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脂滴功能及其与卵母细胞成熟和胚胎发育的关系研究进展
1
作者 高志刚 杜立银 +1 位作者 关洪玉 贾振伟 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期79-87,共9页
脂滴不仅是真核细胞内贮存甘油三酯和胆固醇酯等中性脂质的重要细胞器,也是细胞代谢和细胞器质量控制的中心调控者,参与细胞能量代谢、类固醇激素合成、内质网应激、线粒体功能以及生物膜结构形成等过程的调控。目前认为脂滴合成于内质... 脂滴不仅是真核细胞内贮存甘油三酯和胆固醇酯等中性脂质的重要细胞器,也是细胞代谢和细胞器质量控制的中心调控者,参与细胞能量代谢、类固醇激素合成、内质网应激、线粒体功能以及生物膜结构形成等过程的调控。目前认为脂滴合成于内质网,并以出芽的方式进入细胞质。脂滴是呈动态分布的细胞器,其数量、大小以及分布受细胞获得营养物质和代谢状态影响。众所周知,哺乳动物卵母细胞含有脂滴,且卵母细胞中含有足够数量的脂滴与卵母细胞成熟和早期胚胎发育密切相关。更重要的是,最近的研究表明,脂滴在胚胎附植着床过程中发挥了至关重要的作用,即使卵母细胞中脂滴含量较低的哺乳动物,维持适量的脂滴对早期胚胎发育也很重要。因此,本文综述了脂滴的合成与分布,分析了脂滴的主要功能,重点阐述脂滴在动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育期间的关键作用,并讨论脂滴卵母细胞和胚胎内脂滴含量与胚胎滞育持续时间的关系,以期为通过调控脂滴代谢而增强卵母细胞质量和胚胎发育能力,进而提高动物繁殖性能提供理论基础。 展开更多
关键词 脂滴 功能 卵母细胞成熟 胚胎发育
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卵母细胞玻璃化冷冻与胚胎玻璃化冷冻移植周期的临床妊娠及围产期结局比较
2
作者 申春艳 张建瑞 +1 位作者 杜姗姗 管一春 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2024年第3期331-335,共5页
目的:比较卵母细胞玻璃化冷冻与胚胎玻璃化冷冻移植周期临床妊娠及围产期结局的差异。方法:回顾性分析2011年1月至2021年6月在郑州大学第三附属医院生殖医学科接受卵裂期胚胎移植患者的临床资料。选取玻璃化冷冻卵母细胞解冻行卵胞浆内... 目的:比较卵母细胞玻璃化冷冻与胚胎玻璃化冷冻移植周期临床妊娠及围产期结局的差异。方法:回顾性分析2011年1月至2021年6月在郑州大学第三附属医院生殖医学科接受卵裂期胚胎移植患者的临床资料。选取玻璃化冷冻卵母细胞解冻行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后新鲜卵裂期胚胎移植周期77个(卵母细胞冷冻组),和同期利用倾向性评分1∶4匹配后得到的新鲜卵母细胞行ICSI后卵裂期胚胎玻璃化冷冻复苏移植周期293个(胚胎冷冻组)。比较2组移植后临床妊娠及围产期结局。结果:卵母细胞冷冻组与胚胎冷冻组临床妊娠率(50.65%vs 46.76%)、早期流产率(12.82%vs 11.68%)及活产率(37.66%vs 39.72%)差异均无统计学意义(P均>0.05),剖宫产率(79.31%vs 83.33%)、胎膜早破发生率(10.34%vs 9.65%)及妊娠期高血压疾病发生率(10.34%vs 9.65%)等差异均无统计学意义(P均>0.05),单双胎分娩早产率(18.75%vs 6.41%,46.15%vs 41.67%)、出生体重[(3449.38±485.39)g vs(3424.74±511.94)g,(2515.20±539.46)g vs(2597.08±523.44)g]差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:卵母细胞玻璃化冷冻与胚胎玻璃化冷冻移植周期临床妊娠和围产期结局相似,是一种相对安全的辅助生殖技术。 展开更多
关键词 卵母细胞 胚胎 玻璃化冷冻 临床妊娠结局 围产期结局
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卵母细胞冷冻现状
3
作者 仲万霞(综述) 邱进(审校) 《济宁医学院学报》 2024年第4期355-357,共3页
随着延缓生育趋势的逐渐上升,导致女性面临越来越多非医疗相关的生育风险。卵母细胞冷冻为女性生育力保存提供了一种选择,目前普遍采用玻璃化冷冻卵母细胞。冷冻卵母细胞既存在挑战又存在机遇,对于冷冻卵母细胞的方式方法仍旧存在缺陷,... 随着延缓生育趋势的逐渐上升,导致女性面临越来越多非医疗相关的生育风险。卵母细胞冷冻为女性生育力保存提供了一种选择,目前普遍采用玻璃化冷冻卵母细胞。冷冻卵母细胞既存在挑战又存在机遇,对于冷冻卵母细胞的方式方法仍旧存在缺陷,这需要生殖医学专家们共同努力来完成该技术的进一步突破。同时很多女性对年龄增加导致生育力下降的认识不足,又对辅助生殖技术可以克服这一问题有一种过于乐观的信任。所以有必要加强生育力保存相关科普,以满足大众的认知需求,提高人们对于包括冷冻卵母细胞在内的生育力保存的认知度。国家或政府也应提供相关方面的医疗保险或补贴以降低人们使用该技术的成本。 展开更多
