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枯草芽孢杆菌G10合成表面活性素的发酵条件优化
1
作者 王俊芳 张飘丹 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第3期157-162,共6页
为提高表面活性素的产量,该研究以具有合成表面活性素能力的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)G10菌株为研究对象,利用酸沉淀和甲醇抽提法相结合提取表面活性素,对其表面活性及抑菌性能进行测定,并通过单因素试验和正交试验优化枯草芽孢... 为提高表面活性素的产量,该研究以具有合成表面活性素能力的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)G10菌株为研究对象,利用酸沉淀和甲醇抽提法相结合提取表面活性素,对其表面活性及抑菌性能进行测定,并通过单因素试验和正交试验优化枯草芽孢杆菌G10合成表面活性素的发酵条件及培养基组成。结果表明,表面活性素具有明显的表面活性和抑菌活性,其对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的抑菌圈直径分别为1.8 cm、1.9 cm、1.4 cm。合成表面活性素最优发酵条件为:转速200 r/min,发酵温度30℃,发酵培养基初始pH值为7.5;最优发酵培养基组分为:葡萄糖22 g/L,L-谷氨酸5.0 g/L,Mg SO_(4)0.5 g/L,KCl 0.5 g/L,KH_(2)PO_(4)1 g/L,Fe SO_(4)·7H_(2)O 0.15 g/L,MnSO_(4)0.65 g/L,CuSO_(4)·5H_(2)O 0.16 g/L。在此优化条件下,枯草芽孢杆菌G10发酵表面活性素平均产量为9.89 g/L,表面活性素产量较优化前提高了46.7%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 表面活性素 脂肽 生防菌 发酵条件优化
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链霉菌SS9-1发酵条件优化及其对番茄灰霉病的防治效果研究
2
作者 付麟雲 李晶 +5 位作者 李娜 刘锦霞 丁品 聂垚琰 武建荣 杨成 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期126-136,共11页
本实验室前期从铁棒锤根际土壤样品中分离到一株高加索链霉菌Streptomyces ciscaucasicus SS9-1,抗菌活性试验发现其对番茄灰霉病原菌灰葡萄孢Botrytis cinerea具有较好的抑制作用。为进一步提高其对番茄灰霉病的抑菌效果,采用单因素试... 本实验室前期从铁棒锤根际土壤样品中分离到一株高加索链霉菌Streptomyces ciscaucasicus SS9-1,抗菌活性试验发现其对番茄灰霉病原菌灰葡萄孢Botrytis cinerea具有较好的抑制作用。为进一步提高其对番茄灰霉病的抑菌效果,采用单因素试验、正交试验对SS9-1进行发酵培养基配方和发酵条件优化,并对其发酵滤液进行了番茄灰霉病的抑菌作用试验及盆栽防治效果试验。结果表明,菌株SS9-1最佳发酵配方为:可溶性淀粉4%、KNO_(3)1%、酵母浸粉0.25%、NaCl 0.2%、MnCl_(2)·4H_(2)O 0.002%;最佳发酵条件为:装液量150 mL、接种量3%、初始pH 8.0、发酵温度28℃、发酵时间7 d。平板对峙试验发现,番茄灰霉病菌丝受发酵滤液影响后,出现膨大畸变现象;菌株SS9-1对番茄灰霉菌孢子的萌发也具有很强的抑制作用,处理12、24h后萌发抑制率分别为97.83%和96.07%。盆栽试验中,菌株SS9-1发酵滤液原液防治效果达到了98.43%,明显高于药剂对照40%嘧霉胺SC 500倍稀释液;发酵滤液稀释50倍后防治效果依然达71.11%。综上,菌株SS9-1对番茄灰霉病具有很好的生物防治效果,具有作为生防制剂的应用价值和潜力。 展开更多
关键词 链霉菌 番茄灰霉病 发酵条件优化 生物防治
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黄鳝来源阿氏芽孢杆菌的筛选及发酵条件优化
3
作者 郑菲菲 何鑫 +5 位作者 尹丽 张靖悦 祝东梅 高坚 宋玉峰 赵玉华 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第3期73-78,共6页
