期刊文献+
共找到28篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
糖基转移酶和去糖基化酶 被引量:4
1
作者 杨清香 曹军卫 黄国锦 《氨基酸和生物资源》 CAS 1997年第2期38-43,共6页
在糖基化工程中,通过酶法对蛋白质进行糖基化修饰和对天然糖蛋白去糖基化是研究糖蛋白结构与功能的重要手段。本文综述了近年来所纯化的主要的糖基化转移酶和去糖基化酶的性质和应用。
关键词 糖基转移酶 去糖基化 性质
下载PDF
蛋白质去糖基化酶及其应用 被引量:1
2
作者 刘慧敏 印大中 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第9期90-92,共3页
果糖氨氧化酶和果糖氨激酶能催化去糖基化反应而释放出自由氨基。本文主要探讨阿马多里酶的生物化学特征。如结构和功能的关系,动力学机制和底物的特异性,并探讨这些酶的生物作用和在蛋白中去糖基化中的应用,希望为糖基化相关疾病的治... 果糖氨氧化酶和果糖氨激酶能催化去糖基化反应而释放出自由氨基。本文主要探讨阿马多里酶的生物化学特征。如结构和功能的关系,动力学机制和底物的特异性,并探讨这些酶的生物作用和在蛋白中去糖基化中的应用,希望为糖基化相关疾病的治疗提供很好的治疗手段。 展开更多
关键词 去糖基化 阿马多里酶 衰老
下载PDF
去糖基化作用 被引量:2
3
作者 王克夷 《生命的化学》 CAS CSCD 1993年第1期5-7,共3页
去糖基化是研究糖蛋白中糖部分的功能和作用的一个重要手段。常用的方法有两大类:生化法和化学法。生化法比较温和,包括:用内切或外切酶去除糖链;用糖链合成抑制阻断糖链的合成;用原核细胞通过基因工程的无糖基化的重组产物。化学法比... 去糖基化是研究糖蛋白中糖部分的功能和作用的一个重要手段。常用的方法有两大类:生化法和化学法。生化法比较温和,包括:用内切或外切酶去除糖链;用糖链合成抑制阻断糖链的合成;用原核细胞通过基因工程的无糖基化的重组产物。化学法比较简单,然而较剧烈。有许多例子已经说明糖蛋白的去糖基化会影响到蛋白质的活性。有一定数量的糖蛋白中的糖链是它们表现完整生物活性所必须的。免疫球蛋白G(IgG)是一种糖蛋白,糖链在FC区。 展开更多
关键词 糖蛋白 去糖基化
下载PDF
N端去糖基化修饰对三阴型乳腺癌中PD-L1蛋白表达的影响 被引量:1
4
作者 马怡君 周彩婷 +3 位作者 韩微 王磊 陈勇 黄天宇 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期879-882,共4页
目的分析N端去糖基化修饰对三阴型乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中程序性死亡配体1(programmed cell death 1 ligand 1,PD-L1)表达的影响。方法收集67例TNBC原发灶肿瘤组织及淋巴结转移肿瘤组织,行PD-L1常规免疫组化染色... 目的分析N端去糖基化修饰对三阴型乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)中程序性死亡配体1(programmed cell death 1 ligand 1,PD-L1)表达的影响。方法收集67例TNBC原发灶肿瘤组织及淋巴结转移肿瘤组织,行PD-L1常规免疫组化染色者为常规组,同一组织去糖基化处理后行免疫组化染色者为去糖基化组,比较两组PD-L1表达的差异。结果去糖基化处理后,原发灶肿瘤组织中PD-L1的阳性率提高了14.9%,强阳性率提高了17.9%,淋巴结转移肿瘤组织中PD-L1的阳性率提高了11.6%,强阳性率提高了22.2%,但两组相比差异无显著性(P>0.05)。结论去糖基化处理后,明显增加了TNBC原发灶肿瘤组织及淋巴结转移肿瘤组织中PD-L1的表达,使部分TNBC患者可行PD-L1免疫治疗而受益。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 三阴型乳腺癌 去糖基化 PD-L1 免疫组织化学
