VEGF-A/VEGF-C反义脱氧寡核苷酸对乳腺癌生长及其脉管生成的影响 被引量：9

1

作者 陈基善 张雅洁 +1 位作者 胡帅尔 张惠球 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期972-976,共5页

背景与目的:肿瘤脉管生成与肿瘤的生长和转移密切相关,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)可能是最强的促血管生成因子,而VEGF-C是VEGF家族中最强的促淋巴管生成因子,在肿瘤血管生成中与VEGF-A具有协同促... 背景与目的:肿瘤脉管生成与肿瘤的生长和转移密切相关,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)可能是最强的促血管生成因子,而VEGF-C是VEGF家族中最强的促淋巴管生成因子,在肿瘤血管生成中与VEGF-A具有协同促进效应。本研究旨在探讨VEGF-A/VEGF-C反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对乳腺癌生长及其脉管生成的影响。方法:将VEGF-A/VEGF-CASODN注入人乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型中,观察肿瘤生长;运用RT-PCR法检测肿瘤组织VEGF-A/VEGF-CmRNA表达,免疫组织化学法检测其蛋白表达情况;5′-Nase-ALPase双重酶组织化学染色标记肿瘤微血管和微淋巴管,并计算肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)和微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD)。结果:反义组成瘤时间较对照组长[(13.00±2.83)天vs.(7.67±1.63)天,P<0.05],移植瘤生长速度较对照组缓慢,肿瘤重量明显低于对照组[(0.45±0.14)gvs.(0.92±0.37)g,P<0.05],抑瘤率达51.09%;反义组VEGF-A和VEGF-CmRNA及蛋白表达较对照组明显减弱(P<0.05),且MVD(21.83±2.86vs.41.33±4.03)及LMVD(18.67±4.67vs.31.83±2.33)显著低于对照组(P<0.05)。结论:VEGF-A/VEGF-CASODN通过抑制VEGF-A及VEGF-C表达抑制乳腺癌脉管生成,进而抑制肿瘤生长。 展开更多

关键词 反义脱氧寡核苷酸 VEGF—A VEGF—C 血管生成 淋巴管生成 乳腺肿瘤

下载PDF 职称材料

脂质体转染反义脱氧寡核苷酸对K562细胞α珠蛋白基因表达及细胞增殖的影响 被引量：7

2

作者 刘容容 赖永榕 马劼 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期1065-1069,共5页

本研究查明脂质体转染反义脱氧寡核苷酸(ASON)对K562细胞α珠蛋白基因表达的抑制作用及对细胞增殖的影响,探讨基因调控治疗β地中海贫血的新思路。设计合成靶向α珠蛋白基因的ASON,并与正义寡核苷酸(SON)和空白对照进行比较。采用脂质... 本研究查明脂质体转染反义脱氧寡核苷酸(ASON)对K562细胞α珠蛋白基因表达的抑制作用及对细胞增殖的影响,探讨基因调控治疗β地中海贫血的新思路。设计合成靶向α珠蛋白基因的ASON,并与正义寡核苷酸(SON)和空白对照进行比较。采用脂质体转染技术将ASON、SON与K562细胞共同培养,用荧光显微术、流式细胞术检测脂质体转染效率,用实时荧光定量RT-PCR法检测K562细胞中α珠蛋白基因表达情况,并通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法观察脂质体转染ASON技术对细胞增殖的影响。结果表明:脂质体转染效率在ASON作用24h达到最高,脂质体转染ASON组的α珠蛋白基因表达水平显著低于SON和空白对照组(p<0.01),并对细胞的增殖有明显的抑制作用,上述效应呈浓度依赖性。结论:脂质体转染ASON能特异性的抑制K562细胞中α珠蛋白基因表达,可能会成为β地中海贫血基因治疗的一个新靶点。 展开更多

关键词 Α珠蛋白基因 脂质体转染 反义脱氧寡核苷酸 K562细胞 细胞增殖 地中海贫血

下载PDF 职称材料

神经肽Y5受体反义脱氧寡核苷酸的减重降脂作用 被引量：3

3

作者 刘倩琦 陈荣华 +2 位作者 郭锡熔 费莉 龚海霞 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期259-262,共4页

