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189份桃种质肉质性状形成相关位点基因型鉴定及组合分析
1
作者 王朝晖 李勇 +6 位作者 曹珂 朱更瑞 方伟超 陈昌文 王新卫 吴金龙 王力荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2367-2379,I0017-I0027,共24页
【目的】通过分子标记与生物信息学手段,鉴定189份桃种质与肉质形成相关的F-M基因座、YUC11启动子区转座子插入、NAC72编码区9 bp插入的基因型及3个位点组合情况,为深入研究桃果实肉质形成机制及育种亲本选配提供理论基础。【方法】通过... 【目的】通过分子标记与生物信息学手段,鉴定189份桃种质与肉质形成相关的F-M基因座、YUC11启动子区转座子插入、NAC72编码区9 bp插入的基因型及3个位点组合情况,为深入研究桃果实肉质形成机制及育种亲本选配提供理论基础。【方法】通过PCR扩增、竞争性等位基因特异PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)、高分辨率溶解曲线(high resolution melting analysis,HRM)技术,对F-M基因座倍型、YUC11转座子插入、NAC729 bp插入进行检测;同时结合重测序数据利用生物信息学方法进一步验证,从而准确鉴定189份桃种质肉质性状形成相关位点基因型及组合情况。【结果】F-M基因座编码多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)的PGM与PGF是调控桃果实肉质形成的两个重要基因。189份桃种质中,PGM与PGF分别有159份(84%)、99份(52%)。F-M基因座共发现H0、H1、H2、H34种单倍型,占比分别为33%、39%、4%、24%。在F-M基因座,不溶质粘核以H3H3、H2H3组合为主,溶质粘核以H0H0、H0H1组合为主,溶质离核以H1H1、H0H1组合为主。发现18份含有硬质基因型的种质,在YUC11启动子区含有转座子纯合插入。HRM结果表明,NAC72编码区9 bp插入纯合(早熟)有45份种质、插入杂合(中熟)有71份种质、无插入(晚熟)有73份种质,中熟与晚熟种质占比77%;其中6份种质基因型与表型差别较大。不溶质粘核、溶质粘核、溶质离核3种常见肉质类型,在3个位点最多的基因型组合分别是mmffHdHdI、MMffHdHdI、MMFFHdHdL。【结论】通过分子试验与生物信息学相结合进一步证实了F-M基因座存在4种单倍型;发现18份含有硬质基因型的种质;开发了一种用于鉴定桃成熟期的分子标记;鉴定出不同种质在肉质相关位点的基因型组合形式。 展开更多
关键词 桃 肉质 基因型鉴定 基因型组合
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RELM-β基因敲除大鼠的繁育及基因型鉴定
2
作者 陈惠莲 周灵灵 +5 位作者 谢思琳 张超 谭骏岚 王飞英 易健 戴爱国 《实验动物科学》 2023年第3期12-17,共6页
目的探讨抵抗素样分子β(RELM-β)基因敲除大鼠的最优繁育方式和基因型鉴定方法。方法将RELM-β^(-/-)纯合子雌性Sprague Dawley(SD)大鼠和野生型雄性Wild type(WT)SD大鼠按2∶1交配,繁育出F1杂合子大鼠,采用RELM-β^(-/-)纯合子互交、R... 目的探讨抵抗素样分子β(RELM-β)基因敲除大鼠的最优繁育方式和基因型鉴定方法。方法将RELM-β^(-/-)纯合子雌性Sprague Dawley(SD)大鼠和野生型雄性Wild type(WT)SD大鼠按2∶1交配,繁育出F1杂合子大鼠,采用RELM-β^(-/-)纯合子互交、RELM-β+/-杂合子互交、纯合子及杂合子互交(正交及反交)4种方式交配,PCR扩增凝胶电泳法鉴定子代大鼠基因型,观察子代大鼠的外形,统计子代大鼠数量、体质量及纯合率。结果PCR扩增凝胶电泳法成功鉴定亲代及子代大鼠的基因型,3种基因型大鼠的外观形态无明显差异,3周至6周龄大鼠体质量无明显差异,不同交配方式子代数量无明显差异。结论合理的繁殖方法并进行正确的鉴定是获得RELM-β基因敲除SD大鼠的重要途径,PCR扩增凝胶电泳法具有快速、经济,重复性较好的优点。 展开更多
关键词 基因敲除 抵抗素样分子β 基因型鉴定 繁育方法
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一种适宜高通量基因型鉴定的植物组织取样法及其应用
3
作者 仲威宇 朱晓斌 +2 位作者 夏正俊 李艳华 张丽辉 《长春师范大学学报》 2023年第12期102-106,共5页