下载PDF
罕见病NGLY 1型先天性去糖基化障碍CDDG的临床和基础研究进展 被引量:4
5
作者 袁舒颖 邹琳 +3 位作者 库尔班江·阿布都西库尔 王建设 陈力 孙桂芹 《浙江临床医学》 2020年第12期1845-1848,共4页
Need等[1]于2012年发现,由NGLY1基因突变导致的N-糖苷酶缺陷,会引起一种新的糖基化障碍(congenital disorder of glycosylation,CDG)。后续的研究发现,该病为常染色体隐性遗传性疾病[1-4],又命名为NGLY1型先天性去糖基化障碍(NGLY1-rela... Need等[1]于2012年发现,由NGLY1基因突变导致的N-糖苷酶缺陷,会引起一种新的糖基化障碍(congenital disorder of glycosylation,CDG)。后续的研究发现,该病为常染色体隐性遗传性疾病[1-4],又命名为NGLY1型先天性去糖基化障碍(NGLY1-related congenital disorder of deglycosylation,简写为NGLY1-CDDG)[4]。 展开更多
关键词 去糖基化 罕见病 基因突变 CDD 临床和基础研究 NGL 先天性
下载PDF
工程酵母细胞高压破碎、蛋白低温保藏和去糖基化处理对7-木糖紫杉烷糖基水解酶LXYL-P1-2活性的影响
6
作者 陈天娇 朱平 《中国医药生物技术》 2014年第5期381-384,共4页
紫杉醇主要来源于红豆杉,作为一种“重磅炸弹”式的抗肿瘤药物,自1992年12月被美国 FDA批准上市以来,一直是销售额最大的植物抗肿瘤药。但由于紫杉醇的天然含量极低,约占含量最高的树皮部位的万分之二,加之红豆杉生长缓慢,早期从... 紫杉醇主要来源于红豆杉,作为一种“重磅炸弹”式的抗肿瘤药物,自1992年12月被美国 FDA批准上市以来,一直是销售额最大的植物抗肿瘤药。但由于紫杉醇的天然含量极低,约占含量最高的树皮部位的万分之二,加之红豆杉生长缓慢,早期从野生红豆杉中获取紫杉醇曾给红豆杉资源造成毁灭性破坏。目前主要依靠化学半合成或苗圃栽培手段制取。苗圃栽培虽然对保护野生红豆杉资源具有积极意义,但栽培红豆杉中紫杉醇含量低微的本质没有发生改变。另一方面,红豆杉中存在着大量的紫杉醇结构类似物,其中包括含量数十倍于紫杉醇的7-木糖-10-去乙酰紫杉醇,而后者在脱除木糖基之后形成的10-去乙酰紫杉醇仅需在 C10位乙酰化即可产生紫杉醇[1]。如能将这类副产物转变成紫杉醇,不仅可以减少其对环境的污染,还可以“变废为宝”,大大提高红豆杉资源的利用率。脱除木糖基可用化学法或生物酶法来完成,其中后者的专一性强、环境友好。但由于天然细胞中β-木糖苷酶的酶量普遍偏低,用筛选得到的微生物直接进行转化效率不高[2-3],本实验室已尝试用基因工程方法解决这一问题。我们已从具有转化7-木糖-10-去乙酰紫杉醇为10-去乙酰紫杉醇能力的真菌香菇中克隆得到了7-木糖紫杉烷糖基水解酶 LXYL-P1-2,该酶隶属于糖基水解酶的第3家族,是一种全新的和双功能的β-木糖苷酶和β-葡萄糖苷酶,能高效且专一性地水解包括7-木糖-10-去乙酰紫杉醇在内的7-木糖紫杉烷的木糖基,生成相应的7-羟基紫杉烷。已对该酶及其重组菌开展了酶的表征、高密度发酵与生物催化等研究[4-6]。本文报告工程酵母细胞高压破碎条件、蛋白低温保藏和去糖基化处理对 LXYL-P1-2酶活性的影响,为利用纯化的重组酶进行酶结构与功能关系等的研究提供保障。 展开更多
关键词 基因工程方法 酵母细胞 水解酶 去糖基化 低温保藏 紫杉烷 酶活性 木糖
下载PDF
N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)的研究进展
7
作者 陈妍雯 袁舒颖 +6 位作者 刘瑞杰 张绍兴 邹琳 芦鑫荣 孔维溧 陈力 孙桂芹 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1630-1637,共8页