目的 :　探计神经肽 Y5反义脱氧寡核苷酸对高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型的拮抗作用。方法 :　建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型 ,行侧脑室内插管 ,观察肥胖大鼠注射神经肽 Y5受体反义脱氧寡核苷酸、错义脱氧寡核苷酸及生理盐水后体重... 目的 :　探计神经肽 Y5反义脱氧寡核苷酸对高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型的拮抗作用。方法 :　建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型 ,行侧脑室内插管 ,观察肥胖大鼠注射神经肽 Y5受体反义脱氧寡核苷酸、错义脱氧寡核苷酸及生理盐水后体重和进食量的变化。结果 :　注射神经肽 Y5受体反义脱氧寡核苷酸的肥胖大鼠 ,体重和进食量明显减少 ,与注射前比较有显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ;注射错义脱氧寡核苷酸和生理盐水对照组这两项指标未见明显下降 ( P>0 .0 5 )。结论 :　侧脑室注射神经肽 Y5受体反义寡核苷酸对营养性肥胖大鼠有明显的抑制进食和减轻体重的效应。 展开更多

关键词 神经肽Y 反义脱氧寡核苷酸 侧脑室注射 肥胖 降脂作用

下载PDF 职称材料

c-fos反义脱氧寡核苷酸阻断VIP诱导的VEGF在小细胞肺癌细胞中表达 被引量：2

4

作者 赵正源 程庆书 +2 位作者 李小飞 王小平 刘锟 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第4期312-315,共4页

背景与目的血管活性肠肽(VIP)对多种肿瘤细胞的生长具有促进作用,但其作用机制尚有许多未解之处。本研究旨在通过抑制c-fos基因表达,探讨其表达产物是否参与VIP对小细胞肺癌(SCLC)细胞中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的调节作用。方... 背景与目的血管活性肠肽(VIP)对多种肿瘤细胞的生长具有促进作用,但其作用机制尚有许多未解之处。本研究旨在通过抑制c-fos基因表达,探讨其表达产物是否参与VIP对小细胞肺癌(SCLC)细胞中血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的调节作用。方法应用RT-PCR技术检测VIP作用下SCLC细胞系H446中c-fos及VEGF基因表达水平,以c-fos反义脱氧寡核苷酸(ASO)封闭c-fos基因表达,检测不同c-fos表达水平条件下VIP对VEGF表达的调节作用。结果VIP增强了c-fos及VEGF在H446细胞中的表达。c-fosmRNA的表达在VIP作用2h和4h时达到高峰,显著高于VIP作用0h时(P<0.01)。在VIP作用8h和16h时,VEGF mRNA的表达水平达到高峰,显著高于VIP作用0h时(P<0.01)。c-fosASO能明显反转VIP诱导的VEGF的表达上调(P<0.01)。结论VIP可能通过增强转录因子c-fos的表达,进而促进VEGF mRNA在肺癌细胞中的表达和分泌,促进肺癌新生血管的生成,参与肿瘤的生长。 展开更多

关键词 小细胞肺癌 血管活性肠肽 C-FOS 血管内皮生长因子 反义脱氧寡核苷酸 血管形成

下载PDF 职称材料

脂质体包裹TGF-α反义脱氧寡核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖 被引量：5

5

作者 何勇 周峻 吴金生 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第2期154-156,共3页

目的　研究用转化生长因子 α(TGF- α)反义脱氧寡核苷酸 (ASODN)对人大肠癌细胞株 HR8348生长增殖的作用 ,探讨大肠癌治疗的新途径 .方法　采用人工合成的 TGF-α反义及无关对照 ODN经阳离子脂质体包裹后转染人大肠癌 HR8348细胞 .采用... 目的　研究用转化生长因子 α(TGF- α)反义脱氧寡核苷酸 (ASODN)对人大肠癌细胞株 HR8348生长增殖的作用 ,探讨大肠癌治疗的新途径 .方法　采用人工合成的 TGF-α反义及无关对照 ODN经阳离子脂质体包裹后转染人大肠癌 HR8348细胞 .采用 MTT法 ,[3H]- Td R掺入实验 ,细胞周期分析 ,裸鼠体内接种等方法测定瘤细胞体内外增殖的变化 .结果　经 TGF- α反义 ODN处理的 HR8348细胞与对照组HR8348细胞相比 ,体外增殖速度减慢 (细胞增殖抑制率达71% ) ,DNA 合成受抑 ,裸鼠体内成瘤率下降 (2 5 % vs10 0 % ) .结论　 TGF- α反义 ODN能有效抑制大肠癌细胞的体内外生长增殖 ,可用于实验性肿瘤基因治疗研究 . 展开更多