关键词 卵母细胞 冷冻 生育力保存
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原花青素对青春期前羔羊卵母细胞体外成熟的影响 被引量：1
4
作者 李厚儒 白佳琛 +6 位作者 王晶晶 海桂萍 郝哨鹏 刘倩 刘昱成 万鹏程 傅祥伟 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期172-176,共5页
青春期前羔羊的卵母细胞发育能力低于成年母羊的卵母细胞,这限制了幼畜体外胚胎移植(Juvenile in vitro Embryo Transfer,JIVET)技术的广泛应用。为探讨原花青素B2(Procyanidin B2,PCB2)对提高青春期前羔羊卵母细胞发育能力的影响及其机... 青春期前羔羊的卵母细胞发育能力低于成年母羊的卵母细胞,这限制了幼畜体外胚胎移植(Juvenile in vitro Embryo Transfer,JIVET)技术的广泛应用。为探讨原花青素B2(Procyanidin B2,PCB2)对提高青春期前羔羊卵母细胞发育能力的影响及其机制,本研究收集了经促性腺激素刺激的4~8周龄羔羊卵母细胞,在体外成熟液中培养。在卵母细胞成熟液中添加5μg/mL PCB2作为PCB2组,未添加PCB2组为对照组,培养24 h后测定卵母细胞第一极体排出率、孤雌激活后的卵裂率和囊胚率,并进一步测定胞内活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)含量、线粒体活性和线粒体膜电位水平等。结果表明:PCB2组卵母细胞第一极体排出率高于对照组(36.76%vs 31.11%,P<0.05),但卵裂率(49.17%vs 49.68%)及囊胚率(47.47%vs 54.06%)与对照组无显著差异;进一步研究发现在IVM液中添加5μg/mL PCB2降低了卵母细胞ROS水平(P<0.01),并提高了GSH水平(P<0.05)、线粒体活性(P<0.01)以及线粒体膜电位水平(P<0.05)。由此可见,在IVM过程中添加5μg/mL PCB2能有效降低青春期前羔羊卵母细胞的氧化应激,提升线粒体功能和成熟效率。 展开更多
关键词 羔羊卵母细胞 体外成熟 原花青素B2
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不同培养基对小鼠卵母细胞体外成熟质量及发育潜能的影响 被引量：2
5
作者 田银 赵艳华 +1 位作者 黄国宁 李竞宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第13期2024-2029,共6页
背景:近年,未成熟卵母细胞体外成熟技术的需求逐渐增加。卵母细胞成熟受多种因素影响,其中培养基的选择尤为重要,目前尚无统一方案。目的:用不同成熟培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,研究其对卵母细胞质量及发育潜能的影响。方法:用G-... 背景:近年,未成熟卵母细胞体外成熟技术的需求逐渐增加。卵母细胞成熟受多种因素影响,其中培养基的选择尤为重要,目前尚无统一方案。目的:用不同成熟培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,研究其对卵母细胞质量及发育潜能的影响。方法:用G-1^(TM)PLUS培养基、CZB培养基和M16培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,并以体内成熟卵母细胞为对照组,比较各组间的体外受精和早期胚胎发育能力。对于各组成熟后卵母细胞,采用免疫荧光方法评估线粒体功能,共聚焦显微镜实时成像系统检测钙震荡情况。结果与结论:①3组之间第一极体排出率无明显差异(P>0.05);②G-1^(TM)PLUS组体外受精率(52.86±11.24)%高于M16组(37.76±6.70)%和CZB组(30.62±5.51)%;CZB组的囊胚率(36.23±6.63)%低于对照组(78.16±4.17)%、G-1^(TM)PLUS组(55.75±7.63)%和M16组(53.36±6.33)%;③与对照组相比,仅CZB组的纺锤体长宽比增加;④CZB组线粒体功能差于对照组、G-1^(TM)PLUS组及M16组,并出现CZB组线粒体异常凝集现象;⑤受精后CZB组及M16组的钙震动频率显著高于G1组和对照组。综上所述,在小鼠卵母细胞体外成熟过程中,G-1^(TM)PLUS、CZB及M16培养基的体外成熟率无差异,但G-1^(TM)PLUS培养基有更高的受精率和囊胚形成率。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 培养基 钙震荡 体外受精 胚胎发育