试验旨在从人工养殖的黄鳝体内分离高产蛋白酶菌株,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源,以解决黄鳝摄食率低、消化不完全及水体氮污染等问题。通过采用脱脂奶粉培养基透明圈法初筛和Folin-酚法测定酶活复筛相结合... 试验旨在从人工养殖的黄鳝体内分离高产蛋白酶菌株,为后续微生物蛋白酶的制备和微生态制剂的开发提供菌种资源,以解决黄鳝摄食率低、消化不完全及水体氮污染等问题。通过采用脱脂奶粉培养基透明圈法初筛和Folin-酚法测定酶活复筛相结合的方式筛选人工养殖黄鳝肠道中的高产蛋白酶菌株,通过溶血试验与药敏试验检测菌株安全性,并进行常规生化和分子生物学鉴定。通过单因素和正交试验优化其发酵条件,筛选到一株高产蛋白酶、产过氧化氢酶的菌株Ma-4,初步鉴定其为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)。该菌株最适产酶条件为发酵时间48 h、发酵温度36℃、可溶性淀粉添加量15 g/L、牛肉浸粉添加量15 g/L和pH值6.0。优化后菌株酶活力为288.14 U/mL,较优化前提高了3.34倍。研究表明,菌株Ma-4为高产蛋白酶、产过氧化氢酶、不溶血、不耐药的阿氏芽孢杆菌,该菌株为开发黄鳝微生态制剂开拓了菌种资源。 展开更多
关键词 黄鳝 阿氏芽孢杆菌 筛选鉴定 安全性评价 发酵条件优化
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红色诺卡氏菌高产菌的ARTP诱变选育与发酵条件优化
4
作者 陈洲琴 张祝兰 +3 位作者 杨煌建 程贤 严凌斌 连云阳 《化学与生物工程》 CAS 北大核心 2024年第3期46-52,共7页
以红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)FIM-PO8为出发菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)技术进行诱变,经筛选获得遗传较稳定的Nocardia rubra高产菌株FIM-PO8-16,并通过单因素实验和正交实验优化了菌株FIM-PO8-16的发酵工艺。确定最佳发酵培养... 以红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)FIM-PO8为出发菌株,采用常压室温等离子体(ARTP)技术进行诱变,经筛选获得遗传较稳定的Nocardia rubra高产菌株FIM-PO8-16,并通过单因素实验和正交实验优化了菌株FIM-PO8-16的发酵工艺。确定最佳发酵培养基组分为:酵母粉2.5%、葡萄糖2.5%、蛋白胨0.5%、糊精1.0%;最佳发酵条件为:种子液菌龄30 h、初始pH值7.2、接种量2.0%、装料量100 mL/500 mL、转速230 r·min^(-1)、发酵温度32℃。在此条件下,FIM-PO8-16菌体细胞浓度大幅提高,达到8.31%。 展开更多
关键词 红色诺卡氏菌 常压室温等离子体(ARTP) 发酵条件优化 单因素实验 正交实验
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一株蜡样芽孢杆菌产抑菌物质发酵条件优化及抑菌效果研究
5
作者 戴悦 彭金菊 +5 位作者 张腾月 谢星朋 罗帅帅 谭绮梅 文娇 马驿 《安徽农业科学》 CAS 2024年第6期6-9,共4页
从广东湛江红树林自然保护区的红树植物根际土壤中分离筛选出一株广谱抑菌效果的菌株蜡样芽孢杆菌M15,对菌株M15进行发酵培养条件优化,采用特定发酵培养基的基础上,控制单一变量,对装液量、接种量、发酵温度和发酵时间进行优化,并对其... 从广东湛江红树林自然保护区的红树植物根际土壤中分离筛选出一株广谱抑菌效果的菌株蜡样芽孢杆菌M15,对菌株M15进行发酵培养条件优化,采用特定发酵培养基的基础上,控制单一变量,对装液量、接种量、发酵温度和发酵时间进行优化,并对其抑菌活性物质的酸碱稳定性、热稳定性和蛋白酶耐受性进行测定。结果表明:菌株M15的发酵条件为装液量30 mL、接种量2%、发酵温度30℃、发酵时间120 h时,发酵液的抑菌效果最佳,对大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌抑菌圈直径均为17 mm,金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为15 mm;发酵培养基pH小于5.0或者大于6.0时,抑菌活性丧失;菌株M15的发酵液抑菌活性在30~60℃较稳定,但≥80℃时,发酵液抑菌物质失去活性;抑菌物质对胰蛋白酶不敏感,对木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶E和蛋白酶K敏感。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 抑菌物质 发酵条件优化 抑菌效果
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大曲中产酯化酶霉菌的分离筛选及发酵条件优化
6