高效快速植物基因型鉴定是现代分子育种及分子生物研究中基因定位与克隆的前提条件,因而快速且高通量的取样技术有利于建立高效快速植物基因型鉴定技术体系。随着高通量测序技术的飞速发展,可对重要遗传材料进行重测序来进行全基因组范... 高效快速植物基因型鉴定是现代分子育种及分子生物研究中基因定位与克隆的前提条件,因而快速且高通量的取样技术有利于建立高效快速植物基因型鉴定技术体系。随着高通量测序技术的飞速发展,可对重要遗传材料进行重测序来进行全基因组范围内基因型鉴定,但因成本及鉴定周期等限制,该技术尚难应用于大群体遗传材料的图位克隆及基于基因型鉴定的分子育种。虽然目前已有多种不同的植物叶片取样方法、DNA提取方法,但步骤繁琐,耗时较长,或所需要特殊的仪器设备,其效率并不能满足现代高通量的技术需求。本研究以外直径为3.0 mm的塑料圆管结合木质牙签为简易的取样器,将大豆叶片均匀准确地取样至384深孔微孔板,同时优化了配套的DNA提取方法与步骤,建立了一整套的高效大豆植株基因型鉴定流程。本鉴定技术体系可大大提高工作效率,缩短鉴定周期。应用该技术流程,成功地对杂合型洐生后代群体1150个植株个体进行了基因型鉴定,确定了与黄化突变相关分子标记之间的联系,为进一步精细定位与克隆控制黄化突变基因奠定了基础。本研究所建立的植物组织高效取样法及基因型鉴定流程可扩展应用于水稻、玉米等多种作物的基因克隆研究与分子育种中。 展开更多
关键词 DNA提取 高通量取样 384微孔深孔板 基因型鉴定
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京白梨等品种S基因型鉴定及新基因S_(28)和S_(30)的核苷酸序列分析 被引量：40
4
作者 张妤艳 吴俊 +1 位作者 衡伟 张绍铃 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期496-500,共5页
根据梨S基因高度保守区C1和C3区,设计1对引物P1和P2,对梨品种的基因组DNA进行S基因特异扩增、克隆、测序,并在GenBank中BLAST比较,确定S基因特异性片段,对京白梨等6个供试自交不亲和品种的S基因型比对结果为:白梨中的‘库尔勒香梨’为S2... 根据梨S基因高度保守区C1和C3区,设计1对引物P1和P2,对梨品种的基因组DNA进行S基因特异扩增、克隆、测序,并在GenBank中BLAST比较,确定S基因特异性片段,对京白梨等6个供试自交不亲和品种的S基因型比对结果为:白梨中的‘库尔勒香梨’为S21S28,‘苹果梨’为S17S19;砂梨中的‘台湾蜜梨’为S11S22;西洋梨中的‘葫芦梨’为SaSb;秋子梨中的‘京白’为S16S30,‘早梨18’为S4S28。其中S28和S30为首次登录的新S基因,在GenBank的登录号分别为AY562394(库尔勒香梨)和AY876945(京白)。 展开更多
关键词 梨 自交不亲和性 S基因 S基因型鉴定
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31株苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因型鉴定及表达产物研究 被引量：13
5
作者 张杰 宋福平 +2 位作者 左雅慧 戴莲韵 黄大昉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期372-378,共7页
利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系 ,鉴定了 31株Bt菌株的cry基因类型 ,并进行了SDS PAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明 :2 5株含cry1基因 ,表达蛋白 1 30～ 1 50kD ;其中 1 6株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活... 利用已建立的苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系 ,鉴定了 31株Bt菌株的cry基因类型 ,并进行了SDS PAGE分析和杀虫生物活性测定。研究表明 :2 5株含cry1基因 ,表达蛋白 1 30～ 1 50kD ;其中 1 6株含有对鞘翅目和鳞翅目害虫皆有活性的cry1I基因 ,其表达蛋白为 81kD ;1 5株同时含有cry1和cry2基因 ( 1 3株表达蛋白约为 60kD) ;1 0株含有未知待定基因 ;6株不含所鉴定的cry基因 (其中 2株有表达产物 )。室内生物测定表明 :cry1、cry2基因表达的菌株对鳞翅目害虫具有高杀虫活性 ,7株对舞毒蛾和膜翅目———杨叶蜂幼虫具有较高杀虫活性 ;含有cry1Aa、cry1Ac、cry2或cry1Ab、cry1Ac、cry2基因组合的菌株对棉铃虫幼虫均显示杀虫活性 ,其中 6、1 2、30号菌株毒力最强。不含上述cry基因的菌株均无杀虫活性。以上结果证明 ,通过cry基因类型鉴定和表达产物的SDS PAGE分析可以预测菌株的杀虫活性。 展开更多
