电针干预对单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮层突触结构及视觉诱发电位的影响

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作者 路致远 毕爱玲 +1 位作者 吴建峰 卢秀珍 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期182-187,I0002,共7页

目的探讨电针刺激对单眼形觉剥夺Long Evans大鼠视皮层中蛋白激酶C zeta(protein kinase C zeta,PKCζ)、突触素(synaptophysin,Syn)及突触后致密蛋白95(postsynaptic density-95,PSD-95)表达影响,观察电针干预对弱视眼视觉电生理功能... 目的探讨电针刺激对单眼形觉剥夺Long Evans大鼠视皮层中蛋白激酶C zeta(protein kinase C zeta,PKCζ)、突触素(synaptophysin,Syn)及突触后致密蛋白95(postsynaptic density-95,PSD-95)表达影响,观察电针干预对弱视眼视觉电生理功能改变及初级视皮层中星形胶质细胞数量的改变。方法选取48只Long Evans大鼠新生幼鼠,随机分为正常对照组、弱视模型组、电针治疗组、假穴治疗组。正常对照组不做任何处理,弱视模型组、电针治疗组及假穴治疗组对幼鼠右眼单眼缝合建立弱视模型,电针治疗组和假穴治疗组在生后30 d开始电针刺激。采用闪光视觉诱发电位(flash visual evoked potential,F-VEP)对各组大鼠右眼视觉电生理功能进行检测;应用蛋白免疫印迹技术(western blotting,WB)检测大鼠左侧初级视皮层V1M中PKCζ、Syn及PSD-95的表达量;借助免疫荧光技术和星形胶质细胞特异性标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)观察大鼠左侧初级视皮层V1M区中星形胶质细胞数量的变化。结果F-VEP结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组或假穴治疗组P2波幅明显降低(P<0.01),P2潜伏期可见延长(P<0.05),电针治疗组P2波幅略低(P<0.05),P2潜伏期差异无统计学意义;与弱视模型组或假穴治疗组相比,电针治疗组的P2波幅增加(P<0.05),P2潜伏期变短(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组或假穴治疗组PKCζ表达量减少(P<0.05),Syn及PSD-95表达均明显降低(P<0.01),电针治疗组PKCζ、Syn及PSD-95表达差异无统计学意义;与弱视模型组或假穴治疗组相比,电针治疗组PKCζ、Syn及PSD-95表达均明显增加(P<0.05);免疫荧光结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组或假穴治疗组中GFAP阳性面积显著减少(P<0.01),而电针治疗组中GFAP阳性面积差异无统计学意义;与弱视模型组或假穴治疗组相比,电针治疗组中GFAP阳性面积明显增加,但差异无统计学意义。结论电针刺激可以促进单眼形觉剥夺弱视大鼠初级视皮层中PKCζ、Syn及PSD-95的表达,增加弱视眼对侧初级视皮层V1M区的星形胶质数量,调节突触可塑性,改善大鼠弱视眼视觉电生理功能。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 PKCζ 突触可塑性 星形胶质细胞 F-VEP

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电针干预对单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮层基因表达的影响 被引量：1

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作者 路致远 毕爱玲 +2 位作者 吴建峰 毕宏生 卢秀珍 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第5期590-595,632,共7页

目的运用基因芯片技术对形觉剥夺及电针干预后的弱视大鼠视皮层中差异表达基因进行生物学分析与关键基因的筛选,为弱视发生及电针治疗提供基因水平理论依据。方法将SD大鼠随机分为正常组、弱视组和电针组,每组5只。弱视组和电针组大鼠... 目的运用基因芯片技术对形觉剥夺及电针干预后的弱视大鼠视皮层中差异表达基因进行生物学分析与关键基因的筛选,为弱视发生及电针治疗提供基因水平理论依据。方法将SD大鼠随机分为正常组、弱视组和电针组,每组5只。弱视组和电针组大鼠采用单眼缝合方法造成右眼剥夺性弱视,术后30~60 d对电针组大鼠进行电针干预,每周至少干预6 d。电针干预结束后,处死各组大鼠并取左侧视皮层,使用基因芯片技术检测视皮层中基因表达情况。筛选各组中Fold Change≥2.0且P<0.05的差异基因进行统计,应用基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析差异基因的功能及其参与的生物学通路。结果与正常组比较,弱视组有135个基因下调,28个基因上调;与弱视组比较,电针组有52个基因上调,25个基因下调。GO富集分析发现弱视组和电针组产生的差异基因主要功能集中于蛋白翻译、蛋白转运、离子跨膜转运、细胞内外小分子结合、组织器官发育等。KEGG富集分析发现弱视组和电针组产生的差异基因共同参与ERBB信号通路、光信号传导、TLR信号通路、神经胶质细胞瘤等。PPI网络显示丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)和热休克蛋白A1A(HSPA1A)基因位于网络核心,二者的异常表达可能与弱视发生及电针干预密切相关,在神经突触可塑性过程中起重要作用。结论形觉剥夺弱视大鼠的视皮层在视觉发育过程中存在大量基因的异常表达,电针刺激可以拮抗部分基因的差异表达;由MAPK1和HSPA1A基因调控的代谢通路改变可能是弱视发病及电针治疗弱视的重要分子生物学机制。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 电针 基因芯片 丝裂原活化蛋白激酶1 热休克蛋白A1A