作者 曹新志 钟利明 +3 位作者 谢进 张凤婷 李书源 杨建刚 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第4期129-134,共6页
为提高大曲己酸乙酯的产量,该研究采用传统培养分离法从五粮液大曲中分离筛选高产酯化酶的霉菌,通过形态学特征观察并结合18S rDNA序列分析鉴定筛选菌株,并以酯化酶活力为响应值,以蔗糖添加量、尿素添加量、发酵温度及发酵时间为自变量... 为提高大曲己酸乙酯的产量,该研究采用传统培养分离法从五粮液大曲中分离筛选高产酯化酶的霉菌,通过形态学特征观察并结合18S rDNA序列分析鉴定筛选菌株,并以酯化酶活力为响应值,以蔗糖添加量、尿素添加量、发酵温度及发酵时间为自变量,采用单因素试验及响应面试验优化其发酵条件。结果表明,筛选得到一株高产酯化酶的霉菌,编号为GQ342847,经鉴定为总状横梗霉(Lichtheimia ramose),其产酯化酶的最优发酵条件为蔗糖22 g/L,尿素58 g/L,发酵温度35℃,发酵时间6 d,转速150 r/min,在此优化条件下酯化酶活力可达7.67 U/mL,是优化前(5.62 U/mL)的1.3倍。 展开更多
关键词 大曲 酯化酶 霉菌 分离 筛选 鉴定 发酵条件优化
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高产酯酶格氏乳球菌的ARTP-UV复合诱变选育及发酵条件优化
7
作者 蔡岭肸 陈晓松 +1 位作者 邹伟 汤秀娟 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第2期125-133,共9页
以实验室前期筛选保藏的格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)S5-4为出发菌株,采用多轮次常压室温等离子体-紫外(ARTPUV)复合诱变对出发菌株S5-4进行诱变选育,以产酯酶酶活为评价指标,得到一株高产酯酶突变株ARUV3-26,其产酯酶活力达到(25.... 以实验室前期筛选保藏的格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)S5-4为出发菌株,采用多轮次常压室温等离子体-紫外(ARTPUV)复合诱变对出发菌株S5-4进行诱变选育,以产酯酶酶活为评价指标,得到一株高产酯酶突变株ARUV3-26,其产酯酶活力达到(25.88±0.02)U/mL,较原始菌株S5-4提高了64.42%。经15代传代测试后,突变菌株ARUV3-26产酯酶活力稳定在(23.51±0.02)~(23.56±0.02)U/mL,与原始菌株S5-4相比提高了49.36%~49.68%。生理耐受性试验表明,突变株ARUV3-26与原始菌株S5-4相比,温度耐受性、pH耐受性、葡萄糖耐受性、乙醇耐受性、丁酸和己酸耐受性均有提升。通过单因素试验优化最佳培养基组分为:葡萄糖20 g/L,蛋白胨15 g/L,NaCl 5 g/L。通过单因素和响应面试验优化突变株ARUV3-26发酵条件为发酵时间3.0 d、发酵温度为30℃、初始pH值为7.0。此优化条件下,突变菌株ARUV3-26的产酯酶活力为(30.67±0.17)U/m L,比原始菌株S5-4的产酯酶能力提高了30.45%。 展开更多
关键词 酯酶 格氏乳球菌 复合诱变 响应面法 发酵条件优化
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铜绿假单胞菌Gxun-2产铁载体发酵条件优化及其抑菌效果
8
作者 李枢妍 何艳丽 +6 位作者 宋超东 黄夏至 陆君铭 李时勇 张红岩 申乃坤 姜明国 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第10期118-125,共8页
鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)Gxun-2分泌铁载体类型,确定其最佳发酵工艺条件,同时考察铁载体发酵液对植物病原菌拮抗效果,为该菌株在农业中的应用提供理论依据。本试验先用铬天青(chrome azurol sulfonate,CAS)平板和全波... 鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)Gxun-2分泌铁载体类型,确定其最佳发酵工艺条件,同时考察铁载体发酵液对植物病原菌拮抗效果,为该菌株在农业中的应用提供理论依据。本试验先用铬天青(chrome azurol sulfonate,CAS)平板和全波段紫外光吸收法对P.aeruginosa Gxun-2产铁载体进行定性和定量分析,进一步通过单因素、Plackett-Burman及正交试验相结合的方法对其产铁载体培养基及培养条件进行了优化,最后利用平板对峙法测定产铁载体发酵液对香蕉枯萎病病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)的拮抗效果。结果表明,菌株Gxun-2所产铁载体类型为异羟肟酸型,确定产铁载体最佳发酵工艺为:琥珀酸钠2 g/L、甘油10 g/L、硫酸铵1 g/L,初始pH6.8、温度35℃、接种量1%(v/v)、装液量140 mL/250 mL;在此条件下,菌株Gxun-2产铁载体活性单位(Su)达到81.20%±0.24%,较优化前提高了82.84%±0.82%,对FOC的抑菌率达70.60%±1.87%,较优化前提高了52.68%±4.23%。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 铁载体 发酵条件优化 尖孢镰刀菌 拮抗作用
