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血清学检测和基因分型在ABO疑难血型鉴定中的性能评价
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作者 关茵 张国平 +2 位作者 刘文超 裴垚昶 郭超群 《河南医学研究》 CAS 2024年第7期1250-1253,共4页
目的分析血清学检测和基因分型在ABO疑难血型鉴定中的应用。方法对106例ABO疑难血型实施血清学检测(吸收放散试验)等,同时对其实施基因分型检测(荧光定量PCR试验),以基因测序结果为金标准,评估血清学检测和基因分型所得结果与基因测序... 目的分析血清学检测和基因分型在ABO疑难血型鉴定中的应用。方法对106例ABO疑难血型实施血清学检测(吸收放散试验)等,同时对其实施基因分型检测(荧光定量PCR试验),以基因测序结果为金标准,评估血清学检测和基因分型所得结果与基因测序一致性,比较两种检查方式灵敏度、特异度。结果以基因测序为金标准,血清学检测所得结果一致性为中度,基因分型检测所得结果一致性很好。通过比较血清学检测和基因分型灵敏度、特异度可知,两种检查方式所得特异度、灵敏度差异有统计学意义,基因分型灵敏度、特异度更高(P<0.05)。结论基因分型检测和血清学检测有各自的优缺点,但总体上来说,基因分型检测具有更高的准确性和可靠性,更快速、高效。 展开更多
关键词 血型鉴定 ABO疑难血型 基因分型 血清学检测 基因测序
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宫颈病变患者HPV基因分型检测及其临床意义分析
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作者 陈静 金灿灿 +2 位作者 周皓鹏 张茜蕙 梅辉 《中外医学研究》 2024年第7期70-74,共5页
目的:分析宫颈病变患者人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测及临床意义。方法:回顾性分析2021年5月—2023年5月泰兴市人民医院收治的125例宫颈病变患者的临床资料,均进行HPV基因分型检测。统计125例宫颈病变患者HPV感染阳性率、HPV基因分型情... 目的:分析宫颈病变患者人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测及临床意义。方法:回顾性分析2021年5月—2023年5月泰兴市人民医院收治的125例宫颈病变患者的临床资料,均进行HPV基因分型检测。统计125例宫颈病变患者HPV感染阳性率、HPV基因分型情况(多重感染重复计算)。比较不同程度宫颈病变患者中HPV感染阳性率、高危型HPV感染阳性率。以病理检查为“金标准”,分析并比较液基薄层细胞学检查(TCT)单独诊断、TCT联合HPV基因分型诊断子宫颈癌的准确度、敏感度、特异度。结果:125例宫颈病变患者中,HPV感染阳性率为51.20%(64/125),HPV感染阳性患者中HPV基因型总数为92株,其中高危型HPV为63.04%(58/92),低危型HPV为36.96%(34/92)。高危型HPV感染阳性率最高的前5位基因型分别为HPV16(16.30%)、HPV18(11.96%)、HPV58(8.70%)、HPV53(6.52%)、HPV51(4.35%);低危型HPV感染阳性率最高的前3位基因型分别为HPV6(8.70%)、HPV11(7.61%)、HPV40(4.35%)。不同级别宫颈病变患者HPV感染阳性率、高危型HPV感染阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TCT单独诊断子宫颈癌的准确度为78.40%(98/125),敏感度为66.67%(18/27),特异度为81.63%(80/98),阳性预测值为50.00%(18/36),阴性预测值为89.89%(80/89),Kappa值为0.431;TCT联合HPV基因分型诊断子宫颈癌的准确度为88.00%(110/125),敏感度为59.26%(16/27),特异度为95.92%(94/98),阳性预测值为80.00%(16/20),阴性预测值为89.52%(94/105),Kappa值为0.609;TCT联合HPV基因分型诊断子宫颈癌的准确度、特异度均显著高于TCT单独诊断,差异有统计学意义(P<0.05);TCT联合HPV基因分型诊断子宫颈癌的敏感度低于TCT单独诊断,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:宫颈病变类型与HPV基因分型密切相关,且不同宫颈病变恶性程度患者HPV感染阳性率、高危型HPV感染阳性率存在显著差异,因此HPV基因分型用于辅助子子宫颈癌筛查具有重要意义。 展开更多
关键词 宫颈病变 人乳头瘤病毒 基因分型 子宫颈癌
