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抗单纯疱疹病毒1型的IgY制备及其生物学活性检测
1
作者 苏海涛 翟玥 +1 位作者 宋秀玲 徐坤 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期303-309,共7页
目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-... 目的:制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。方法:制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和蛋白浓度定量试剂盒测定IgY效价、纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测IgY中和病毒的能力,测定病毒阻断率,以Vero细胞为病毒感染靶细胞,测定不同抗体浓度(0.01560、0.03125、0.06250、0.12500、0.50000、和1.00000 g·L^(-1))作用后细胞病变效应(CPE),根据CPE程度测定IgY体外抗HSV-1能力。结果:制备的IgY效价随免疫时间逐渐升高,达到1/1024000后保持稳定;IgY轻链重链条带清晰;IgY平均蛋白水平为11.544 g·L^(-1);IgY对HSV-1的阻断率可高达77.90%;HSV-1致CPE程度随抗体浓度升高而逐渐降低,当IgY浓度达到0.50000g·L^(-1)及以上时,25%以下细胞(甚至无细胞)发生病变。结论:成功制备出抗HSV-1的IgY,该抗体对HSV-1具有明显的中和阻断能力和体外抑制活性,可用于药物及诊断方法的开发。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 卵黄抗体 中和病毒 体外抗病毒能力
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家庭聚集性单纯疱疹病毒1型感染3例
2
作者 何花 黄瑛 +2 位作者 徐俊 李杨 张燕玲 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期453-456,共4页
单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type,HSV)1型和2型(分别为HSV-1和HSV-2)引起多种疾病,包括唇疱疹、生殖器疱疹、疱疹间质角膜炎、脑膜炎和脑炎。HSV-1和HSV-2通过密切接触在个体之间传播。大多数人在生命早期通过口腔黏膜获得HSV-1... 单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type,HSV)1型和2型(分别为HSV-1和HSV-2)引起多种疾病,包括唇疱疹、生殖器疱疹、疱疹间质角膜炎、脑膜炎和脑炎。HSV-1和HSV-2通过密切接触在个体之间传播。大多数人在生命早期通过口腔黏膜获得HSV-1,而HSV-2感染发生较晚,通常通过性传播;HSV与宿主之间的相互作用,特别是与免疫系统的相互作用,决定了感染的结果。HSV感染后可表现为无症状、轻微的亦或是危及生命的。感染病毒后潜伏期长短、何时再激活、及侵犯某一部位与宿主的免疫状态密切相关[1];HSV可通过飞沫、口腔、呼吸道等方式传播,HSV在家庭成员中传播、感染不少见,但在相近时间段发病却不常见,我们报道3例家庭聚集性HSV感染的病例,旨在提高对该病的认识,减少误诊和漏诊。 展开更多
关键词 家庭聚集性 单纯疱疹病毒1型 感染
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CT灌注成像辅助诊断单纯疱疹病毒1型脑炎一例 被引量：1
3
作者 符雄琳 龙发青 《新医学》 CAS 2023年第3期226-230,共5页
单纯疱疹病毒性脑炎又称急性坏死性脑炎,是由疱疹病毒感染引起的脑实质炎症。CT灌注成像(CTP)可快速显示脑部组织灌注异常及脑组织受损情况,常被用于脑卒中的诊断,而被用于辅助诊断脑炎的文献报道较少。该文报道了1例通过CTP辅助诊断单... 单纯疱疹病毒性脑炎又称急性坏死性脑炎,是由疱疹病毒感染引起的脑实质炎症。CT灌注成像(CTP)可快速显示脑部组织灌注异常及脑组织受损情况,常被用于脑卒中的诊断,而被用于辅助诊断脑炎的文献报道较少。该文报道了1例通过CTP辅助诊断单纯疱疹病毒1型脑炎的59岁男性患者。该例患者起病急,突发右侧肢体抽搐伴发热,且伴有精神症状,不能配合完成MRI,故急行头颅CTP,结果显示其左侧颞叶灌注较右侧增加,不排除病毒性脑炎的诊断,遂于入院12 h内泵注阿昔洛韦抗病毒治疗及予其他对症治疗,患者病情逐渐好转。入院后3 d脑脊液病原体二代测序结果回报,明确诊断为单纯疱疹病毒1型脑炎。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒性脑炎 单纯疱疹病毒1型 CT灌注成像