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发育期单眼形觉剥夺弱视模型猫视皮层谷氨酸受体状况的研究 被引量：4

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作者 刘峥 侯川 +1 位作者 陈曼玲 马麟 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期111-113,共3页

目的观察单眼形觉剥夺性弱视动物模型谷氨酸受体(GluRs)的变化,探索形觉剥夺性弱视发生的物质基础。方法11只初生家养猫随机分为两组,处理组在3周龄时缝合单侧眼睑塑造单眼形觉剥夺性弱视模型,3月后用受体的放射性配体结合分析实验观测... 目的观察单眼形觉剥夺性弱视动物模型谷氨酸受体(GluRs)的变化,探索形觉剥夺性弱视发生的物质基础。方法11只初生家养猫随机分为两组,处理组在3周龄时缝合单侧眼睑塑造单眼形觉剥夺性弱视模型,3月后用受体的放射性配体结合分析实验观测视皮层GluRs的结合位点数和亲和力。对照组未予特殊处理。结果处理组视皮层GluRs结合位点数较对照组下降(P<0.001),而KD值高于对照组(P<0.001)。两组放射性配体-受体结合实验的Hill系数均接近于1。L-[3,4-3H]-谷氨酸与各型GluRs结合位点的亲和力相同,无正负协同效应。结论单眼形觉剥夺性弱视动物模型视皮层GluRs亲和力低,GluRs参数出现异常,说明形觉剥夺性弱视的发生可能有一定的物质基础。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 视觉发育 弱视 谷氨酸 视皮层

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左旋多巴及胞二磷胆碱对单眼形觉剥夺大鼠视皮质α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸-GluR2表达的影响、 被引量：4

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作者 孙晓楠 陶军 +3 位作者 郝旭红 徐丽 李若溪 张劲松 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1065-1069,共5页

背景研究表明α-氨基-3-羟基-5-甲基±异嗯唑丙酸（AMPA）．GluR2与弱视的发生发展有关，左旋多巴及胞二磷胆碱对改善弱视患者的视功能有一定的疗效，但其作用机制尚不完全明了。目的检测敏感期单眼形觉剥夺（MD）大鼠分别应用左旋... 背景研究表明α-氨基-3-羟基-5-甲基±异嗯唑丙酸（AMPA）．GluR2与弱视的发生发展有关，左旋多巴及胞二磷胆碱对改善弱视患者的视功能有一定的疗效，但其作用机制尚不完全明了。目的检测敏感期单眼形觉剥夺（MD）大鼠分别应用左旋多巴及胞二磷胆碱后视皮质中AMPA—GluR2的表达情况，探讨左旋多巴及胞二磷胆碱改善视功能的作用机制。方法2周龄健康SD大鼠60只行单侧眼睑缝合31d制作MD动物模型，造模成功后与年龄匹配的正常大鼠15只在自然光条件下一起饲养。将大鼠用随机数字表法随机分为正常对照组、MD组、左旋多巴组、胞二磷胆碱组和生理盐水组，每组15只大鼠。造模后第32天左旋多巴组大鼠给予溶于1ml生理盐水中的左旋多巴40mg／kg灌胃，每日1次；胞二磷胆碱组大鼠给予胞二磷胆碱80mg／kg肌内注射，每日1次；生理盐水组给予1ml生理盐水灌胃，均连续给药28d。分别采用免疫组织化学法、Westernblot法、实时荧光定量PCR法检测各组大鼠视皮质中AMPA—GluR2的表达情况。结果MD组大鼠视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均低于正常对照组，差异有统计学意义（0．32±O．02VS．0．64±0．05，t=13．287，P〈0．05；0．30±0．01VS．0．8±t-O．03，t=38．184，P〈0．05）；左旋多巴组视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均高于生理盐水组（0．59±0．04VS．0．33±0．03，t=11．628，P〈0．05；0．71±0．06VS．0．33±0．02，t=13．435，P〈0．05）；胞二磷胆碱组大鼠视皮质中AMPA—GluR2蛋白及mRNA表达均高于生理盐水组，差异有统计学意义（0．52±0．04VS．0．33±0．03，t=8．497，P〈0．05；0．48±0．04VS．0．33±0．02，t=7．500，P〈0．05）。结论AMPA-GluR2与视觉发育的可塑性有关，左旋多巴、胞二磷胆碱能够在一定程度上逆转MD引起的AMPA．GluR2表达下降。这一机制可能与其能够改善视功能的作用有关，其作用部位可能在视皮质。 展开更多

