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干旱胁迫下萝卜种子萌发期蛋白的双向电泳分析
1
作者 崔和馨 《生物化工》 CAS 2024年第1期54-58,70,共6页
种子萌发是植物生长、发育的最初阶段,也是容易遭到包括干旱在内的非生物胁迫的重要时期。蛋白组学是解析植物响应逆境胁迫的主要策略之一,双向电泳分离是蛋白组学的重要手段和环节。本研究以“春不老”萝卜为材料,利用聚乙二醇-6000(PE... 种子萌发是植物生长、发育的最初阶段,也是容易遭到包括干旱在内的非生物胁迫的重要时期。蛋白组学是解析植物响应逆境胁迫的主要策略之一,双向电泳分离是蛋白组学的重要手段和环节。本研究以“春不老”萝卜为材料,利用聚乙二醇-6000(PEG-6000)模拟干旱胁迫,对干旱胁迫下萝卜种子萌发早期无子叶胚蛋白进行双向电泳分离和蛋白图谱差异分析。采取直接对萝卜无子叶胚体样品进行裂解和上样的方法,可得到分辨度和重复性较好的双向电泳蛋白图谱;对干旱胁迫下的萝卜种子萌发早期无子叶胚蛋白表达图谱进行差异分析,共检测和匹配265个萝卜蛋白点,响应干旱胁迫的蛋白质点有28个,其中13个显著上调表达,15个显著下调表达。研究结果表明,部分萝卜种子萌发期蛋白响应了干旱胁迫,为后续的蛋白质谱分析和响应蛋白的鉴定工作打下良好基础。本研究采用的对植物样品直接裂解和上样的方法,也为其他植物蛋白的双向电泳分析提供了借鉴。 展开更多
关键词 萝卜 种子萌发 干旱胁迫 无子叶胚体 双向电泳
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沙田柚自交、异交花粉管蛋白双向电泳分析 被引量：21
2
作者 秦新民 李惠敏 +1 位作者 薛妙男 杨继华 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期566-569,523,共5页
比较分析了沙田柚自交、异交花粉管蛋白的双向电泳图谱 ,两者的蛋白分布格局相似 ,具有重叠性 ,可分辨出 2 0 0多个蛋白点。在异交花粉管电泳图谱中发现了 1种特异蛋白 (A) ,A蛋白 (MrA =5 8.2 ,pI=5 9) ;在自交花粉管电泳图谱中发现... 比较分析了沙田柚自交、异交花粉管蛋白的双向电泳图谱 ,两者的蛋白分布格局相似 ,具有重叠性 ,可分辨出 2 0 0多个蛋白点。在异交花粉管电泳图谱中发现了 1种特异蛋白 (A) ,A蛋白 (MrA =5 8.2 ,pI=5 9) ;在自交花粉管电泳图谱中发现了 2种特异蛋白 (B、C) ,B蛋白 (MrB =2 6.4,pI=6.1 ) ,C蛋白 (MrC =2 8 0 ,pI=6.3) 。 展开更多
关键词 花粉管 自交不亲和 沙田柚 特异蛋白 异交 双向电泳图谱 分布格局 C蛋白 双向电泳分析 发现
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人胃贲门腺癌组织和正常胃黏膜组织蛋白质组双向电泳图谱的差异分析 被引量：3
3
作者 刘国红 杨继要 +4 位作者 呼琳 张钦宪 李霞 张芳芳 马佳佳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期1712-1713,共2页
关键词 组织蛋白质组 双向电泳图谱 腺癌组织 胃黏膜 胃贲门 CARDIA 流行病学特征 双向电泳技术
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双向电泳技术进展及在动物和植物科学研究中的应用 被引量：5
4
作者 赵肃清 蔡燕飞 张焜 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第5期43-45,共3页
综述了双向电泳技术的原理、每一步骤的研究进展及其在动物和植物科学研究中的应用。
关键词 双向电泳 植物学 进展 双向电泳技术 科学研究 技术进展 应用 植物 动物
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卵巢癌组织蛋白双向电泳分析技术的建立 被引量：1
5