关键词 大肠癌 转化生长因子-Α 脂质体 反义脱氧寡核苷酸

下载PDF 职称材料

MUC2反义脱氧寡核苷酸对胃癌细胞体外黏附侵袭活性的影响 被引量：1

6

作者 肖春卫 易永芬 张晓艳 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第8期15-17,共3页

目的探讨黏蛋白MUC2反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对人胃癌细胞株SGC7901黏附侵袭活性的影响。方法采用人工合成的MUC2 ASODN经阳离子脂质体包裹后转染入SGC7901细胞中,采用黏附试验、Boyden小室体外侵袭试验观察比较转染前后癌细胞黏附率,... 目的探讨黏蛋白MUC2反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对人胃癌细胞株SGC7901黏附侵袭活性的影响。方法采用人工合成的MUC2 ASODN经阳离子脂质体包裹后转染入SGC7901细胞中,采用黏附试验、Boyden小室体外侵袭试验观察比较转染前后癌细胞黏附率,穿膜细胞相对百分率及组织蛋白酶D、钙黏蛋白表达的变化。结果转染SGC7901细胞48 h后,癌细胞黏附率在30、60、90、120 min各时间段逐渐升高,但低于空白对照组(P均<0.01);转染后癌细胞穿膜细胞相对百分率明显下降;转染后SGC7901细胞的E-钙黏蛋白表达明显增高,组织蛋白酶D水平明显降低。结论人工合成的MUC2 ASODN能有效抑制胃癌细胞株SGC7901黏附侵袭能力。 展开更多

关键词 胃肿瘤 黏蛋白 反义脱氧寡核苷酸

下载PDF 职称材料

体外观察反义脱氧寡核苷酸对变形链球菌蔗糖依赖性粘附的影响

7

作者 郭青玉 吴军正 +3 位作者 肖刚 李睿 朱秀丽 温德升 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期104-107,共4页

目的：评估gtfB特异反义脱氧寡核苷酸对变形链球菌蔗糖依赖性粘附能力的影响。方法：合成针对gtfB709—726bp及3479—3497bp的反义脱氧寡核苷酸并进行硫化。将其分别自然转入变形链球菌细胞内，观察各组变形链球菌对唾液包被羟磷灰石的... 目的：评估gtfB特异反义脱氧寡核苷酸对变形链球菌蔗糖依赖性粘附能力的影响。方法：合成针对gtfB709—726bp及3479—3497bp的反义脱氧寡核苷酸并进行硫化。将其分别自然转入变形链球菌细胞内，观察各组变形链球菌对唾液包被羟磷灰石的蔗糖依赖性粘附，结晶紫染色，无水乙醇脱色，酶标仪于620nm处读取吸光度值。结果：培养基中加入反义脱氧寡核苷酸的变形链球菌蔗糖依赖性粘附明显低于对照组（P〈0．01），PS-ODN1和PS-ODN2分别可减少31．4％和41．8％细菌粘附。结论：反义脱氧寡核苷酸可以抑制变形链球菌蔗糖依赖性粘附，有可能将其开发成龋病预防及病因研究中的新型试剂。 展开更多

关键词 龋病 变形链球菌 反义脱氧寡核苷酸 蔗糖依赖性粘附

下载PDF 职称材料

血管内皮生长因子C反义脱氧寡核苷酸对肺癌细胞的作用

8

作者 彭传亮 丛波 +2 位作者 田辉 赵小刚 孙启峰 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1183-1185,共3页