N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNG... N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNGase基因功能缺陷会导致先天性去糖基化障碍,小鼠PNGase缺陷会导致胚胎致死性,线虫PNGase缺陷使其寿命下降。本文对PNGase在不同物种的分布、蛋白质结构、酶学功能及生物学功能进行阐述,为PNGase的生理病理功能及致病机制的基础研究提供思路,为PNGase作为糖生物学工具酶或药物开发的创新应用研究奠定基础。 展开更多
关键词 N-糖蛋白去糖基化 分布 蛋白质结构 酶学功能 生物学功能
原文传递
HIV-1流行株去糖基化修饰gp41突变体的构建及其表达和纯化
8
作者 邵继平 符健 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期579-583,共5页
目的:构建HIV-1ⅢB标准株、中国大陆地区主要流行株CRF-BC和海南省流行株CRF-AE野生型和突变型gp41表达载体,获得gp41重组蛋白。方法:利用基因定点突变的方法,将HIV-1ⅢB、CRF-BC和CRF-AE流行株野生型gp41基因中特定的N611Q糖基化位点... 目的:构建HIV-1ⅢB标准株、中国大陆地区主要流行株CRF-BC和海南省流行株CRF-AE野生型和突变型gp41表达载体,获得gp41重组蛋白。方法:利用基因定点突变的方法,将HIV-1ⅢB、CRF-BC和CRF-AE流行株野生型gp41基因中特定的N611Q糖基化位点天冬酰胺Asn突变为谷氨酰胺Gln,使该位点去糖基化。利用基因工程技术构建野生型pc DNA3. 1-gp41和突变型pc DNA3. 1-Mgp41表达载体。取测序正确的重组质粒转染293 T细胞,重组蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后采用免疫杂交方法进行分析。结果:测序结果显示野生型gp41的N611糖基化位点均由天冬酰胺(Asn)的编码基因(AAU)突变为谷氨酰胺(Gln)的编码基因(GAA),成功构建了野生型和突变型gp41表达载体。琼脂糖凝胶电泳分析显示野生型和突变型HIV-1 gp41基因大小约为700 bp,Western blot免疫杂交结果显示在26 k D处出现目的条带,与预期一致。结论:成功构建了HIV-1流行株去糖基化修饰gp41突变体,为研究去糖基化修饰gp41蛋白与疾病发生发展的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 HIV-1 病毒 包膜糖蛋白gp41 去糖基化突变体 表达和纯化
下载PDF
去糖基化提高脑钠肽的诊断及预后价值
9
作者 本刊 《中国循证心血管医学杂志》 2015年第4期517-517,共1页
目前临床上常以心肌细胞来源的脑钠肽(BNP)以及脑钠肽前体N末端序列(NT-pro BNP)作为急性呼吸困难患者诊断心衰和评估预后的指标。虽然应用广泛,但仍有将近15%的急性呼吸困难患者无法做出心衰诊断。因此,提升这些生物标志物的诊断... 目前临床上常以心肌细胞来源的脑钠肽(BNP)以及脑钠肽前体N末端序列(NT-pro BNP)作为急性呼吸困难患者诊断心衰和评估预后的指标。虽然应用广泛,但仍有将近15%的急性呼吸困难患者无法做出心衰诊断。因此,提升这些生物标志物的诊断和预后准确性的改进措施是十分有必要的。 展开更多
关键词 预后价值 急性呼吸困难 去糖基化 末端序列 心肌细胞 呼吸困难患者 生物标志物 诊断效能 抗凝管 附属医院
下载PDF
去糖基化嵌合性小鼠/人IgG_1抗体仍可保持某些效应功能
10
作者 Corai H 胡蔓萝 阎岩 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1992年第4期70-72,共3页
