PD98059抑制大鼠听泡成骨细胞增殖及分化

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作者 黄玉 刘豆 +1 位作者 黄文霞 梁耕田 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2024年第2期155-161,共7页

目的 探究ERK抑制剂PD98059对大鼠听泡成骨细胞增殖及分化的影响。方法 用0.25%胰酶和I型胶原酶两步消化法提取SD乳鼠听泡成骨细胞,分别与浓度为0、10、25和50μmol/L的ERK抑制剂PD98059进行共培养,然后采用EDU法连续4天对4组成骨细胞... 目的 探究ERK抑制剂PD98059对大鼠听泡成骨细胞增殖及分化的影响。方法 用0.25%胰酶和I型胶原酶两步消化法提取SD乳鼠听泡成骨细胞,分别与浓度为0、10、25和50μmol/L的ERK抑制剂PD98059进行共培养,然后采用EDU法连续4天对4组成骨细胞的增殖进行检测,对各组增殖趋势进行对比分析。用10 mmol/L、50μg/ml和10^(-7) mol/L的浓度的β-甘油磷酸钠、L-维生素C和地塞米松对4组成骨细胞进行成骨诱导分化,24 h后采用RT-qPCR技术检测各组成骨相关因子Ocn、Bsp、Runx2、Bmp2、OPG和RANKL mRNA的表达水平,分析结果。结果 浓度为10、25和50μmol/L的ERK抑制剂PD98059对SD乳鼠听泡成骨细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,其中浓度为10μmol/L的PD98059对其增殖的抑制作用明显大于其余3组(P<0.05)。此外,上述不同浓度的PD98059对Ocn、Bsp、Runx2、Bmp2和OPG mRNA的表达均有不同程度的抑制作用,其中Ocn、Bsp、Runx2和Bmp2 mRNA的表达在10μmol/L的PD98059组明显低于0、25和50μmol/L的PD98059组(P<0.05);OPG mRNA的表达在10和25μmol/L的PD98059组明显低于0和50μmol/L的PD98059组(P<0.05),而前二者间的差异并无明显统计学意义(P>0.05)。RANKL mRNA的表达在各组中均未检测出CT值。结论 ERK通路抑制剂PD98059对SD乳鼠听泡成骨细胞的增殖和分化均有抑制作用,推测ERK1/2-MAPK通路可能通过影响大鼠听泡成骨细胞的增殖与分化而介导了鼓室硬化的形成。 展开更多

关键词 听泡 成骨细胞 PD98059 增殖 分化

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大鼠听泡原代成骨细胞分离培养及鉴定

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作者 黄玉 刘豆 +1 位作者 黄文霞 梁耕田 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期439-443,共5页

目的对SD大鼠听泡的原代成骨细胞进行分离培养及鉴定。方法选取6只出生24 h的SD乳鼠,从颞区无菌分离出听泡组织,经0.25%胰蛋白酶和I型胶原酶消化后接种培养;待生长融合至80%密度时,进行传代培养,于倒置显微镜下观察原代及传代成骨细胞... 目的对SD大鼠听泡的原代成骨细胞进行分离培养及鉴定。方法选取6只出生24 h的SD乳鼠,从颞区无菌分离出听泡组织,经0.25%胰蛋白酶和I型胶原酶消化后接种培养;待生长融合至80%密度时,进行传代培养,于倒置显微镜下观察原代及传代成骨细胞的生长状态,并用EDU法分析其增殖趋势。对生长良好的细胞进行成骨诱导分化,并用ALP试剂盒和茜素红试剂盒进行染色分析,鉴定分化效果。结果大鼠听泡原代及传代成骨细胞培养中,细胞均贴壁良好、生长旺盛,第2 d分别可融合生长至50%、30%的密度,第4 d分别可融合生长至80%、70%的密度,形态呈现多样化。EDU法检测分析见:第1~4 d细胞增殖比均维持在较高水平,从第5 d起呈直线下降趋势。经诱导分化后,细胞生长状态良好,形态依旧多样化,早期以梭形为主,中后期形态较为丰腴。分化后2周,ALP染色见大量细胞胞质呈现深蓝色;第15 d经茜素红染色便可见局部出现橙红色钙化结节。结论通过胰酶联合胶原酶两步消化法,成功地从SD乳鼠听泡中分离出原代成骨细胞,所得细胞生长及传代能力强,经诱导分化后具备良好的成骨活性,为鼓室硬化等疾病的体外研究提供可能。 展开更多

