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凡纳滨对虾半胱氨酸双加氧酶基因的克隆表达
1
作者 欧英杰 冯志强 许银叶 《中外食品工业（下）》 2015年第4期99-102,共4页
牛磺酸是一种带有氨基的磺酸，是人体所需营养成分之一。目前，牛磺酸广泛应用于乳制品、饮料、复合味精、豆制品、滋补品、营养液，还可用于水产、动物养殖饲料添加剂，洗涤剂中间体和化学剂等。它也是鱼虾类食品风味形成的呈味氨基酸... 牛磺酸是一种带有氨基的磺酸，是人体所需营养成分之一。目前，牛磺酸广泛应用于乳制品、饮料、复合味精、豆制品、滋补品、营养液，还可用于水产、动物养殖饲料添加剂，洗涤剂中间体和化学剂等。它也是鱼虾类食品风味形成的呈味氨基酸。半胱氨酸双加氧酶是牛磺酸生物合成的两个限速酶之一，在牛磺酸的合成中起关键作用。本研究利用racePCR技术克隆到了凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）的半胱氨酸双加氧酶（L．vannamei cysteine dioxygenase，LvCDO）基因的全长序列，对其编码的蛋白的特性进行了分析。同时构建原核表达载体对其进行表达，获得可溶表达的LvCDO，并利用GST琼脂糖凝胶对其进行纯化，获得较纯的重组GST—LvCDO。另外还发现在盐度为15‰的养殖水体中，LvCDO在凡纳滨对虾的血淋巴细胞和肝胰腺细胞中有较高的转录水平，表明其调节渗透压方面具有一定功能。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 牛磺酸 半胱氨酸双加氧酶 克隆 表达
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高效液相色谱法评价海洋生物中半胱氨酸双加氧酶活性
2
作者 范子瑞 胡佳妃 +2 位作者 江瑞妮 杨星玲 金火喜 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第12期174-178,共5页
建立半胱亚磺酸的高效液相色谱分析方法,并利用该方法测定不同海洋生物组织中半胱氨酸双加氧酶的活性。应用邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)为衍生试剂进行柱前衍生,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C_(18)。结果发现,当检测波长为315 n... 建立半胱亚磺酸的高效液相色谱分析方法,并利用该方法测定不同海洋生物组织中半胱氨酸双加氧酶的活性。应用邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)为衍生试剂进行柱前衍生,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C_(18)。结果发现,当检测波长为315 nm、半胱亚磺酸与OPA物质的量比1∶2、衍生时间3 min、流动相甲醇-乙酸钠(8∶2,V/V)、流速1 m L/min时,半胱亚磺酸在10~400μg/m L质量浓度范围内具有良好的线性关系(R^2>0.99),平行样品的相对标准偏差为0.9%~6.4%,保留时间为1.46 min。以此方法为基础,对不同海产品组织中半胱氨酸双加氧酶活性进行检测,结果显示,所选择的海洋贝类、蟹类、虾类、鱼类中均检测到半胱氨酸双加氧酶活性,其中南美白对虾中活性最高。不同组织比较,鱼体肝脏中半胱氨酸双加氧酶活性最高,而鳃中活性最低。 展开更多
关键词 海产品 半胱氨酸双加氧酶 半胱亚磺酸 高效液相色谱
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长白猪体内牛磺酸合成关键酶及其转运体的表达
3
作者 张茗晰 王玉婷 +2 位作者 林树梅 李晨甦 杨建成 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第1期19-23,共5页