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地生弯颈霉C41-3产低温脂肪酶发酵条件优化
9
作者 孙蕊 苏丹 +1 位作者 张文浩 吕国忠 《安徽农业科学》 CAS 2024年第2期1-4,共4页
[目的]优化地生弯颈霉C41-3产低温脂肪酶发酵条件,为扩大低温脂肪酶的应用提供理论依据。[方法]使用棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)比色法测定脂肪酶的活性。[结果]最佳发酵培养基为胰蛋白胨40 g/L、α-乳糖20 g/L、MnSO_(4)·H_(2)O 1 g/... [目的]优化地生弯颈霉C41-3产低温脂肪酶发酵条件,为扩大低温脂肪酶的应用提供理论依据。[方法]使用棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)比色法测定脂肪酶的活性。[结果]最佳发酵培养基为胰蛋白胨40 g/L、α-乳糖20 g/L、MnSO_(4)·H_(2)O 1 g/L、NH_(4)NO_(3)1 g/L、乳化芥花油20 mL;最佳发酵条件为pH 5、发酵温度15℃、培养时间4 d。优化后,地生弯颈霉C41-3的脂肪酶活性从199.40 U/mL增加至5700.72 U/mL,脂肪酶活性增加了约27.6倍。[结论]该新型脂肪酶具有潜在的工业应用价值。 展开更多
关键词 低温脂肪酶 地生弯颈霉C41-3 发酵条件优化
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1株烟曲霉产耐热纤维素酶发酵条件优化及酶学性质研究
10
作者 曹平华 李晓霞 +4 位作者 李旺 赵龙妹 丁轲 李元晓 何万领 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4414-4423,共10页
【目的】优化1株产耐热纤维素酶烟曲霉的最适产酶条件,分析所产酶液对秸秆的纤维降解效果,为其在纤维素物质生物降解中的应用提供依据。【方法】利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定前期研究分离的烟曲霉WL002产纤维素酶的活性,并分析其酶... 【目的】优化1株产耐热纤维素酶烟曲霉的最适产酶条件,分析所产酶液对秸秆的纤维降解效果,为其在纤维素物质生物降解中的应用提供依据。【方法】利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定前期研究分离的烟曲霉WL002产纤维素酶的活性,并分析其酶学性质;采用单次单因子法和正交试验对其产酶的培养条件和发酵培养基进行优化;利用体外发酵法分析粗酶对不同粗饲料的纤维降解效果。【结果】酶学性质分析表明,菌株WL002所产纤维素酶的最适反应pH为7.0,pH 6.0~8.0保存0.5和1 h后,残余酶活为74%~95%和56%~90%;最适反应温度为60℃,70℃保温0.5~1.5 h后,残余酶活为70%~80%。产酶条件优化结果显示,孢子悬液以7%比例接种至含1.0%蛋白胨、2.0%小麦秸秆粉、pH为7.0的发酵培养基,50℃培养48 h,菌株WL002所产粗酶的内切葡聚糖酶活性最高,达3.11 U/mL。利用菌株WL002所产粗酶处理小麦秸秆和玉米秸秆60 h,其粗纤维降解率分别为6.1%和4.7%。【结论】烟曲霉WL002菌株所产的纤维素酶具有较宽泛的pH适应性和较强的热耐受性,对饲料粗纤维具有一定的降解能力。本研究初步获得了该菌的最优发酵条件,为其后续开发应用奠定了基础。 展开更多
关键词 纤维素酶 烟曲霉 酶学性质 发酵条件优化
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藜麦内生细菌LS3发酵条件优化及其抑菌机制初探
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作者 秦楠 任璐 +2 位作者 吕红 殷辉 赵晓军 《山西农业科学》 2023年第10期1210-1218,共9页