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西藏4个绵羊品种SNP基因分型及群体结构分析
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作者 洛桑催成 巴桑吉巴 +6 位作者 平措班旦 王欣悦 德庆卓嘎 格桑加措 次仁曲珍 旦巴 罗布桑布 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期138-141,共4页
藏系绵羊分布范围广泛,品种资源丰富,目前主要分为三大类群,但藏系绵羊群体结构不清。为分析藏系绵羊SNP位点及群体结构,实验利用Illumina Ovine SNP 600K商业化芯片对西藏阿旺绵羊、岗巴绵羊、多玛绵羊和霍尔巴绵羊等150只藏系绵羊进行... 藏系绵羊分布范围广泛,品种资源丰富,目前主要分为三大类群,但藏系绵羊群体结构不清。为分析藏系绵羊SNP位点及群体结构,实验利用Illumina Ovine SNP 600K商业化芯片对西藏阿旺绵羊、岗巴绵羊、多玛绵羊和霍尔巴绵羊等150只藏系绵羊进行了SNP基因分型,并通过PCA和NJ-tree等方法分析了藏系绵羊群体结构。SNP质控结果表明,共有147个个体符合质控条件,共获得456 418个SNP位点。群体结构分析表明,西藏地区的岗巴绵羊、多玛绵羊和霍尔巴绵羊分别聚为一类,而其他地区的藏系绵羊混乱聚集在一起。本实验研究结果为今后西藏当地绵羊遗传资源的鉴定和保护开发利用提供了理论基础和参考依据。 展开更多
关键词 藏系绵羊 SNP基因分型 群体结构 高密度芯片
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血小板HPA-3,HPA-15基因分型微滴式数字PCR检测体系的构建
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作者 孔小娇 王红梅 +1 位作者 段生宝 刘铁梅 《中国输血杂志》 2024年第1期1-8,共8页
目的建立血小板HPA-3,HPA-15基因分型的微滴式数字PCR(ddPCR)高灵敏检测方法,并初步探索应用于孕妇外周血胎儿游离DNA HPA抗原相容性检测的可行性。方法针对HPA-3,HPA-15的SNP突变位点,设计特异性引物及MGB探针,优化ddPCR退火温度及引... 目的建立血小板HPA-3,HPA-15基因分型的微滴式数字PCR(ddPCR)高灵敏检测方法,并初步探索应用于孕妇外周血胎儿游离DNA HPA抗原相容性检测的可行性。方法针对HPA-3,HPA-15的SNP突变位点,设计特异性引物及MGB探针,优化ddPCR退火温度及引物浓度等扩增条件,建立最佳反应体系,明确检验程序。对该检测方法进行方法学性能评估包括特异性、灵敏度、重复性和稳定性。利用ddPCR技术对2022年6月至2023年6月67例临床血液标本进行检测,将等位基因分型结果与基因测序结果比较,并对52例母体外周血胎儿游离DNA HPA抗原进行检测。结果检测血小板HPA-3,HPA-15的ddPCR方法,引物及探针特异性良好,HPA-3,HPA-15的最佳退火温度分别为:61.6℃,60.2℃;体系最佳引物浓度分别为:900 nM,700 nM;探针终浓度均为250 nM。拷贝数定量检测范围为:2~20000 copies,检测下限为0.1 copies/μL且线性良好。在低拷贝数标本中,HPA-3及HPA-15实际检测值的批内及批间变异系数(CV)均<5%。对67份人血液标本DNA的HPA-3,HPA-15基因型检测,结果与基因测序结果完全一致。应用于胎母血小板HPA-3,HPA-15基因型检测结果符合预期。结论本研究构建的HPA-3,HPA-15 ddPCR检测体系准确性高,重复性及稳定性较好,灵敏度高,可应用于临床血小板HPA-3,HPA-15基因型供者库的建立、基因配型及胎母血小板相容性检测等。 展开更多
关键词 HPA 微滴式数字PCR 基因分型 基因频率
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联合应用基因分型和DH3检测406例女性子宫颈HPV感染分析与临床意义
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作者 姜朋飞 沈思环 印洪林 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期325-326,共2页