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微流控法制备载卵母细胞水凝胶微球及其玻璃化保存 被引量：1
6
作者 张慧 张宇琪 +1 位作者 胡剑麟 周新丽 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第4期969-980,共12页
目的通过微流控法制备载卵母细胞海藻酸钠微球,在低浓度保护剂下实现卵母细胞玻璃化保存。方法采用流动聚焦型微流控芯片,通过调整芯片结构、海藻酸钠溶液浓度和流速比,制备大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微... 目的通过微流控法制备载卵母细胞海藻酸钠微球,在低浓度保护剂下实现卵母细胞玻璃化保存。方法采用流动聚焦型微流控芯片,通过调整芯片结构、海藻酸钠溶液浓度和流速比,制备大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微球。在低浓度低温保护剂下将微球玻璃化保存,复温后检测存活率,采用细胞松弛素B和氯化锶孤雌激活卵母细胞,与Cryotop玻璃化法对比卵母细胞存活率和卵裂率、囊胚率。结果制备的海藻酸钠微球在冷冻复温前后的体积稳定且结构完整,在将卵母细胞包封在海藻酸钠水凝胶中后,空包率低,存活率、卵裂率和囊胚率与新鲜组相比无显著差异。在低浓度低温保护剂10%DMSO+10%乙二醇(EG)+0.5 mol/L海藻糖中玻璃化冻存后卵母细胞的存活率达到92.48%,卵裂率70.80%,囊胚率20.42%,与高浓度保护剂15%DMSO+15%EG+0.5 mol/L海藻糖中Cryotop玻璃化法相比无显著性差异。结论本文设计制作了三通道内部交联芯片并用于卵母细胞玻璃化保存的微流控系统,可生成大小均匀、空包率低、低温耐受的载卵母细胞海藻酸钠水凝胶微球,在低浓度保护剂下实现玻璃化保存,为卵母细胞玻璃化保存方法提供新思路。 展开更多
关键词 微流控 卵母细胞 微囊化 玻璃化保存 低温保护剂
原文传递
千金藤素对牛卵母细胞体外成熟中抗氧化能力的影响
7
作者 徐冰洁 王玉琪 +4 位作者 郑湘民 孙朝阳 高青山 方南洙 金庆国 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期245-250,共6页
为探究千金藤素(Cepharanthine,Ceph)对牛卵母细胞抗氧化能力的影响及作用机制,本实验在牛卵母细胞体外成熟培养基中添加0、10、100、500、1000μmol/L Ceph进行培养,统计第一极体排出率,筛选出Ceph的最佳浓度,根据浓度将分为对照组和C... 为探究千金藤素(Cepharanthine,Ceph)对牛卵母细胞抗氧化能力的影响及作用机制,本实验在牛卵母细胞体外成熟培养基中添加0、10、100、500、1000μmol/L Ceph进行培养,统计第一极体排出率,筛选出Ceph的最佳浓度,根据浓度将分为对照组和Ceph处理组,通过免疫荧光染色法检测活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)表达水平以及线粒体膜电位水平(JC-1);使用实时荧光定量PCR检测囊胚内抗氧化相关基因(SIRT-1、SOD-1、SOD-2)mRNA转录水平。结果表明:与对照组相比,添加500、1000μmol/L Ceph可显著提高牛卵母细胞第一极体排出率,而10、100μmol/L Ceph组第一极体排出率显著降低,后续采用500μmol/L Ceph用于实验;与对照组相比,添加500μmol/L Ceph显著降低了ROS水平,GSH及JC-1水平显著升高,SIRT-1、SOD-1、SOD-2 mRNA表达水平也显著升高。由此可知,在体外成熟培养基中添加500μmol/L Ceph可以缓解氧化应激损伤,维持线粒体膜电位,从而提高卵母细胞体外发育质量。 展开更多
关键词 千金藤素 牛 卵母细胞 氧化应激 体外成熟
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补充褪黑素的人卵母细胞体外培养成熟技术在COH周期中的应用
8
作者 任宇 韩星星 +4 位作者 张琦琦 刘璐 许孝凤 章志国 邹慧娟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第6期983-988,共6页
