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原位杂交结合半薄切片对石鳖贝壳发育相关细胞的观察研究
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作者 夏玉秀 郇聘 刘保忠 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期68-74,共7页
多板纲软体动物(石鳖)生有8片重复排列的贝壳,与其他类群如腹足类、双壳类等有显著的区别,这些差异蕴含着重要的发育和演化意义。前期研究发现,红条毛肤石鳖(Acanthochitona rubrolineata)幼虫贝壳发育组织的细胞排列欠规则,在普通显微... 多板纲软体动物(石鳖)生有8片重复排列的贝壳,与其他类群如腹足类、双壳类等有显著的区别,这些差异蕴含着重要的发育和演化意义。前期研究发现,红条毛肤石鳖(Acanthochitona rubrolineata)幼虫贝壳发育组织的细胞排列欠规则,在普通显微镜下不易识别单个细胞结构。本研究首先利用整装原位杂交手段鉴定出一些参与贝壳发育的细胞群体,发现表达engrailed的细胞分布于贝壳发育区中央区域的突起部位(脊)和边缘区域,其中脊区域的表达呈条纹状,边缘区域的表达则与贝壳发育区的外周吻合,但是对这些细胞的形态和排列模式等细节无法开展深入观察。接下来对石鳖幼虫进行了半薄切片,发现可以识别出壳板发育区细胞及脊细胞的大致轮廓和分布模式,但分辨率仍然受限。为了进一步提升分辨能力,结合了整装原位杂交实验及半薄切片技术,对表达engrailed基因的贝壳发育相关细胞开展了观察研究。结果显示,对整装原位杂交后的幼虫进行半薄切片,组织细胞结构保持完整,细胞轮廓清晰,能够清楚区分engrailed阳性细胞。观察表明,这些细胞具有较高的核质比,总体呈V形排列,且贝壳发育区中央部位与边缘部位的engrailed阳性细胞在形态和排列上存在区别。这些结果证明,将原位杂交与半薄切片结合,可提升对细胞结构观察的分辨率,实现同时从分子和细胞学层面研究石鳖贝壳发育相关细胞。本研究对进一步从细胞水平研究石鳖的贝壳发育过程、解析相关贝壳发育相关基因的功能有重要的支撑作用。研究结果对揭示更多贝壳起源的信息,理解软体动物贝壳的起源和演化有重要意义。 展开更多
关键词 半薄切片 原位杂交 红条毛肤石鳖 贝壳发育
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硼砂甲苯胺蓝染液在半薄切片染色上的应用 被引量:13
2
作者 刘冬娟 祝素文 李艳杰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期33-33,共1页
改良常规的甲苯胺蓝半薄切片染色为硼砂甲苯胺蓝染色 ,获得了很好的效果。其染色步骤简捷、结构清晰、色调适度 。
关键词 甲苯胺蓝 半薄切片 染色
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石蜡半薄切片制作透射电镜的方法 被引量:7
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作者 曲淑贤 吕广艳 +3 位作者 高船舟 魏晓晴 崔颖 高颖 《大连医科大学学报》 CAS 2009年第4期355-356,360,共3页
[目的]介绍石蜡半薄切片转制透射电镜的制样方法。[方法]对石蜡半薄切片进行脱蜡、水化、锇酸固定、缓冲液漂洗、梯度酒精脱水、环氧树脂包埋、超薄切片机切片、透射电镜下观察。[结果]组织细胞的超微结构保存完好,足以满足病理诊断之用... [目的]介绍石蜡半薄切片转制透射电镜的制样方法。[方法]对石蜡半薄切片进行脱蜡、水化、锇酸固定、缓冲液漂洗、梯度酒精脱水、环氧树脂包埋、超薄切片机切片、透射电镜下观察。[结果]组织细胞的超微结构保存完好,足以满足病理诊断之用。[结论]用石蜡半薄切片转制电镜比用石蜡组织块转制电镜方法简单,快速易行。 展开更多
关键词 石蜡半薄切片 电镜样品制作 透射电镜
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肥大细胞电镜半薄切片染色方法 被引量:4
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作者 吴洪娟 周力 +1 位作者 李桂芝 王岱君 《电子显微学报》 CAS CSCD 2012年第5期452-454,共3页