关键词 苏云金孢杆菌 CRY基因 基因型鉴定 SDS-PAGE
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‘翠冠’梨2个后代品种S基因型鉴定及杂交亲和性强度观察 被引量：8
6
作者 戴美松 王月志 +1 位作者 孙田林 施泽彬 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期132-138,共7页
以‘西子绿’ב翠冠’梨组合的2个F1代品种‘初夏绿’与‘翠玉’为材料,利用S基因PCR-RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)检测技术与PCR产物转质粒测序技术鉴定其基因型,并综合应用花粉原位萌发动态的荧光显微观察与田间授... 以‘西子绿’ב翠冠’梨组合的2个F1代品种‘初夏绿’与‘翠玉’为材料,利用S基因PCR-RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)检测技术与PCR产物转质粒测序技术鉴定其基因型,并综合应用花粉原位萌发动态的荧光显微观察与田间授粉试验研究其杂交亲和性强度。结果表明:‘初夏绿’与‘翠玉’的S基因型皆为S3S4;‘初夏绿’和‘翠玉’的自交不亲和强度中等,二者相互间授粉不完全亲和,而与‘翠冠’间的相互授粉均表现为完全亲和。 展开更多
关键词 '初夏绿’ '翠玉’ S基因型鉴定 杂交亲和性
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奶牛肠道寄生虫感染情况调查及两种主要原虫病的种类基因型鉴定 被引量：8
7
作者 陈功义 王海燕 +2 位作者 李丽 李爱心 裴淑丽 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第3期47-49,共3页
近年来,国家积极推进农业产业结构调整,畜牧业是结构调整的重要部分,奶牛业在畜牧产业中越来越重要,牛奶已成为人民生活的必须品,对提高人民生活水平和保障身体健康有重要意义.胃肠道寄生虫病是奶牛养殖中常见的、危害严重的疾病,可造... 近年来,国家积极推进农业产业结构调整,畜牧业是结构调整的重要部分,奶牛业在畜牧产业中越来越重要,牛奶已成为人民生活的必须品,对提高人民生活水平和保障身体健康有重要意义.胃肠道寄生虫病是奶牛养殖中常见的、危害严重的疾病,可造成巨大经济损失.研究表明,奶牛感染线虫后,每头奶牛的产奶量每天可降低1.68～2.35 kg[1].在生产中,犊牛和泌乳母牛易受胃肠道寄生虫病侵害,可引起犊牛营养不良、消瘦甚至死亡等;母牛表现为产奶量下降、乳脂率低、产奶高峰期短,易流产、不孕,产弱胎,死胎等. 展开更多
关键词 肠道寄生虫病 感染情况调查 奶牛业 基因型鉴定 农业产业结构调整 原虫病 种类 泌乳母牛
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Smad3基因剔除小鼠的繁殖与基因型鉴定 被引量：5
8
作者 孙岩松 吕雅歆 +4 位作者 时彦胜 战大伟 李文龙 张爱兰 杨晓 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第3期182-185,共4页
目的　为进一步深入研究Smad3基因在脊椎动物发育中的重要作用 ,对Smad3基因剔除小鼠进行保种和繁育研究。方法　采用基因剔除杂合子小鼠进行保种 ,通过PCR和Southern杂交对杂合子小鼠交配所产生的后代进行基因型鉴定 ,纯合子小鼠和野... 目的　为进一步深入研究Smad3基因在脊椎动物发育中的重要作用 ,对Smad3基因剔除小鼠进行保种和繁育研究。方法　采用基因剔除杂合子小鼠进行保种 ,通过PCR和Southern杂交对杂合子小鼠交配所产生的后代进行基因型鉴定 ,纯合子小鼠和野生型小鼠用于表型分析 ,杂合子小鼠用于留种和繁殖生产。结果　采用PCR方法对 2 78只子代小鼠进行了基因型鉴定 ,83只为野生型 ,133只为杂合子 ,6 2只为纯合子。结论　Smad3基因剔除突变能稳定遗传。采用杂合子小鼠保种 。 展开更多
关键词 Smad3基因剔除小鼠 杂合子 纯合子 SMAD3基因 子代 表型分析 野生型 保种 基因型鉴定 繁殖