人血清中绝大部分抗体的同种型为IgG1。IgG1是一种糖蛋白,其N端连接的碳水化物位于其H链的C_(H2)区。许多研冗表明,该碳水化物对维持IgG1的结构与功能起关键作用。在这些研究中,是采用酶学方法除去碳水化物来研究去糖基化抗体的效应功... 人血清中绝大部分抗体的同种型为IgG1。IgG1是一种糖蛋白,其N端连接的碳水化物位于其H链的C_(H2)区。许多研冗表明,该碳水化物对维持IgG1的结构与功能起关键作用。在这些研究中,是采用酶学方法除去碳水化物来研究去糖基化抗体的效应功能。所获结果提示,虽然这种抗体的效应功能有所损害,但在大多数情况下仍保留有残余的活性。 展开更多
关键词 IGG1 抗体 去糖基化抗体
下载PDF
蛋白质N-糖基化在拟南芥生长周期中的变化规律及去糖基化对根发育的影响 被引量:1
11
作者 王婷 羊欢欢 +2 位作者 赵弘巍 Josef Voglmeir 刘丽 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期262-274,共13页
蛋白质N-糖基化修饰在植物生长发育中发挥重要作用。为探究蛋白质N-糖基化在拟南芥(Arabidopsis thaliana)整个生长周期中的变化规律以及去N-糖基化对拟南芥生根发育的影响,通过N-糖链酶解和HPLC与MALDI-TOF-MS分析解析了不同生长时期... 蛋白质N-糖基化修饰在植物生长发育中发挥重要作用。为探究蛋白质N-糖基化在拟南芥(Arabidopsis thaliana)整个生长周期中的变化规律以及去N-糖基化对拟南芥生根发育的影响,通过N-糖链酶解和HPLC与MALDI-TOF-MS分析解析了不同生长时期的拟南芥Col-0植株的N-糖链组成(结构和含量)变化。以BSA溶液为阴性对照,无菌去离子水为空白对照,用N-糖酰胺酶(PNGase Rz)溶液处理拟南芥幼苗8小时;然后继续在MS培养基中培养5天、10天,测量主根长度并检测N-糖链组成的变化。结果显示,从拟南芥中解析出12种N-糖链结构,其中包括4个高甘露糖型和8个复杂型。在拟南芥整个生长周期中,复杂型N-糖链含量始终高于高甘露糖型,其中含木糖和岩藻糖的复杂型结构是N-糖链的主要组成,而Man3XylFucGlcNAc2含量最高。高甘露糖型N-糖链含量由幼苗期的13.87%缓慢上升至抽薹期的19.02%,盛花期回落至17.98%,而在长角果成熟期快速下降至最低点2.36%,衰老期再度小幅回升至5.23%。用高浓度糖酰胺酶液PNGase Rz处理后,可观察到幼苗主根生长受到显著抑制,且培养10天后仍然无法恢复正常;而低浓度酶液处理组与阴性对照组差异不显著,根长和生长状态基本正常。糖链分析结果显示,与对照组相比,高、低浓度酶液处理组的N-糖链组成均发生显著变化,主要表现为高甘露糖型含量显著低于空白对照组,同时随生长时间的延长该差异逐渐减小,最终消失。研究表明,拟南芥N-糖基化组成随着生长发育发生周期性变化,且去糖基化酶处理能够瞬时影响拟南芥蛋白质N-糖基化修饰,进而抑制根的发育。 展开更多
关键词 拟南芥 N-糖链 根发育 去糖基化
原文传递
日本血吸虫虫卵可溶性糖蛋白去糖基化对其刺激机体产生Th2免疫应答能力的影响 被引量:1
12
作者 丛莉 陈小平 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2011年第5期261-264,共4页
目的探究日本血吸虫虫卵可溶性蛋白(Schistosomajaponicumsolubleeggantigen,SjEA)中的糖蛋白去糖基化后对其诱导机体产生Th2免疫应答能力的影响。方法用胶原酶消化法制备SjEA,用过碘酸钠氧化处理后,制备成去糖基化的SjEA(deglyco... 目的探究日本血吸虫虫卵可溶性蛋白(Schistosomajaponicumsolubleeggantigen,SjEA)中的糖蛋白去糖基化后对其诱导机体产生Th2免疫应答能力的影响。方法用胶原酶消化法制备SjEA,用过碘酸钠氧化处理后,制备成去糖基化的SjEA(deglycosylatedSjEA,d-SjEA)。