用7种不同的染色方法对环氧树脂包埋的大鼠空肠粘膜组织半薄切片中的肥大细胞进行染色和定位。光镜观察结果显示,盐酸甲苯胺蓝染色法简便快速,着色效果良好,适于肥大细胞半薄切片快速定位;硫堇、姬姆萨和中性红染色显示肥大细胞颗粒清晰... 用7种不同的染色方法对环氧树脂包埋的大鼠空肠粘膜组织半薄切片中的肥大细胞进行染色和定位。光镜观察结果显示,盐酸甲苯胺蓝染色法简便快速,着色效果良好,适于肥大细胞半薄切片快速定位;硫堇、姬姆萨和中性红染色显示肥大细胞颗粒清晰,也可用于肥大细胞的观察与定位。 展开更多
关键词 肥大细胞 半薄切片 染色
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塑料半薄切片法观察豆科植物根表面传递细胞 被引量:7
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作者 吴均章 韩素芬 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期65-68,共4页
豆科植物合欢、紫云英、苜蓿等在接种根瘤菌后,部分根毛密集生长稍有膨大的根段,经FAA固定,GMA包埋,半薄切片(3μm),PAS反应染色,在光学显微镜油镜下观察根的横切面发现,其表皮细胞或外皮层细胞的外切向壁上有明显的壁内突结构,属典型... 豆科植物合欢、紫云英、苜蓿等在接种根瘤菌后,部分根毛密集生长稍有膨大的根段,经FAA固定,GMA包埋,半薄切片(3μm),PAS反应染色,在光学显微镜油镜下观察根的横切面发现,其表皮细胞或外皮层细胞的外切向壁上有明显的壁内突结构,属典型的根表面传递细胞。采用半薄切片,不仅操作简单,费用较少,且较易确定传递细胞发生的部位。 展开更多
关键词 传递细胞 GMA 半薄切片 油镜
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MTG-DAPI双染色法观察黄瓜花粉细胞半薄切片中线粒体DNA的研究 被引量:2
6
作者 赵娟 沈佳 +3 位作者 李海梅 娄群峰 李季 陈劲枫 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期27-32,共6页
[目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG... [目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG和DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)2种染料建立适用于黄瓜花粉细胞的树脂半薄切片荧光双染色技术。[方法]树脂半薄切片厚度为0.3μm,切片首先经20 nmol·L-1的MTG染色液处理30 min,然后用0.1μg·m L-1的DAPI溶液染色6 min,即可在荧光显微镜下清楚地显示出线粒体结构及DNA的存在情况。[结果]观察显示:黄瓜贴壁期花粉细胞中生殖细胞内存在线粒体结构及线粒体DNA,表明黄瓜小孢子第一次有丝分裂时没有将线粒体排除在生殖细胞之外,而是被分配到了生殖细胞中,并且此时的线粒体细胞器携带有基因信息。[结论]MTG-DAPI双染色技术可以有效地对黄瓜花粉细胞中生殖细胞核周围的线粒体进行定位,为探索黄瓜线粒体基因父系遗传现象提供技术支持。同时研究也证实了MTG可以对固定后并进行树脂半薄切片的细胞中的线粒体进行着色,扩展了MTG的应用范围。 展开更多
关键词 黄瓜 线粒体 MTG-DAPI双染色 半薄切片
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不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响 被引量:2
7
作者 崔新明 李爽 +1 位作者 董超 李艳茹 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期91-93,共3页
目的:探讨不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响。方法:切取大鼠的坐骨神经及肾脏组织,经戊二醛-锇酸双重固定,乙醇、丙酮梯度脱水后,分别用Epon812和Eponate12包埋聚合,利用超薄切片机制备厚度为1.5μm的半薄切片,切片经甲苯胺... 目的:探讨不同包埋剂对半薄切片甲苯胺蓝染色效果的影响。方法:切取大鼠的坐骨神经及肾脏组织,经戊二醛-锇酸双重固定,乙醇、丙酮梯度脱水后,分别用Epon812和Eponate12包埋聚合,利用超薄切片机制备厚度为1.5μm的半薄切片,切片经甲苯胺蓝染色,在光镜下观察半薄切片的染色效果。结果:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后,颜色更鲜艳,微细结构更清晰,图像反差更好。结论:Eponate12包埋的半薄切片经甲苯胺蓝染色后更有利于在光镜下观察组织的微细结构。 展开更多