目的探讨非小细胞肺癌(NSCC)中血管内皮生长因子C(VEGF-C)信使核糖核酸(mRNA)的表达及其反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxyribonucleotide,ASODN)对人肺癌细胞的作用。方法应用原位杂交技术检测48例新鲜肺癌标本中VEGF-C mRNA的表... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCC)中血管内皮生长因子C(VEGF-C)信使核糖核酸(mRNA)的表达及其反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxyribonucleotide,ASODN)对人肺癌细胞的作用。方法应用原位杂交技术检测48例新鲜肺癌标本中VEGF-C mRNA的表达,将脂质体介导的VEGF-C ASODN转染人肺癌细胞株A-549,用Western印迹法检测肺癌细胞VEGF-C蛋白的表达。结果VEGF-C mRNA在肺鳞癌和腺癌细胞中的表达阳性率分别为65.4%(17/26)和59.1%(13/22),经VEGF-C ASODN转染的细胞株A-549中,VEGF-C蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。结论VEGF-C mRNA在NSCC中有一定程度的表达,体外实验VEGF-C ASODN通过下调VEGF-C蛋白的表达抑制肺癌细胞的侵袭作用。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子C 非小细胞肺癌 反义脱氧寡核苷酸

下载PDF 职称材料

CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大

9

作者 杨光 杨凯 +3 位作者 陆莹 杜洪伟 于波 杨爽 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第2期104-107,共4页

目的探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)的影响及CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪在CT-1诱导心肌细胞肥大中的作用。方法利用AngⅡ刺激心肌细胞造成细胞肥大、凋亡,应用CT-1反义脱氧寡核... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对心肌营养素-1(cardiotrophin-1,CT-1)的影响及CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪在CT-1诱导心肌细胞肥大中的作用。方法利用AngⅡ刺激心肌细胞造成细胞肥大、凋亡,应用CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪进行干预。检测心肌细胞大小及3H-亮氨酸掺入率的变化;以及通过逆转录聚合酶链反应观察CT-1 mRNA表达。结果相差显微镜下可见经AngⅡ刺激的心肌细胞面积变大,3H-亮氨酸掺入率增高;CT-1 mRNA表达增加。CT-1反义脱氧寡核苷酸组心肌细胞面积较肥大组减小,3H-亮氨酸掺入率减少;CT-1 mRNA表达亦减少。AG490和川芎嗪减小心肌细胞面积、3H-亮氨酸掺入率,但不影响CT-1 mRNA的表达。结论 CT-1参与心肌细胞肥大,CT-1反义脱氧寡核苷酸、AG490、川芎嗪可减少心肌细胞肥大。 展开更多

关键词 心肌营养素-1 血管紧张素Ⅱ 肥大 反义脱氧寡核苷酸 AG490 川芎嗪

下载PDF 职称材料

硫代反义脱氧寡核苷酸对脑胶质瘤SWO-38细胞的作用

10

作者 郑刚 张积仁 +2 位作者 刘发全 王雄文 张新宇 《广东医学》 CAS CSCD 2002年第10期1020-1022,共3页

目的　研究α1,4半乳糖糖基转移酶 (α1,4GalT)基因硫代反义核酸对脑胶质瘤细胞系SWO -3 8细胞的增值与凋亡的影响及其与Bcl -2和Bax表达的关系。方法　采用脂质体介导的基因转染方法将人工合成α1,4GalT基因反义核酸转入SWO -3 8细胞... 目的　研究α1,4半乳糖糖基转移酶 (α1,4GalT)基因硫代反义核酸对脑胶质瘤细胞系SWO -3 8细胞的增值与凋亡的影响及其与Bcl -2和Bax表达的关系。方法　采用脂质体介导的基因转染方法将人工合成α1,4GalT基因反义核酸转入SWO -3 8细胞中。应用RT -PCR检测对α1,4GalTmRNA表达的影响 ,应用克隆形成实验检测对细胞增殖的作用 ,应用流式细胞术 (FCM)和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡的发生 ,应用FCM检测Bax和Bcl -2表达的变化。结果　反义核酸转染后 ,经RT -PCR检测证实α1,4GalTmRNA基因的表达下降 ;克隆形成试验显示细胞生长明显受到抑制 (P <0 .0 1) ;FCM检测表明 ,导入α1,4GalT基因反义核酸的SWO -3 8细胞的凋亡明显增加 (P <0 .0 1) ,Bcl -2蛋白表达显著下降 (P <0 .0 1) ,而Bax蛋白表达显著提高 (P <0 .0 1)。结论　α1,4GalT基因硫代反义核酸可诱导脑胶质瘤细胞系SWO -3 8细胞凋亡 。 展开更多