目的比较同一控制性超促排卵(COH)治疗周期中,体内成熟与改良技术体外培养成熟(IVM)的卵母细胞的早期胚胎发育能力及临床结局,探讨补充褪黑素的IVM技术在临床中的应用。方法收集159例患者在COH周期中的920个成熟卵母细胞进行常规体外受... 目的比较同一控制性超促排卵(COH)治疗周期中,体内成熟与改良技术体外培养成熟(IVM)的卵母细胞的早期胚胎发育能力及临床结局,探讨补充褪黑素的IVM技术在临床中的应用。方法收集159例患者在COH周期中的920个成熟卵母细胞进行常规体外受精(IVF/ICSI)处理,同时收集同周期中1283个未成熟卵母细胞,在添加褪黑素的改良IVM培养基中培养成熟后行ICSI处理。通过回顾性分析,比较常规助孕技术与改良IVM技术这两种方式,对辅助生殖治疗的助孕结局和妊娠结局的影响。结果与从COH周期中收集到的行常规IVF/ICSI处理的成熟卵母细胞相比,经改良IVM技术促成熟的卵母细胞的优质囊胚形成率较低。但经胚胎移植后,两种方式获得的成熟卵母细胞的临床结局包括临床妊娠率、足月产率、婴儿体长、新生儿Apgar评分,差异均无统计学意义。结论IVM可以提高从COH周期中回收的未成熟卵母细胞的卵子利用率,改善辅助生殖技术助孕患者的妊娠结局。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外培养成熟技术 体外受精 控制性超促排卵 妊娠结局
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千金藤素对牛体外卵母细胞和早期胚胎抗凋亡能力的影响
9
作者 郑湘民 王玉琪 +4 位作者 徐冰洁 孙朝阳 高青山 方南洙 金庆国 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2943-2952,共10页
【目的】探究千金藤素(Ceph)对牛卵母细胞及早期胚胎抗凋亡能力的影响,为提高牛体外胚胎生产效率提供参考,同时为Ceph抗癌过程中的药理作用提供新的数据。【方法】将牛卵母细胞分别在含不同浓度(0、10、100、500、1000μmol/L)Ceph的体... 【目的】探究千金藤素(Ceph)对牛卵母细胞及早期胚胎抗凋亡能力的影响,为提高牛体外胚胎生产效率提供参考,同时为Ceph抗癌过程中的药理作用提供新的数据。【方法】将牛卵母细胞分别在含不同浓度(0、10、100、500、1000μmol/L)Ceph的体外成熟培养液中培养,观测卵母细胞成熟率及受精后的早期胚胎发育,确定Ceph的最适浓度,并对牛卵母细胞组织蛋白酶B(CB)活性、细胞自噬相关蛋白LC3水平、凋亡相关基因Survivin和Caspase-3 mRNA表达水平及囊胚细胞凋亡率进行检测。【结果】经500μmol/L Ceph处理的牛卵母细胞成熟率及早期胚胎分裂率、囊胚率均显著高于其他组(P<0.05)。添加Ceph显著降低了牛卵母细胞CB活性和LC3水平(P<0.05),显著提高了抗凋亡相关基因Survivin mRNA表达水平(P<0.05),显著降低了促凋亡相关基因Caspase-3 mRNA表达水平及囊胚细胞凋亡率(P<0.05)。【结论】在体外胚胎生产过程中添加Ceph能够通过调控凋亡相关基因Survivin和Caspase-3的表达影响CB和LC3水平,提升牛卵母细胞抗凋亡能力和体外胚胎生产效率。 展开更多
关键词 千金藤素 牛 卵母细胞 早期胚胎 抗凋亡
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哺乳动物卵母细胞老化的相关机制研究进展
10
作者 许庆龙 姚顺发 +3 位作者 张君正 曹立朋 陈璇 金一 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期60-66,共7页
哺乳动物卵母细胞老化是一个复杂且不可逆的生物学过程,主要表现为孤雌激活和细胞凋亡。老化会引起卵母细胞发生形态结构改变和细胞器功能下降,导致卵母细胞质量下降,直接影响受精和胚胎发育的结果。目前对体外培养卵母细胞过程中老化... 哺乳动物卵母细胞老化是一个复杂且不可逆的生物学过程,主要表现为孤雌激活和细胞凋亡。老化会引起卵母细胞发生形态结构改变和细胞器功能下降,导致卵母细胞质量下降,直接影响受精和胚胎发育的结果。目前对体外培养卵母细胞过程中老化特征、老化影响因素以及如何延缓老化等研究越来越广泛,本文将近些年卵母细胞老化特征、影响老化因素和延缓卵母细胞老化的相关研究进行综述,以期对改善卵母细胞老化及优化辅助生殖技术提供一定参考。 展开更多
关键词 哺乳动物 卵母细胞 细胞老化 氧化应激 抗氧化剂
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玉米赤霉烯酮影响绵羊卵母细胞体外成熟的分子机制研究
11
作者 马甜 李宗帅 +4 位作者 张启冉 李怡娜 赵兴绪 胡俊杰 张勇 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期207-213,共7页