关键词 大鼠 听泡 成骨细胞 鼓室硬化

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镍钛合金在豚鼠听泡的生物相容性观察 被引量：3

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作者 张媛媛 肖自安 +2 位作者 李周 徐国富 黄伯云 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期211-214,共4页

目的探讨镍钛形状记忆合金(nitinol,NiTi)植入体在豚鼠听泡的生物相容性。方法健康、听觉灵敏的纯白红目豚鼠50只,一耳为实验组(NiTi植入组,50耳),其中25只对侧耳为对照组I[纯钛(Ti)植入组],另25只对侧耳为对照组II(空白组)。分别于术后... 目的探讨镍钛形状记忆合金(nitinol,NiTi)植入体在豚鼠听泡的生物相容性。方法健康、听觉灵敏的纯白红目豚鼠50只,一耳为实验组(NiTi植入组,50耳),其中25只对侧耳为对照组I[纯钛(Ti)植入组],另25只对侧耳为对照组II(空白组)。分别于术后7、14、28、56、112d随机处死含对照组I和对照组II的豚鼠各5只,观察听泡内有无肉芽生长等炎性反应、材料外观有无蚀斑和颜色改变,以Sirion200场发射扫描电镜(FEI公司,美国)观察材料表面新生组织,GENESIS60SEDAX能谱仪(EDAX公司,美国)能谱分析新生组织的元素构成。结果 NiTi及Ti植入体表面均有新生骨骼样组织生长,有纤维状物与听泡壁及听小骨相连,周围无明显肉芽组织,植入材料表面无蚀斑和颜色改变,有新生骨骼样组织形成,从术后7d的零星点状或条索状逐渐增多交织成网状到112天时形成板状,能谱分析证实为骨组织,但NiTi植入组新生组织中含有极微量的镍(Ni)。结论 NiTi在豚鼠听泡有很好的生物相容性,但有微量的Ni释放,其生物毒性需进一步观察。 展开更多

关键词 镍钛形状记忆合金 生物相容性 豚鼠 听泡

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听泡内注射法建立大鼠化脓性中耳炎模型 被引量：5

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作者 邹艺辉 黄德亮 +1 位作者 孙建和 于黎明 《中华耳科学杂志》 CSCD 2004年第1期64-66,共3页

目的摸索大鼠听泡寻找及注射方法,了解建立化脓性中耳炎及粘连性中耳炎动物模型的方法。方法健康,鼓膜及听力正常的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠11只,体重220-320g。麻醉后2只经鼓膜、9只经头颈腹侧正中入路,右侧听泡内注入5×106CFU... 目的摸索大鼠听泡寻找及注射方法,了解建立化脓性中耳炎及粘连性中耳炎动物模型的方法。方法健康,鼓膜及听力正常的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠11只,体重220-320g。麻醉后2只经鼓膜、9只经头颈腹侧正中入路,右侧听泡内注入5×106CFU/ml肺炎球菌悬液0郾05ml,左侧注入无菌悬液0郾05ml作对照。于术后7天、14天观察鼓膜情况,各处死4只,随机分2组,取头、后固定,取听泡,一组PAS/alcainblue染色,立体显微镜下观察。特殊部位进行连续切片,HE染色,光学显微镜下观察粘连情况。另一组制成扫描电镜标本进行观察。结果因麻醉过深死亡3只。实验耳(8只右耳)鼓膜明显增厚,呈黄色化脓样改变;听泡内充满成团黄色物,粘膜层明显增厚,未见粘连形成。对照耳(8只左耳)鼓膜稍增厚,呈苍白或浑浊、内陷;听泡内无异物,粘膜光滑。结论SD大鼠麻醉量与致死量之间差距小。经鼓膜或头颈腹侧正中入路听泡内注射无差异,后一种方法寻找大鼠听泡简单易行、安全可靠。大鼠听泡内注射肺炎球菌是建立化脓性中耳炎动物模型的好方法,成功率100%,但粘连性中耳炎模型未成功,须进一步探索。 展开更多