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Arrb2基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定 被引量：3
9
作者 孙妩弋 孙家昌 +2 位作者 厉歆然 彭文婷 魏伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期878-881,共4页
目的 探讨Arrb2基因敲除鼠的繁育和基因型分析,验证聚合酶链式反应(PCR)法对Arrb2基因敲除鼠基因型检测的适用性。方法 将引进的Arrb2纯合♂小鼠和野生型♀鼠进行交配繁殖出子一代,获得的F1代杂合子小鼠继续进行交配,待小鼠2周龄时剪... 目的 探讨Arrb2基因敲除鼠的繁育和基因型分析,验证聚合酶链式反应(PCR)法对Arrb2基因敲除鼠基因型检测的适用性。方法 将引进的Arrb2纯合♂小鼠和野生型♀鼠进行交配繁殖出子一代,获得的F1代杂合子小鼠继续进行交配,待小鼠2周龄时剪尾部组织提取DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。将获得的纯合子小鼠与异性杂合子交配,以获得更多的基因敲除纯合子小鼠。Western blot检测验证获得的Arrb2基因敲除纯合子小鼠的主要脏器中β-arrestin2蛋白的表达情况。结果 Arrb2基因敲除鼠的繁育和鉴定取得了成功,获得了一批基因敲除鼠。F1代杂合子小鼠交配获得的F2代小鼠出现3种基因型:Arrb2+/+、Arrb2+/-、Arrb2-/-,使用PCR法成功鉴别了子代鼠的基因型。Western blot结果表明,Arrb2基因敲除纯合子小鼠肝、肾组织中几乎不表达β-arrestin2蛋白。结论 正确的繁殖和鉴定是得到纯合Arrb2基因敲除鼠的重要途径,PCR法鉴别小鼠基因型具有简便、快捷、可靠的特点。 展开更多
关键词 Arrb2 基因敲除 基因型鉴定 聚合酶链式反应 繁育 蛋白表达
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11个延边地区栽培梨品种的S基因型鉴定 被引量：3
10
作者 巩艳明 宗成文 +2 位作者 曹后男 金灿 李文剑 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期575-579,共5页
鉴定梨品种的S基因型可为合理配置授粉树、杂交亲本选配提供理论依据。为鉴定11个延边地区栽培梨品种的S基因型,利用梨的自交不亲和基因(S-RNase)特异引物FTQQYQ和anti-IIWPNV,对11个梨品种的基因组DNA进行S基因特异扩增,并对扩增片段... 鉴定梨品种的S基因型可为合理配置授粉树、杂交亲本选配提供理论依据。为鉴定11个延边地区栽培梨品种的S基因型,利用梨的自交不亲和基因(S-RNase)特异引物FTQQYQ和anti-IIWPNV,对11个梨品种的基因组DNA进行S基因特异扩增,并对扩增片段进行回收、克隆、测序,使用生物信息学软件对各序列进行分析和同源性搜索比对,最终确定各品种的S基因型。结果分别是:苹果梨、东宁五号大梨、延光梨均为S1S17;苹博香为S1S8m;早酥为S1Sd;延边谢花甜为S17S31;尖把梨为S12S30;延边明月梨为S3Se;小香水芽变为SeSx;朝鲜洋梨为SeS3;身不知为S5Sd。 展开更多
关键词 梨 自交不亲和性 DNA序列分析 S基因型鉴定
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GJB2基因条件敲除小鼠的繁殖、基因型鉴定及听力检测 被引量：3
11
作者 万亚蕊 张延平 +1 位作者 张晓强 杨仕明 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期505-508,共4页
目的探讨GJB2基因条件敲除(conditional connexin 26knock out,cCx26KO)小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定方法,为进一步研究GJB2基因突变导致非综合征型聋的机制奠定基础。方法将引进的两对转基因小鼠Cx26loxp/loxp和Pax2-Cre/+进行交配饲... 目的探讨GJB2基因条件敲除(conditional connexin 26knock out,cCx26KO)小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定方法,为进一步研究GJB2基因突变导致非综合征型聋的机制奠定基础。