HPV属于球形无包膜的双链DNA病毒,能特异性引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖,可导致多种良恶性病变。HPV高危型持续感染是导致子宫颈癌发生的主要原因,其检测方法多种、多样,各有优缺点。本科室联合应用基因分型和第三代杂交捕获技术定... HPV属于球形无包膜的双链DNA病毒,能特异性引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖,可导致多种良恶性病变。HPV高危型持续感染是导致子宫颈癌发生的主要原因,其检测方法多种、多样,各有优缺点。本科室联合应用基因分型和第三代杂交捕获技术定量分型(daltonbio hybrid capture 3,DH3),可以准确检测子宫颈中HPV型别和病毒载量的高低,对子宫颈癌的筛查进行精准分流,现作简要介绍。1材料与方法1.1材料收集2021~2022年我院妇产科门诊和健康管理中心406例女性子宫颈标本,患者年龄18~76岁,中位年龄34岁。 展开更多
关键词 子宫颈 HPV 基因分型 DH3 联合应用
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广州地区259例丙型肝炎病毒患者HCV基因分型研究
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作者 廖亚龙 姚亚男 +1 位作者 张莉滟 李文敏 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第1期48-51,共4页
目的 了解广州地区丙型肝炎病毒患者的HCV基因型分布情况,为该地区丙型肝炎病毒的预防和诊疗提供依据。方法 选择自2019年9月至2023年4月共259例丙型肝炎病毒患者的HCV基因分型的结果,分析比较不同年龄、性别和年度各基因型感染率的差... 目的 了解广州地区丙型肝炎病毒患者的HCV基因型分布情况,为该地区丙型肝炎病毒的预防和诊疗提供依据。方法 选择自2019年9月至2023年4月共259例丙型肝炎病毒患者的HCV基因分型的结果,分析比较不同年龄、性别和年度各基因型感染率的差异。结果 共纳入259例患者,最常见的基因型为6a型和1b型,占42.47%和42.08%,与其他亚型差异有统计学意义(P<0.05)。其余依次为3a型占6.18%,2a型占4.63%,3b型占4.25%,2b型占0.39%,未发现亚型混合感染。1b型,青年人群(41.86%)、中年人群(31.447%)分别低于老年人群的71.93%;6a型,青年人群(44.186%)、中年人群(51.572%)分别高于老年人群的15.789%,差异有统计学意义(P<0.05)。女性1b型63.077%、2a型10.769%分别高于男性的35.052%和2.577%,女性6a型18.462%低于男性的50.516%,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年度各基因型感染率差异无统计学意义。结论 广州地区丙型肝炎病毒患者HCV基因分型以6a型、1b型为主。1b型多见于60岁以上的老年人群和女性,6a型多见于中青年人群及男性。 展开更多
关键词 HCV 基因分型 RT-PCR 广州
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基于DNA提取方法优化转基因小鼠基因分型研究
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作者 夏雨 余静 +3 位作者 康露 张欣 马娓 严军 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期415-420,共6页
目的:探讨DNA提取方法优化后对转基因小鼠基因分型结果的影响,并比较分析与业内常用试剂盒基因型鉴定结果的差异。方法:在团队前期专利基础上,改进了DNA裂解液的配方和实验流程,并以新型转录因子Musculin和增强型绿色荧光蛋白(enhanced ... 目的:探讨DNA提取方法优化后对转基因小鼠基因分型结果的影响,并比较分析与业内常用试剂盒基因型鉴定结果的差异。方法:在团队前期专利基础上,改进了DNA裂解液的配方和实验流程,并以新型转录因子Musculin和增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)转基因小鼠为例,对基因分型结果进行了比较研究和验证。结果:DNA提取时现配裂解液配方为100μL 0.025 N NaOH工作液、160μL 0.5 M EDTA工作液和40 mL超纯水;每个样本加入180μL裂解液,100℃30 min。与相关领域常用的基因分型试剂盒相比,该DNA提取优化方案能够在确保鉴定准确的前提下有效缩短基因分型时间,而且裂解液配置方法简单,反应次数多,步骤更简便,可大幅降低试剂成本和工作量。结论:本研究提供1种适用于转基因小鼠基因分型的经济、简单、可靠的DNA提取技术,具有较好的应用和推广价值。 展开更多
关键词 基因小鼠 DNA提取 基因分型 优化
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CYP2D6基因分型影响因素研究进展
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作者 慎津进 薛寒 +2 位作者 李进福 高利飞 郑业焕 《检验医学》 CAS 2024年第3期291-297,共7页