藜麦黑茎病是危害藜麦的主要病害之一,可引起藜麦倒伏、籽粒空瘪和不育,严重影响藜麦籽粒的产量和品质。前期从藜麦穗中分离获得1株对藜麦黑茎病菌(Ascochyta caulina)具有良好抑菌活性的内生细菌,命名为LS3,为进一步开发应用该菌株,采... 藜麦黑茎病是危害藜麦的主要病害之一,可引起藜麦倒伏、籽粒空瘪和不育,严重影响藜麦籽粒的产量和品质。前期从藜麦穗中分离获得1株对藜麦黑茎病菌(Ascochyta caulina)具有良好抑菌活性的内生细菌,命名为LS3,为进一步开发应用该菌株,采用单因素试验法对LS3菌株的最佳培养基、碳源、氮源、温度进行筛选,对其发酵条件进行优化,采用鉴定培养基法对LS3菌株的抑菌活性物质进行检测,对其抑菌机制进行初探。结果表明,LS3菌株发酵所需最佳培养基为YSP培养基,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为牛肉膏+酵母粉,发酵最佳温度为28℃。对转速、装液量、接种量、pH以及发酵时间5个因素进行正交发酵优化,结合方差分析,并考虑成本因素,最终确定LS3菌株最佳发酵条件为:转速130 r/min,装液量150 mL/300 mL,接种量1%,pH值7.0,发酵时间96 h。对LS3菌株细胞壁降解酶活性检测发现,LS3菌株可分泌β-1,4-葡聚糖酶和胞外蛋白酶,但不能产生几丁质酶和β-l,3-葡聚糖酶。 展开更多
关键词 藜麦黑茎病菌 内生细菌 抑菌作用 鉴定培养基法 发酵条件优化
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链霉菌F01菌株对TMV的抗性及其发酵条件优化
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作者 郝兴安 杨焓 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第5期92-100,共9页
【目的】从源自秦岭的土壤微生物中筛选具有抗病毒活性的生防菌并进行分类鉴定,对其抗烟草花叶病毒(TMV)的作用方式进行研究并对发酵条件进行优化,为防治烟草花叶病毒病提供新资源。【方法】采用土壤分离法分离生防菌,采用形态学和分子... 【目的】从源自秦岭的土壤微生物中筛选具有抗病毒活性的生防菌并进行分类鉴定,对其抗烟草花叶病毒(TMV)的作用方式进行研究并对发酵条件进行优化,为防治烟草花叶病毒病提供新资源。【方法】采用土壤分离法分离生防菌,采用形态学和分子生物学方法对其进行分类鉴定。采用无菌过滤法制备F01菌株发酵液,以心叶烟为材料,采用半叶枯斑法测定生防菌F01菌株抗TMV的作用方式,并采用单因素法优化F01菌株的发酵体系。【结果】从秦岭土壤中分离到1株生防放线菌株F01,经形态学和分子生物学鉴定为链霉菌。F01菌株发酵液对烟草花叶病毒具有良好的防治效果,其抗病作用方式包括体外病毒钝化和体内诱导抗病性,对TMV的抑制率为74.2%。优化后的发酵体系为:以高氏1号为培养基,以小米粉和酪蛋白胨为碳、氮源,在28℃、pH 8.0条件下培养5 d,发酵液对TMV有显著的抑制效果,抑制率为81.7%。【结论】分离得到的链霉菌F01菌株具有良好的抗TMV活性,优化后的发酵条件简单,发酵产物对TMV有显著抑制效果,具有进一步开发为抗TMV工程菌株的潜力。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 链霉菌 发酵条件优化 生物防治
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2株烟草病害拮抗细菌的分离鉴定和发酵条件优化研究
13
作者 施春兰 曾舒泉 +6 位作者 王志江 谢永辉 詹莜国 黄永迪 吴国星 高熹 秦得强 《江西农业学报》 CAS 2023年第7期81-90,共10页
从健康烟株根际土壤中分离得到了2株拮抗细菌菌株Gj7和Gj9。采用平板对峙试验方法探究了这2个菌株对4种烟草病原真菌的抑制效果,通过形态特征观察、生理生化特征测定和16S rDNA基因序列分析对这2个菌株的分类地位进行了鉴定,并采用单因... 从健康烟株根际土壤中分离得到了2株拮抗细菌菌株Gj7和Gj9。采用平板对峙试验方法探究了这2个菌株对4种烟草病原真菌的抑制效果,通过形态特征观察、生理生化特征测定和16S rDNA基因序列分析对这2个菌株的分类地位进行了鉴定,并采用单因素试验方法对其发酵条件进行了优化。试验结果表明:Gj7和Gj9对烟草黑胫病、赤星病、靶斑病、根腐病菌的抑制率均在60%以上,且这2株菌的挥发性物质对4种病原菌也有抑制效果。初步鉴定Gj7菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),Gj9菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。Gj7菌株的最佳发酵培养基配方为蛋白胨1.00 g,酵母浸粉0.50 g,蔗糖2.00 g,蒸馏水100 mL;其最佳发酵条件为pH值8,转速240 r/min,装液量60 mL,温度24℃,发酵时间为22 h。Gj9菌株的最佳发酵培养基配方为蛋白胨1.00 g,酵母浸粉0.50 g,葡萄糖2.00 g,蒸馏水100 mL;其最佳发酵条件为pH值6,转速240 r/min,装液量30 mL,温度36℃,发酵时间14 h。 展开更多