作者 甘淋 李娟 +2 位作者 段春燕 林海蕤 何涛 《泸州医学院学报》 2005年第4期365-366,共2页
目的初步建立卵巢癌蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法提取卵巢癌肿瘤组织中蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,对关键环节如样品处理、上样量分析和水化等进行一系列优化。进一步采用垂直SDS-PAGE进行第... 目的初步建立卵巢癌蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率及重复性。方法提取卵巢癌肿瘤组织中蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,对关键环节如样品处理、上样量分析和水化等进行一系列优化。进一步采用垂直SDS-PAGE进行第二相分离,银染显色、图像分析或软件分析电泳图谱。结果通过实验条件的反复筛选获得了较为满意的卵巢癌双向凝胶电泳图谱。结论本文初步建立了卵巢癌蛋白质组双向电泳分析方法,具有较好的分辨率和重复性,为进一步研究卵巢癌的差异表达及特异性分子标志物的筛选奠定了基础。 展开更多
关键词 蛋白质组 双向电泳 卵巢癌 双向电泳分析 分析技术 组织蛋白 双向凝胶电泳技术 特异性分子标志物 凝胶电泳图谱 固相PH梯度
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蛋白质双向电泳图像分析 被引量：37
6
作者 贾宇峰 林秋霞 +2 位作者 郭尧君 郭鹞 刘少君 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期246-250,共5页
随着人类基因组计划的接近完成 ,蛋白质组 (proteome)研究成为新的热点 .其中高分辨率的双向电泳(two dimensionalgelelectrophoresis ,2 DE)技术使对组织或细胞的整个蛋白质组的综合分析成为可能 .近年来这一技术有了很大的改进和提... 随着人类基因组计划的接近完成 ,蛋白质组 (proteome)研究成为新的热点 .其中高分辨率的双向电泳(two dimensionalgelelectrophoresis ,2 DE)技术使对组织或细胞的整个蛋白质组的综合分析成为可能 .近年来这一技术有了很大的改进和提高 ,特别是图像分析系统 ,算法更为先进 ,功能日益强大 ,操作也更简便 ,为大规模研究提供了良好的工具 .使用新一代的 2D图像分析系统 ,对离体培养的雪旺氏细胞的蛋白质样品双向电泳结果进行了初步分析 ,探讨了在图像扫描、点检测、背景消除、匹配、结果报告和数据分析各步中的技术问题 ,并报告了进行 2D图像分析的体会 . 展开更多
关键词 双向电泳 蛋白质组 图像分析 软件 雪旺氏细胞
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甘蓝型油菜蛋白质双向电泳体系的建立 被引量：38
7
作者 甘露 李殿荣 +3 位作者 臧新 付春华 余龙江 栗茂腾 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期612-619,共8页
选用油菜品种08127,采用TCA-丙酮提取方法,pH4～7胶条和改进的IEF聚焦程序,得到较好的蛋白质双向电泳结果,建立了一种适合甘蓝型油菜的双向电泳体系。利用其他甘蓝型油菜品种的幼苗、叶片和茎中的蛋白检验该实验体系,都能得到较好的蛋... 选用油菜品种08127,采用TCA-丙酮提取方法,pH4～7胶条和改进的IEF聚焦程序,得到较好的蛋白质双向电泳结果,建立了一种适合甘蓝型油菜的双向电泳体系。利用其他甘蓝型油菜品种的幼苗、叶片和茎中的蛋白检验该实验体系,都能得到较好的蛋白质双向电泳结果。利用该实验体系比较甘蓝型油菜幼苗不同发育时期蛋白质双向电泳图,找到二者之间的差异点,选取部分点成功进行了质谱分析。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 蛋白质 双向电泳