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单纯疱疹病毒1型感染致Mollaret脑膜炎继发癫痫发作:1例报道并文献综述
4
作者 赵燕红 王澜静 +2 位作者 刘丽君 邢天丽 滕继军 《临床医学进展》 2023年第12期18757-18762,共6页
目的:报告1例单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)感染致Mollaret脑膜炎(Mollaret’s meningitis)继发癫痫发作的病例,旨在提高临床医生对该病的认识。方法:回顾性分析我院确诊的1例Mollaret脑膜炎患者的临床资料,并... 目的:报告1例单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1, HSV-1)感染致Mollaret脑膜炎(Mollaret’s meningitis)继发癫痫发作的病例,旨在提高临床医生对该病的认识。方法:回顾性分析我院确诊的1例Mollaret脑膜炎患者的临床资料,并结合相关文献进行总结。结果:患者临床以反复发热伴头疼,及继发癫痫发作为特点,脑脊液二代测序(next-generation sequencing, NGS)检查发现HSV-1核酸序列阳性,诊断为Mollaret脑膜炎,经抗病毒及对症治疗1周后症状完全缓解。结论:Mollaret脑膜炎是临床少见疾病,由HSV-1感染更是少见,易误诊、漏诊,应提高早期识别率,减少不必要的检查及治疗。 展开更多
关键词 MOLLARET脑膜炎 良性复发性无菌性脑膜炎 单纯疱疹病毒1型 癫痫
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余甘子提取物体外抗单纯疱疹病毒1型和2型的初步研究 被引量：17
5
作者 瞿畅 赖志才 +4 位作者 裴赢 张美英 王一飞 张颖君 杨崇仁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期784-786,共3页
目的从余甘子的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物和水提物3种提取物体外筛选抗单纯疱疹病毒1型和2型的活性成分。方法通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、空斑减数法,判断药物的毒性及其抗病毒效应。结果余甘子的醋酸乙酯提取物、甲... 目的从余甘子的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物和水提物3种提取物体外筛选抗单纯疱疹病毒1型和2型的活性成分。方法通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、空斑减数法,判断药物的毒性及其抗病毒效应。结果余甘子的醋酸乙酯提取物、甲醇提取物和水提物对于单纯疱疹病毒1型的半数抑制浓度分别为25.28,66.17,100.94μg/ml;余甘子的3种提取物对于单纯疱疹病毒2型的半数抑制浓度分别为31.70,180.3,112.1μg/ml。结论余甘子3种提取物在体外对单纯疱疹病毒1型和2型均有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 余甘子 单纯疱疹病毒1型 单纯疱疹病毒2型 细胞病变效应法 空斑减数法
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栀子提取物ZG对单纯疱疹病毒1型细胞吸附的影响 被引量：9
6
作者 郭姗姗 王秀坤 +5 位作者 张媛媛 高英杰 黄洋 赵晔 巩文峰 崔晓兰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期198-202,共5页
采用负染技术,借助高倍电子显微镜观察栀子提取物ZG作用后,病毒颗粒及其病毒吸附蛋白(virus attach-ment protein,VAP)的变化,考察药物是否直接改变或破坏病毒包膜蛋白的结构,使其失去感染性;采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocya... 采用负染技术,借助高倍电子显微镜观察栀子提取物ZG作用后,病毒颗粒及其病毒吸附蛋白(virus attach-ment protein,VAP)的变化,考察药物是否直接改变或破坏病毒包膜蛋白的结构,使其失去感染性;采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记病毒,以肝素钠为参照,借助冷却慢扫描电荷耦合器件荧光成象技术,用Aquacomos软件进行图象分析,以探讨栀子提取物ZG不同加药方式对HSV-1吸附量的影响。结果表明栀子提取物ZG对HSV-1包膜表面的VAP无直接破坏作用,不影响病毒对Hep-2细胞的感染性;先加入肝素钠再进行病毒吸附及肝素钠病毒同时加入培养细胞这两种用药方式可明显减少细胞表面病毒的吸附量;栀子提取物ZG各种不同加药方式均能阻止HSV-1对Hep-2细胞表面的吸附,使病毒吸附量减少。 展开更多
