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豌豆凝集素基因转化单倍体烟草 被引量：6
1
作者 王逸群 赵仁贵 +1 位作者 王玉兰 孙珊珊 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期21-23,共3页
豆科植物凝集素在对根瘤菌的识别中起重要作用。通过农杆菌介导 ,采用叶盘法将豌豆凝集素基因转化单倍体烟草 ,获得了转基因再生植株。对转基因植株进行了GUS检测。该转基因单倍体烟草可用于非豆科植物进行凝集素对根瘤菌的识别作用研究。
关键词 豌豆凝集素基因转化 单倍体烟草 基因转化 生物固氮 根瘤菌
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农杆菌介导的双价抗盐基因转化番茄的研究 被引量：19
2
作者 刘晶 周树峰 +2 位作者 陈华 韩和平 李银心 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1636-1644,共9页
植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状,将多个耐盐相关基因导入同一植物更有助于提高植物的耐盐能力。运用农杆菌介导法向转AtNHX1(拟南芥Na+/H+逆向运输蛋白编码基因)的番茄(Lycopersicumesculentum L.Moneymaker’)株系X1OEA1自交... 植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状,将多个耐盐相关基因导入同一植物更有助于提高植物的耐盐能力。运用农杆菌介导法向转AtNHX1(拟南芥Na+/H+逆向运输蛋白编码基因)的番茄(Lycopersicumesculentum L.Moneymaker’)株系X1OEA1自交二代植株(T2)中转入山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)。PCR、Southern、RT-PCR和甜菜碱含量分析结果表明,BADH已经整合到番茄基因组中,并在转基因植株中转录和翻译表达。叶绿素荧光(Fv/Fm)、相对电导率(Rc/Rc’)、叶绿素含量(Chla+b)、叶绿素a/b比(Chla/b)、光合速率(Pn)测定结果表明,200mmol·L-1NaCl胁迫下,双转化的番茄植株各项生理指标均优于单转化AtNHX1的番茄。转双基因植株TT0-2随着NaCl浓度的增加,Fv/Fm值下降幅度最小;相对电导率与非胁迫条件下相比增加了3.6倍,而单转化AtNHX1的T2增加了4.2倍;与转单基因植株T2相比,茎部干重、鲜重分别增加12.5%、19.8%;叶部干重、鲜重分别增加22.5%、14.0%,差异达显著水平。初步证明双基因转化有助于增强番茄的耐盐性。同时对番茄的转化系统进行优化的结果表明,使用抗生素特美汀的转化效率明显高于头孢霉素的。 展开更多
关键词 农杆菌 BADN AtNHXI 双基因转化 耐盐性 番茄 基因转化 农杆菌介导 Na^+/H^+逆向运输 甜菜碱醛脱氢酶基因 转基因植株
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水稻基因枪法多基因转化研究 被引量：23
3
作者 戴顺洪 李良材 +3 位作者 丁月云 何锶洁 曹守云 田文忠 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1998年第4期345-350,共6页
为探索多基因转化系统,利用基因枪法进行水稻3个质粒的共转化研究,结果从25个转基因植株中获得3个三转化植株N12、K4-39和K1-1-66,成功地将分别位于不同质粒载体上的GUS,hpt和RTBV CP基因同时导入到水稻中。3个三转化植株中N12、K4-39... 为探索多基因转化系统,利用基因枪法进行水稻3个质粒的共转化研究,结果从25个转基因植株中获得3个三转化植株N12、K4-39和K1-1-66,成功地将分别位于不同质粒载体上的GUS,hpt和RTBV CP基因同时导入到水稻中。3个三转化植株中N12、K4-39正常可育。对N12的后代遗传分析表明,该转基因植株中3个载体所携外源基因均呈孟德尔式分离(3:1),3个外源基因分别整合到水稻的两条染色体上。GUS基因与hpt连锁,RTBV CP位于另一条染色体上。 展开更多
关键词 水稻 基因枪法转化 多基因转化 共转化
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樱桃砧木叶片再生系统建立及抗菌肽基因转化 被引量：28
4
作者 王关林 夏秀英 +2 位作者 钟文田 方宏筠 姜明兰 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期209-211,共3页