关键词 烟草 病原菌 芽孢杆菌 抑菌作用 分离和鉴定 发酵条件优化
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黄粉虫致病菌的分离鉴定、发酵条件优化及其对植物病原菌的抑制作用
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作者 汤永玉 李海亚 +4 位作者 兰明先 梁晨 张曼 吴国星 高熹 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1146-1156,共11页
【目的】研究黄粉虫病死幼虫体内的致病菌、致病菌抑制植物病原菌的效果及其最佳发酵条件,为有效防控黄粉虫病害及利用致病菌进行农业病虫害生物防治提供科学依据。【方法】以罹病死亡的黄粉虫幼虫为材料,利用平板涂布法及划线法分离致... 【目的】研究黄粉虫病死幼虫体内的致病菌、致病菌抑制植物病原菌的效果及其最佳发酵条件,为有效防控黄粉虫病害及利用致病菌进行农业病虫害生物防治提供科学依据。【方法】以罹病死亡的黄粉虫幼虫为材料,利用平板涂布法及划线法分离致病菌;依据柯赫氏法则测定致病菌的致病性;通过形态学观察、生理生化测定和16S rDNA序列分析确定致病菌株的分类地位;采用平板对峙法测定致病菌对12种供试植物病原真菌的抑制效果;利用单因素试验对致病菌的发酵条件进行优化。【结果】从罹病黄粉虫虫体中分离获得3株致病菌,从中筛选出致病效果最好的菌株并命名为WU-1,其对黄粉虫幼虫的致死率为58.00%;WU-1菌株对供试12种植物病原真菌具有广谱抑菌性,抑菌率为60.54%~78.33%。结合WU-1菌株菌落形态特征、生理生化测定和16S rDNA序列分析结果,将WU-1菌株鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。WU-1菌株发酵条件优化结果表明,其最适培养基为YSP培养基;最适发酵条件为250 mL三角瓶装液量30 mL、初始pH 8、接菌量50μL、培养温度40℃、转速240 r/min、发酵时间24 h。【结论】优化的发酵方案可用于快速、大批量培养WU-1菌悬液。WU-1菌株对黄粉虫幼虫具有较好的致病效果,可为鞘翅目害虫防治提供参考。该菌株对12种植物病原真菌具有良好的抑制作用,可作为研制植物病害生物防治菌剂的备选菌株。 展开更多
关键词 黄粉虫 贝莱斯芽孢杆菌 抑制作用 鉴定 发酵条件优化
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高产磷脂酶D的蜡样芽孢杆菌诱变筛选及发酵条件优化
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作者 王天一 刘欢 +1 位作者 王芳 邓利 《北京化工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期71-79,共9页
蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种天然的磷脂酶D(PLD)生产菌株,为了提高PLD产量,以野生型蜡样芽孢杆菌(B.cereus CICC 20551)为出发菌,使用紫外线和硫酸二乙酯对其进行复合诱变,通过建立的PLD活性高效筛选方法,从大量突变样本中筛... 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种天然的磷脂酶D(PLD)生产菌株,为了提高PLD产量,以野生型蜡样芽孢杆菌(B.cereus CICC 20551)为出发菌,使用紫外线和硫酸二乙酯对其进行复合诱变,通过建立的PLD活性高效筛选方法,从大量突变样本中筛选得到一株高产PLD的蜡样芽孢杆菌S6-UD46。将该菌株摇瓶发酵48 h,产酶量达到0.52 U/mL,相比原始菌株(0.32 U/mL)提高了62.5%。对诱导产酶条件与培养基成分进行了优化,确定最佳发酵条件为:以20 g/L牛肉膏为氮源,10 g/L蔗糖为碳源,在600 nm波长下的光密度(OD600)达到4左右时加入40 g/L卵磷脂(磷脂酰胆碱含量>90%)对突变菌株S6-UD46进行诱导产酶,在37℃、200 r/min下培养48 h,PLD酶活性可达3.22 U/mL,是优化前的6.19倍。 展开更多
关键词 磷脂酶D 蜡样芽孢杆菌 诱变筛选 发酵条件优化
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枯草芽孢杆菌8-32产吲哚乙酸发酵条件优化