方法将引进的两对转基因小鼠Cx26loxp/loxp和Pax2-Cre/+进行交配饲养与繁殖,选取子一代雌性Cx26loxp/-_Pax2-Cre/+小鼠与雄性小鼠Cx26loxp/loxp合笼交配,即获得cCx26KO小鼠。提取鼠尾组织基因组DNA,PCR方法鉴定动物基因型。采用c-ABR检测成年cCx26KO小鼠和野生型小鼠的听力,进一步验证PCR方法的正确性。结果 cCx26KO小鼠繁殖成功后,采用PCR方法鉴定分析,成功获得Cx26loxp/loxp_Pax2Cre/+、Cx26loxp/-_Pax2-Cre/+、Cx26loxp/loxp、Cx26loxp/-4种基因型小鼠,其繁殖结果符合孟德尔遗传定律。与野生型小鼠相比,cCx26KO小鼠c-ABR反应阈显著升高,约达95dB SPL。结论 PCR方法可准确鉴定子鼠的基因型,雌性Cx26loxp/-_Pax2-Cre/+小鼠与雄性Cx26loxp/loxp小鼠交配是获得cCx26KO实验小鼠的有效途径。 展开更多
关键词 GJB2基因 小鼠 基因敲除 野生型 基因型鉴定 感音神经性聋
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补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR条件优化 被引量：2
12
作者 郑静 李丽梅 +5 位作者 阳泰 刘阳 刘进 李敏惠 杨淑霞 邹强 《成都医学院学报》 CAS 2010年第3期228-232,共5页
目的对补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系及扩增程序进行优化,检测PCR优化体系的适用性和灵敏性。方法通过改进引物设计、改变PCR反应过程中Mg2+浓度、引物浓度、退火温度、模板DNA浓度及反应循环次数,分析比较PCR扩增效果。... 目的对补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系及扩增程序进行优化,检测PCR优化体系的适用性和灵敏性。方法通过改进引物设计、改变PCR反应过程中Mg2+浓度、引物浓度、退火温度、模板DNA浓度及反应循环次数,分析比较PCR扩增效果。结果优化后的补体C3基因敲除小鼠基因型鉴定的PCR反应体系中,Mg2+浓度在2-4mmol/L,引物浓度在0.025-0.4μmol/L,循环次数在30-45次之间均能扩增得到清晰均一的特异性条带;同时,引物退火温度在55.5℃-69.6℃范围内均适用;优化后PCR体系能够检测的最低DNA浓度为1.41ng/μl,即模板DNA在反应体系中的总量为约2.82ng.结论已经建立的优化后的PCR基因扩增体系特异性高且稳定可靠。 展开更多
关键词 基因敲除小鼠 基因型鉴定 PCR条件优化
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基于子代基因型鉴定技术研究FMR1敲除对C57BL/6小鼠繁殖性能的影响 被引量：3
13
作者 谢金东 杨燕燕 +4 位作者 林玮 俞春英 周建华 刘德强 王训立 《中国农学通报》 2015年第11期68-71,共4页
为探讨FMR1基因敲除对C57BL/6小鼠繁殖性能的影响,将FMR1基因敲除杂合子小鼠饲养于SPF环境,依照遗传学规则进行繁育,并采用PCR法利用小鼠尾部组织鉴定子代小鼠的基因型。结果表明,PCR技术可以检测小鼠的基因型,且具有方便快捷、直观可... 为探讨FMR1基因敲除对C57BL/6小鼠繁殖性能的影响,将FMR1基因敲除杂合子小鼠饲养于SPF环境,依照遗传学规则进行繁育,并采用PCR法利用小鼠尾部组织鉴定子代小鼠的基因型。结果表明,PCR技术可以检测小鼠的基因型,且具有方便快捷、直观可靠的特点。子代经过检测可得野生型、杂合子和纯合子3种基因型;在此鉴定基础上,挑选10周龄C57BL/6 FMR1 KO和同源SPF级C57BL/6种鼠各10对,采取1:1全同胞兄妹近亲繁殖的方法,测定各对第2胎仔鼠的繁殖性能,并进行比较分析。结果显示,C57BL/6 FMR1 KO小鼠在窝产仔数、离乳率、初生鼠体重和体长、离乳体长及雌雄比例等数值偏低,但均差异不显著(P>0.05);而两者的离乳体重差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 基因敲除 FMR1 基因型鉴定 繁殖性能
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A2a基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定 被引量：1
14
作者 王一龙 陈通克 +1 位作者 管敏强 陈锡文 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第11期5674-5675,共2页