6~8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为PBS、SjEA和d-SjEA组,每组9只。用后足垫皮下注射的方式免疫小鼠,其中PBS组注射25斗lPBs/侧,SjEA组注射50p,gSjEA/~0,d-SjEA组注射50灿gd-SjEA/~0,4d后断髓法处死小鼠,取胭窝淋巴结,制备成浓度为4×10。/ml淋巴细胞悬液,体外用anti-CD3和anti—CD28刺激48h后,ELISA检测细胞上清中的细胞因子IL4。结果SjEA组上清中IL4的平均值为1.55ng/nt,高于PBS组的0.03ng/ml,差异有统计学意义(P〈0.001);d-SjEA组上清中IL4为1.42ng/ml,和SjEA组相比,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论日本血吸虫虫卵可溶性蛋白中的糖蛋白在去除糖基化后对其诱导机体产生Th2免疫应答的能力无影响。 展开更多
关键词 日本血吸虫 虫卵可溶性抗原 去糖基化
原文传递
糖蛋白的去糖基化方法研究进展 被引量:3
13
作者 徐云巧 李婷婷 +2 位作者 吴彩娥 范龚健 李佟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期97-106,共10页
糖组学是继基因组学及蛋白质组学后的新兴研究领域,糖基化是非常重要的一种蛋白质翻译后修饰,在多种生物过程中扮演着重要角色,异常糖基化与一些疾病的发生发展密切相关,因此糖基化的研究已成为研究热点。去糖基化后能够影响糖蛋白的活... 糖组学是继基因组学及蛋白质组学后的新兴研究领域,糖基化是非常重要的一种蛋白质翻译后修饰,在多种生物过程中扮演着重要角色,异常糖基化与一些疾病的发生发展密切相关,因此糖基化的研究已成为研究热点。去糖基化后能够影响糖蛋白的活性、分泌等物化性质,而且去糖基化也是糖基化研究的主要技术手段,因此综述了各种去糖基化的方法,各种方法的优缺点和适用范围及去糖基化后的结构检测方法等,为研究去糖基化对大分子物质的构效关系提供参考。 展开更多
关键词 糖基化 糖蛋白 去糖基化 技术手段 构效关系
原文传递
N-糖基化对TNFR-Fc融合蛋白结构稳定性和生物活性的影响 被引量:2
14
作者 黄嘉慧 汪才坤 +3 位作者 覃锦红 陈龙冠 黄云娜 谢秋玲 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期12-19,共8页
目的:探究糖基化对TNFR-Fc融合蛋白结构、稳定性和生物活性的影响。方法:经N-糖酰胺酶F(PNGase F)切除TNFR-Fc融合蛋白所连的糖链,用SEC-HPLC、傅里叶变换红外光谱法和荧光光谱法等方法分析N-糖基化和去糖基化后重组蛋白的结构变化,通... 目的:探究糖基化对TNFR-Fc融合蛋白结构、稳定性和生物活性的影响。方法:经N-糖酰胺酶F(PNGase F)切除TNFR-Fc融合蛋白所连的糖链,用SEC-HPLC、傅里叶变换红外光谱法和荧光光谱法等方法分析N-糖基化和去糖基化后重组蛋白的结构变化,通过加速稳定性实验和毛细管电泳检测对比其酶切前后稳定性变化,其生物活性的差异经细胞杀伤实验进行比较。结果:去糖基化后TNFR-Fc融合蛋白质分子质量略有降低,其构象、荷电性质及生物活性没有明显差异;然而切除N-糖链,TNFR-Fc二聚体的稳定性降低,蛋白质降解物明显增加。结论:去N-糖基化对TNFR-Fc的构象、荷电性质和生物活性的影响并不显著,但会影响TNFR-Fc融合蛋白的稳定性。 展开更多
关键词 TNFR-Fc 糖基化 去糖基化 蛋白质构象
原文传递
人参皂苷体内代谢及其产物的生物活性 被引量:8
15
作者 郑志忠 明艳林 《海峡药学》 2012年第1期9-13,共5页