关键词 栀子提取物ZG 单纯疱疹病毒1型 病毒吸附蛋白 冷却慢扫描电荷耦合器件 异硫氰酸荧光素 肝素钠
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白介素2基因佐剂协同单纯疱疹病毒1型糖蛋白D核酸疫苗免疫诱导的特异性免疫应答 被引量：11
7
作者 刘晓娟 朱明昭 +6 位作者 宋国兴 许于飞 刘宏伟 王盛 杨宝玲 董方田 许雪梅 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期67-72,共6页
目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果。方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定... 目的研究白介素2(IL-2)cDNA协同单纯疱疹病毒1型(HSV-1)gD核酸疫苗免疫对机体体液免疫和细胞免疫应答的影响,以及在HSV-1病毒角膜攻击时的保护效果。方法利用pcDNA3.1载体分别构建HSV-1糖蛋白D和IL-2的真核表达质粒pgD和pIL-2,体外鉴定其表达。动物实验分为pcDNA3.1空载体对照组、pgD单独免疫组和pgD+pIL-2联合免疫组3组,具体为通过肌肉免疫接种BALB/c小鼠3次,间隔2周,每次接种质粒100μg,第3次免疫后2周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体滴度并做亚型分析,利用3H-TdR掺入法进行Th细胞增殖实验,ELISA试剂盒检测Th细胞分泌的IL-2、IFN-γ和IL-10水平,耳廓肿胀实验检测迟发型超敏反应(DTH)反应;HSV-1病毒角膜攻击后,裂隙灯显微镜观察角膜上皮病变。结果与pgD单独免疫组相比,pIL-2的协同免疫可以显著提高IgG2a抗体滴度、Th细胞增殖反应和DTH反应,Th细胞分泌IL-2和IFN-γ水平也显著提高,IL-10水平明显下降。在动物保护实验中,pIL-2的协同免疫明显增强了pgD疫苗在病毒攻击时对角膜的保护效果。结论IL-2cDNA的协同免疫可以显著提高pgD核酸疫苗诱导的体液免疫和细胞免疫应答水平,增加核酸疫苗的免疫保护效果。 展开更多
关键词 DNA疫苗 白介素2 单纯疱疹病毒1型 角膜炎
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单纯疱疹病毒1型糖蛋白B基因疫苗的构建 被引量：9
8
作者 孟祥俊 贺冰 +2 位作者 冯非 李光源 毕军 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期717-720,共4页
目的 :构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗 ,探讨单纯疱疹病毒 1型糖蛋白 B(HSV-1gp B)基因作为基因疫苗的可能性。方法 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4毒株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)... 目的 :构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗 ,探讨单纯疱疹病毒 1型糖蛋白 B(HSV-1gp B)基因作为基因疫苗的可能性。方法 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4毒株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)的基因片断 (2 6 73bp) ,定向插入真核表达质粒 pc DNA3载体中 ,构建出重组真核表达质粒 pc DNA- gp B,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。结果 :双酶切重组质粒 pc DNA- gp B,电泳可见两条带 ,分别为目的基因 (2 70 0 bp)和线性质粒 pc DNA3(5 4 0 0 bp) ;以重组质粒 pc DNA- gp B为模板进行 PCR扩增 ,在 2 70 0 bp位置扩增出特异的产物 ;测序结果表明 ,克隆基因插入方向正确 ,与 Gen Bank中登录的 HSV- 1F株 gp B基因序列比较 ,同源性达 99.5 %。结论 :利用 PCR技术从 HSV- 1SM4 4株基因组中扩增出编码 HSV- 1gp B去除 N端部分信号肽序列 (39bp)的基因片断 (2 6 73bp) ,成功地构建了 HSV- 1基因疫苗pc DNA- gp B。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 糖蛋白B DNA疫苗