关键词 听泡内注射法 大鼠 化脓性中耳炎 听力 动物模型 粘连性中耳炎

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镍钛合金听泡植入对豚鼠耳蜗及听功能的毒性 被引量：1

5

作者 张媛媛 肖自安 李秀国 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第21期3380-3385,共6页

背景:镍钛合金多作为自膨胀支架和封堵器的材料应用已很成熟,但镍钛合金作为听骨链重建材料的相关研究及临床应用至今少有报道。目的:观察镍钛合金植入体在豚鼠听泡中的耳毒性。方法:健康听敏纯白红目豚鼠50只,每只豚鼠其中一侧耳为镍... 背景:镍钛合金多作为自膨胀支架和封堵器的材料应用已很成熟,但镍钛合金作为听骨链重建材料的相关研究及临床应用至今少有报道。目的:观察镍钛合金植入体在豚鼠听泡中的耳毒性。方法:健康听敏纯白红目豚鼠50只,每只豚鼠其中一侧耳为镍钛合金植入组,其中25只对侧耳为钛植入组,另25只对侧耳为空白植入组。分别于植入后7,14,28,56,112 d随机处死含钛植入组和空白植入组的豚鼠各5只,对各组行近中轴位耳蜗石蜡切片苏木精-伊红染色观察耳蜗组织的形态变化,行耳蜗毛细胞核丫啶橙-碘化丙啶双重荧光染色观察毛细胞凋亡和缺失情况,行耳蜗基底膜扫描电镜观察毛细胞纤毛排列情况,透射电镜观察毛细胞细胞器形态,对各组的豚鼠植入前、不同时间点处死前均行听性脑干反应及畸变反应耳声发射检测。结果与结论:各组植入后各时间点耳蜗组织形态无明显变化,未发现耳蜗毛细胞发生凋亡,基底膜耳蜗毛细胞纤毛排列整齐,外耳蜗毛细胞的细胞器未见明显异常。植入前及植入后7,14,28,56,112 d听性脑干反应阈值差异无显著性意义,且畸变反应耳声发射检测通过率均为100%。结果证实,镍钛合金听泡植入对豚鼠耳蜗形态及听功能无明显影响,提示镍钛合金无明显耳毒性。 展开更多

关键词 生物材料 材料相容性 镍钛合金 耳毒性 豚鼠 听泡

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大鼠听泡解剖结构及耳后进路手术标志的观察 被引量：1

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作者 刘立翠 付崇罗 +1 位作者 朱军 李会 《聊城大学学报（自然科学版）》 2010年第1期42-44,共3页

制作成年Wistar大鼠颅骨标本,观察听泡大体形态及位置;打开听泡,观察内耳主要结构.进一步在活体上选择耳后手术径路,观察大鼠听泡位置,了解耳后内耳进路的手术标志.结果发现,大鼠听泡体积较大,听骨及内耳结构主要集中于听泡前;在活体上... 制作成年Wistar大鼠颅骨标本,观察听泡大体形态及位置;打开听泡,观察内耳主要结构.进一步在活体上选择耳后手术径路,观察大鼠听泡位置,了解耳后内耳进路的手术标志.结果发现,大鼠听泡体积较大,听骨及内耳结构主要集中于听泡前;在活体上取其耳后切口,寻找茎突样结构,经听泡后壁可顺利进入听泡,不会损伤重要结构,可清楚地观察到内耳主要结构以及蜗神经、内耳门等相连结构,为内耳的耳后进路注射以及内耳门进路蜗神经核注射提供了相关的实验基础. 展开更多

关键词 大鼠 听泡 内耳

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大鼠听泡外电极耳蜗电图描记法

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作者 迟放鲁 《耳鼻喉学报》 1991年第2期114-114,共1页