实验旨在研究玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对绵羊卵母细胞体外成熟相关基因表达及活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平的影响。采集绵羊卵巢,收集卵母细胞,分为4组,包括对照组(CG组)和实验组(TG1、TG2和TG3组)。CG组不做任何处理... 实验旨在研究玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对绵羊卵母细胞体外成熟相关基因表达及活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平的影响。采集绵羊卵巢,收集卵母细胞,分为4组,包括对照组(CG组)和实验组(TG1、TG2和TG3组)。CG组不做任何处理,TG1、TG2和TG3组分别在成熟液中添加10、20、30μmol/L ZEA进行体外成熟培养,qPCR技术检测减数分裂成熟和凋亡等相关基因mRNA的相对表达量,ROS检测试剂盒检测卵母细胞内ROS水平。结果表明:与CG组相比,当培养液中ZEA浓度达到20μmol/L时,卵母细胞成熟率显著降低,GPX、SOD1、SOD2、Caspase3、ATG3和ATG7的mRNA表达水平显著升高,而CDC20、GDF9和BMP15的mRNA表达水平显著降低,但LC3、BAX和BCL-2的mRNA表达水平在统计学上没有显著差异;与CG组相比,添加ZEA后卵母细胞内ROS含量极显著升高。以上结果提示,ZEA能通过诱导绵羊卵母细胞发生凋亡和氧化应激,抑制细胞分裂从而影响卵母细胞的体外成熟。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 绵羊 卵母细胞 体外成熟
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TUBB8基因c.154-156del杂合变异致卵母细胞成熟阻滞一例
12
作者 闻星星 柴梦晗 +4 位作者 杨倪 邹慧娟 章志国 李琳 陈蓓丽 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2024年第1期17-19,23,共4页
对1例卵母细胞成熟阻滞患者进行全外显子组测序,通过生物信息学筛查可疑致病变异,对患者及其家系成员进行Sanger测序验证。测序提示患者TUBB8基因存在c.154-156del(p.52del)杂合缺失变异,患者的父母、哥哥、姐姐和侄女均未检出该变异,... 对1例卵母细胞成熟阻滞患者进行全外显子组测序,通过生物信息学筛查可疑致病变异,对患者及其家系成员进行Sanger测序验证。测序提示患者TUBB8基因存在c.154-156del(p.52del)杂合缺失变异,患者的父母、哥哥、姐姐和侄女均未检出该变异,患者的哥哥、姐姐均已生育,该变异与家系表型共分离,提示TUBB8基因c.154-156del(p.52del)杂合缺失变异可能是该卵母细胞成熟阻滞患者的遗传学病因。TUBB8基因变异在卵母细胞成熟阻滞患者中约占30%,对于这类患者的遗传咨询可常规行TUBB8基因检查,而TUBB8基因变异引起的卵母细胞成熟阻滞患者只能通过卵母细胞捐赠助孕。 展开更多
关键词 微管蛋白 基因 突变 卵母细胞 不育 女(雌)性 TUBB8基因
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LncRNA调控卵母细胞成熟及胚胎发育的作用机制研究进展
13
作者 张君正 姚顺发 +3 位作者 许庆龙 曹立朋 韩越 金一 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期78-83,共6页
长链非编码RNA(lncRNA)在卵母细胞的发育和胚胎发育过程中发挥着重要作用。目前,lncRNA在卵母细胞成熟和胚胎发育中的具体作用机制尚不清楚,相关研究报道较少。本文综述了lncRNA调控卵母细胞成熟和胚胎发育的作用机制研究进展,着重讨论l... 长链非编码RNA(lncRNA)在卵母细胞的发育和胚胎发育过程中发挥着重要作用。目前,lncRNA在卵母细胞成熟和胚胎发育中的具体作用机制尚不清楚,相关研究报道较少。本文综述了lncRNA调控卵母细胞成熟和胚胎发育的作用机制研究进展,着重讨论lncRNA在激素分泌、卵丘颗粒细胞、卵母细胞成熟以及合子基因组的激活等方面的调控作用,以期为进一步研究lncRNA提供新的启示。 展开更多
关键词 LncRNA 卵母细胞 成熟 胚胎发育 调控
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β-谷甾醇对猪卵母细胞体外成熟和胚胎发育的影响
14
作者 蓝昕蕊 赵宝宝 +3 位作者 张碧菡 林晓语 马会明 王勇胜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1629-1637,共9页
旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基... 旨在探索一种自然植物提取的抗氧化分子——β-谷甾醇(β-sitosterol,SITO)对猪卵母细胞体外成熟效率和早期胚胎体外发育质量的影响。本研究以在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加不同浓度SITO为试验组,不添加SITO(含0.16%DMSO)的培养基为对照组,对屠宰场所得猪卵巢中收集到的卵母细胞进行体外培养,试验组浓度分别为10、20、40μmol·L~(-1),不同浓度各重复3次,每组培养卵母细胞150~200枚。培养46 h后,对卵母细胞成熟率进行统计,并收集成熟卵母细胞进行活性氧、细胞凋亡、线粒体膜电位染色以及相关基因的实时荧光定量PCR;对成熟卵母细胞进行孤雌激活,2 d后统计卵裂率,7 d后统计囊胚率,并统计囊胚细胞总数。结果发现,20μmol·L~(-1)SITO处理显著提高了猪卵母细胞的体外成熟率,且促进了孤雌激活后囊胚的形成并增加了囊胚细胞数,降低了卵母细胞中ROS含量,提高了抗氧化应激基因SOD和CAT的表达;同时,SITO降低卵母细胞的凋亡水平,增加抗凋亡基因BCL-2的表达,降低促凋亡基因Caspase 3和BAX的表达。此外,SITO可增强线粒体膜电位(ΔΨm),增加TFAM基因的表达。综上所述,本研究结果表明,在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加20μmol·L^(-1)SITO能够显著促进猪卵母细胞的体外成熟率、提高胚胎的体外发育能力和胚胎质量。 展开更多
关键词 Β-谷甾醇 猪卵母细胞 胚胎发育 ROS 凋亡
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筛选的差异表达microRNAs对猪卵母细胞Npm2基因的表达调控及作用研究
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作者 李河林 蒋玉芬 +9 位作者 程娜 韩宇辰 霍晓颖 苏宏鼎 常悦 方玉珠 王配 贾宝瑜 魏红江 成文敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5035-5049,共15页
旨在研究卵母细胞中筛选的差异表达microRNAs对Npm2(nucleoplasmin 2)基因的调控作用。本研究采集屠宰场卵巢,收集GV期卵母细胞进行体外成熟培养,收集MⅡ期卵母细胞。使用qPCR检测筛选的差异表达miRNAs在GV、MⅡ期卵母细胞的表达水平;... 旨在研究卵母细胞中筛选的差异表达microRNAs对Npm2(nucleoplasmin 2)基因的调控作用。本研究采集屠宰场卵巢,收集GV期卵母细胞进行体外成熟培养,收集MⅡ期卵母细胞。使用qPCR检测筛选的差异表达miRNAs在GV、MⅡ期卵母细胞的表达水平;双荧光素酶报告试验验证预测的miRNA是否与靶基因Npm2存在结合位点;在体外成熟培养液中添加miRNAs模拟物/抑制物,验证miRNA对卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎体外发育能力的影响。添加最适浓度的miRNAs模拟物/抑制物后,使用花生凝集素染色试验检测皮质颗粒分布和qPCR检测Npm2 mRNA表达水平。结果表明,MⅡ期卵母细胞中miR-150、miR-7138-5p表达显著高于GV期卵母细胞(P<0.05),miR-296-3p、miR-423-3p表达水平极显著低于GV期卵母细胞(P<0.01),表达趋势与测序结果一致。miR-32表达水平无显著差异(P>0.05)。双荧光素酶报告试验结果表明,miR-32、miR-7138-5p、miR-296-3p与Npm2存在结合位点,荧光强度极显著下调(P<0.01);miR-150与Npm2存在结合位点,荧光强度显著下调(P<0.05);miR-296-5p、miR-423-3p与Npm2不存在结合位点,荧光强度无显著变化(P>0.05)。通过在体外成熟培养液中添加不同浓度miRNAs模拟物/抑制物以确定最适浓度,添加miR-32抑制物、miR-296-5p模拟物、miR-296-5p抑制物、miR-423-3p模拟物、miR-423-3p抑制物、miR-7138抑制物、miR-150模拟物、miR-150抑制物后皮质颗粒荧光强度极显著下调(P<0.01);添加miR-296-3p抑制物、miR-7138-5p模拟物后皮质颗粒荧光强度显著下调(P<0.05)。MⅡ期卵母细胞Npm2 mRNA表达量极显著高于GV期卵母细胞,添加最适浓度miR-150、miR-296-3p、miR-296-5p、miR-7138-5p模拟物和/或抑制物Npm2 mRNA表达量与对照组有显著差异(P<0.05),添加miR-32、miR-423-3p模拟物/抑制物后MⅡ期卵母细胞Npm2 mRNA表达量与对照组无显著差异(P>0.05)。筛选的差异miRNA(如miR-296-3p、miR-7138-5p)可能通过调控Npm2表达影响卵母细胞体外成熟及早期胚胎体外发育,可为猪卵母细胞microRNAs与靶基因复杂调控网络研究提供基础。 展开更多
关键词 猪 卵母细胞 MICRORNA Npm2