人参皂苷(ginsenoside)是从人参中提取出来的萜类化合物,是人参诸多药理药效作用的主要活性成分。天然人参皂苷口服难以被直接吸收,必须经过体内代谢后,其产物才能发挥生物活性。然而,迄今国内尚未检索到人参皂苷体内代谢过程比较系统... 人参皂苷(ginsenoside)是从人参中提取出来的萜类化合物,是人参诸多药理药效作用的主要活性成分。天然人参皂苷口服难以被直接吸收,必须经过体内代谢后,其产物才能发挥生物活性。然而,迄今国内尚未检索到人参皂苷体内代谢过程比较系统的研究报道。因此,本文从以下4个方面概述下人参皂苷在体内的代谢研究:一是人参皂苷胃酸液、肠道菌、其他微生物的去糖基化;二是代谢产物通过被动扩散的方式进行吸收;三是代谢产物在肝脏中的酯化和聚集;四是代谢产物的生物活性。 展开更多
关键词 人参皂苷 体内代谢 去糖基化 酯化 生物活性
下载PDF
差示扫描量热法研究寡糖链对糖蛋白的热力学性质的影响 被引量:1
16
作者 朱科学 周惠明 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期38-40,共3页
报道了研究寡糖链对糖蛋白热力学性质影响的新方法 ;以小麦胚芽为原料 ,从其水溶性提取物中分离得到粗蛋白 -糖复合物 ,经DEAE_Cellulose52和SephadexG_100柱层析 ,得到一种糖蛋白(WGGP) ;采用差示扫描量热法 (DSC)分别对WGGP和去糖基化... 报道了研究寡糖链对糖蛋白热力学性质影响的新方法 ;以小麦胚芽为原料 ,从其水溶性提取物中分离得到粗蛋白 -糖复合物 ,经DEAE_Cellulose52和SephadexG_100柱层析 ,得到一种糖蛋白(WGGP) ;采用差示扫描量热法 (DSC)分别对WGGP和去糖基化的WGGP的热力学参数进行了测定 ,二者的tp 分别为96.098℃和74.338℃ ,说明WGGP的寡糖链对于蛋白质具有较好的稳定和抗变性功能。 展开更多
关键词 寡糖链 糖蛋白 热力学性质 差示扫描量热法 去糖基化
下载PDF
糖苷酶对Alzheimer病神经原纤维缠结结构的影响 被引量:1
17
作者 王建枝 龚成新 +1 位作者 I.Grundke-Iqbal K.Iqbal 《中国神经科学杂志》 CSCD 1998年第2期63-67,共5页
内切糖苷酶F/N-糖苷酶F可使Alzheimer病神经原纤维缠结选择性去糖基化。去糖基化作用使神经原纤维缠结的螺旋消失,在电子显微镜下呈直径为(2.5±0.5)nm的线性纤维丝结构,这些线性纤维丝常以束存在。单纯去糖基化作用并不引起... 内切糖苷酶F/N-糖苷酶F可使Alzheimer病神经原纤维缠结选择性去糖基化。去糖基化作用使神经原纤维缠结的螺旋消失,在电子显微镜下呈直径为(2.5±0.5)nm的线性纤维丝结构,这些线性纤维丝常以束存在。单纯去糖基化作用并不引起tau蛋白从缠结结构的释放量明显增高,但去糖基化处理可明显增高蛋自磷酸酯酶从缠结结构中释放游离tau蛋白。这些结果揭示,tau蛋白的糖基化作用与Alzheimer病患者脑中神经原纤维缠结结构的稳定性有关。 展开更多
关键词 神经原纤维缠结 糖苷酶 去糖基化 老年性痴呆
下载PDF
M6P/IGF2R11-15结构域介导了CREG对VSMC的生物学功能
18
作者 栾波 韩雅玲 +3 位作者 郭鹏 闫承慧 郭亮 康建 《岭南心血管病杂志》 2011年第S1期235-235,共1页
目的本室前期研究提示M6P/IGF2R参与了CREG生物学效应的调控。本研究将着重阐明M6P/IGF2R各结构域在介导CREG对VSMC生物学功能中的作用,以及CREG蛋白分子中糖基化结构对其生物学效应的影响。方法 (1)构建真核表达载体,利用NTA-Ni柱亲和... 目的本室前期研究提示M6P/IGF2R参与了CREG生物学效应的调控。本研究将着重阐明M6P/IGF2R各结构域在介导CREG对VSMC生物学功能中的作用,以及CREG蛋白分子中糖基化结构对其生物学效应的影响。方法 (1)构建真核表达载体,利用NTA-Ni柱亲和层析方法制备获得野生型wtCREG和去糖基化型mCREG蛋白,糖酐酶切和Western鉴定;(2)观察wt/mCREG蛋白对VSMC增殖、迁移、分化的影响;应用抗体阻断实验、免疫荧光双染色和免疫共沉淀法分析CREG蛋白是否与M6P/IGF2R直接结合;(3)构建原核表达载体,制备获得M6P/IGF2R结构域蛋白。