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槟榔提取物体外抗柯萨奇病毒B3及单纯疱疹病毒1型和乙型肝炎病毒的研究 被引量：7
9
作者 王小燕 张美英 +5 位作者 王亚峰 郝静 刘秋英 王一飞 张颖君 杨崇仁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2954-2955,共2页
目的从槟榔9种提取物中体外筛选出抗柯萨奇病毒B3,单纯疱疹病毒1型活性成分,从其中3种提取物中体外筛选出抗乙型肝炎病毒的活性成分。方法通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、MTT法,判断药物毒性及药物抗病毒效应。结果槟榔9种... 目的从槟榔9种提取物中体外筛选出抗柯萨奇病毒B3,单纯疱疹病毒1型活性成分,从其中3种提取物中体外筛选出抗乙型肝炎病毒的活性成分。方法通过观察药物毒性、病毒引起的细胞病变效应、MTT法,判断药物毒性及药物抗病毒效应。结果槟榔9种提取物对Hela,Vero细胞具有一定的毒性,而无抗病毒活性,3种提取物不能有效地抑制HepG2.2.15细胞HBeAg的表达。结论槟榔9种提取物体外无抗柯萨奇病毒B3、单纯疱疹病毒1型的作用,3种提取物体外无抗乙型肝炎病毒的作用。 展开更多
关键词 槟榔 柯萨奇病毒 单纯疱疹病毒1型 乙型肝炎病毒
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单纯疱疹病毒1型US12基因siRNA筛选及其对病毒增殖的影响 被引量：2
10
作者 李深 任哲 +7 位作者 王巧利 向阳飞 王一飞 胡巢凤 戚仁斌 陆大祥 张庶民 张佩琢 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期528-532,共5页
目的:筛选高效沉默单纯疱疹病毒1型(HSV-1)US12基因的siRNA,研究siRNA沉默US12基因后对HSV-1增殖的影响。方法:构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,设计并化学合成3对靶向US12基因的siRNA,与pEGFP-N1-US12融合表达质粒共转染Vero细胞,流式... 目的:筛选高效沉默单纯疱疹病毒1型(HSV-1)US12基因的siRNA,研究siRNA沉默US12基因后对HSV-1增殖的影响。方法:构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,设计并化学合成3对靶向US12基因的siRNA,与pEGFP-N1-US12融合表达质粒共转染Vero细胞,流式细胞术筛选高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siRNA,实时荧光定量PCR检测siRNA对细胞内US12 mRNA表达水平的抑制效果,空斑减数实验评价siRNA对HSV-1增殖的抑制效果。结果:共转染实验筛选出高效抑制pEGFP-N1-US12融合蛋白的siR-NAS121、siRNAS122及siRNAS123。3对siRNA均能显著降低感染细胞US12 mRNA的表达水平,但空斑减数实验均未发现3对siRNA对HSV-1的增殖有显著抑制效果。结论:成功构建pEGFP-N1-US12融合表达质粒,筛选到高效抑制US12基因表达的3对siRNA,但是对病毒的体外增殖无显著影响,表明US12表达的立即早期蛋白ICP47的功能可能与HSV-1体外增殖无直接相关。 展开更多
关键词 SIRNA RNA干扰 基因 US12 单纯疱疹病毒1型
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单纯疱疹病毒1型对抗生素17997的耐药及交叉耐药研究 被引量：1
11
作者 陶佩珍 王淑琴 +3 位作者 潘菲 陈斯同 滕立 章天 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期382-384,共3页