以优良樱桃砧木新品系 98 1、Colt、大青叶为试材进行叶片离体再生及根癌农杆菌介导遗传转化 ,建立了高频率再生系统 ,并获得抗菌肽转基因植株。诱导叶片再生的最佳培养基为MS附加BA 1.0～2 .0mg/L、NAA 0 .3～ 0 .5mg/L、GA 0 .5mg/L、... 以优良樱桃砧木新品系 98 1、Colt、大青叶为试材进行叶片离体再生及根癌农杆菌介导遗传转化 ,建立了高频率再生系统 ,并获得抗菌肽转基因植株。诱导叶片再生的最佳培养基为MS附加BA 1.0～2 .0mg/L、NAA 0 .3～ 0 .5mg/L、GA 0 .5mg/L、AgNO3 5 .0～ 10 .0mg/L。农杆菌及受体感受态是影响转化的关键 ,延迟筛选可提高叶片中转化细胞对卡那霉素的抗性而利于再生。PCR及SouthernBlot检测为阳性 ,表明抗菌肽基因已整合到樱桃砧木 98 1基因组。 展开更多
关键词 樱桃 砧木 叶片再生系统 抗菌肽 基因转化
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根癌农杆菌介导TA29-Barnase基因转化甘蓝型油菜的研究 被引量：41
5
作者 何业华 熊兴华 +8 位作者 官春云 李栒 林良斌 陈社员 刘忠松 李文彬 钟军 刘春林 周小云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期615-620,共6页
经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg&... 经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg·L-1BA +10mg·L-1Km +30 0mg·L-1Carb培养基上进行选择 ,转化率为 8 8% ,PCR检测和Southern杂交检测证明外源基因已整合了甘蓝型油菜基因组中。 展开更多
关键词 根癌农杆菌介导 TA29-Barnase基因 基因转化 甘蓝型油菜 雄性不育
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84K杨树耐盐基因转化研究 被引量：38
6
作者 樊军锋 韩一凡 +2 位作者 李玲 彭学贤 李嘉瑞 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期33-37,共5页
在已建立了 84K杨叶片外植体再生系统的基础上 ,利用叶盘法首次开展了 84K杨双价耐盐基因 mtl D/gut D的转化研究 ,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素 (选择性抗生素 )连续筛选 ,获得了 1 6株卡那霉素抗性转化植株。抗性植株经 PCR检... 在已建立了 84K杨叶片外植体再生系统的基础上 ,利用叶盘法首次开展了 84K杨双价耐盐基因 mtl D/gut D的转化研究 ,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素 (选择性抗生素 )连续筛选 ,获得了 1 6株卡那霉素抗性转化植株。抗性植株经 PCR检测 ,有 4株呈阳性。耐盐实验表明 ,3株阳性植株抗 Na Cl能力比对照有不同程度提高。 展开更多
关键词 基因转化 84K 耐盐基因 卡那霉素 叶盘法
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甘蓝下胚轴的高效再生和农杆菌介导B.t.基因转化甘蓝 被引量：44
7
作者 卫志明 黄健秋 +5 位作者 徐淑平 薛红卫 钟仲贤 顾桢祥 徐悌惟 李贤 《上海农业学报》 CSCD 1998年第2期11-18,共8页
分别对取材时间和培养基组成进行研究，建立了甘蓝下胚轴外植体的高效再生系统，当选取6～7d苗龄的下胚轴，将其置于MSB＋BA2．5mg／L＋ZT1mg／L＋IBA0．1mg／L的芽分化培养基中，并于培养基中附加AgNO37．5mg／L时，最高的芽分化频率... 分别对取材时间和培养基组成进行研究，建立了甘蓝下胚轴外植体的高效再生系统，当选取6～7d苗龄的下胚轴，将其置于MSB＋BA2．5mg／L＋ZT1mg／L＋IBA0．1mg／L的芽分化培养基中，并于培养基中附加AgNO37．5mg／L时，最高的芽分化频率，“夏光甘蓝”母本“103”可达81．67％，父本“60天早椰菜”可达78．56％。在此基础上，我们对影响转化频率的不同因素，即：抑制农杆菌生长的抗生素种类及其浓度、预培养的有无及感染时的浓度、下胚轴外植体与农杆菌的感染时间和共培养时间、筛选时抗生素的加入时间进行了探讨。共获得100余株卡那霉素抗性植株，全部移栽成活，生长良好。对转基因植株总DNA进行Southernblotting分析，证明nptⅡ基因已整合到甘蓝植株细胞基因组中。 展开更多
关键词 甘蓝 下胚轴 再生 农杆菌介导 基因转化 基因
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影响根癌农杆菌介导的香蕉基因转化早期的主要因素 被引量：19
8
作者 黄霞 黄学林 +2 位作者 李哲 陈云凤 李筱菊 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期68-72,共5页