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小麦花药蛋白质组双向电泳技术体系的优化 被引量：42
8
作者 陈蕊红 张改生 +2 位作者 刘卫 叶景秀 牛娜 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期404-409,共6页
以小麦单核期花药为材料,比较了两种不同蛋白质提取方法TCA/丙酮法和酚提取法及不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在蛋白质上样量和SDS-PAGE胶浓度等方面也进行了探索与优化。结果表明,采用TCA/丙酮提取法比用酚提取法提取的... 以小麦单核期花药为材料,比较了两种不同蛋白质提取方法TCA/丙酮法和酚提取法及不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在蛋白质上样量和SDS-PAGE胶浓度等方面也进行了探索与优化。结果表明,采用TCA/丙酮提取法比用酚提取法提取的蛋白质所得的2-DE胶图谱上蛋白质点数增加,图谱背景也比较清晰;样品溶解于含有硫脲和TBP的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著提高蛋白质的溶解性,在2-DE图谱上可分辨出554个蛋白质点,比用蛋白质裂解液Ⅰ提取的蛋白多39个点。以TCA-丙酮法提取小麦花药组织中的蛋白,用蛋白质裂解液Ⅱ[7mol/L尿素、2mol/L硫脲、4%CHAPS、2%TBP、65mmol/L DTT、0.2%载体两性电解质（其中0.1%pH 3-10,0.1%pH4-6）]溶解蛋白,以pH4-7线性17cm的IPG胶条进行双向凝胶电泳,在上样量为800μg,13%SDS-PAGE胶浓度下,蛋白质得到了更好的分离,2-DE图谱上可分辨出631个蛋白点,图谱质量最佳。优化后的双向电泳技术体系,适合于小麦花药全蛋白质的双向电泳分析。 展开更多
关键词 小麦 花药蛋白 蛋白质提取方法 蛋白质裂解液 双向电泳技术
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油菜不同器官高质量总蛋白提取方法和双向电泳体系的优化 被引量：23
9
作者 刘海衡 胡胜武 +2 位作者 刘胜毅 黄军艳 董彩华 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期426-433,共8页
以显性核不育油菜Shaan—GMS不育株和可育株的花序和叶片为材料，采用TCA（三氯醋酸）-丙酮法提取油菜花蕾、花药及叶片总蛋白，对总蛋白提取方法、IPG（固定pH梯度）胶条种类、聚焦程序、凝胶浓度、上样量等环节进行了优化。结果表明... 以显性核不育油菜Shaan—GMS不育株和可育株的花序和叶片为材料，采用TCA（三氯醋酸）-丙酮法提取油菜花蕾、花药及叶片总蛋白，对总蛋白提取方法、IPG（固定pH梯度）胶条种类、聚焦程序、凝胶浓度、上样量等环节进行了优化。结果表明，采用理想的蛋白质裂解液（7mol／L尿素，2mol／L硫脲，4％CHAPS（3-[3-（胆酰氨丙基）二甲氨基]丙磺酸内盐），65mmol二硫苏糖醇，0．5％IPG缓冲液pH3～10或pH4～7，全蛋白酶抑制片剂（片／10mL））裂解蛋白，以150μg上样，按IEF程序Ⅱ（30V，12h；200V，1h；500V，1h；1000V，0．5h；10000V，2h；10000V，8h）进行等电聚焦，10％SDS—PAGE胶浓度进行第二向电泳，银染方法检测，可得到背景清晰、分辨率较高的油菜花蕾、花药及叶片蛋白质电泳图谱。高质量油菜蛋白的提取方法和蛋白质分离双向电泳体系的优化可为油菜蛋白质组学研究奠定技术基础。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 花药 花蕾 叶片 总蛋白提取 双向电泳
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一种省时高效的木本植物蛋白双向电泳分析方法 被引量：33
10