关键词 左旋多巴 胞二磷胆碱 α-氨基-3-羟基-5-甲基4-异噁唑丙酸受体 单眼形觉剥夺

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发育期单眼形觉剥夺弱视模型猫P-VEP的特征 被引量：4

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作者 刘峥 侯川 马麟 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第4期250-253,共4页

目的观察单眼形觉剥夺性弱视动物模型视皮层的电生理特性,探索弱视发生的皮层机制,并为弱视的治疗提供实验依据。方法11只初生家养猫随机分为2组,处理组在3周龄时缝合单侧眼睑塑造单眼形觉剥夺性弱视模型,3个月后以图形视觉诱发电位(pat... 目的观察单眼形觉剥夺性弱视动物模型视皮层的电生理特性,探索弱视发生的皮层机制,并为弱视的治疗提供实验依据。方法11只初生家养猫随机分为2组,处理组在3周龄时缝合单侧眼睑塑造单眼形觉剥夺性弱视模型,3个月后以图形视觉诱发电位(pattern visual evoked potential,P-VEP)技术检测视觉生理功能的改变。结果对照组双眼间的P-VEP波形潜伏时和振幅差异无统计学意义(P>0.05),而处理组剥夺眼的P波潜伏时延迟和振幅降低或呈波形熄灭的杂波,与对侧健眼及对照组比较,差异均具有显著统计学意义(0.01<P<0.025、P<0.005)。对照组P波的振幅随刺激的空间频率增加而增高,在达到0.10c.d-1时后转呈下降趋势,而潜伏时却始终随空间频率增加而延迟。处理组双眼P波潜伏时和振幅均缺乏与刺激空间频率的对应关系。结论单眼形觉剥夺性弱视动物模型视皮层的电生理特性出现异常,说明弱视的发生存在皮层机制。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 视觉发育 弱视 图形视觉诱发电位

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左旋多巴对单眼形觉剥夺大鼠视皮质NMDAR1表达的影响 被引量：1

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作者 孙晓楠 陶军 张劲松 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第11期1939-1942,共4页

目的:检测敏感期内单眼形觉剥夺大鼠应用左旋多巴后视皮质中NNMDAR1的表达情况并与对照组对比,探讨左旋多巴改善视功能的作用部位及其分子机制。方法:选取60只2周龄健康SD大鼠随机分为4组,正常组15只,另外45只行单侧眼睑缝合制作单眼形... 目的:检测敏感期内单眼形觉剥夺大鼠应用左旋多巴后视皮质中NNMDAR1的表达情况并与对照组对比,探讨左旋多巴改善视功能的作用部位及其分子机制。方法:选取60只2周龄健康SD大鼠随机分为4组,正常组15只,另外45只行单侧眼睑缝合制作单眼形觉剥夺动物模型,制模成功后随机分为单眼形觉剥夺组(MD组),生理盐水组(NS组),左旋多巴组(LD组),每组各15只。各组大鼠均在正常日光照射条件下饲养至45日龄。处死MD组及正常组大鼠,分别用免疫组化,蛋白免疫印记,实时荧光定量PCR的方法检测这两组大鼠视皮质中NMDAR1的表达情况。LD组和NS组在46日龄时分别给予左旋多巴(40mg/kg)和生理盐水灌胃,连续28d,分别用前述方法检测视皮质中NMDAR1的表达。结果:MD组大鼠视皮质中NMDAR1的蛋白及mRNA表达均低于对照组;LD组大鼠视皮质中NMDAR1的蛋白及mRNA表达均高于NS组。结论:NMDAR1与视觉发育的可塑性有关,左旋多巴能够逆转因形觉剥夺引起的NMDAR1表达下降。这一机制可能与其能够改善视功能的作用有关,其作用部位可能在于视皮质。 展开更多