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作者 王冬云 高峰 +3 位作者 刘笑稳 董欣宇 高同国 朱宝成 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS 北大核心 2023年第5期127-134,共8页
前期研究中筛选出1株拮抗多种植物病原真菌的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)8-32,具有产吲哚乙酸(indoleacetic acid,IAA)的能力。为提升其IAA的产量,对该8-32菌株产IAA的发酵培养基组成和发酵培养条件进行优化。利用单因素试验确定... 前期研究中筛选出1株拮抗多种植物病原真菌的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)8-32,具有产吲哚乙酸(indoleacetic acid,IAA)的能力。为提升其IAA的产量,对该8-32菌株产IAA的发酵培养基组成和发酵培养条件进行优化。利用单因素试验确定培养基中最优碳源为蔗糖,氮源为蛋白胨,无机盐为NaCl;利用Plackett-Burman试验确定影响菌株8-32产IAA的3个显著因素,并利用最陡爬坡试验和Box-Behnken试验,确定3个显著因素的最适范围及最优配比,并通过响应面分析找到中心点。最终确定枯草芽孢杆菌8-32产IAA的最适发酵培养基构成及发酵条件如下:蔗糖50 g·L^(-1)、NaCl 0.3 g·L^(-1)、蛋白胨79.2 g·L^(-1)、发酵时间96 h、装液量56.17 mL·瓶^(-1)(250 mL三角瓶)、pH 7.0。发酵液中IAA含量由优化前的8.48 mg·L^(-1)提升至优化后的65.06 mg·L^(-1)。回归模型的预测值与实测值相差小于0.05%,表明模型预测值可靠,优化工艺可行。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 吲哚乙酸 发酵条件优化 响应面分析
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贝莱斯芽孢杆菌BA-300的鉴定、发酵条件优化及应用
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作者 赵金 高子晴 丛丽娜 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2023年第3期176-180,共5页
为了获得在农业生物防治具有广谱抗菌作用的芽孢杆菌类益生菌,经多轮分离筛选,确定了一株对多种致病菌均具有较好抑菌效果的BA-300菌株。经16S rDNA测序比对、形态特征观察和生理生化分析,鉴定菌株BA-300为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus vele... 为了获得在农业生物防治具有广谱抗菌作用的芽孢杆菌类益生菌,经多轮分离筛选,确定了一株对多种致病菌均具有较好抑菌效果的BA-300菌株。经16S rDNA测序比对、形态特征观察和生理生化分析,鉴定菌株BA-300为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。为提高抑菌活性,对菌株BA-300发酵条件进行优化。从6种常见的细菌培养基中筛选出最佳培养基,对时间、温度和pH三种发酵条件进行优化。将稀释5倍和10倍的菌株BA-300发酵液分别喷洒到樱桃树上,结果表明,稀释5倍的发酵液实验组对樱桃树叶片细菌性穿孔病的防治效果可以达到78.4%,稀释10倍的实验组也能达到70.0%。与对照组相比,樱桃产量有明显提高,说明贝莱斯芽孢杆菌BA-300有较高的生物防治作用。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 发酵条件优化 细菌性穿孔病 生物防治
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小麦茎基腐病拮抗菌发酵条件优化及稳定性评价
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作者 张强 吴利民 +3 位作者 李朋燕 赵娜 户申奥 陆宁海 《河南农业科学》 北大核心 2023年第5期121-129,共9页