关键词 半薄切片 包埋剂 甲苯胺蓝 染色
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树脂包埋半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用 被引量:2
8
作者 吴洪娟 李桂芝 +3 位作者 周力 尤敏 高峰 赵岩松 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期519-522,共4页
目的探讨半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用,寻找一种视神经形态学研究和疾病诊断的有效方法。方法健康Sprague-Dawley大鼠视神经分别行树脂包埋制成半薄切片与石蜡包埋制成石蜡切片,分别采用HE、甲苯胺蓝染色及髓鞘碱... 目的探讨半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中的应用,寻找一种视神经形态学研究和疾病诊断的有效方法。方法健康Sprague-Dawley大鼠视神经分别行树脂包埋制成半薄切片与石蜡包埋制成石蜡切片,分别采用HE、甲苯胺蓝染色及髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学方法染色,光学显微镜下观察并比较半薄切片与石蜡切片染色结果的差异。结果石蜡切片HE和甲苯胺蓝染色均显示视神经髓鞘不着色,MBP免疫组织化学染色示MBP阳性着色较重,着色较紊乱,髓鞘着色不清晰。半薄切片HE及甲苯胺蓝染色均显示髓鞘呈环形,着色清晰,颜色对比鲜明;MBP免疫组化染色结果可见髓鞘呈环形,非特异性染色不明显,阳性对比显著,可清晰显示髓鞘结构。结论半薄切片在视神经组织学和免疫组织化学研究中优于石蜡切片,可用于视神经疾病的诊断和研究。 展开更多
关键词 视神经 树脂 半薄切片 组织学 免疫组织化学
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树脂包埋半薄切片染色的改进及体会 被引量:6
9
作者 王萍 任力 《大连医科大学学报》 CAS 2007年第5期509-510,共2页
[目的]树脂包埋半薄切片染色技术的改进及在病理诊断、细胞学细微结构研究等方面的应用。[方法]应用多色和甲苯胺蓝单一染色法对树脂包埋的半薄切片进行染色。[结果]多色染色因其有对比度,接近HE染色,可用于多种组织。甲苯胺蓝单一染色... [目的]树脂包埋半薄切片染色技术的改进及在病理诊断、细胞学细微结构研究等方面的应用。[方法]应用多色和甲苯胺蓝单一染色法对树脂包埋的半薄切片进行染色。[结果]多色染色因其有对比度,接近HE染色,可用于多种组织。甲苯胺蓝单一染色虽缺乏层次,没有对比度,但对神经组织及肌肉组织,由于其组织学特点,仍不失为首选。[结论]树脂包埋半薄切片多色染色,切片清晰、鲜艳颇似HE染色效果,具有高分辨的数种光学染色的综合特征,所显示的细胞学精细结构是任何最好的石蜡切片不能比拟的。 展开更多
关键词 树脂包埋 半薄切片 染色
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改良Masson胶原纤维染色法在半薄切片中的应用 被引量:3
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作者 胥维勇 杨红 +1 位作者 李科 杨群 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期248-248,共1页
改良Masson胶原纤维染色法在半薄切片中的应用胥维勇,杨红,李科,杨群(四川省人民医院病理科成都,610072)在对2μm切片做Masson胶原纤维染色时,发现该染色法对肌纤维、胞质、红细胞染色不够鲜艳,着色浅,对... 改良Masson胶原纤维染色法在半薄切片中的应用胥维勇,杨红,李科,杨群(四川省人民医院病理科成都,610072)在对2μm切片做Masson胶原纤维染色时,发现该染色法对肌纤维、胞质、红细胞染色不够鲜艳,着色浅,对比度差,针对这一现象、我们将Mas... 展开更多