将引进的A2a基因敲除杂合子小鼠饲养于SPF环境中,依照遗传学规则进行繁育,提取每种基因型小鼠尾部组织基因组DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型。结果表明,A2a基因敲除杂合子小鼠子代中将出现野生型、杂合子和纯合子3种基因型。
关键词 A2a小鼠 繁殖 基因型鉴定
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条件性基因敲除:骨髓细胞特异性敲除Ncol2基因小鼠的建立和基因型鉴定 被引量：1
15
作者 郝海邦 杨承忠 岳碧松 《四川动物》 CSCD 北大核心 2011年第6期961-963,共3页
Ncol2是新发现的参与免疫调节的重要因子,Ncol2基因骨髓细胞特异性敲除小鼠的建立,能够有针对性的研究Ncol2基因缺失后对免疫系统的影响。根据条件性基因敲除的原理,本文利用loxp转基因小鼠和在骨髓细胞特异性表达Cre重组酶的LysMcre小... Ncol2是新发现的参与免疫调节的重要因子,Ncol2基因骨髓细胞特异性敲除小鼠的建立,能够有针对性的研究Ncol2基因缺失后对免疫系统的影响。根据条件性基因敲除的原理,本文利用loxp转基因小鼠和在骨髓细胞特异性表达Cre重组酶的LysMcre小鼠,繁殖建立了骨髓细胞特异性敲除Ncol2基因的小鼠,并提供了用鼠尾做基因型鉴定的简便方法。 展开更多
关键词 条件性基因敲除 骨髓细胞 Ncol2基因 基因型鉴定
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心脏和软骨细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的基因型鉴定 被引量：1
16
作者 侯宁 王剑 +2 位作者 李文龙 张继帅 杨晓 《生物技术通讯》 CAS 2005年第3期262-264,共3页
我们曾经报道了分别在心脏(α-MHC-Cre)和软骨细胞(Col2A1-Cre)特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的成功研制。为了对这2种转基因小鼠进行特异性的基因型鉴定,设计了2对特异性PCR引物,其中一条引物分别位于α-肌球蛋白重链基因(α-MHC)启... 我们曾经报道了分别在心脏(α-MHC-Cre)和软骨细胞(Col2A1-Cre)特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的成功研制。为了对这2种转基因小鼠进行特异性的基因型鉴定,设计了2对特异性PCR引物,其中一条引物分别位于α-肌球蛋白重链基因(α-MHC)启动子和Ⅱ型胶原(Col2A1)启动子上。以6种不同组织特异性Cre重组酶转基因小鼠基因组DNA为模板,利用设计的特异性引物以及位于Cre编码区的通用引物进行PCR反应。结果显示,2对特异性引物可以分别将心肌细胞特异性和软骨细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠与其他组织特异性Cre重组酶转基因小鼠有效区分开来。 展开更多
关键词 CRE重组酶 转基因小鼠 基因型鉴定 特异性表达 软骨细胞 心脏 组织特异性 特异性引物 细胞特异性 基因组DNA PCR引物 PCR反应 Ⅱ型胶原 重链基因 肌球蛋白 通用引物 启动子 MHC 编码区 设计 心肌
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广东雷州杂草稻黑壳基因Bh4和红皮基因Rc的基因型鉴定
17
作者 夏启玉 赵辉 +5 位作者 贺萍萍 张丽丽 杨小亮 肖苏生 张雨良 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2020年第12期2400-2405,共6页
为测定雷州杂草稻的黑色颖壳基因Bh4和红色果皮基因Rc的基因型,本研究对雷州10个杂草稻群体的100个单株的种子的颖壳和果皮颜色进行表型观察,同时通过PCR扩增及序列分析对Bh4和Rc的基因型进行鉴定。结果表明,雷州杂草稻中黑色颖壳和黄... 为测定雷州杂草稻的黑色颖壳基因Bh4和红色果皮基因Rc的基因型,本研究对雷州10个杂草稻群体的100个单株的种子的颖壳和果皮颜色进行表型观察,同时通过PCR扩增及序列分析对Bh4和Rc的基因型进行鉴定。结果表明,雷州杂草稻中黑色颖壳和黄色颖壳的种子几乎各占一半,果皮颜色则以红色为主,有少量白色和浅红色果皮的种子。雷州杂草稻的Bh4和Rc的基因型与表型鉴定结果一致。57份黑色颖壳杂草稻的Bh4基因型为39个野生型和18个杂合型,25份黄色颖壳和18份黄色带黑斑颖壳杂草稻的Bh4基因型均为缺失22 bp的突变型;90份红色果皮杂草稻的Rc基因型为73个野生型和17个杂合型,4份白色和6份浅红色果皮杂草稻的Rc基因型均为缺失14 bp的突变型。本研究为分析雷州杂草稻的Bh4和Rc基因的来源提供了分子基础。 展开更多
