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鼻咽癌低分化细胞系CNE-2双向凝胶电泳图谱的建立 被引量:4
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作者 杨海燕 肖志强 +3 位作者 李峰 余艳辉 张鹏飞 陈主初 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期123-128,共6页
目的 :建立人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2双向凝胶电泳图谱 ,初步分析其蛋白质表达情况。方法 :采用双向凝胶电泳 (2 DE)分离人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2总蛋白 ,银染显色 ,ImageMaster图象分析系统分析 ,从胶中选取分离较好的蛋白质点 ,... 目的 :建立人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2双向凝胶电泳图谱 ,初步分析其蛋白质表达情况。方法 :采用双向凝胶电泳 (2 DE)分离人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2总蛋白 ,银染显色 ,ImageMaster图象分析系统分析 ,从胶中选取分离较好的蛋白质点 ,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF) ,Mascot软件搜索MSDB和SWISS PROT数据库鉴定蛋白质。结果 :获得重复性和分辨率较好的CNE 2双向凝胶电泳图谱 ;质谱分析了 78个蛋白质点 ,获取 77张肽质量指纹图谱 ,通过查询数据库鉴定了 4 8个蛋白质。结论 :建立了人鼻咽癌低分化细胞系CNE 2双向凝胶电泳图谱 ,并应用质谱技术鉴定了部分蛋白质点 。 展开更多
关键词 鼻咽癌 CNE-2细胞系 双向凝胶电泳图谱 质谱技术 蛋白质组
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不同等电点沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白的双向电泳分析 被引量:17
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作者 陈静廷 卜登攀 +2 位作者 马露 杨永新 李发弟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第20期180-184,共5页
为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方法,以生鲜荷斯坦牛奶为对象,采用不同等电点(pH 4.6和pH 4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白样品,并对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱分析。依据凝胶图谱上... 为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方法,以生鲜荷斯坦牛奶为对象,采用不同等电点(pH 4.6和pH 4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白样品,并对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱分析。依据凝胶图谱上蛋白斑点比较图谱质量,采用PDQuest 8.0凝胶图像分析软件进行凝胶图谱分析。结果显示:2种方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,且获得的2-DE凝胶图谱背景清晰、蛋白点个体独立、无明显的拖尾现象,且重复性强,但都存在一定的酪蛋白残留。与超速离心法相比,pH 4.6沉淀法和pH 4.8沉淀法提取乳清蛋白的2-DE凝胶图谱可检测到较多的蛋白质斑点。pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备的2-DE凝胶图谱中蛋白点的表达丰度略高于pH 4.8沉淀法。研究表明:pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备2-DE凝胶图谱略优于pH 4.8沉淀法和超速离心法。但2种等电点沉淀法和超速离心法都可有效去除牛奶中的高丰度酪蛋白,提高低丰度蛋白的检出敏感性。 展开更多
关键词 牛奶 乳清蛋白 等电沉淀 超速离心 提取方法 双向凝胶电泳图谱
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窄范围pH梯度干胶条可提高胃癌细胞蛋白质组表达谱分辨率 被引量:1
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作者 郭强 张茂修 +1 位作者 李玉瑭 贾继辉 《医学检验与临床》 2006年第4期60-62,共3页
目的 探讨不同pH梯度干胶条在提高胃癌细胞蛋白质表达谱分辨率中的作用,为深入研究胃癌的蛋白质组学奠定基础.方法 提取胃低分化腺癌细胞MGC-803的蛋白质,分别采用pH 3~10和pH4~7不同pH梯度干胶条建立胃低分化腺癌细胞MGC-803蛋白质... 目的 探讨不同pH梯度干胶条在提高胃癌细胞蛋白质表达谱分辨率中的作用,为深入研究胃癌的蛋白质组学奠定基础.方法 提取胃低分化腺癌细胞MGC-803的蛋白质,分别采用pH 3~10和pH4~7不同pH梯度干胶条建立胃低分化腺癌细胞MGC-803蛋白质双向凝胶电泳图谱,与相对应pH区域的蛋白质斑点进行比较.结果 成功地构建出两种不同pH梯度MGC-803细胞的双向凝胶电泳图谱,经比较两种图谱蛋白质斑点结果显示,运用窄范围pH 4~7干胶条可更有效分辨出pH 3~10部分区域内聚积的蛋白质斑点.结论 采用窄范围pH的干胶条可提高双向电泳图谱分辨率,优化了胃癌细胞蛋白质组学研究的技术体系,可有效获取待测靶蛋白. 展开更多
关键词 梯度 干胶条 胃癌 细胞蛋白质 谱分辨率 GASTRIC ADENOCARCINOMA cells high resolution 双向凝胶电泳图谱 蛋白质组学 腺癌细胞 斑点 组学研究 分区域 技术体系 靶蛋白 运用 优化 显示 提取 内聚
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