细胞色素P450家族2亚科D成员6(CYP2D6)是细胞色素P450酶家族中的重要药物代谢酶,是抗抑郁药物、抗精神病药物和阿片类镇痛药物等主要的代谢酶。CYP2D6基因位点的复杂性和诸多等位基因突变体造成了CYP2D6表型的多态性,目前已报道170余种... 细胞色素P450家族2亚科D成员6(CYP2D6)是细胞色素P450酶家族中的重要药物代谢酶,是抗抑郁药物、抗精神病药物和阿片类镇痛药物等主要的代谢酶。CYP2D6基因位点的复杂性和诸多等位基因突变体造成了CYP2D6表型的多态性,目前已报道170余种等位基因突变体。CYP2D6酶活性变化很大,从无活性到超快代谢均存在,根据酶活性可将不同表型携带者分为超快代谢者、正常代谢者、中间代谢者和弱代谢者。随着个体化医疗的发展,CYP2D6基因分型试验可以辅助药物遗传学和基因分型技术的研究和临床应用。然而,由于CYP2D6基因存在复杂的突变,包括单核苷酸突变、插入、缺失、基因拷贝数变异和基因重组。CYP2D6基因不仅存在个体化差异,且在不同种族之间等位基因的频率也明显不同。另外,人体内同时存在与CYP2D6同源性很高的非功能性基因CYP2D7,通过基因检测分析CYP2D6表型是一项非常具有挑战性的工作。文章总结了CYP2D6基因的多态性和基因分型的复杂性,并分析了部分不同的基因型突变对CYP2D6基因分型的影响,以帮助临床通过基因分型方法对CYP2D6酶活性进行预测。 展开更多
关键词 细胞色素P450家族2亚科D成员6 基因分型 突变 等位基因 基因多态性
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纳米孔基因测序技术在HLA基因分型中的应用
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作者 朱孟琳 何燕琴 +2 位作者 谢水莲 杨影 万绍贵 《赣南医学院学报》 2024年第1期99-104,共6页
人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)基因是人类基因组中最复杂的基因区域,主要参与机体免疫反应,HLA的基因分型在器官移植以及疾病诊疗等领域有着广泛的临床应用。现有的HLA分型方法在临床实践中发挥了重要作用,但也存在一些... 人类白细胞抗原(Human leukocyte antigen,HLA)基因是人类基因组中最复杂的基因区域,主要参与机体免疫反应,HLA的基因分型在器官移植以及疾病诊疗等领域有着广泛的临床应用。现有的HLA分型方法在临床实践中发挥了重要作用,但也存在一些技术限制和局限性。纳米孔基因测序技术的出现为快速鉴定HLA基因分型提供了全新视角。该技术以其快速、实时测序和长读长等特点,为复杂的HLA区域提供了更为快速精确的识别能力。该技术不仅能更快速地解析HLA基因型,还对前沿高通量基因测序新技术开发HLA分型方法的研究具有潜在的借鉴意义。本文主要对纳米孔基因测序技术在HLA分型领域中的研究方法和临床应用进行综述。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 基因分型技术 纳米孔基因测序 器官移植
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胃癌合并Hp感染患者Hp血清抗体基因分型测定及其意义 被引量:1
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作者 武曼群 胡建平 杨少奇 《宁夏医学杂志》 CAS 2023年第10期945-947,共3页
目的 了解本地区胃癌患者幽门螺杆菌(Hp)血清抗体基因分型情况及胃癌发生与Hp血清抗体基因分型的可能影响因素。结果 Ⅰ型幽门螺杆菌在胃癌中所占比例较Ⅱ型更高,差异有统计学意义(χ2=15.2,P<0.05);非萎缩性胃炎组Ⅰ型所占比例小于... 目的 了解本地区胃癌患者幽门螺杆菌(Hp)血清抗体基因分型情况及胃癌发生与Hp血清抗体基因分型的可能影响因素。结果 Ⅰ型幽门螺杆菌在胃癌中所占比例较Ⅱ型更高,差异有统计学意义(χ2=15.2,P<0.05);非萎缩性胃炎组Ⅰ型所占比例小于Ⅱ型,差异有统计学意义;胃癌患者幽门螺杆菌抗体基因分型I型与Ⅱ型与性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05),幽门螺杆菌抗体基因分型I型与吸烟史、饮酒史及胃癌家族史有一定相关性。结论 幽门螺杆菌抗体基因分型在胃癌及非萎缩性胃炎中有差异,其检测结果可指导并助力临床抗幽门螺杆菌精准及个体化治疗。 展开更多
关键词 胃癌 慢性非萎缩性胃炎 Hp血清抗体基因分型
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计算弥散加权成像联合瘤周DWI高信号征象评估胶质瘤IDH-1基因分型的临床应用