目的　体外训练单纯疱疹病毒 1型 (HSV- 1)对抗生素 17997的耐药突变及体内、外研究抗生素17997与阿昔洛韦 (ACV)的交叉耐药。方法　 HSV- 1在抗生素 17997或 ACV的存在下连续传代 ,选择一定代数测定 HSV- 1野株及训练株的 IC50 。用 HS... 目的　体外训练单纯疱疹病毒 1型 (HSV- 1)对抗生素 17997的耐药突变及体内、外研究抗生素17997与阿昔洛韦 (ACV)的交叉耐药。方法　 HSV- 1在抗生素 17997或 ACV的存在下连续传代 ,选择一定代数测定 HSV- 1野株及训练株的 IC50 。用 HSV- 1的 ACV耐药株感染兔角膜造模 ,分别用抗生素 17997或ACV局部给药治疗 ,以局部病损及病毒分离判断疗效。结果　HSV- 1在抗生素 17997存在下连传 41代仍保持对抗生素 17997的敏感性 ,未产生耐药变株 ;但 HSV- 1在 ACV存在下 ,仅传一代 ,就发生耐药变株。抗生素17997与 ACV无交叉耐药。抗生素 17997对 HSV- 1ACV耐药株实验感染角膜炎有明显治疗效果 ,可减轻病损 ,降低病毒排出量 ;阳性对照药 ACV无任何疗效。结论　体外 HSV- 1对抗生素 17997不易产生耐药。抗生素 17997与 ACV体内。 展开更多
关键词 抗生素17997 耐药性 HSV-1 兔 角膜炎 单纯疱疹病毒1型
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单纯疱疹病毒1型糖蛋白D主要抗原表位区的表达、纯化及鉴定 被引量：2
12
作者 刘红 刘宾 +1 位作者 和骁 赵晓涛 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第3期350-355,共6页
目的原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序... 目的原核表达单纯疱疹病毒1型(HSV-1)糖蛋白D(gD)主要抗原表位区,纯化融合表达蛋白并对其进行鉴定。方法用Lasergene7.0中Protean软件对HSV-1 gD氨基酸序列进行抗原表位预测和分析,筛选出gD主要抗原表位区(gD MED),人工合成该区域cDNA序列,构建原核表达载体pET-GST-gD MED;将重组质粒转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)pLysS,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过GST.Bind纯化试剂盒对gDMED融合蛋白进行纯化;Western blot对gD MED融合蛋白的免疫活性进行分析。结果 HSV-1 gD在266～394区域富含抗原表位,人工合成了该区域的cDNA序列,并成功构建了原核表达载体pET-GST-gD MED;gD MED融合蛋白主要以可溶形式表达,分子质量约为45 ku,纯度能达95%;Western blot结果显示,gD MED融合蛋白能与感染HSV-1患者的血清发生特异结合。结论成功表达和纯化了具有良好抗原性的HSV-1 gD MED融合蛋白,为HSV免疫诊断试剂盒和基因工程疫苗的研制提供了依据。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒1型 糖蛋白D 主要抗原表位区 原核表达
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单纯疱疹病毒1型VP16蛋白和VHS蛋白研究进展 被引量：2
13
作者 张春龙 王一飞 张美英 《中国病毒学》 CAS CSCD 2006年第5期519-522,共4页
关键词 单纯疱疹病毒1型(HSV-1) VP16蛋白 VHS蛋白
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染料木黄酮抑制由单纯疱疹病毒1型感染导致的人胶质瘤细胞增殖和凋亡异常 被引量：1
14
作者 王倩 李玲 +6 位作者 王斌 于向民 宋旭霞 钱冬萌 侯云 姜光域 胡明 《医学研究生学报》 CAS 2011年第3期231-236,共6页
目的染料木黄酮(Genistein,GST)已被证实具有抗广谱病毒的作用,但有关其抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpessimplex virus-1,HSV-1)感染人星形胶质细胞的研究鲜有报道。研究GST对由HSV感染所致人胶质瘤细胞(U251)增殖和凋亡异常的抑制作用。... 目的染料木黄酮(Genistein,GST)已被证实具有抗广谱病毒的作用,但有关其抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型(herpessimplex virus-1,HSV-1)感染人星形胶质细胞的研究鲜有报道。研究GST对由HSV感染所致人胶质瘤细胞(U251)增殖和凋亡异常的抑制作用。