关键词 左旋多巴 NMDA受体 单眼形觉剥夺

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单眼形觉剥夺性弱视大鼠视皮层突触密度及功能的研究 被引量：5

7

作者 李谦 毕爱玲 +4 位作者 张秀艳 张莉唯 路致远 王兴荣 毕宏生 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期958-962,共5页

目的:研究视觉发育关键期单眼形觉剥夺(MD)对弱视大鼠视皮层突触密度超微形态结构变化规律的影响,以及突触素(SYN)在视皮层的表达及意义,探讨弱视大鼠视皮层突触密度及功能的关系,为弱视的发病机制及临床治疗提供分子水平理论依据。方法... 目的:研究视觉发育关键期单眼形觉剥夺(MD)对弱视大鼠视皮层突触密度超微形态结构变化规律的影响,以及突触素(SYN)在视皮层的表达及意义,探讨弱视大鼠视皮层突触密度及功能的关系,为弱视的发病机制及临床治疗提供分子水平理论依据。方法:选用正常新生Long Evans大鼠随机分为正常对照组与弱视模型组,每组16只,两组大鼠均在相同环境下饲养。正常对照组不做任何处理,弱视模型组在出生后第13d采用单眼缝合的方法建立单眼形觉剥夺性弱视经典模型。两组大鼠均于出生后51d进行闪光视觉诱发电位(F-VEP)的检测。检测结束后立即取材,用透射电镜及Image J图像分析软件观察并统计两组大鼠初级视皮层V1M区第Ⅳ~Ⅵ层大锥体细胞周围神经纤维网络的突触密度变化。利用漂染法对视皮层冰冻切片进行免疫荧光组织化学染色,在激光共聚焦显微镜及荧光显微镜下对SYN阳性神经元进行定位观察和定量统计分析。结果:F-VEP检查结果显示与正常对照组相比,弱视模型组剥夺眼的P2潜伏期较正常眼明显延长,P2波振幅较正常眼明显降低(P<0.05);透射电镜结果显示,与正常对照组相比,弱视模型组双侧视皮层的突触密度显著降低(P<0.05),其中弱视眼对侧视皮层下降更加明显(P<0.05);免疫荧光染色结果显示两组大鼠视皮层脑切片形态完整,镜下组织结构清晰,与正常对照组相比,弱视模型组SYN阳性神经元表达强度值明显降低(P<0.01)。结论:视觉发育关键期存在着突触结构可塑性,单眼形觉剥夺可以造成大鼠初级视皮层突触密度的降低,SYN表达水平下降,视皮层功能下降。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 视皮层 突触密度 突触素 视功能

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单眼形觉剥夺小鼠闪光视觉诱发电位与视知觉行为学的改变 被引量：3

8

作者 丁素真 李兰 +2 位作者 朱贺飞 李少敏 董洁 《昆明医科大学学报》 CAS 2019年第12期34-38,共5页

目的探究单眼形觉剥夺小鼠闪光视觉诱发电位与视知觉行为学的改变。方法选择健康3周龄小鼠100只,检测fVEP;将35只小鼠随机分为单眼形觉剥夺组(25只)和正常对照组(10只)。单眼形觉剥夺组小鼠随机选择1只眼行褥式缝合,7 d后分别检测小鼠... 目的探究单眼形觉剥夺小鼠闪光视觉诱发电位与视知觉行为学的改变。方法选择健康3周龄小鼠100只,检测fVEP;将35只小鼠随机分为单眼形觉剥夺组(25只)和正常对照组(10只)。单眼形觉剥夺组小鼠随机选择1只眼行褥式缝合,7 d后分别检测小鼠右眼及左眼fVEP,随后将单眼形觉剥夺组小鼠行反向缝合,将对照组小鼠单眼缝合,进行视知觉行为学实验。结果 (1)统计得出100只正常小鼠(200只眼)的fVEP N1波、P1波潜伏期及N1-P1振幅范围;(2)单眼形觉剥夺7 d后,部分小鼠剥夺眼较未剥夺眼fVEP的N1-P1振幅降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)在单眼形觉剥夺组中,fVEPN1-P1波振幅下降的小鼠视知觉行为学完成时间较对照组长,差异有统计学意义(P<0.05);N1-P1波振幅未下降的小鼠视知觉行为学完成时间较对照组长,差异无统计学意义(P>0.05)。结论验证了fVEP检测单眼形觉剥夺小鼠视功能的稳定可靠的指标是N1-P1波振幅降低;视知觉检测单眼形觉剥夺小鼠视功能结果与fVEP检测一致,二者相辅相成,同时运用这2种方法进行小鼠视功能检测,结果更为准确。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 视觉诱发电位 视知觉行为学 小鼠