关键词 胶原纤维 半薄切片 染色法 酸性偶氮红 肌纤维 丽春红 四川省人民医院 磷钼酸 品红液 染色方法
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电镜半薄切片制备方法的改进 被引量:5
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作者 于红丽 张大红 +1 位作者 徐夏红 王婷 《徐州医学院学报》 CAS 2004年第2期129-130,共2页
关键词 电镜 半薄切片 制备方法 包埋块
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环氧树脂半薄切片的多色性染色方法 被引量:3
12
作者 王爽 王春梅 +1 位作者 陈丹 黄晓峰 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第9期775-775,共1页
关键词 环氧树脂 半薄切片 多色性染色方法
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乌拉尔甘草愈伤组织石蜡切片与半薄切片的对比 被引量:2
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作者 张欣 曹君迈 +2 位作者 刘建利 张焱 郑素娇 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第12期2487-2489,共3页
以乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fich.)不同来源愈伤组织为材料,采用石蜡切片和半薄切片技术,对乌拉尔甘草不同来源愈伤组织细胞进行了观察,结果表明,半薄切片在制作不同来源愈伤组织装片时优于石蜡切片,其清晰度高,分辨率更为精... 以乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fich.)不同来源愈伤组织为材料,采用石蜡切片和半薄切片技术,对乌拉尔甘草不同来源愈伤组织细胞进行了观察,结果表明,半薄切片在制作不同来源愈伤组织装片时优于石蜡切片,其清晰度高,分辨率更为精确。石蜡切片中,根源愈伤组织有核细胞较少,而且细胞出现解体现象;半薄切片中观察到了叶源愈伤组织细胞中的着色颗粒、线粒体和圆球体,可为透射电镜制样提供有效的材料。 展开更多
关键词 乌拉尔甘草 愈伤组织 石蜡切片 半薄切片
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国产环氧树脂618半薄切片制备及染色法 被引量:4
14
作者 刘鲜林 林陶 《贵州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 1999年第2期54-55,共2页
对用国产618树脂包埋的样品进行半薄切片过程中的修块、定位及染色过程进行了探索,提出了1套完整的方法。该方法得到的半薄切片色彩鲜艳。
关键词 半薄切片 环氧树脂 制备 染色法 透射电镜
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环氧树脂包埋块半薄切片进行免疫组化染色的方法 被引量:2
15
作者 唐海兰 黄中新 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 1997年第4期9-12,共4页
为应用环氧树脂包埋的电镜制样切片进行光镜免疫组化观察,探讨脱树脂试剂的浓度、新鲜度、作用时间及切片的厚度对Epone-812环氧树脂包埋的人体子宫平滑肌组织经氧化醇钠脱树脂处理后,进行ABC法α-肌动球蛋白免疫组化染... 为应用环氧树脂包埋的电镜制样切片进行光镜免疫组化观察,探讨脱树脂试剂的浓度、新鲜度、作用时间及切片的厚度对Epone-812环氧树脂包埋的人体子宫平滑肌组织经氧化醇钠脱树脂处理后,进行ABC法α-肌动球蛋白免疫组化染色效果的影响。结果显示新鲜配制的过饱和氧化醇钠,作用5min其脱树脂效果良好且不掉片,免疫组化染色显色明显、清晰。表明脱树脂试剂的浓度、新鲜度和作用时间是实验成功的关键因素。切片厚度未见对免疫组化染色有明显影响。 展开更多
关键词 环氧树脂 半薄切片 染色 免疫组织化学 包埋
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一种简单而快捷的半薄切片脱树脂新方法 被引量:1