为了研究牛磺酸合成关键酶及其转运体(taurine transporter,TAUT)在长白猪肝脏及内分泌腺中的表达情况,试验随机选取120日龄长白猪,公母各半,取肝脏、下丘脑、垂体、卵巢、睾丸、甲状腺及肾上腺,采用RT-PCR方法、实时荧光定量RT-PCR方法... 为了研究牛磺酸合成关键酶及其转运体(taurine transporter,TAUT)在长白猪肝脏及内分泌腺中的表达情况,试验随机选取120日龄长白猪,公母各半,取肝脏、下丘脑、垂体、卵巢、睾丸、甲状腺及肾上腺,采用RT-PCR方法、实时荧光定量RT-PCR方法及Western-blot技术对这些组织/器官中牛磺酸合成关键酶——半胱亚磺酸脱羧酶(cysteine sulfinate decarboxylase,CSD)、半胱氨酸双加氧酶(cysteine dioxygenase,CDO)及牛磺酸转运体(taurine transporter,TAUT)基因mRNA及蛋白表达情况进行了测定。结果表明:长白猪肝脏和内分泌腺中均存在CSD、CDO及TAUT基因mRNA表达,其中CSD基因mRNA表达水平由高到低的顺序为甲状腺、垂体、肝脏、卵巢、下丘脑、肾上腺、睾丸,CDO基因mRNA表达水平由高到低的顺序为睾丸、卵巢、甲状腺、肝脏、垂体、下丘脑、肾上腺,TAUT基因mRNA表达水平由高到低的顺序为垂体、肝脏、卵巢、下丘脑、甲状腺、肾上腺、睾丸;长白猪肝脏和内分泌腺均可表达CSD、CDO及TAUT蛋白。说明长白猪肝脏、下丘脑、垂体、卵巢、睾丸、甲状腺及肾上腺均可通过CDO-CSD途径生物合成牛磺酸,牛磺酸可能与这些组织/器官的功能发挥密切相关。 展开更多
关键词 牛磺酸 半胱亚磺酸脱羧酶 半胱氨酸双加氧酶 牛磺酸转运体 长白猪 内分泌腺
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胆囊癌患者癌组织及其血清CDO1基因启动子甲基化水平变化及与预后的关系研究 被引量：3
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作者 云哲琳 张生彬 张智伟 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第11期1792-1796,共5页
目的:研究胆囊癌患者癌组织及血清半胱氨酸双加氧酶-1(CDO1)基因启动子甲基化水平与预后的关系。方法:回顾性分析2016年1月至2017年1月内蒙古包钢医院收治的90例胆囊癌患者的临床资料,依据患者预后情况分为预后良好组(生存时间≥3年,n=... 目的:研究胆囊癌患者癌组织及血清半胱氨酸双加氧酶-1(CDO1)基因启动子甲基化水平与预后的关系。方法:回顾性分析2016年1月至2017年1月内蒙古包钢医院收治的90例胆囊癌患者的临床资料,依据患者预后情况分为预后良好组(生存时间≥3年,n=40)与预后不良组(生存时间<3年,n=50)。比较两组临床资料(性别、年龄、淋巴结转移情况、组织学类型、TNM分期、肝脏侵犯及胆管侵犯情况)及癌组织和血清CDO1基因启动子甲基化情况,采用单因素及多因素Logistic回归分析法明确胆囊癌患者预后不良的危险因素,并对癌组织及血清CDO1基因启动子完全、部分、无甲基化患者3年生存率进行分析。结果:预后不良组女性、年龄>60岁、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、癌组织及血清CDO1基因启动子完全甲基化所占百分比均显著高于预后良好组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,上述因素均为胆囊癌患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。癌组织及血清CDO1基因启动子无甲基化患者3年生存率高于癌组织及血清CDO1基因启动子完全、部分甲基化患者。结论:CDO1基因启动子甲基化水平与胆囊癌预后有关,其可能作为预测胆囊癌患者预后的生物学指标。 展开更多
关键词 胆囊癌 癌组织 血清 半胱氨酸双加氧酶-1基因启动子甲基化 预后
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血浆中CDO1甲基化在肺癌早期诊断中的作用研究 被引量：7