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单眼形觉剥夺对小鼠视觉发育关键期内初级视皮层V1B区tLTP的影响 被引量：2

9

作者 付俊洪 陈霞 +1 位作者 郭雅图 宋德胜 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第6期512-515,519,共5页

目的观察在脉冲时间依赖的刺激诱导模式下单眼形觉剥夺对小鼠视觉发育关键期内初级视皮层V1B区长时程增强（timing long-term potentiation,t LTP）的影响及其对应诱导时间窗的变化。方法选择健康C57BL/6小鼠28只,随机分为正常对照组和... 目的观察在脉冲时间依赖的刺激诱导模式下单眼形觉剥夺对小鼠视觉发育关键期内初级视皮层V1B区长时程增强（timing long-term potentiation,t LTP）的影响及其对应诱导时间窗的变化。方法选择健康C57BL/6小鼠28只,随机分为正常对照组和单眼形觉剥夺组,每组14只,单眼形觉剥夺组右眼褥式缝合3 d。七氟烷麻醉后,断头、取脑,置于含体积分数95%O2和5%CO2饱和的0~4℃脑片制备液中冷却1~2 min,切取后部2/5脑组织,行400μm冠状连续切片,在脉冲时间依赖的条件刺激诱导模式下采用红外可视膜片钳全细胞模式记录正常对照组、单眼形觉剥夺组（含剥夺侧皮层、非剥夺侧皮层）视皮层V1B区脑片Ⅱ/Ⅲ层锥体神经元NMDA介导的兴奋性突触后电位（excitatory postsynaptic potentials,EPSP）。结果正常对照组小鼠脑片初级视皮层V1B区Ⅱ/Ⅲ层锥体神经元予间隔Δt=10 ms的突触前后联合刺激后EPSP反应增加,可成功诱导t LTP,但当Δt=100 ms则未能诱导t LTP[Δt=＋10 ms：EPSP斜率（124.1±3.9）%;Δt=＋100 ms：EPSP斜率（100.4±3.3）%;P〈0.001）。单眼形觉剥夺组小鼠剥夺侧初级视皮层分别给予Δt=10 ms、100 ms的脉冲时间依赖的条件刺激均可诱导出t LTP[Δt=＋10 ms：EPSP斜率（130.8±1.7）%;Δt=＋100 ms：EPSP斜率（114.7±0.3）%;P〈0.001）。单眼形觉剥夺组小鼠非剥夺侧视皮层分别给予Δt=10 ms、50 ms的脉冲时间依赖的条件刺激均可诱导出t LTP[Δt=＋10 ms：EPSP斜率（129.6±1.5）%;Δt=＋50 ms：EPSP斜率（120.5±0.9）%],而当Δt=100 ms时,未能成功诱导t LTP[Δt=＋100 ms：EPSP斜率（101.1±0.6）%]。结论单眼形觉剥夺3 d可以改变小鼠初级视皮层V1B区兴奋性通路的脉冲时间依赖的突触可塑性。剥夺侧较非剥夺侧及正常视皮层t LTP诱导时间窗增宽,有助于从突触可塑性角度解释弱视内在神经突触机制。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 脉冲时间依赖突触可塑性 长时程增强

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艾芬地尔对单眼形觉剥夺小鼠初级视皮层兴奋性递质受体表达的影响 被引量：1

10

作者 宋德胜 钱晶 陈志钧 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第4期326-330,共5页