关键词 硫代反义脱氧寡核苷酸 脑胶质瘤 α1 4半乳糖糖基转移酶 BCL-2基因 BAX基因 基因转染

下载PDF 职称材料

5′-荧光素标记的RelA反义脱氧寡核苷酸在人白血病细胞HL-60中的分布及稳定性

11

作者 曹文静 张瑶珍 +1 位作者 邓金牛 李登举 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期37-38,42,共3页

目的　比较修饰型及未修饰型 Rel A反义脱氧寡核苷酸 ( AS- ODN)在人白血病细胞 HL- 60中的分布及稳定性。方法　将荧光素 ( FAM)标记的硫代磷酸酯修饰型及未修饰型 AS- ODN经脂质体介导或直接转染人 HL- 60细胞 ,应用荧光显微镜及流式... 目的　比较修饰型及未修饰型 Rel A反义脱氧寡核苷酸 ( AS- ODN)在人白血病细胞 HL- 60中的分布及稳定性。方法　将荧光素 ( FAM)标记的硫代磷酸酯修饰型及未修饰型 AS- ODN经脂质体介导或直接转染人 HL- 60细胞 ,应用荧光显微镜及流式细胞仪观察细胞内荧光的时相分布。结果　发现 1μm ol/ L 修饰型 AS- ODN进入细胞后 ,细胞内荧光强度 6h达到高峰。在有脂质体存在时 ,细胞内荧光明显增强 ,12 h后荧光减弱并逐渐消失 ;而 AS- ODN直接转染细胞 ,细胞内特别是核内荧光强度明显比脂质体组弱。未修饰型 AS- ODN直接或经脂质体介导转染 ,细胞内荧光强度均很弱 ,滞留时间不超过 4h。结论　脂质体可以提高细胞对 AS- ODN的摄取及核聚积 ,而硫代磷酸酯修饰型 展开更多

关键词 荧光素 反义脱氧寡核苷酸 硫代磷酸酯修饰 细胞内稳定性

下载PDF 职称材料

反义脱氧寡核苷酸抑制人卵巢癌HO-8910细胞株中ILK基因的表达

12

作者 李奇 裴俊瑞 +1 位作者 李佩玲 张艳华 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第4期514-517,共4页

目的:探讨整合素连接激酶(integirn-linked kinase,ILK)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)对卵巢癌HO-8910细胞株中ILK基因表达的抑制作用。方法:将ILK反义寡核苷酸(ILK-ASODN)导入卵巢癌细胞株,阻断ILK的表达。转染后72h,... 目的:探讨整合素连接激酶(integirn-linked kinase,ILK)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)对卵巢癌HO-8910细胞株中ILK基因表达的抑制作用。方法:将ILK反义寡核苷酸(ILK-ASODN)导入卵巢癌细胞株,阻断ILK的表达。转染后72h,用RT-PCR和Western-bllot法检测各组卵巢癌细胞ILKmRNA和蛋白表达量的变化。结果:ILK-ASODN处理后,各组卵巢癌细胞mRNA表达量明显下降,与两对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且mRNA表达量随转染浓度的增高而减低;各组蛋白表达量均显著下降,各组与两对照组比较差异有极显著意义(P<0.01),且蛋白表达量随转染浓度增高而减低。结论:ILK-ASODN导入卵巢癌细胞株后可以明显抑制卵巢癌HO-8910细胞株中ILK基因的mRNA表达和蛋白表达。 展开更多

关键词 整合素连接激酶 反义脱氧寡核苷酸 卵巢癌细胞株 蛋白表达

下载PDF 职称材料

脂质体介导Bcl-2反义脱氧寡核苷酸对人卵巢癌细胞作用的研究

13

作者 孟祥凯 陈盼 任常山 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1305-1308,1313,共5页