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作者 王晓青 曹梦秋 +4 位作者 程佳慧 张一铭 吴洪 张晓华 周滟 《中国医学计算机成像杂志》 CSCD 北大核心 2023年第2期111-116,共6页
目的:探讨计算弥散加权成像(cDWI)拟合得到的高b值DWI图像及瘤周DWI高信号(NePDH)征象在区分不同IDH-1基因型胶质瘤中的临床价值。方法:回顾性纳入60例Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤患者(IDH-1突变型25例,野生型35例),均行常规MRI平扫、增强及DWI(b=0、... 目的:探讨计算弥散加权成像(cDWI)拟合得到的高b值DWI图像及瘤周DWI高信号(NePDH)征象在区分不同IDH-1基因型胶质瘤中的临床价值。方法:回顾性纳入60例Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤患者(IDH-1突变型25例,野生型35例),均行常规MRI平扫、增强及DWI(b=0、1000、3000 s/mm^(2))扫描。使用cDWI技术将DWI_(0,1000)拟合得到cDWI_(0,3000)图像。比较DWI_(0,3000)、cDWI_(0,3000)图像的信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR),及医师判读NePDH征象的一致性。评价NePDH征象阳性、肿瘤实质区域表观弥散系数(ADC)_(0,1000)与IDH-1基因型的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线并评价各参数的诊断效能。结果:cDWI_(0,3000)图像SNR、CNR优于DWI_(0,3000)(P<0.05)。医师在DWI_(0,3000)、cDWI_(0,3000)上判读NePDH征象的一致性极高(κ=0.958)。不同IDH-1基因型组间,cDWI_(0,3000)上NePDH征象阳性例数差异具有统计学意义(P<0.05),且诊断效能与DWI_(0,3000)相仿(P>0.05)。NePDH征象结合肿瘤实质区ADC值诊断的灵敏度为96.00%,特异度为71.4%,ROC曲线下面积达0.834。结论:高b值cDWI及NePDH征象为术前诊断胶质瘤IDH-1基因型提供了一种无创、可靠的方法。 展开更多
关键词 磁共振成像 弥散加权成像 脑胶质瘤 IDH-1基因 基因分型
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荷斯坦牛κ-酪蛋白基因分型KASP检测方法的建立与应用
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作者 赵凤 刘林 +6 位作者 杨宇泽 吕小青 麻柱 赵春颖 路永强 张建聪 邹杨 《中国奶牛》 2023年第7期49-52,共4页
为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB... 为筛选κ-酪蛋白优势基因型,本研究设计4个SNP位点,利用基因组检测已知CSN3基因型的13头牛,采集抗凝血,提取基因组DNA,采用竞争性等位基因特异性聚合酶链式反应(Kompetitive Allele Specific PCR,KASP)对样本进行分型,CSN3基因有AA、BB、EE、AB、AE、BE六种基因型。本研究实现了对北京地区213头荷斯坦种公牛及1003头母牛中CSN3三种常见变异体的全面筛选,从育种角度出发,基于κ-酪蛋白不同基因型与奶酪生产的产量和质量相关性,利用分子检测方法筛选与优良性状的优势基因型,发掘荷斯坦牛特色优质种质资源,为牧场选择合适的荷斯坦牛,提高乳蛋白率,从种源解决相关领域的技术瓶颈。 展开更多
关键词 荷斯坦牛 κ-酪蛋白 基因分型 检测方法
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HPV基因分型与血清肿瘤标志物检测对宫颈癌的诊断效果
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作者 侯莉莉 关鑫 《实用妇科内分泌电子杂志》 2023年第1期87-89,共3页