目的检测N-甲基-D-天冬氨酸(N-mehyl-D-aspartate,NMDA)受体亚基NR2B (NMDA-NR2B)阻断剂艾芬地尔对单眼形觉剥夺小鼠初级视皮层内兴奋性递质受体亚基关键期相对表达量的影响,为弱视机制研究提供实验基础。方法选取出生后3～4周健康C57BL... 目的检测N-甲基-D-天冬氨酸(N-mehyl-D-aspartate,NMDA)受体亚基NR2B (NMDA-NR2B)阻断剂艾芬地尔对单眼形觉剥夺小鼠初级视皮层内兴奋性递质受体亚基关键期相对表达量的影响,为弱视机制研究提供实验基础。方法选取出生后3～4周健康C57BL/6J小鼠15只,随机分为正常对照组、单眼形觉剥夺组、联合组,每组5只。单眼形觉剥夺组和联合组小鼠右眼褥式缝合6 d,建立单眼形觉剥夺模型,联合组于第1、3、5天腹腔注射艾芬地尔,给药量为10 mg·kg^(-1)。采用qRT-PCR法检测各组小鼠视皮层NR2A mRNA和NR2B mRNA的相对表达量;采用Western blot法检测各组小鼠视皮层NR2A蛋白和NR2B蛋白的相对表达情况。结果与正常对照组相比,单眼形觉剥夺组小鼠左侧视皮层NR2A mRNA和蛋白表达下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05),NR2B mRNA和蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);右侧视皮层NR2A mRNA和蛋白表达升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),NR2B mRNA和蛋白表达下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。联合组、单眼形觉剥夺组小鼠左侧视皮层NR2A mRNA和蛋白相对表达量分别为0.99±0.22、0.75±0.08和0.58±0.44、0.50±0.36,差异均无统计学意义(均为P>0.05);联合组小鼠左侧视皮层NR2B蛋白相对表达量为1.79±0.84,低于单眼形觉剥夺组小鼠(4.83±2.06),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NR2B受体阻断剂艾芬地尔能显著降低NR2B亚基的表达,并阻断单眼形觉剥夺对NR2B基因及蛋白表达的影响,但对NR2A基因及蛋白表达无影响。 展开更多

关键词 NR2B 初级视皮层 艾芬地尔 单眼形觉剥夺

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视觉发育关键期单眼形觉剥夺对大鼠视功能和视皮层PKCζ蛋白表达的影响

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作者 李谦 路致远 +3 位作者 毕爱玲 李洋 毕宏生 王兴荣 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2022年第12期933-936,941,共5页

目的探讨视觉发育关键期单眼形觉剥夺对大鼠视功能和视皮层PKCζ蛋白表达的影响。方法选取出生后13 d SPF级Long Evans大鼠28只,利用随机数字表法将大鼠随机分为两组:正常对照组、弱视模型组,每组14只,以右眼作为实验眼。建立大鼠多维... 目的探讨视觉发育关键期单眼形觉剥夺对大鼠视功能和视皮层PKCζ蛋白表达的影响。方法选取出生后13 d SPF级Long Evans大鼠28只,利用随机数字表法将大鼠随机分为两组:正常对照组、弱视模型组,每组14只,以右眼作为实验眼。建立大鼠多维度弱视模型,采用视觉诱发电位验证弱视模型的建立,HE染色观察大鼠视皮层形态结构,视觉悬崖实验检测大鼠立体视功能,计算每只大鼠的辨别指数,Western blot检测大鼠视皮层中PKCζ蛋白的表达。结果与正常对照组相比,弱视模型组大鼠右眼(剥夺眼)的P2波潜伏期明显延长,P2波振幅明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。两组大鼠视觉悬崖实验检测结果显示,正常对照组大鼠探索行为轨迹集中在右侧(非悬崖侧),而弱视模型组大鼠探索行为轨迹紊乱,探索区域大多分布在左侧(悬崖侧)。弱视模型组大鼠辨别指数明显低于正常对照组(P<0.05)。正常对照组大鼠视皮层神经元数量丰富,结构完整,未出现明显神经元变性和坏死;弱视模型组大鼠视皮层神经元数量明显减少,结构不完整,出现不同程度的胞体固缩。弱视模型组大鼠左侧视皮层PKCζ蛋白相对表达量明显低于正常对照组(P<0.01)。结论在视觉发育关键期单眼形觉剥夺可造成大鼠视皮层结构的改变和视功能严重损害,视皮层PKCζ蛋白表达水平下降。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 视皮层 视觉诱发电位 视觉悬崖实验 蛋白激酶C

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氟西汀对单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性的影响 被引量：2

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作者 李彬 晁小蕊 +2 位作者 李权达 谢艳艳 石荣先 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第11期1159-1163,共5页