关键词 耳蜗电图 听泡外电极 大鼠

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小鼠听觉剥夺动物模型的建立 被引量：1

8

作者 田永胜 张萌 +1 位作者 陈晓巍 艾星 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第6期618-622,共5页

目的探索一种建立稳定的小鼠听觉剥夺动物模型的方法。方法选取出生2个月、听觉脑干诱发电位(ABR)正常的BALB/c小鼠40只,随机分为两组各20只。实验组采用耳后径路开放听泡,用微型钻在耳蜗表面钻孔损毁双侧耳蜗结构;对照组仅做耳后切口... 目的探索一种建立稳定的小鼠听觉剥夺动物模型的方法。方法选取出生2个月、听觉脑干诱发电位(ABR)正常的BALB/c小鼠40只,随机分为两组各20只。实验组采用耳后径路开放听泡,用微型钻在耳蜗表面钻孔损毁双侧耳蜗结构;对照组仅做耳后切口不破坏耳蜗结构。术后动物饲养4个月,通过比较手术前后ABR测试结果,进行客观听力学评估。结果实验组小鼠术后耳廓反射消失,ABR测试未检测出反应波形。对照组听力正常。结论耳后径路切除小鼠耳蜗,能够建立稳定可靠的听觉剥夺动物模型,对于听觉中枢可塑性的研究很有价值。 展开更多

关键词 听泡 耳蜗切除 听觉剥夺 小鼠

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Wnt信号通路在毛细胞分化和再生过程中的作用 被引量：5

9

作者 范晴晴 孟飞龙 +2 位作者 房冉 李高鹏 赵小立 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期897-907,共11页

Wnt信号通路在生物发育和维持内环境稳态过程中起着重要作用。Wnt配体通过与Frizzle受体结合参与体轴的形成、细胞分化和细胞命运决定等生命活动。在小鼠内耳发育过程中,Wnt信号通路扮演了重要角色:在内耳发育早期阶段,参与听基板的特... Wnt信号通路在生物发育和维持内环境稳态过程中起着重要作用。Wnt配体通过与Frizzle受体结合参与体轴的形成、细胞分化和细胞命运决定等生命活动。在小鼠内耳发育过程中,Wnt信号通路扮演了重要角色:在内耳发育早期阶段,参与听基板的特化和听泡的形成;在内耳发育后期阶段,调控毛细胞分化及毛细胞纤毛束的定向。本文综述了Wnt信号通路在内耳毛细胞发育分化及再生过程中的研究进展,以期为从事相关领域的科研人员提供参考。 展开更多

关键词 WNT信号通路 听基板 听泡 毛细胞再生

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耳内镜下新西兰兔中耳的解剖研究 被引量：1

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作者 林琼萍 李达飞 +3 位作者 杨静雅 徐飘 张珊珊 田广永 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第1期14-18,共5页

目的耳内镜下观察兔中耳解剖结构,探讨兔作为耳内镜解剖训练模型的可行性,为兔中耳相关的其他实验研究提供解剖学依据。方法5只(10耳)新西兰兔麻醉处死后,耳内镜下经外耳道入路观察兔鼓膜、中耳鼓室结构,辨别听小骨、上中下鼓室、面神... 目的耳内镜下观察兔中耳解剖结构,探讨兔作为耳内镜解剖训练模型的可行性,为兔中耳相关的其他实验研究提供解剖学依据。方法5只(10耳)新西兰兔麻醉处死后,耳内镜下经外耳道入路观察兔鼓膜、中耳鼓室结构,辨别听小骨、上中下鼓室、面神经等。结果与人对比,新西兰兔听小骨由锤砧联合体和镫骨组成;上鼓室外侧壁部分骨质缺如,由鼓膜向上延续并覆盖;听泡类似于人的中、下鼓室,包含咽鼓管、面神经、鼓岬、前庭窗、蜗窗以及鼓室神经等结构,乳突为听泡尾侧的板障型骨管;面神经鼓室段水平走行于上鼓室下方骨壁内,后经锥隆起垂直走行于听泡后壁,经茎乳孔出听泡。结论新西兰兔中耳结构与人相似,既可作为耳科医生练习耳内镜操作的解剖模型,也可作为耳部三维解剖结构的教学标本。 展开更多