Ellisa分析M6P/IGF2R各结构域与wt/mCREG的亲和力。应用竞争结合实验分析各结构域介导wt/mCREG蛋白生物学功能。结果 (1)wtCREG是糖基化蛋白,糖酐酶切后分子量由30KD变为25KD,而mCREG为去糖基化蛋白,糖酐酶切后分子量无变化,为25KD;(2)wt/mCREG蛋白均抑制VSMC迁移、增殖和分泌细胞外基质,促进其分化;wtCREG效应强于mCREG:wt/mCREG蛋白与M6P/IGF2R存在直接结合。(3)wtCREG蛋白与M6P/IGF2R7~10、11~15结构域具有高结合力,mCREG蛋白与11~15结构域存在高亲和力。wtCREG与第7~10结构域结合可以被M6P阻断。第11~15结构域片段阻断wtCREG和mCREG生物学效应,第7~10结构域仅阻断wtCREG蛋白的生物学效应。结论 CREG通过细胞膜表面M6P/IGF2R蛋白抑制VSMC的增殖、迁移、分泌细胞外基质,促进其分化。其作用与其分子中糖基化结构无关,糖基化可以增强CREG的生物学功能,M6P/IGF2R第11~15号结构域是CREG功能结构域。 展开更多
关键词 功能结构域 生物学功能 生物学效应 去糖基化 糖基化蛋白 细胞外基质 酶切 直接结合 亲和力 增殖
下载PDF
纤维素载体固定化β-葡萄糖苷酶及其在大豆异黄酮水解中的应用 被引量:5
19
作者 姚轶俊 王立峰 鞠兴荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第24期177-182,共6页
建立纤维素载体固定化β-葡萄糖苷酶系统,用于黑豆浆中大豆异黄酮去糖基化反应,并对该催化系统进行了可行性评价。结果表明,在40 cm3纤维素颗粒上可结合超过40 mgβ-葡萄糖苷酶,并且能有效将4-硝基苯-β-D-葡糖苷酸水解成对硝基苯酚,其... 建立纤维素载体固定化β-葡萄糖苷酶系统,用于黑豆浆中大豆异黄酮去糖基化反应,并对该催化系统进行了可行性评价。结果表明,在40 cm3纤维素颗粒上可结合超过40 mgβ-葡萄糖苷酶,并且能有效将4-硝基苯-β-D-葡糖苷酸水解成对硝基苯酚,其反应最适温度为50℃。经动力学测试后可得其米氏常数Km值为(1.38±0.20)mmol/L。将该固定化酶系统用于黑豆浆中大豆异黄酮去糖基化,通过高效液相色谱检测其转化效率,表明该系统可以在30 min内利用40 cm^3含酶载体将50 mL黑豆浆中的异黄酮全部转化为去糖基化形式。该固定化酶催化系统连续化催化稳定性实验表明,在经过15次反应以及15 d之后,该固定化酶系统仍然可维持其60%的催化活性。 展开更多
关键词 Β-葡萄糖苷酶 固定化 纤维素颗粒 黑豆浆 异黄酮去糖基化
下载PDF
一种用于流感病毒亚单位疫苗纯度分析的改进方法
20
作者 田文莉 邵铭 +5 位作者 祁骥 刘淑珍 谷堃 李长贵 杨旭 李小强 《生物技术通讯》 CAS 2013年第1期98-100,共3页
目的:在SDS-PAGE方法的基础上建立一种改进方法,用于流感病毒亚单位疫苗中间体的杂质分析。方法:用糖苷酶F对不同亚型的疫苗中间体去糖基化处理后进行SDS-PAGE,与未经去糖基化处理的还原型SDS-PAGE结果进行比较。结果:去糖基化处理消除... 目的:在SDS-PAGE方法的基础上建立一种改进方法,用于流感病毒亚单位疫苗中间体的杂质分析。方法:用糖苷酶F对不同亚型的疫苗中间体去糖基化处理后进行SDS-PAGE,与未经去糖基化处理的还原型SDS-PAGE结果进行比较。结果:去糖基化处理消除了血凝素的糖基化对电泳迁移率的影响,从而实现了血凝素亚基和杂质的电泳分离。结论:此方法应用于流感病毒亚单位疫苗中间体的杂质分析,较之常规的还原型SDS-PAGE方法具有更高的分辨力。 展开更多
关键词 流感病毒亚单位疫苗 SDS-PAGE 血凝素 糖苷酶F 去糖基化
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部