目的观察氟西汀对单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性的影响,探讨其可能机制。方法SD大鼠45只,随机选取10只为正常组,不作处理,余35只行左侧眼睑缝合术制备单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型。将造模成功30只大鼠随机分为模型... 目的观察氟西汀对单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性的影响,探讨其可能机制。方法SD大鼠45只,随机选取10只为正常组,不作处理,余35只行左侧眼睑缝合术制备单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型。将造模成功30只大鼠随机分为模型组、氟西汀组、氟西汀+舒林酸组各10只。氟西汀组腹腔注射氟西汀生理盐水溶液10 mg/kg,氟西汀+舒林酸组腹腔注射氟西汀生理盐水溶液10 mg/kg+舒林酸生理盐水溶液5 mg/kg,模型组、正常组腹腔注射等量生理盐水,均1次/d,持续2周。给药2周后测定4组大鼠剥夺眼闪光视觉诱发电位,记录P波潜伏期及振幅。4组大鼠处死后取剥夺眼侧视皮质,测定视皮质突触数量、突触间隙宽度、突触后致密带厚度;行HE染色观察视皮质组织形态;采用Western blot法检测视皮质糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、p-β-catenin、β-catenin蛋白相对表达量,计算p-β-catenin/β-catenin。结果模型组剥夺眼P波潜伏期[(113.35±12.64)ms]长于正常组[(77.62±11.57)ms](P<0.05),振幅[(5.66±1.47)μV]低于正常组[(21.53±3.61)μV](P<0.05),视皮质突触数量[(39.80±5.07)个/200μm^(2)]少于正常组[(61.60±8.53)个/200μm^(2)](P<0.05),突触间隙宽度[(26.37±3.18)nm]和突触后致密带厚度[(77.01±7.76)nm]均大于正常组[(15.56±2.37)、(49.93±5.14)nm](P<0.05);氟西汀组剥夺眼P波潜伏期[(87.81±14.53)ms]短于模型组(P<0.05),振幅[(14.89±2.73)μV]高于模型组(P<0.05),视皮质突触数量[(53.20±6.14)个/200μm^(2)]多于模型组(P<0.05),突触间隙宽度[(18.34±2.88)nm]和突触后致密带厚度[(59.08±6.03)nm]均小于模型组(P<0.05);氟西汀+舒林酸组剥夺眼P波潜伏期[(104.23±13.61)ms]长于氟西汀组(P<0.05),振幅[(10.17±1.95)μV]低于氟西汀组(P<0.05),视皮质突触数量[(45.80±5.89)个/200μm^(2)]少于氟西汀组(P<0.05),突触间隙宽度[(21.19±3.07)nm]和突触后致密带厚度[(65.42±7.15)nm]均大于氟西汀组(P<0.05)。HE染色结果显示,正常组剥夺眼侧视皮质神经元体积大、数目多、胞体饱满、胞质丰富,着色深;与正常组比较,模型组细胞体积减小、数目减少、胞体干瘪、着色变浅;与模型组比较,氟西汀组细胞形态改善,接近正常组;与氟西汀组比较,氟西汀+舒林酸组细胞体积减小、数目减少。模型组剥夺眼侧视皮质GSK-3β蛋白相对表达量(0.51±0.07)高于正常组(0.17±0.02)(P<0.05),p-β-catenin/β-catenin(0.13±0.01)低于正常组(0.71±0.08)(P<0.05);氟西汀组剥夺眼侧视皮质GSK-3β蛋白相对表达量(0.27±0.03)低于模型组(P<0.05),p-β-catenin/β-catenin(0.43±0.04)高于模型组(P<0.05);氟西汀+舒林酸组剥夺眼侧视皮质GSK-3β蛋白相对表达量(0.39±0.04)高于氟西汀组(P<0.05),p-β-catenin/β-catenin(0.32±0.03)低于氟西汀组(P<0.05)。结论氟西汀可改善单眼形觉剥夺性弱视大鼠视觉功能及视皮质突触可塑性,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺性弱视 氟西汀 视觉功能 突触可塑性 Wnt/β-catenin信号通路 大鼠

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Neuritin基因在单眼剥夺成年大鼠视皮层中的表达 被引量：2

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作者 田春慧 陈霞 +1 位作者 陈静 王玉川 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第4期334-337,共4页