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单宁酸缓解氟化钠诱导小鼠卵母细胞氧化应激的研究
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作者 英提扎尔·阿不力孜 郭延华 +4 位作者 艾日夏提·地里夏提 艾克拜尔·艾合麦提 妮格尔阿依·安尼瓦尔 王旭光 阿布力孜·吾斯曼 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期4246-4254,共9页
【目的】研究单宁酸(TA)对氟化钠(NaF)诱导小鼠卵母细胞氧化应激损伤的保护作用,从而为开发氟中毒解毒剂提供理论依据。【方法】在小鼠卵母细胞体外成熟培养液中添加0(对照)、0.25、0.50、0.75 mmol/L NaF,通过检测卵母细胞第一极体排出... 【目的】研究单宁酸(TA)对氟化钠(NaF)诱导小鼠卵母细胞氧化应激损伤的保护作用,从而为开发氟中毒解毒剂提供理论依据。【方法】在小鼠卵母细胞体外成熟培养液中添加0(对照)、0.25、0.50、0.75 mmol/L NaF,通过检测卵母细胞第一极体排出率,确定NaF最适作用浓度。以最佳作用浓度NaF处理小鼠卵母细胞后,通过添加不同浓度TA(0、1、10、100μg/L),确定最佳TA作用浓度。在上述试验基础上设置对照组、毒性组(NaF)和解毒剂组(NaF+TA),利用免疫荧光染色检测小鼠卵母细胞内活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)以及线粒体膜电位(MMP)水平;统计各组小鼠卵母细胞受精率、卵裂率和囊胚率,测定丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。【结果】与对照组相比,0.25~0.75 mmol/L NaF组卵母细胞第一极体排出率均极显著降低(P<0.01),后续以0.25 mmol/L NaF作为有效毒性剂量进行试验。小鼠卵母细胞经NaF处理后,与0μg/L TA组相比,10μg/L TA组卵母细胞第一极体排出率极显著升高(P<0.01)。免疫荧光检测结果显示,与对照组相比,NaF组小鼠卵母细胞ROS水平显著上升(P<0.05),GSH、MMP水平和SOD、GSH-Px活性显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01)。与NaF组相比,NaF+TA组小鼠卵母细胞GSH、MMP水平以及SOD和GSH-Px活性显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),ROS水平和MDA含量显著或极显著降低(P<0.05;P<0.01)。早期胚胎发育统计结果显示,NaF组小鼠卵母细胞的受精率、卵裂率和囊胚率均极显著低于对照组(P<0.01);NaF+TA组小鼠卵母细胞受精率、卵裂率以及囊胚率均极显著高于NaF组(P<0.01),且与对照组相比无显著差异(P>0.05)。【结论】NaF通过提高卵母细胞内ROS和MDA水平诱导小鼠卵母细胞产生氧化应激,并降低细胞MMP水平,影响早期胚胎发育。添加10μg/L TA可以缓解NaF诱导小鼠引起的氧化应激,提高小鼠卵母细胞成熟质量,从而促进体外受精和胚胎发育潜力。 展开更多
关键词 氟化钠 单宁酸 小鼠 卵母细胞 氧化应激
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细胞松弛素B改善冷冻引起的猪卵母细胞皮质颗粒迁移障碍
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作者 李婉君 徐皆欢 +3 位作者 何孟纤 孔钰婷 张德福 戴建军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1999-2010,共12页
旨在揭示冷冻后的猪GV期卵母细胞体外成熟过程中细胞骨架与皮质颗粒迁移之间的相互关系和影响。所采集猪卵巢样品来自上海市嘉定区五丰上食屠宰场的健康经产母猪,每次采样选用体重70~90 kg、生产性能良好的浦东白母猪300头左右采取卵巢... 旨在揭示冷冻后的猪GV期卵母细胞体外成熟过程中细胞骨架与皮质颗粒迁移之间的相互关系和影响。所采集猪卵巢样品来自上海市嘉定区五丰上食屠宰场的健康经产母猪,每次采样选用体重70~90 kg、生产性能良好的浦东白母猪300头左右采取卵巢样品,采集卵巢数量120~150枚·次^(-1),挑选胞质分布均匀且紧密的GV期卵母细胞按试验要求随机分为3组,每组设3个重复,每组至少30枚细胞,利用细胞骨架稳定剂细胞松弛素B (cytochalasin B,CB)冻前处理猪GV期卵母细胞,冷冻解冻后经体外成熟培养,检测卵母细胞存活率、各时间点微丝与皮质颗粒荧光共定位情况、卵丘扩散程度、第一极体排出率、谷胱甘肽(glutathione, GSH)水平和发育能力等指标。