作者 谷瑞升 刘群录 +1 位作者 陈雪梅 蒋湘宁 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期7-10,共4页
对蛋白提取方法进行改良并引用毛细管等电聚焦技术，不仅大大降低了木本植物体内次生代谢物质对双向电泳结果的干扰，明显改善了分析效果，而且又经济、快捷，获得了分析木本植物蛋白较好的双向电泳方法．在对毛白杨叶片和胡杨组织分析... 对蛋白提取方法进行改良并引用毛细管等电聚焦技术，不仅大大降低了木本植物体内次生代谢物质对双向电泳结果的干扰，明显改善了分析效果，而且又经济、快捷，获得了分析木本植物蛋白较好的双向电泳方法．在对毛白杨叶片和胡杨组织分析中获得较满意的结果． 展开更多
关键词 木本植物 蛋白 双向电泳分析 杨树
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家蚕蛋白质双向电泳的样品制备方法 被引量：26
11
作者 钟伯雄 颜海燕 +2 位作者 沈飞英 李建科 周丽 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第4期427-432,共6页
进行蛋白质组研究的关键是要尽可能完整地获得一个基因组在一个生物体或一个组织器官的特定时期表达的蛋白质的种类和数量 ,双向电泳技术是分离组织和器官蛋白质的核心技术 ,而蛋白质样品的制备是双向电泳的基础。以家蚕胚胎、中肠、皮... 进行蛋白质组研究的关键是要尽可能完整地获得一个基因组在一个生物体或一个组织器官的特定时期表达的蛋白质的种类和数量 ,双向电泳技术是分离组织和器官蛋白质的核心技术 ,而蛋白质样品的制备是双向电泳的基础。以家蚕胚胎、中肠、皮肤、丝腺等组织器官为材料 ,采用磷酸缓冲液或Tris HCl缓冲液抽提蛋白质样品 ,用 6种不同的蛋白质溶解缓冲液溶解蛋白质 ,经蛋白质双向电泳和蛋白质图像软件分析 ,结果表明用磷酸缓冲液抽提、蛋白质溶解缓冲液E溶解是制备家蚕蛋白质双向电泳样品的较好方法。蛋白质磷酸抽提缓冲液 (PBS)的组成为 :32 5mmol/LK2 HPO4,2 6mmol/LKH2 PO4,4 0 0mmol/LNaCl,pH 7 6。蛋白质样品溶解缓冲液E的组成为 :8mol/L尿素 ,2mol/L硫尿 ,4 %CHAPS ,2 0mmol/LTrisbase,30mmol/LDTE ,2 %Pharmalyte(pH 3～ 10 )。 展开更多
关键词 家蚕 蛋白质 双向电泳 样品制备方法 抽提缓冲液 溶解缓冲液 器官 组织
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水稻籽粒蛋白双向电泳条件的优化及其蛋白组学方法的比较 被引量：15
12
作者 李奇松 陈军 +3 位作者 林世圣 李忠 张志兴 林文雄 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期921-927,共7页
探讨适用于籽粒蛋白组学研究的策略,对深入研究籽粒的发育过程具有重要的意义。本文对比了3种不同的蛋白提取方法,优化了双向电泳中自制管胶一向的等电聚焦条件和IPG干胶条一向的等电聚焦时间,以MALDI-TOF/MS、Western blot和磷酸化蛋... 探讨适用于籽粒蛋白组学研究的策略,对深入研究籽粒的发育过程具有重要的意义。本文对比了3种不同的蛋白提取方法,优化了双向电泳中自制管胶一向的等电聚焦条件和IPG干胶条一向的等电聚焦时间,以MALDI-TOF/MS、Western blot和磷酸化蛋白组学3个重要的蛋白质组学研究方法对胶内蛋白质鉴定分析。结果表明,可溶性蛋白提取法最适用于籽粒蛋白组学的研究;电泳条件优化后,得到了较优的2-DE图谱;胶内蛋白点适用于质谱分析、蛋白表达量验证(Western blot)及籽粒蛋白的磷酸化组学的研究。本研究为下一步在蛋白组水平上分析籽粒发育提供了技术支持。 展开更多
关键词 水稻 籽粒 蛋白组学 双向电泳 蛋白磷酸化
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家蚕催青后期胚胎蛋白质双向电泳图谱分析 被引量：14
13