目的研究单眼剥夺(MD)视皮层neuritin mRNA的表达。方法35只Wistar大鼠分为正常对照组、MD组和反缝合(RS)组,缝合14日龄大鼠右眼睑建立MD模型,RS组大鼠缝合单眼至90日龄时进行反缝合,并持续暴露于灯光中6、12、24、48 h和1周,其余2组大... 目的研究单眼剥夺(MD)视皮层neuritin mRNA的表达。方法35只Wistar大鼠分为正常对照组、MD组和反缝合(RS)组,缝合14日龄大鼠右眼睑建立MD模型,RS组大鼠缝合单眼至90日龄时进行反缝合,并持续暴露于灯光中6、12、24、48 h和1周,其余2组大鼠至90日龄时直接取左侧大脑视皮层,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测所有大鼠视皮层neuritin mRNA的表达情况。结果不同组大鼠视皮层中neuritin mRNA表达量的总体差异有统计学意义(F=19.235,P<0.05)。MD组大鼠视皮层中neuritin mRNA的表达量低于正常对照组,差异有统计学意义(t=-0.097,P<0.05);RS 6 h组大鼠视皮层中neuritin mRNA的表达量明显高于MD组,差异有统计学意义(t=-0.028,P<0.05)。RS12、24、48 h组大鼠视皮层中neuritin mRNA的表达量明显高于MD组,差异均有统计学意义(t=-0.046,t=-0.064,t=-0.065;P<0.05)。Neuritin mRNA的表达在实验24 h达到高峰,然后逐渐下降,但RS1周组与MD组neuritin mRNA的表达比较,差异有统计学意义(t=-0.037,P<0.05)。结论Neuritin mRNA在MD成年大鼠和RS不同时间大鼠视皮质表达呈动态变化,提示年龄超过视觉发育敏感期的MD成年大鼠的视皮层仍具有一定程度的可塑性。 展开更多

关键词 neuritin基因 视皮质可塑性 单眼形觉剥夺 视觉发育

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丰富环境及反转缝合治疗后突触素对关键期内视皮质神经元可塑性的影响 被引量：3

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作者 蔺静静 刘向玲 +3 位作者 王圆月 宋子宣 李靳 张锐 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第4期330-333,共4页

目的探讨关键期内单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型经反转缝合及丰富环境治疗前后视皮质突触素(synaptophysin,SYP)的表达规律,及SYP对视皮质神经元可塑性的影响。方法 36只14 d龄SD大鼠随机分为6组,每组6只,其中NCI组、NCII组为正常对照组;... 目的探讨关键期内单眼形觉剥夺性弱视大鼠模型经反转缝合及丰富环境治疗前后视皮质突触素(synaptophysin,SYP)的表达规律,及SYP对视皮质神经元可塑性的影响。方法 36只14 d龄SD大鼠随机分为6组,每组6只,其中NCI组、NCII组为正常对照组;MDI组、MDII组、反转缝合(reverse suture,RS)组和RS+丰富环境(enriched environment,EE)组分别行右眼眼睑缝合,RS组、RS+EE组于28 d龄打开剥夺眼,同时缝合对侧眼睑行遮盖治疗,RS组放于标准环境中饲养、RS+EE组放于EE中饲养;NCI组、MDI组于28 d龄,NCII组、MDII组、RS组、RS+EE组于42 d龄行图形视觉诱发电位检测,同时采用HE染色和免疫组织化学法检测分析各组大鼠视皮质SYP蛋白表达水平的变化。结果图形视觉诱发电位示形觉剥夺眼P100波的波形稳定性差、潜伏期延长、振幅降低。HE染色示各组大鼠视皮质神经元均未见明显异常。免疫组织化学法检测可见RS组视皮质SYP阳性神经元密度较MDII组高,RS+EE组视皮质SYP阳性神经元密度较MDII组、RS组高,MDI组大鼠视皮质SYP阳性神经元密度较NCI组低,MDII组、RS组大鼠视皮质SYP阳性神经元密度均较NCII组及RS+EE组低,定量分析显示以上各组SYP免疫标记的平均光密度值间差异均有统计学意义(均为P<0.05),但NCII组和RS+EE组两组间平均光密度值差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SYP影响视皮质神经元可塑性,且参与了视觉发育视皮质可塑性的变化过程,是弱视发病的重要分子机制之一; 展开更多

关键词 单眼形觉剥夺 弱视 突触素 视皮质 反转缝合治疗 丰富环境

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