结果显示,冷冻前用CB处理可有效提高GV期卵母细胞解冻后存活率(44.11%vs. 27.91%,P<0.01)。在新鲜卵母细胞成熟过程中,可观察到皮质颗粒与微丝存在共迁移。冷冻会引起皮质颗粒-微丝迁移异常,而冷冻前CB的添加会缓解冷冻引起的迁移障碍,表现为CB处理组的微丝与皮质颗粒均成功迁移至质膜的比例更高,迁移均匀分布于质膜效果更好。冷冻卵母细胞体外成熟后,CB预处理的第一极体排出率((26.79±2.37)%vs.(8.13±0.30)%,P<0.01)、GSH水平(23.12±2.65 vs. 7.27±0.79,P<0.01)和孤雌激活后的卵裂率((20.91±2.84)%vs.(5.64±0.37)%,P<0.01)与囊胚率((5.00±0.03)%vs.(0.41±0.01)%,P<0.05)均有显著提高。本研究表明,微丝细胞骨架对卵母细胞体外成熟过程中胞内皮质颗粒由内部向质膜迁移有一定的调节作用,且两者存在一定共定位关系,通过冻前添加CB孵育可有效影响细胞微丝骨架与皮质颗粒的迁移程度,减轻了冷冻引起的细胞骨架异常分布,缓解了由冷冻引起的皮质颗粒-微丝迁移障碍,进而提升细胞抗冻能力,表现为促进胞质成熟的同时,提高了冷冻卵母细胞存活率、核成熟率与胚胎体外发育潜能。 展开更多
关键词 皮质颗粒 微丝 玻璃化冷冻 猪卵母细胞
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多次超数排卵对小鼠和人卵母细胞发育潜能的影响
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作者 李崇 沈小力 +4 位作者 杨静薇 郭晶 谢娟 黄国宁 李竞宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第19期3018-3023,共6页
背景:超数排卵是辅助生殖技术中常见的治疗方法。在临床实践中,一些患者需要经过多次超数排卵怀孕。目的:探讨多次超数排卵对小鼠和人卵母细胞发育潜能的影响。方法:采用动物实验和临床回顾性研究。动物实验选择90只SPF级ICR 8周龄雌性... 背景:超数排卵是辅助生殖技术中常见的治疗方法。在临床实践中,一些患者需要经过多次超数排卵怀孕。目的:探讨多次超数排卵对小鼠和人卵母细胞发育潜能的影响。方法:采用动物实验和临床回顾性研究。动物实验选择90只SPF级ICR 8周龄雌性小鼠,随机分为3组,分别进行1次、3次和5次超数排卵。在临床研究中共纳入306例接受3个体外受精周期的患者,比较不同周期的获卵数和胚胎发育情况。结果与结论:①在动物实验中,多次超数排卵不影响小鼠胚胎的发育率和发育速度,且对小鼠囊胚细胞凋亡、DNA损伤、内细胞团和滋养外胚层的形成均无显著影响(P>0.05);②在临床研究中,3个周期内获得的卵母细胞数(8.60±5.04,8.58±4.87及8.38±4.63,P=0.81)和可移植胚胎数(2.42±1.99,2.40±1.92及2.64±2.00,P=0.26)均无显著差异;③对于年轻组(<35岁)和高龄组(≥35岁),胚胎质量不受超数排卵次数的影响(P>0.05);④结果显示:多次超数排卵不影响小鼠和人卵母细胞的发育潜能。 展开更多
关键词 多次超数排卵 体外受精 卵母细胞 发育潜能
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羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存研究进展
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作者 张迪 房晓欢 +1 位作者 李俊杰 王志刚 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第6期9-13,共5页
生发泡(germinal vesial,GV)期卵母细胞由于未形成极为敏感的纺锤体,对于冷冻卵母细胞以及长期保存地方家畜种质资源具有无可比拟的优势。研究人员对此进行了广泛的关注,基于此,本文综述了羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存的意义,分析了目... 生发泡(germinal vesial,GV)期卵母细胞由于未形成极为敏感的纺锤体,对于冷冻卵母细胞以及长期保存地方家畜种质资源具有无可比拟的优势。研究人员对此进行了广泛的关注,基于此,本文综述了羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻保存的意义,分析了目前羊GV期卵母细胞冷冻保存过程中存在的问题,总结了有效提高卵母细胞冷冻效率的一些解决方法,对提高羊GV期卵母细胞冷冻保存效率具有一定的借鉴与参考。 展开更多
关键词 绵羊 山羊 卵母细胞 GV期 玻璃化冷冻
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