目的探讨bcl-2反义脱氧寡核苷酸体外转染卵巢癌细胞后,对癌细胞bcl-2基因表达调控作用、诱导其凋亡的作用以及对顺铂敏感性的影响。方法体外培养顺铂耐药的人卵巢上皮性癌细胞系CAOV3,以阳离子脂质体为载体,将bcl-2反义脱氧寡核苷酸片... 目的探讨bcl-2反义脱氧寡核苷酸体外转染卵巢癌细胞后,对癌细胞bcl-2基因表达调控作用、诱导其凋亡的作用以及对顺铂敏感性的影响。方法体外培养顺铂耐药的人卵巢上皮性癌细胞系CAOV3,以阳离子脂质体为载体,将bcl-2反义脱氧寡核苷酸片断作用于CAOV3细胞。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测bcl-2基因的表达;流式细胞仪(FACS)检测转染后CAOV3细胞凋亡的变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色试验检测转染后CAOV3细胞对顺铂敏感性的影响。结果脂质体介导的bcl-2反义脱氧寡核苷酸作用于CAOV3细胞后,bcl-2基因mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.01),并可诱导卵巢癌细胞凋亡,增强卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。结论脂质体介导的bcl-2反义脱氧寡核苷酸作用于CAOV3细胞,可下调bcl-2基因的表达,诱导卵巢癌细胞凋亡,并增强CAOV3细胞对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 卵巢癌 BCL-2 反义脱氧寡核苷酸

下载PDF 职称材料

HSP70反义脱氧寡核苷酸对卵巢癌细胞HO-8910生长凋亡的影响

14

作者 张蕴莉 王莹 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第1期44-47,共4页

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对体外培养的人卵巢癌细胞株HO-8910生长和凋亡的影响。方法取对数生长期HO-8910人卵巢癌细胞,与不同终浓度(5、10、15和20μmol/L)的HSP70 ASODN及正义脱氧寡核苷酸(SODN)共同孵育... 目的探讨热休克蛋白70(HSP70)反义脱氧寡核苷酸(ASODN)对体外培养的人卵巢癌细胞株HO-8910生长和凋亡的影响。方法取对数生长期HO-8910人卵巢癌细胞,与不同终浓度(5、10、15和20μmol/L)的HSP70 ASODN及正义脱氧寡核苷酸(SODN)共同孵育。四甲基偶氮唑蓝光吸收法(MTT)检测细胞增殖情况;流式细胞仪分析细胞DNA含量及细胞周期动力学改变。结果MTT检测表明HSP70 ASODN能够抑制HO-8910细胞增殖,且一定范围内呈浓度、时间依赖性。流式细胞仪检测分析可见亚二倍体峰,凋亡指数(AI)随HSP70 ASODN浓度升高而升高,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期分析提示HSP70 ASODN使细胞停滞于G1/G0期,S期细胞逐渐减少,G2/M期无明显变化。结论HSP70 ASODN可抑制卵巢癌细胞HO-8910生长并可诱导凋亡。 展开更多

关键词 反义脱氧寡核苷酸 热休克蛋白 肿瘤 凋亡

下载PDF 职称材料

聚酰胺树形分子递送survivin反义脱氧寡核苷酸抑制裸鼠肝癌移植瘤 被引量：4

15

作者 姚航 岳隧岩 +3 位作者 金跃明 潘碧峰 高峰 崔大祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第1期36-40,共5页

目的:探讨聚酰胺-胺型(polyamidoamine,PAMAM)树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)对肝癌裸鼠移植瘤及其微血管形成的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射... 目的:探讨聚酰胺-胺型(polyamidoamine,PAMAM)树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)对肝癌裸鼠移植瘤及其微血管形成的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立肝癌裸鼠皮下移植瘤模型。将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-asODN混合得到载反义基因复合物,透射电镜观察复合物的形态、粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物分别注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小;免疫组化方法检测瘤组织中微血管密度(microvesseldensity,MVD);Westernblotting检测移植瘤组织中survivin蛋白的表达。结果:PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.6)vs(193.9±32.2)nm,P<0.01],而zeta电位高于脂质体-survivin-asODN复合物[(37.7±3.8)vs(22.6±2.2)mV,P<0.05];基因包封率两组比较无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组裸鼠移植瘤组织survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(26.8±5.6)vs(37.0±5.9),P<0.05];PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组移植瘤重量低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(124.8±25.2)vs(210.2±33.6)mg,P<0.05],其微血管密度低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(2.8±1.5)vs(6.4±2.7),P<0.05]。结论:PAMAM能将survivin-asODN高效递送到肝癌移植瘤细胞,降低瘤组织中survivin蛋白的表达,可通过抑制移植瘤微血管的形成来抑制癌细胞的生长。 展开更多

关键词 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物 SURVIVIN 反义脱氧寡核苷酸 肝癌 抗微血管形成