方法设立GST组、GST+HSV-1组、HSV-1组和对照组,以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为5的HSV-1感染U251细胞,通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和RT-PCR检测GST对HSV-1感染致U251细胞增殖和凋亡异常的抑制作用。结果①MTT法显示不同处理组之间的差别具有高度统计学意义(P<0.05),并有非常明显的时间效应(P<0.05)。其中30μg/ml GST组和HSV-1组MTT值低于对照组(P<0.05);15μg/ml GST+HSV-1组MTT均值高于HSV-1组均值(P<0.05),3.75和30μg/ml GST+HSV-1组MTT值均低于HSV-1组(P<0.05)。②形态学观察HSV-1组细胞感染12 h后出现融合,36 h后出现细胞病变效应,15μg/ml GST+HSV-1组细胞感染24 h后开始出现少量融合,36 h后融合增多,但大部分细胞为正常形态;流式细胞术显示,15μg/ml GST+HSV-1组凋亡率低于HSV-1组(P<0.05)。③RT-PCR检测显示HSV-1组感染6 h后开始检测到gD基因的表达;15μg/ml GST+HSV-1组在感染12 h内gD基因表达受到抑制,24 h后gD基因才开始表达。结论 15μg/ml浓度的GST能抑制HSV-1感染所致细胞增殖和凋亡的异常,同时抑制病毒gD基因的表达。 展开更多
关键词 染料木黄酮 单纯疱疹病毒1型 U251 增殖 凋亡
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重组蓝藻抗病毒蛋白N的纯化复性及其抗单纯疱疹病毒1型活性的研究 被引量：1
15
作者 刘宗涛 于红 +2 位作者 尹延梅 李丹 张文卿 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2008年第3期1-5,共5页
目的纯化复性重组蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N,CV-N)并研究其抗病毒活性。方法将诱导表达的重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化并以稀释法复性,在Vero细胞中进行CV-N抗单纯疱疹病毒1型(herpes si mplex virus type1,HSV-1)活性的研究。通... 目的纯化复性重组蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin-N,CV-N)并研究其抗病毒活性。方法将诱导表达的重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化并以稀释法复性,在Vero细胞中进行CV-N抗单纯疱疹病毒1型(herpes si mplex virus type1,HSV-1)活性的研究。通过观察细胞病变效应(CPE)及MTT比色法检测细胞活性,以判断CV-N的抗病毒效应。结果重组CV-N经Ni Sepharose柱纯化后,SDS-PAGE显示11KDa处清晰的单一条带,复性的重组CV-N对Vero细胞毒性极低,对HSV-1无直接灭活作用,CV-N对病毒的吸附及生物合成均有抑制作用,且强于阳性对照药物阿昔洛韦。结论经纯化复性的CV-N具有良好的抗HSV-1活性,值得进一步研究和开发。 展开更多
关键词 重组蓝藻抗病毒蛋白N 纯化 复性 单纯疱疹病毒1型 抗病毒
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天花粉蛋白抗单纯疱疹病毒1型的实验研究 被引量：3
16
作者 黎志东 赵巧云 +1 位作者 徐志凯 宋继蓉 《科学技术与工程》 2006年第12期1676-1677,1680,共3页
检测用基因工程方法制备的天花粉蛋白抗单纯疱疹病毒1型的活性。将单纯疱疹病毒1型在细胞系中培养,加入天花粉蛋白后,观察细胞病变情况,用酶联免疫吸附(ELISA)的方法检测病毒生长情况。结果显示,加入天花粉蛋白的细胞始终未见细胞病变,E... 检测用基因工程方法制备的天花粉蛋白抗单纯疱疹病毒1型的活性。将单纯疱疹病毒1型在细胞系中培养,加入天花粉蛋白后,观察细胞病变情况,用酶联免疫吸附(ELISA)的方法检测病毒生长情况。结果显示,加入天花粉蛋白的细胞始终未见细胞病变,ELISA检测为阴性;阴性对照组细胞在第3d以后均出现单纯疱疹病毒1型感染典型细胞病变,ELISA检测结果为阳性;阳性对照组始终未见单纯疱疹病毒1型感染典型细胞病变,ELISA检测结果为阴性。天花粉蛋白在体外培养细胞系中可以抑制单纯疱疹病毒1型。 展开更多
关键词 天花粉蛋白 单纯疱疹病毒1型 抑制