作者 钟伯雄 陈金娥 +2 位作者 颜新培 徐孟奎 梁建设 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期637-642,共6页
采用蛋白质双向电泳技术分析了家蚕Bombyxmori催青后期胚胎蛋白质图谱的变化。研究发现:在头胸分化期(戊3)、反转期(己1)、毛瘤发生期(己2)、点青期(己3)、转青期(己4)和孵化期(己5)胚胎蛋白质的双向电泳图谱中共检测到209个特异蛋白斑... 采用蛋白质双向电泳技术分析了家蚕Bombyxmori催青后期胚胎蛋白质图谱的变化。研究发现:在头胸分化期(戊3)、反转期(己1)、毛瘤发生期(己2)、点青期(己3)、转青期(己4)和孵化期(己5)胚胎蛋白质的双向电泳图谱中共检测到209个特异蛋白斑点,其中己3和己4两个胚胎出现的特异蛋白斑点数在整个催青期胚胎中为最多,分别达55和77个。与催青前期胚胎出现的特异蛋白斑点变化规律相似,这些特异蛋白斑点大多也是在随后邻近的胚胎发育中消失。推测这些特异蛋白可能与相应胚胎的形体特征发育有关。 展开更多
关键词 家蚕 蛋白质 双向电泳 图谱分析 胚胎发育
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成年和老年小鼠脑蛋白质组双向电泳图谱比较 被引量：19
14
作者 丁勤学 阙海萍 +2 位作者 郭尧君 景书谦 刘少君 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期683-687,共5页
使用双向电泳 (2 DE)比较成年和老年小鼠脑蛋白质差异 ,从分子水平初步探索老年脑蛋白整体变化规律 .以固相 pH梯度等电聚焦为第一向 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶水平电泳 (PAGE)为第二向进行 2 DE .图象分析软件Imagemaster 2DElite分析电... 使用双向电泳 (2 DE)比较成年和老年小鼠脑蛋白质差异 ,从分子水平初步探索老年脑蛋白整体变化规律 .以固相 pH梯度等电聚焦为第一向 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶水平电泳 (PAGE)为第二向进行 2 DE .图象分析软件Imagemaster 2DElite分析电泳图谱 .重复性实验结果显示 ,同组样品在三次不同实验中所得蛋白质斑点数目的相对标准差 (变异系数 )为 4 43%± 0 2 5 % ;同一蛋白质斑点在三次实验中等电点、分子质量和蛋白质量的相对标准差分别为 8 76 %± 5 14% ,13 0 0 %± 4 2 2 %和 10 84%± 9 16 % .成年和老年小鼠脑组织 2 DE图谱分别获得 996和 12 5 6个蛋白质斑点 ,其中 8个蛋白质在老年脑组织中含量降低 ,2 0个蛋白质斑点含量增加 .另至少有 4个蛋白质斑点在老年脑组织中缺失 ,14个蛋白质点为老年脑特有 . 展开更多
关键词 老年 脑蛋白 固相PH梯度 双向电泳图谱 蛋白质组 成年 小鼠 脑老化 功能退变
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应用双向电泳技术研究条锈菌侵染后小麦蛋白质的改变 被引量：16
15
作者 李跃建 姬红丽 +3 位作者 彭云良 高荣 高霞 刘世贵 《四川大学学报（工程科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第2期80-85,共6页
在pH3～10和pH4～7条件下,用双向电泳研究了慢条锈病和高感条锈病2个小麦品种体内蛋白质的差异表达。结果表明,条锈菌侵入后,慢条锈病抗病品种川麦107和高感条锈病品种80-8体内的蛋白质均发生了显著改变;在宽、窄2种pH条件下,2品种的蛋... 在pH3～10和pH4～7条件下,用双向电泳研究了慢条锈病和高感条锈病2个小麦品种体内蛋白质的差异表达。结果表明,条锈菌侵入后,慢条锈病抗病品种川麦107和高感条锈病品种80-8体内的蛋白质均发生了显著改变;在宽、窄2种pH条件下,2品种的蛋白质点都较多,但在窄pH下,蛋白质点的分离更好;2品种都诱导出了一些新的蛋白质;慢条锈病的川麦107比高感条锈病的80-8多产生了几个表达更强烈的非特异性抗性蛋白质,同时也多诱导出了2个新的特异性抗性蛋白质,其中一个的分子量是16.8kDa,pI值为6.1。 展开更多