下载PDF 职称材料

脂质体转染细胞周期素A反义脱氧寡核苷酸对HL-60细胞增殖及凋亡的调控作用 被引量：5

16

作者 马劼 徐世荣 +6 位作者 贾存荣 贾晋松 王毅 石翠英 石万通 姚银荣 赖永榕 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期304-307,共4页

目的　探讨脂质体转染细胞周期素A(cyclinA)反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖及凋亡的影响。方法　采用脂质体转染技术将cyclinAASON与HL 6 0细胞共同培养 ,用MTT法绘制细胞生长曲线 ,用电镜、细胞原位凋亡检测 (POD)等方法观... 目的　探讨脂质体转染细胞周期素A(cyclinA)反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖及凋亡的影响。方法　采用脂质体转染技术将cyclinAASON与HL 6 0细胞共同培养 ,用MTT法绘制细胞生长曲线 ,用电镜、细胞原位凋亡检测 (POD)等方法观察细胞凋亡 ,用流式细胞术 (FACS)及RT PCR法检测cyclinA、bcl 2表达 ,并通过裸鼠成瘤实验验证cyclinA在白血病发生中的作用。结果　脂质体转染cyclinAASON组和cyclinAASON组的HL 6 0细胞生物抑制率分别为 6 8.9%和 2 4 .8% (P <0 .0 1)。脂质体转染cyclinAASON组cyclinA及bcl 2表达水平 (1.1%和 2 1.9% )较对照组 (38.8%和6 5 .0 % )明显减低 (P值均 <0 .0 1) ,并能检测出DNA断裂 ,观察到凋亡细胞。裸鼠实验中发现脂质体转染cyclinAASON组与对照组相比 ,其成瘤率低 ,成瘤时间延长 ,同一时间成瘤的瘤体体积明显缩小。结论　脂质体转染cyclinAASON能在体外及动物体内明显抑制白血病细胞的生长 ,且有诱导细胞凋亡的作用 ,可能会成为基因治疗的一个新靶点。 展开更多

关键词 脂质体转染细胞周期素A 反义脱氧寡核苷酸 HL-60 细胞增殖 调控作用 细胞凋亡

原文传递

NF—κB亚单位p65反义脱氧寡核苷酸治疗胰腺癌的实验研究 被引量：3

17

作者 储著凌 霍中华 +2 位作者 谢敏 潘一明 朱海涛 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期552-554,共3页

核因子-κB（NF-κB）是细胞分裂和生存的关键调节因子，参与肿瘤发生、增殖、转移等多方面的调控环节，在胰腺癌的发生、发展过程中发挥着重要作用。该实验拟采用NF—κB亚单位p65反义脱氧寡核苷酸（ASODN）体外转染人胰腺癌PANC-1细... 核因子-κB（NF-κB）是细胞分裂和生存的关键调节因子，参与肿瘤发生、增殖、转移等多方面的调控环节，在胰腺癌的发生、发展过程中发挥着重要作用。该实验拟采用NF—κB亚单位p65反义脱氧寡核苷酸（ASODN）体外转染人胰腺癌PANC-1细胞株，以抑制NF—κB在PANC-1中的表达，研究p65 ASODN对人胰腺癌细胞增殖活性及侵袭转移能力的影响，探讨p65ASODN治疗胰腺癌的可行性。 展开更多

关键词 反义脱氧寡核苷酸 人胰腺癌 实验研究 B亚单位 P65 NF 治疗 PANC-1

原文传递

周期蛋白G1反义硫代脱氧寡核苷酸对白血病细胞增殖的调控 被引量：2

18

作者 贾晋松 徐世荣 +5 位作者 贾存荣 马劼 哈森 姚银荣 王毅 石翠英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期48-54,共7页