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BALB/c小鼠作为单纯疱疹病毒1型感染模型的免疫学分析 被引量：2
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作者 张小龙 汤贝贝 +5 位作者 何玉凤 段永忠 王丽春 张志晓 周巨民 李琦涵 《微生物与感染》 2017年第4期222-228,共7页
在单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)小鼠感染及其相关研究中,临床病理和免疫学指标对其分析具有重要技术意义。本研究观察了HSV-1在不同条件下感染BALB/c小鼠后的多个免疫学指标,包括外周血单核细胞(peripheral bloo... 在单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)小鼠感染及其相关研究中,临床病理和免疫学指标对其分析具有重要技术意义。本研究观察了HSV-1在不同条件下感染BALB/c小鼠后的多个免疫学指标,包括外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)群体中树突细胞比例及功能、血清中和抗体水平、PBMC中HSV-1抗原特异性T细胞水平,以及潜伏感染期小鼠神经组织中CD8^+T细胞浸润情况。结果显示,HSV-1毒株Mckrae、17^+以角膜及滴鼻途径感染3周龄及6周龄BALB/c小鼠后,小鼠PBMC中树突细胞数量增加,并显示出刺激病毒抗原特异性T细胞增殖的能力。病毒感染后35d,小鼠PBMC中未检测到白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)^+抗原特异性T细胞,但能检测到低水平的γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)^+抗原特异性T细胞;小鼠血清中未检测到或仅能检测到低水平的中和抗体。HSV-1以皮下及足垫注射途径感染BALB/c小鼠90d后,足垫感染途径较皮下感染诱导出更高水平的血清中和抗体,PBMC中可检测到IL-4^+及IFN-γ^+抗原特异性T细胞,但不同毒株及小鼠周龄之间出现T细胞反应程度差异。组织病理学结果表明,各组小鼠三叉神经组织中均有CD8^+T细胞浸润。这些结果提示,不同HSV-1毒株以不同途径感染不同周龄BALB/c小鼠后,均可刺激树突细胞成熟及呈递病毒抗原,但血清中和抗体及PBMC中病毒抗原特异性T细胞水平在不同毒株、感染途径及小鼠周龄之间有差异。 展开更多
关键词 BALB/C小鼠 单纯疱疹病毒1型 免疫学分析
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硅油抑制单纯疱疹病毒1型的体外实验研究 被引量：6
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作者 颜华 李军 《眼外伤职业眼病杂志》 北大核心 2007年第10期751-754,共4页
目的通过体外实验的方法研究硅油对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的抑制作用。方法(1)滴定HSV-1型TC ID50。(2)培养Hela细胞并接种于96孔板。(3)将HSV-1原液分别稀释为100 TC ID50、50 TC ID50、30 TC ID50、10 TC ID50和1 TC ID50。(4)将上... 目的通过体外实验的方法研究硅油对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的抑制作用。方法(1)滴定HSV-1型TC ID50。(2)培养Hela细胞并接种于96孔板。(3)将HSV-1原液分别稀释为100 TC ID50、50 TC ID50、30 TC ID50、10 TC ID50和1 TC ID50。(4)将上述各浓度的HSV-1分别加到长满Hela细胞的96孔板中,每个浓度加到16个孔,其中8个孔另加0.1 mL硅油作为实验组,其余8个作为对照组。(5)再取8个孔加维持液和0.1 mL硅油作为实验组,8个孔只加维持液作为对照组。结果(1)实验后32 h的30 TC ID50实验组、实验后45 h的10 TC ID50实验组、实验后51 h的1 TC ID50实验组细胞病变均明显少于对照组(P<0.01)。(2)在病毒对照组中,30 TC ID50、10 TC ID50和1 TC ID50孔中细胞分别于实验后45 h、58 h和58 h发生100%病变。(3)50 TCID50对照组和实验组以及100 TCID50对照组和实验组细胞于实验后32 h发生100%细胞病变(P>0.05)。结论在体外实验中,硅油对HSV-1有明显抑制作用。其抑制作用大小与病毒的浓度有一定关系。 展开更多