关键词 杂草稻 黑壳基因 红皮基因 基因型鉴定
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鸡传染性支气管炎病毒地方分离株S1基因克隆和基因型鉴定
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作者 祁贤 叶向阳 +3 位作者 张婉华 朱永军 步志高 刘思国 《上海农业学报》 CSCD 2000年第4期52-56,共5页
利用IBV全长S1基因特异性引物 ,以纯化的 3个标准株M4 1、H52 、T和 6个地方分离株 (QD、ZZ、GZ、TJ、DL和YC)的基因组RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增出预期大小约 1.73kbcDNA片段 ,经BAMHI和HindIII酶切插入到质粒 pUC18中 ,并在大肠杆菌... 利用IBV全长S1基因特异性引物 ,以纯化的 3个标准株M4 1、H52 、T和 6个地方分离株 (QD、ZZ、GZ、TJ、DL和YC)的基因组RNA为模板 ,用RT PCR方法扩增出预期大小约 1.73kbcDNA片段 ,经BAMHI和HindIII酶切插入到质粒 pUC18中 ,并在大肠杆菌JM 83中实现了克隆。对 6个分离株的S1基因PCR产物进行HaeIIIRFLP分析 ,表明QD、TJ属于M4 1基因型 ,ZZ和GZ与T基因型一致 ;而DL、YC表现为不同的基因型 ,这一结果与血清中和实验结果基本吻合 ,证实我国IBV流行株已发生基因变异。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 RFLP 基因型鉴定
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念球菌表型与基因型鉴定的比较
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作者 刘维达 吴绍熙 郭宁如 《中华疾病控制杂志》 CAS 1997年第1期42-44,共3页
为了比较念珠菌表型鉴定与基因型鉴定间的差异，最近我们对8种188株念珠菌进行了常规形态学、生化反应鉴定及电泳核型分析，结果发现二者的符合率为87．23％。对有差异的24株菌再进行AMS补充性鉴定，支持基因型鉴定结果的有12株，支持... 为了比较念珠菌表型鉴定与基因型鉴定间的差异，最近我们对8种188株念珠菌进行了常规形态学、生化反应鉴定及电泳核型分析，结果发现二者的符合率为87．23％。对有差异的24株菌再进行AMS补充性鉴定，支持基因型鉴定结果的有12株，支持表型的有4株，三者均不一致的有8株。研究表明，基因型能更真实地反映菌种的生物学本质，是表型鉴定的必要补充。 展开更多
关键词 念珠菌 表型鉴定 基因型鉴定 电泳核型
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脉冲电泳转移膜全染色体杂交──一种新的念珠菌基因型鉴定方法
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作者 刘维达 紫建华 +1 位作者 吴绍熙 郭宁如 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第2期25-27,共3页
将８种念珠菌标准株用ＣＨＥＦ电泳技术分离基因组全染色体并进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹转移，然后用１株白念珠菌和１株热带念珠菌的全染色体做探针分别与该转移膜杂交，从杂交结果可了解菌种间的亲缘关系，有助于确定其分类学地位。研... 将８种念珠菌标准株用ＣＨＥＦ电泳技术分离基因组全染色体并进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹转移，然后用１株白念珠菌和１株热带念珠菌的全染色体做探针分别与该转移膜杂交，从杂交结果可了解菌种间的亲缘关系，有助于确定其分类学地位。研究表明该方法特异、可靠，可做为一种新的念珠菌基因型鉴定方法。 展开更多
关键词 念珠菌属 脉冲场凝胶电泳 染色体DNA 基因型鉴定
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