为了探讨脂质体转染细胞周期蛋白 (cyclin)G1反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖调控的作用 ,用针对cyclinG1mRNA 5′端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL 6 0细胞共培养后 ,用免疫组织化学法和RT PCR分别检测c... 为了探讨脂质体转染细胞周期蛋白 (cyclin)G1反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL 6 0细胞增殖调控的作用 ,用针对cyclinG1mRNA 5′端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL 6 0细胞共培养后 ,用免疫组织化学法和RT PCR分别检测cyclinG1和mRNA水平的表达 ,用电镜、细胞原位凋亡检测法 (POD)、流式细胞术(FCM)及DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡。结果表明 :cyclinG1ASON组与SON及空白对照组相比 ,ASON能特异地抑制cyclinG1及mRNA水平的表达 ,当ASON的浓度达到一定程度时 ,HL 6 0细胞的增殖及集落形成率均明显受抑制 ,出现细胞凋亡 ,并且此作用随ASON浓度的升高而增强。结论 :cyclinG1的特异反义脱氧寡核苷酸能封闭其蛋白及mRNA水平的表达 ,对白血病细胞的增殖有抑制作用 ,并可促使细胞凋亡 ,且有浓度依赖性。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白G1 反义脱氧寡核苷酸 脂质体 白血病

下载PDF 职称材料

小分子干扰RNA联合反义脱氧寡核苷酸靶向逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的研究 被引量：2

19

作者 魏军民 侯明 +2 位作者 李丽珍 孔峰 高鹏 《中华乳腺病杂志（电子版）》 CAS 2008年第4期29-32,共4页

目的探讨针对多药耐药基因(MDR-1)的小分子干扰RNA(siRNAs)和反义脱氧寡核苷酸(asODNs)联合应用逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的作用效果。方法设计并合成针对MDR-1基因同一序列的siRNAs和asODNs及阴性对照siRNAs,采用转染试剂lipofectamin... 目的探讨针对多药耐药基因(MDR-1)的小分子干扰RNA(siRNAs)和反义脱氧寡核苷酸(asODNs)联合应用逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的作用效果。方法设计并合成针对MDR-1基因同一序列的siRNAs和asODNs及阴性对照siRNAs,采用转染试剂lipofectamineTM2000分别转染人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR;利用RT-PCR检测MDR-1mRNA和Western blot检测MDR-1蛋白质的表达;采用罗丹明123外排实验检测P-gp的转运功能,MTT法检测MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药逆转效果。结果siRNAs、asODNs、asODNs和siRNAs联合应用均能降低MDR-1mRNA及其蛋白质表达,提高P-gp的转运功能,使细胞对阿霉素的敏感性明显恢复;asODNs和siRNAs联合应用效果明显提高;低浓度siRNAs(200nmol/L)比高浓度asODNs(5μmol/L)的效果强。结论siRNAs、asODNs能有效逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的多药耐药,asODNs和siRNAs联合应用效果明显加强。 展开更多

关键词 小分干扰RNA 反义脱氧寡核苷酸 基因 MDR-1 抗药性 肿瘤

原文传递

反义脱氧寡核苷酸对培养C_6胶质瘤细胞合成血管内皮生长因子和细胞增殖的影响 被引量：1

20

作者 陈卫国 李志强 +1 位作者 袁先厚 曹长军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期274-275,共2页

目的　研究反义脱氧寡核苷酸 (AODN)对培养C6 细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)和自身增殖的影响。方法　将不同浓度 (1 .0、2 .5、5 .0、1 0 .0 μmol/L)经硫代修饰的正义、反义、错义寡核苷酸分别加入培养的C6 细胞中 ,采用免疫组织化... 目的　研究反义脱氧寡核苷酸 (AODN)对培养C6 细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)和自身增殖的影响。方法　将不同浓度 (1 .0、2 .5、5 .0、1 0 .0 μmol/L)经硫代修饰的正义、反义、错义寡核苷酸分别加入培养的C6 细胞中 ,采用免疫组织化学SP法检测C6 细胞中VEGF蛋白的表达 ,并用噻唑蓝 (MTT)法检测肿瘤细胞的增殖状况。结果　反义寡核苷酸可抑制C6 细胞VEGF蛋白的表达 ,其抑制作用随AODN浓度的升高而增强 ,错义和正义寡核苷酸却无此作用。其中 ,对照组和浓度为 1 .0、2 .5、5 .0、1 0 .0 μmol/LAODN的VEGF阳性细胞率分别为 82 .1 0 %、73 .1 0 %、70 .0 0 %、57.85 %和 53 .2 0 %。但 3种寡核苷酸对C6 细胞增殖均不发生影响。结论　VEGF AODN药物能抑制VEGF蛋白的产生和分泌 。 展开更多

关键词 反义脱氧寡核苷酸 C6胶质瘤细胞 血管内皮生长因子 细胞增殖 影响 细胞培养 基因治疗

原文传递