为探究解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)HB-081对小麦茎基腐病原假禾谷镰刀菌(Fusarium pseudograminearum)的生防活性,采用单因素试验和正交试验对菌株HB-081发酵条件进行优化,对无菌发酵液的稳定性进行分析,并通过盆栽试... 为探究解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)HB-081对小麦茎基腐病原假禾谷镰刀菌(Fusarium pseudograminearum)的生防活性,采用单因素试验和正交试验对菌株HB-081发酵条件进行优化,对无菌发酵液的稳定性进行分析,并通过盆栽试验测定菌株HB-081的生防效果。结果表明,菌株HB-081最适培养基配方为麦芽糖10.0 g/L、蛋白胨15.0 g/L、氯化钾5.0 g/L;最适发酵初始pH值为6、温度为28~32℃、装液量为50~75 mL、接种量为2%~4%、发酵时间为48 h。无菌发酵液可以耐受100℃高温,紫外线照射180 min抑菌活性不受影响,不耐强酸和强碱,不受胃蛋白酶、胰蛋白酶及蛋白酶K的影响。通过PCR检测发现,该菌株具有脂肽类物质合成基因bacAB和fenB。盆栽试验结果表明,优化后的菌株HB-081发酵液对小麦茎基腐病的防治效果为69.74%,高于原始发酵液的防治效果(64.31%)。 展开更多
关键词 小麦茎基腐病 拮抗菌 假禾谷镰刀菌 解淀粉芽孢杆菌 发酵条件优化 稳定性 生物防治
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黑枸杞风味酸奶发酵条件优化及低聚果糖和水苏糖对其品质的影响 被引量：1
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作者 贾庆超 李望铭 韩亚飞 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第3期187-193,共7页
该研究以黑枸杞、牛奶为主要原料制备黑枸杞风味酸奶,以感官评分和乳酸菌总数为考察指标,采用单因素试验和响应面法对黑枸杞风味酸奶的发酵工艺条件进行优化,并考察低聚果糖和水苏糖对黑枸杞风味酸奶品质的影响。结果表明,黑枸杞风味酸... 该研究以黑枸杞、牛奶为主要原料制备黑枸杞风味酸奶,以感官评分和乳酸菌总数为考察指标,采用单因素试验和响应面法对黑枸杞风味酸奶的发酵工艺条件进行优化,并考察低聚果糖和水苏糖对黑枸杞风味酸奶品质的影响。结果表明,黑枸杞风味酸奶的最佳发酵工艺条件为白砂糖添加量8.9%,黑枸杞汁添加量4.1%,羧甲基纤维素钠添加量0.3%,接种量2.2%。在此优化条件下,黑枸杞风味酸奶的感官评分为89.48分,乳酸菌总数为1.3×10^(9)CFU/mL。当低聚果糖和水苏糖添加量分别为1.8%和0.8%时,黑枸杞风味酸奶乳酸菌总数分别提高7.08倍和5.6倍,酸度分别降低23.4%和20.2%,蛋白质含量分别升高65.2%和61.3%,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率分别提高22.7%和26.5%,表明低聚果糖和水苏糖可使黑枸杞风味酸奶抗氧化性增强。 展开更多
关键词 黑枸杞 风味酸奶 低聚果糖 水苏糖 发酵条件优化 响应面法
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乳酸菌产胞外多糖的发酵条件优化及其抗氧化活性研究
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作者 蒋光阳 田永强 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第4期187-195,共9页
该研究从实验室保藏的17株乳酸菌中筛选高产胞外多糖(EPS)菌株,结合形态学观察与分子生物学技术对其进行鉴定,采用单因素试验和响应面法对其产胞外多糖发酵条件进行优化,并分析胞外多糖结构和抗氧化活性。结果表明,筛选得到一株高产EPS... 该研究从实验室保藏的17株乳酸菌中筛选高产胞外多糖(EPS)菌株,结合形态学观察与分子生物学技术对其进行鉴定,采用单因素试验和响应面法对其产胞外多糖发酵条件进行优化,并分析胞外多糖结构和抗氧化活性。结果表明,筛选得到一株高产EPS菌株E8,经鉴定其为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。菌株E8最佳发酵工艺条件为:蔗糖添加量5%,蛋白胨和大豆蛋白胨(1∶1)添加量2.5%,发酵时间58 h,接种量3.7%,初始p H值5.85。在此优化条件下,胞外多糖产量为1 516.62 mg/L。结构表征结果表明,胞外多糖中存在吡喃糖环,糖苷键构型为α-型,微观结构呈片状。抗氧化结果表明,当EPS质量浓度为9 mg/m L时,对1,1二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)和羟基自由基的清除能力分别为(62.62±1.52)%、(55.17±1.44)%和(63.91±2.71)%。 展开更多
关键词 乳酸菌 胞外多糖 分离鉴定 发酵条件优化 响应面法 抗氧化活性
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