目的分析人乳头状瘤病毒(HPV)基因分型以及血清肿瘤标志物检测对宫颈癌的诊断效果。方法选取进行宫颈疾病检查的60例患者为研究对象,根据宫颈疾病类型分为5组,其中宫颈癌组16例,宫颈炎组20例,宫颈上皮内瘤变高度宫颈病变组12例,宫颈上... 目的分析人乳头状瘤病毒(HPV)基因分型以及血清肿瘤标志物检测对宫颈癌的诊断效果。方法选取进行宫颈疾病检查的60例患者为研究对象,根据宫颈疾病类型分为5组,其中宫颈癌组16例,宫颈炎组20例,宫颈上皮内瘤变高度宫颈病变组12例,宫颈上皮内瘤变低度宫颈病变组12例,同时选择同期健康体检人群20例设为对照组。所有患者以及健康体检人群均接受HPV基因分型检测以及血清肿瘤标志物检测,比较不同组别HPV分布情况、血清肿瘤标志物检测结果、不同检测方式的诊断效能。结果不同组别HPV16、HPV52、HPV58、HPV39、HPV35分布情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同组别血清肿瘤标志物水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);联合检测的准确性、敏感度、特异度均高于单独检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HPV基因分型以及血清肿瘤标志物都在宫颈癌的检测中具有良好的效果,且两种方式联合检测能够明显提高检测的准确性以及敏感性,可以在临床检测中加以使用。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV基因分型 血清肿瘤标志物检测 诊断效能
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不同丙型肝炎病毒基因分型检测方法学的比较 被引量:1
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作者 马雯 何瑞芬 +3 位作者 吴涛 闫俊霞 安超 朴文花 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第8期1426-1430,共5页
目的通过丙型肝炎基因分型检测方法学的比较,为实验室选择提供依据。方法选取宁夏回族自治区人民医院2019年1月至2021年12月丙型肝炎确诊患者血清样本148份,使用PCR-荧光探针法、PCR-反向点杂交法及Sanger测序法进行丙型肝炎病毒基因分... 目的通过丙型肝炎基因分型检测方法学的比较,为实验室选择提供依据。方法选取宁夏回族自治区人民医院2019年1月至2021年12月丙型肝炎确诊患者血清样本148份,使用PCR-荧光探针法、PCR-反向点杂交法及Sanger测序法进行丙型肝炎病毒基因分型检测,并采用卡方检验、Kappa检验对这三种检测方法进行比较分析。结果PCR-荧光探针法检出136例,检出率91.89%,共检出4种基因型,分别为1b、2+、3+和6+。PCR-反向点杂交法检出135例,检出率为91.22%,共检出5种基因型,分别为1b、2a、3a、3b和6a。Sanger测序法检出148例,检出率100%,共检出7种基因型,分别为1b、2a、3a、3b、6a、1g和6xa。PCR-荧光探针法未检出的12例样本中,Sanger测序法均已检出,其中包括1例6xa型,1例1g型。两种方法的检出率比较差异无统计学意义(χ^(2)=7.565,P>0.05)。两种方法比较一致性较高(k=0.871,P<0.001)。PCR-反向点杂交法未能测出的13例样本,Sanger测序法均已检出,其中包括1例1g型。PCR-反向点杂交法检出1例3b型,Sanger测序法检出为6xa型。两种方法的检出率比较差异无统计学意义(χ^(2)=8.696,P>0.05)。PCR-反向点杂交法与Sanger测序法一致性高(k=0.609,P<0.05)。结论PCR-荧光探针法和PCR-反向点杂交法操作简单,适合临床推广,Sanger测序法准确性高,可对其他方法进行补充,实验室可结合自身情况进行选择。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因分型检测 方法学比较
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武汉地区女性人群宫颈细胞28种HPV基因分型及感染特征分析 被引量:1
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作者 王栋 颜新生 张丹 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第2期272-278,318,共8页
目的 分析武汉地区女性人群宫颈细胞人类乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)基因分型及感染特征,为本地区宫颈癌的筛查、早期预防策略及疫苗接种提供科学的依据。方法 收集2021年7月至2022年7月在武汉亚心总医院妇科门诊就诊和体检... 目的 分析武汉地区女性人群宫颈细胞人类乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)基因分型及感染特征,为本地区宫颈癌的筛查、早期预防策略及疫苗接种提供科学的依据。方法 收集2021年7月至2022年7月在武汉亚心总医院妇科门诊就诊和体检中心常规健康体检的4 160例女性人群的宫颈脱落细胞标本,采用PCR+反向点杂交技术对标本进行28种HPV基因亚型检测,分析不同人群及年龄组女性HPV感染现状。