关键词 硅油 单纯疱疹病毒1型 HELA细胞
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KIR MMP-9基因多态性与单纯疱疹病毒1型脑炎易感性的相关性 被引量：1
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作者 曹杏 沈雷 +1 位作者 张伟东 李林 《安徽医学》 2021年第4期413-416,共4页
目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因多态性与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)脑炎易感性的相关性。方法选取2018年1月至2020年3月河南省南阳市中心医院收治的HSV-1脑炎患儿75例为研究对象,并作为研究组。另选... 目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因多态性与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)脑炎易感性的相关性。方法选取2018年1月至2020年3月河南省南阳市中心医院收治的HSV-1脑炎患儿75例为研究对象,并作为研究组。另选取经脑脊液检测为非病毒性脑炎的患儿75例为对照组,对比两组KIR等位基因(2DL1、2DL2、2DL3、2DL5、3DL1、3DL2、3DL3、2DL4、2DS1、2DS2、2DS3、2DS4、2DS5、3DS1)和MMP-9基因1562C/T多态性中野生型(CC)、杂合子突变型(CT)、突变纯合型(TT)的分布情况,采用logistic回归模型分析KIR、MMP-9基因多态性与HSV-1脑炎易感的关系。结果研究组KIR等位基因中的2DL1和3DL1基因频率高于对照组(P<0.05),研究组KIR等位基因中的2DS2、2DS4、2DS5和3DS1基因频率低于对照组(P<0.05);MMP-9基因1562C/T多态性中,CC基因频率低于对照组,TT基因频率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);logistic回归模型结果显示,2DL1(OR=6.25)、3DS1(OR=1.69)和TT(OR=2.68)能够增加HSV-1脑炎的易感性,而2DS2(OR=0.86)、3DL1(OR=0.57)、2DS4(OR=0.24)、2DS5(OR=0.19)和CC(OR=0.74)可能作为保护因素降低HSV-1脑炎的易感性。结论KIR等位基因和MMP-9基因1562C/T多态性与HSV-1脑炎的易感性相关。 展开更多
关键词 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 基质金属蛋白酶-9 基因多态性 单纯疱疹病毒1型脑炎
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双黄连口服液体外抗单纯疱疹病毒1型的初步探讨 被引量：1
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作者 姜光域 王斌 宋旭霞 《山东师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第4期141-146,共6页
目的探讨双黄连口服液体外抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用．方法选用非洲绿猴肾细胞VERO作为体外培养靶细胞，建立HSV-1感染，用不同剂量的双黄连口服液处理HSV-1感染细胞，以50％组织细胞感染量（TCDI50），细胞病变效应（CPE）为... 目的探讨双黄连口服液体外抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用．方法选用非洲绿猴肾细胞VERO作为体外培养靶细胞，建立HSV-1感染，用不同剂量的双黄连口服液处理HSV-1感染细胞，以50％组织细胞感染量（TCDI50），细胞病变效应（CPE）为评测指标；采用MTT法，RT—PCR及流式细胞技术作为检测手段并比较药物处理组与HSV-1感染组细胞闻病毒表达的差异．结果浓度为标准剂量10％的口服液可明显抑制HSV-1gD基因mRNA的转录，选择性抑制HSV-1DNA的合成；在标准药物剂量0．1％-10％范围内病毒感染组细胞与实验组细胞问凋亡呈现差异性．结论双黄连口服液对体外感染的HSV-1型病毒存在抑制作用，显示出一定的抗病毒活性． 展开更多
关键词 双黄连口服液 绿猴肾细胞(VERO) 单纯疱疹病毒1型(HSV一1) 抗病毒
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