16
作者 李祁伟 武昕 周骊楠 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第z1期72-72,共1页
  目前, 在HE染色、特殊染色或免疫组化染色研究方面多采用普通石蜡包埋的切片, 其切片厚度最薄达4 μm,若更薄的切片,切割有一定的难度.对于各种染色而言,越薄的切片,细胞与组织结构越清晰,染色效果越好.环氧树脂包埋的组织块(Epon)...   目前, 在HE染色、特殊染色或免疫组化染色研究方面多采用普通石蜡包埋的切片, 其切片厚度最薄达4 μm,若更薄的切片,切割有一定的难度.对于各种染色而言,越薄的切片,细胞与组织结构越清晰,染色效果越好.环氧树脂包埋的组织块(Epon)不仅用于透射电子显微镜超薄切片的制备,也可用于光镜半薄切片的制备[1].本研究摸索出一种简单而快捷的脱树脂的方法,现介绍如下.…… 展开更多
关键词 环氧树脂 半薄切片 免疫组化
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H-E染色在环氧树脂半薄切片中的应用 被引量:1
17
作者 韩莉 马卫军 +1 位作者 赵树敏 刘胜 《解剖科学进展》 CAS 2003年第3期277-277,共1页
关键词 环氧树脂半薄切片 H-E染色法 样品制备 病理诊断
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黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养及其再生植株半薄切片观察 被引量:3
18
作者 洪森荣 宁本松 +3 位作者 叶思雨 刘燕 张铭心 占学林 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期65-70,共6页
以黄独胚性愈伤组织为材料,对黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养的时间进行探讨,并对冻后黑暗培养胚性愈伤组织的显微结构及其再生植株进行半薄切片观察。结果表明,包埋玻璃化法超低温保存后,黑暗培养1~5 d,黄独胚性愈伤组织的冻后成活率随... 以黄独胚性愈伤组织为材料,对黄独胚性愈伤组织冻后黑暗培养的时间进行探讨,并对冻后黑暗培养胚性愈伤组织的显微结构及其再生植株进行半薄切片观察。结果表明,包埋玻璃化法超低温保存后,黑暗培养1~5 d,黄独胚性愈伤组织的冻后成活率随着时间的延长而增加,超过5 d,成活率显著下降。半薄切片观察结果表明,冻后黄独胚性愈伤组织直接置于光周期下培养,会造成细胞排列疏松,局部出现较大的细胞空隙;而经黑暗培养后再置于光周期下培养,细胞排列较为紧密,细胞空隙较小。经半薄切片观察,黄独冻后黑暗培养胚性愈伤组织再生植株与常温继代再生植株相比较,根、茎、叶结构无显著差异,叶肉细胞的平均叶绿体数量也无显著差异。因此,冻后黑暗培养一定程度上保证了胚性愈伤组织细胞结构的完整性,且其再生植株无形态学变异。 展开更多
关键词 黄独 胚性愈伤组织 超低温保存 冻后黑暗培养 再生植株 半薄切片观察
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植物细胞的半薄切片技术及其应用 被引量:2
19
作者 李学湛 宋英淑 +2 位作者 于智深 朱光新 郑成国 《黑龙江农业科学》 北大核心 1989年第6期42-44,共3页
本试验将半薄切片技术应用于植物细胞学研究中,并对其方法进行了如下几方面的改进:①减少了制片程序;②切片厚度达到了0.1微米,并未出现皱褶;③增加了染液的溶质浓度,达到稳定的多色性染色效果;④根据不同植物组织,优选出最佳切片、染... 本试验将半薄切片技术应用于植物细胞学研究中,并对其方法进行了如下几方面的改进:①减少了制片程序;②切片厚度达到了0.1微米,并未出现皱褶;③增加了染液的溶质浓度,达到稳定的多色性染色效果;④根据不同植物组织,优选出最佳切片、染色厚度。 展开更多
关键词 植物细胞 半薄切片 切片技术
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电镜半薄切片染色液的改良及应用 被引量:2
20
作者 韩琳 吴鹏 徐军 《沈阳医学院学报》 2008年第3期170-170,共1页
关键词 电镜 半薄切片 染色液
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