关键词 小麦 条锈病 双向电泳 蛋白质
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染氟成骨细胞的双向电泳和质谱鉴定 被引量：15
16
作者 徐辉 井玲 +2 位作者 张承巍 齐玲 李广生 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期35-38,共4页
目的探讨双向电泳和质谱鉴定技术在染氟成骨细胞蛋白表达变化中的意义,为探索氟骨症发病机制提供有效手段。方法采用小鼠乳鼠颅骨来源的成骨细胞进行培养,抽提染氟(2mg/L)72h组和对照组成骨细胞蛋白,用双向凝胶电泳进行分离及ImageMaste... 目的探讨双向电泳和质谱鉴定技术在染氟成骨细胞蛋白表达变化中的意义,为探索氟骨症发病机制提供有效手段。方法采用小鼠乳鼠颅骨来源的成骨细胞进行培养,抽提染氟(2mg/L)72h组和对照组成骨细胞蛋白,用双向凝胶电泳进行分离及ImageMaster2DElite软件分析电泳图谱,基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱仪对两组间比较具有统计学意义的差异蛋白点进行鉴定。结果在对照组成骨细胞蛋白双向电泳图谱上可观察到671个蛋白点,而在染氟组双向电泳图谱上可见到837个蛋白点;在染氟成骨细胞表达有明显差异的蛋白点经质谱鉴定出12种(7种蛋白表达增多,5种降低),主要是与细胞代谢旺盛、蛋白质氧化折叠和氧化应激等相关的蛋白。结论实验所采用的双向电泳和质谱鉴定方法可有效分离和鉴定成骨细胞蛋白点,为氟骨症的发生机制提供了有价值的新线索,表明蛋白质组学技术较其他方法具有很大的优越性。 展开更多
关键词 成骨细胞 氟化物 双向电泳 质谱 蛋白质组
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适用于盐生植物的双向电泳样品制备方法 被引量：22
17
作者 李肖芳 韩和平 +2 位作者 王旭初 范鹏祥 李银心 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1848-1853,共6页
比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)、三氯乙酸沉淀法(E-TCA)和酚抽法(Phe)3种方法对盐生植物盐角草(SalicorniaeuropaeaL.)总蛋白的提取效果。3种方法分别得到579、343和535个蛋白点;TCA和E-TCA法所得图谱均存在严重的横向纹理,Phe法所得... 比较了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)、三氯乙酸沉淀法(E-TCA)和酚抽法(Phe)3种方法对盐生植物盐角草(SalicorniaeuropaeaL.)总蛋白的提取效果。3种方法分别得到579、343和535个蛋白点;TCA和E-TCA法所得图谱均存在严重的横向纹理,Phe法所得图谱则背景干净,基本上没有纹理。说明Phe法不仅能很好地提取盐角草蛋白,而且能有效去除样品中的盐分。对Phe法的提取液进行了改进,所得图谱背景更加清晰,蛋白点数增加。为其他盐生植物以及嗜盐微生物蛋白质的提取提供了重要参考。 展开更多
关键词 蛋白质提取 双向电泳(2-DE) 酚 三氯乙酸(TCA) 盐角草
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用双向电泳和质谱技术检测NGX6转染后人鼻咽癌细胞表达差异的蛋白质(英文) 被引量：20
18
作者 李江 谭琛 +7 位作者 向秋 张晓梅 马健 李伟芳 王洁如 阳剑波 梁宋平 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期573-578,共6页