关键词 耳内镜 兔 中耳解剖 听泡 听小骨

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河南地区啮齿动物种类及其分布的记述 被引量：1

11

作者 葛凤翔 李新民 张尚仁 《河南预防医学杂志》 1979年第4期59-65,共7页

河南地区啮齿动物在1911年 Thomas 记录了一种,这是最早的报告。1935年傅桐生的“嵩山松鼠类志”,记录6种,Allen(1938—1940)、Ellerman & Morri-son-Scott(1951)先后报道了河南地区的啮齿动物达4种与亚种。1952—1960年周家兴等在... 河南地区啮齿动物在1911年 Thomas 记录了一种,这是最早的报告。1935年傅桐生的“嵩山松鼠类志”,记录6种,Allen(1938—1940)、Ellerman & Morri-son-Scott(1951)先后报道了河南地区的啮齿动物达4种与亚种。1952—1960年周家兴等在伏牛山、太行山、大别山。 展开更多

关键词 啮齿动物 足长 花松鼠 尾长 耳长 指名亚种 间宽 听泡 西峡 鼠科 岩松鼠 河南地区 齿隙 齿列 鼠类

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四川省发现的几种小型兽及一新亚种的记述 被引量：2

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作者 王酉芝 屠云人 汪松 《Zoological Systematics》 1966年第1期85-91,共7页

笔者在研究四川省小型兽类标本的过程中,发现三种食虫类及三种啮齿类,在四川均系首次发现,都属国内较罕见或十分狭布的种类;其中沟牙鼯鼠系新亚种。鉴于这些种类均较稀有,在研究其分类和分布上有一定意义,故予报导。标本系四川省卫生防... 笔者在研究四川省小型兽类标本的过程中,发现三种食虫类及三种啮齿类,在四川均系首次发现,都属国内较罕见或十分狭布的种类;其中沟牙鼯鼠系新亚种。鉴于这些种类均较稀有,在研究其分类和分布上有一定意义,故予报导。标本系四川省卫生防疫站历年来所采,均存该单位;对比用的标本藏中国科学院动物研究所。 展开更多

关键词 新亚种 体长 听泡 耳长 后足 臼齿 指名亚种 尾长 小型兽类 列长 基枕骨

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前庭学

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《中国医学文摘（耳鼻咽喉科学）》 1992年第6期211-212,共2页

921369 前庭放射损伤扫描电镜观察的实验研究/范静平…∥上海医学。-1992,15(2)。-96～97 采用扫描电镜观察放射对前庭的影响,发现豚鼠听泡区40GYγ射线照射后,前庭耳石变形,囊斑和壶腹嵴毛细胞纤毛紊乱、倒伏、融化及脱落,少许毛细胞... 921369 前庭放射损伤扫描电镜观察的实验研究/范静平…∥上海医学。-1992,15(2)。-96～97 采用扫描电镜观察放射对前庭的影响,发现豚鼠听泡区40GYγ射线照射后,前庭耳石变形,囊斑和壶腹嵴毛细胞纤毛紊乱、倒伏、融化及脱落,少许毛细胞坏死。其病理改变类似耳毒性药物和噪声对前庭的损害。图2参3(原提要) 展开更多

关键词 壶腹嵴 耳毒性药物 细胞纤毛 Γ射线照射 听泡 耳石 庭学 放射损伤 范静 扫描电镜

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耳科学

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《中国医学文摘（耳鼻咽喉科学）》 2004年第5期307-311,共5页

20041002 外中耳畸形与传导性耳聋的相关性／冷同嘉…／／中国听力语言康复科学杂志.-2004,(1).-10-11 目的:探求不向类型的外中耳畸形与传导性耳聋的相关性,以利于术前术式的选择。

关键词 分泌性中耳炎 腺样体肥大 耳科学 耳鼻咽喉科学 鼓室成形术 乙状窦后进路 中耳畸形 鼓膜置管 咽鼓管导管 听泡 中华耳科学杂志

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