结果 (1)4 160例女性人群、妇科门诊及健康体检人群HPV感染率为:14.69%(611/4160)、16.40%(364/2219)和12.73%(247/1941)。妇科门诊及健康体检人群感染率差异有统计学意义(χ^(2)=11.18,P<0.01)。(2)4 160例女性人群HPV阳性检出799例次,28种HPV基因型均检出,高危型(high-risk, HR)和低危型(low-risk, LR)HPV占比前五位基因型为:HR-HPV 52、53、16、51、39和LR-HPV 61、54、42、81、44。妇科门诊及健康体检人群HR-HPV占比前三位的基因型分别为:HPV 52、53、51和HPV 52、53、16。≤25岁组、26~35岁组、36~45岁组、46~55岁组及≥56岁组各组中占比第一的HR-HPV型别均为HPV 52。(3)女性人群HPV单一及双重感染占比分别为:78.07%(477/611)、16.20%(99/611)。妇科门诊及健康体检人群单一及多重感染率分别为:12.44%(276/2 219)、3.97%(88/2 219);10.36%(201/1 941)、2.37%(46/1 941),差异有统计学意义(χ^(2)=4.42,P<0.05;χ^(2)=8.46,P<0.01)。(4)上述各年龄组HPV总体感染率分别为:17.55%、13.53%、14.24%、14.64%和23.12%,感染率差异有统计学意义(χ^(2)=15.82,P<0.01)。各年龄组HPV总体、单一及多重感染率呈现近似“U”形变化曲线,其中≤25岁组和≥56岁感染率高。结论 武汉地区女性人群HPV感染率较高,以单一感染为主,常见HR-HPV型别为52、53、16、51、39型,不同人群HPV感染率和基因型分布不同。HPV感染的两个高峰分别为≤25岁和≥56岁,各年龄组HPV基因型分布不同。本研究可为该地区HPV疫苗接种和宫颈癌预防策略提供指导。 展开更多
关键词 武汉地区 人乳头瘤病毒 基因分型 感染率 宫颈癌
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青海省海西州鼠疫自然疫源地分离鼠疫菌株CRISPR基因分型研究
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作者 张琪 代瑞霞 +7 位作者 何建 靳娟 李胜 王兴斌 施昊旻 艾丽孜热·艾尼瓦尔 廖星豪 张雪飞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期665-669,共5页
目的利用DNA规律聚集簇间隔短回文重复序列(Clustered regularlyinter-spaced short palindromic repeats CRISPR)分型方法,全面探索海西地区分离鼠疫菌株是否存在新的基因型,为鼠疫菌溯源鉴定及流行病学分析提供理论依据。方法分离培... 目的利用DNA规律聚集簇间隔短回文重复序列(Clustered regularlyinter-spaced short palindromic repeats CRISPR)分型方法,全面探索海西地区分离鼠疫菌株是否存在新的基因型,为鼠疫菌溯源鉴定及流行病学分析提供理论依据。方法分离培养海西地区1961-2009年间取自鼠疫患者、媒介昆虫及中间宿主的50株鼠疫菌后提取其DNA,利用PCR技术,对鼠疫菌CRISPR分型中的YPa、YPb、YPc 3个位点进行扩增,测定其扩增产物核酸序列并进行分析,将测得CRISPR序列与文献最新报道的CRISPR Dictionary和NCBI数据库进行比对,找出新的CRISPR spacer阵列,基因型别,分析其进化关系,最终确定青海省海西州喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫菌株的CRISPR基因库。结果50株鼠疫菌在3个CRISPR位点上共有24种spacer,其中YPa位点上有13种、YPb位点8种、YPc位点3种,b51是新发现的spacer。50株鼠疫菌可被分为16个基因型,共归为6大CRISPR类群。Ca35′是该地区主要流行类群;Ca7是流行最为广泛的类群;Cb4和Cb4′仅存在于格尔木唐古拉地区。结论青海省海西州地区鼠疫菌种群结构复杂,Ca35′、Ca7、Cb4′是流行最普遍的种群,G26-a1′型、G22型、G9型、G26-a1′a4-为主要基因型,呈现显著的地区分布特征,今后可以利用CRISPR基因分型技术加强该地区鼠疫溯源检测和防控工作。 展开更多
关键词 规律聚集簇间隔短回文重复序列 鼠疫菌 基因分型 青海省海西州
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一例抗-Dia合并抗-Wra的疑难标本鉴定及基因分型检测
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作者 牟秋菊 范亮峰 +4 位作者 王学锋 向东 蔡晓红 祝丽丽 雷航 《中国输血杂志》 CAS 2023年第2期195-198,共4页