5
作者 王攀 赵洪林 +8 位作者 施睿峰 刘兴雨 刘京豪 任凡 赵青春 张洪兵 李永文 刘红雨 陈军 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期314-320,共7页
背景与目的肺癌的发生率和死亡率常居所有恶性肿瘤的首位,DNA甲基化作为表观遗传学之一参与肿瘤的发生发展过程,CDO1作为抑癌基因常在肿瘤发生早期便会发生甲基化改变,因此本研究旨在探讨CDO1甲基化在肺癌早期诊断中的价值。方法收集肿... 背景与目的肺癌的发生率和死亡率常居所有恶性肿瘤的首位,DNA甲基化作为表观遗传学之一参与肿瘤的发生发展过程,CDO1作为抑癌基因常在肿瘤发生早期便会发生甲基化改变,因此本研究旨在探讨CDO1甲基化在肺癌早期诊断中的价值。方法收集肿瘤患者和健康人群的外周血液样本,游离DNA通过亚硫酸盐修饰并结合实时荧光定量PCR检测CDO1在外周血中的甲基化水平。结果肺癌患者的外周血的基因甲基化水平明显高于肺部良性疾病患者及健康人群。肺癌患者CDO1的甲基化水平在性别、淋巴结转移和肿瘤原发灶-淋巴结-转移(tumornode-metastasis, TNM)分期的分层比较中存在显著性差异(P<0.05)。CDO1对肺癌诊断的灵敏度和特异性分别为52.2%和78.6%。其诊断的整体准确度明显高于应用于临床的肿瘤标志物而且对I期、II期患者的诊断灵敏度表现最好(40.8%, 47.1%)。此外,CDO1可有效增加多项联检中诊断的灵敏性。结论检测CDO1的甲基化水平对肺癌的早期诊断具有潜在的巨大优势。 展开更多
关键词 半胱氨酸双加氧酶1 甲基化 DNA 肺肿瘤 血浆
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脑胶质瘤癌组织与血清CDO-1基因启动子甲基化状态研究 被引量：3
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作者 杨成子 徐培坤 +4 位作者 王斌 邓鹏程 洪洋 李显雄 李式浩 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期846-850,共5页
目的探讨脑胶质瘤肿瘤组织及血清中半胱氨酸双加氧酶-1(CDO-1)基因启动子区域甲基化程度与肿瘤相关性及临床意义。方法实验组取50例病理证实为脑胶质瘤患者的肿瘤组织及血清标本,另取20例脑外伤患者坏死脑组织、血清及20例健康者血清标... 目的探讨脑胶质瘤肿瘤组织及血清中半胱氨酸双加氧酶-1(CDO-1)基因启动子区域甲基化程度与肿瘤相关性及临床意义。方法实验组取50例病理证实为脑胶质瘤患者的肿瘤组织及血清标本,另取20例脑外伤患者坏死脑组织、血清及20例健康者血清标本为对照组。应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和亚硫酸氢盐测序(BSP)检测CDO-1基因甲基化水平。结果实验组肿瘤组织中CDO-1基因启动子区域甲基化率为44.0%(22/50),血清中甲基化率为36.0%(18/50),而对照组中均未发现明显甲基化。脑胶质瘤患者的肿瘤组织DNA中,女性患者CDO-1基因启动子区域甲基化发生率为64.0%(16/25),明显高于男性患者的24.0%(6/25),两者差异有统计学意义(P=0.004)。血清DNA中,女性患者CDO-1基因启动子区域甲基化的发生率为52.0%(13/25),同样明显高于男性患者的20.0%(5/25),两者差异有统计学意义(P=0.012)。另外,肿瘤组织的CDO-1基因启动子区域甲基化水平在不同年龄、病理类型和病理分级之间的差异无统计学意义。结论脑胶质瘤患者肿瘤组织和血清DNA中存在CDO-1基因启动子区域的异常甲基化状态,并且女性患者甲基化水平明显高于男性患者。血清DNA CDO-1启动子区域的异常甲基化检测有可能成为一种非侵入性的诊断脑胶质瘤的生物学标记物。 展开更多
关键词 半胱氨酸双加氧酶 基因 启动子 甲基化 脑胶质瘤
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