NGX6是克隆的鼻咽癌相关基因 ,它的功能与作用机制目前尚不十分清楚 .通过脂质体转染把NGX6导入鼻咽癌细胞株中 ,采用双向凝胶电泳分离细胞内所有蛋白质 ,通过软件分析 ,找到与未处理细胞表达差异的蛋白质 ,通过质谱分析和生物信息学资... NGX6是克隆的鼻咽癌相关基因 ,它的功能与作用机制目前尚不十分清楚 .通过脂质体转染把NGX6导入鼻咽癌细胞株中 ,采用双向凝胶电泳分离细胞内所有蛋白质 ,通过软件分析 ,找到与未处理细胞表达差异的蛋白质 ,通过质谱分析和生物信息学资料处理 .鉴定出七种表达上调的蛋白质 ,其中包括Fas蛋白 ,锌指蛋白(ZNF) ,主要组织相容性抗原Ⅱ (MHCⅡ )等 .Fas蛋白参与细胞凋亡的信号传导途径 ,它的上调可以促进细胞凋亡 ;ZNF蛋白参与基因的转录调控 ,它的上调也可影响细胞异常增殖的信号传导通路 ;MHCⅡ可以促进机体对肿瘤细胞的免疫应答 .这些结果说明NGX6可能通过多种途径抑制鼻咽癌细胞的生长 ,为研究NGX6的作用机制提供了很好的实验资料 ,对鼻咽癌的基因治疗奠定了一定的研究基础 。 展开更多
关键词 双向电泳 细胞转染 基质辅助性激光解吸飞行时间质谱 鼻咽癌相关基因
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尖吻蝮蛇毒素组双向电泳和二维液相色谱研究 被引量：17
19
作者 黄春洪 孔毅 +2 位作者 吴杰连 刘睿 吴梧桐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-173,共5页
目的:初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法:利用双向电泳和二维色谱(IEX+HPLC)分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组,并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果:双向电泳分离检测得到128种蛋白质,其中24种蛋白质丰度较高,73种为酸... 目的:初步研究尖吻蝮蛇蛇毒的蛋白质组分及其活性。方法:利用双向电泳和二维色谱(IEX+HPLC)分析尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质组,并制备分离样品研究蛇毒中酶和毒素活性。结果:双向电泳分离检测得到128种蛋白质,其中24种蛋白质丰度较高,73种为酸性蛋白质,20种为碱性蛋白质。二维色谱展现58种蛋白质,其中26种蛋白质丰度较高。初步活性研究表明,尖吻蝮蛇蛇毒蛋白质多数属于丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和磷脂酶A2家族,部分蛋白质可能属于去整合素家族。结论:双向电泳和二维色谱相互结合,有效分析了尖吻蝮蛇毒的蛋白质组成和生物活性。 展开更多
关键词 双向电泳 二维液相色谱 毒素组学 尖吻蝮蛇
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适于水稻根、叶、悬浮细胞总蛋白质分析的高分辨率双向电泳方法 被引量：22
20
作者 余初浪 严顺平 +1 位作者 孙卫宁 杨玲 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期549-552,共4页
提取了水稻根、叶、悬浮细胞的总蛋白质，用双向电泳进行分离，得到了高分辨率和高重复性的双向电泳图谱。在根、叶、悬浮细胞的双向电泳图谱上能分别检测到至少1190、1320、1080个蛋白点，重复样品图谱间的相关系数在0．87～0．94。还... 提取了水稻根、叶、悬浮细胞的总蛋白质，用双向电泳进行分离，得到了高分辨率和高重复性的双向电泳图谱。在根、叶、悬浮细胞的双向电泳图谱上能分别检测到至少1190、1320、1080个蛋白点，重复样品图谱间的相关系数在0．87～0．94。还对水稻蛋白质的提取过程和电泳条件进行了改进和优化，对其他植物蛋白的双向电泳分析有一定的借鉴作用。 展开更多
关键词 蛋白质组学 双向电泳 固化pH梯度胶 水稻 分析方法
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