目的1例产生抗-Di^(a)联合抗-Wr^(a)的患者血样,结合血清学检测及基因检测分析,探讨Diego血型基因筛查的意义。方法采用血型血清学试验进行血型鉴定、抗体筛选鉴定、抗体效价测定及交叉配血;对患者血样进行DNA提取,并PCR扩增、直接测序... 目的1例产生抗-Di^(a)联合抗-Wr^(a)的患者血样,结合血清学检测及基因检测分析,探讨Diego血型基因筛查的意义。方法采用血型血清学试验进行血型鉴定、抗体筛选鉴定、抗体效价测定及交叉配血;对患者血样进行DNA提取,并PCR扩增、直接测序法检测Diego血型基因。结果患者血清中存在抗-Di^(a)(IgG效价16)合并抗-Wr^(a)(IgG效价2);直接测序结果显示患者Diego血型基因型为Di(a-b+)/Wr(a-b+);选择Di^(a)和Wr^(a)抗原阴性献血者血液与患者血样进行交叉配血,配血相合。结论对低频抗体检测可将基因分型与血型血清学实验相结合,有利于商品化血型抗体稀缺情况下的血型鉴定与血液选择,保障临床供血及输血安全。 展开更多
关键词 Diego血型系统 抗-Di^(a) 抗-Wr^(a) 基因分型
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感染四项阴性献血者去白细胞悬浮红细胞中EB病毒的检测及基因分型
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作者 陈秋雨 任慧娟 +2 位作者 王颖君 贾高鹏 韩艳秋 《山东医药》 CAS 2023年第22期58-60,共3页
目的 探讨感染四项阴性献血者去白细胞悬浮红细胞感染EBV的情况及基因分型。方法 采用荧光PCR技术对500例去白细胞悬浮红细胞血袋进行EB病毒核酸定量,统计其感染率,并根据EBV的EBNA2与EBNA3C基因连锁多态性及BamHI基因某些片段的保留与... 目的 探讨感染四项阴性献血者去白细胞悬浮红细胞感染EBV的情况及基因分型。方法 采用荧光PCR技术对500例去白细胞悬浮红细胞血袋进行EB病毒核酸定量,统计其感染率,并根据EBV的EBNA2与EBNA3C基因连锁多态性及BamHI基因某些片段的保留与缺失通过PCR联合限制性片段长度多态性(RFLP)的检测对EBV阳性标本进行A/B、F/f、C/D分型,分别统计出各型别的检出率。结果 500例血液制品样本中共有44例检测到有EB病毒DNA拷贝,阳性率为8.8%(44/500)。其中A/B分型中A型检出率为36.36%(16/44),B型检出率为63.64%(28/44),A型和B型混合感染未检出。F/f分型中F型检出率为79.55%(35/44),f型的检出率为20.45%(9/44),无两型混合感染。C/D分型中C型检出率为70.45%(31/44),D型检出率为29.55%(13/44),无两型混合感染。结论 感染四项阴性献血者输血时有EBV感染的可能,EBV阳性的样本中,多数以B、C、F型EBV感染为主。 展开更多
关键词 EB病毒 去白细胞悬浮红细胞 核酸检测 基因分型 输血
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一种适用于高通量基因分型的水稻种子切片DNA制备技术
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作者 林旻 杨绍华 +5 位作者 林艳 王月 胡太蛟 宋亚娜 潘雷博 陈在杰 《福建农业科技》 CAS 2023年第10期40-47,共8页
建立一种高质量、低成本的水稻种子切片DNA制备方法,用于育种群体的高通量基因分型。通过对比TPS法提取水稻叶片DNA及96孔板结合磁珠法提取切片种子DNA的纯度和浓度,进一步采用STARP(Semi-thermal asymmetric PCR)标记检测验证96孔板结... 建立一种高质量、低成本的水稻种子切片DNA制备方法,用于育种群体的高通量基因分型。通过对比TPS法提取水稻叶片DNA及96孔板结合磁珠法提取切片种子DNA的纯度和浓度,进一步采用STARP(Semi-thermal asymmetric PCR)标记检测验证96孔板结合磁珠法提取水稻切片种子DNA的质量。结果表明:96孔板结合磁珠法提取水稻种子切片的DNA质量和纯度优于TPS法提取水稻叶片的DNA质量;STARP标记检测验证结果显示96孔板结合磁珠法提取水稻切片种子DNA可适用于GS3、Wx的STARP标记基因分型,其鉴定结果与测序结果一致。研究显示96孔板结合磁珠法可以从微量水稻种子切片中提出高回收率、高纯度、高完整度、无PCR抑制物的DNA用于高通量STATP法基因单倍型分析,可获得一种96孔板结合磁珠法提取DNA的高通量基因分型操作流程。 展开更多
关键词 水稻种子切片 96孔板结合磁珠法 高通量基因分型 STARP技术
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