用含质粒载体pCAMBIA2 30 1的根癌农杆菌 (Agrobacteriuminoculation)转化“6 4 1”香蕉 (MusaAAACavendishsubgroupcv.6 4 - 1)的薄片外植体 ,通过测定GUS基因瞬时表达率 ,对转化早期的主要影响因素进行了研究。结果表明 :农杆菌EHA10 ... 用含质粒载体pCAMBIA2 30 1的根癌农杆菌 (Agrobacteriuminoculation)转化“6 4 1”香蕉 (MusaAAACavendishsubgroupcv.6 4 - 1)的薄片外植体 ,通过测定GUS基因瞬时表达率 ,对转化早期的主要影响因素进行了研究。结果表明 :农杆菌EHA10 5较适合于介导转化。将薄片置于固体高渗培养基上培养 4h后 ,通过真空减压法使农杆菌接种于其上 ,获得了较高的瞬时表达率 (41 6 7% ) ,是对照 (8 33% )的 5倍 ,农杆菌悬液稀释 5倍用于转化较好 ,共培养 3d为宜。薄片外植体越靠近根部 ,瞬时表达率越高。而外植体预培养会降低瞬时表达率。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 香蕉 基因转化 瞬时表达 转基因植物 影响因素
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建立青菜(Brassica　chinensis)农杆菌介导法基因转化体系 被引量：25
9
作者 蔡小宁 佘建明 +3 位作者 朱祯 朱卫民 袁希汉 苏小俊 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1997年第2期110-114,共5页
以青菜地方品种矮脚黄、苏州青的子叶、子叶柄、真叶为外植体，在改良ＭＳ培养基上离体培养获得再生植株。在不定芽诱导培养基中添加２～２０ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３可显著提高子叶不定芽诱导频率；添加０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ和１～２ｍｇ／... 以青菜地方品种矮脚黄、苏州青的子叶、子叶柄、真叶为外植体，在改良ＭＳ培养基上离体培养获得再生植株。在不定芽诱导培养基中添加２～２０ｍｇ／ＬＡｇＮＯ３可显著提高子叶不定芽诱导频率；添加０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ和１～２ｍｇ／ＬＣＰＰＵ既可提高不定芽诱导频率，又可获得较多数量的不定芽。用含ＣｐＴＩ基因和ＮＰＴＩＩ基因的农杆菌感染子叶，获得了具有卡那霉素抗性的再生植株。培养基中添加羧苄青霉素促进子叶再生不定芽，头孢霉素和卡那霉素则抑制子叶再生。卡那霉素敏感性测定结果表明，当培养基中含卡那霉素１０ｍｇ／Ｌ时。 展开更多
关键词 青菜 子叶 农杆菌介导法 基因转化体系 再生植株
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农杆菌介导Ferritin基因转化苹果的研究 被引量：17
10
作者 叶霞 黄晓德 +3 位作者 陶建敏 乔玉山 姚泉洪 章镇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期387-389,共3页
以皇家嘎拉苹果的叶片为转化受体,通过根癌农杆菌介导将铁结合蛋白(Ferritin)基因导入受体中,诱导获得了抗性芽.经PCR检测从抗Km植株中选择到4株阳性植株,进一步经PCR-Southern杂交证实外源基因已整合到4株苹果基因组中,RT-PCR检测表明,... 以皇家嘎拉苹果的叶片为转化受体,通过根癌农杆菌介导将铁结合蛋白(Ferritin)基因导入受体中,诱导获得了抗性芽.经PCR检测从抗Km植株中选择到4株阳性植株,进一步经PCR-Southern杂交证实外源基因已整合到4株苹果基因组中,RT-PCR检测表明,Ferritin基因在4株转基因植株中得到了表达. 展开更多
关键词 铁结合蛋白 根癌农杆菌 基因转化 苹果
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雪花莲外源凝集素基因转化番茄 被引量：43
11
作者 吴昌银 叶志彪 +1 位作者 李汉霞 唐克轩 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第7期719-723,共5页
将含有雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的质粒pRSSGNA1通过冻融法转化到根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)菌株LBA44 0 4中。采用叶盘法转化番茄 (LycopersiconesculentumMill.)栽培品种“C8”、“A3 9”和“A... 将含有雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的质粒pRSSGNA1通过冻融法转化到根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens (SmithetTownsend)Conn)菌株LBA44 0 4中。采用叶盘法转化番茄 (LycopersiconesculentumMill.)栽培品种“C8”、“A3 9”和“A53 ” ,获得了含GNA基因的 43株转化植株。通过卡那霉素抗性鉴定、NPTⅡ基因PCR和GNA基因Southernblot分析表明 ,GNA基因已整合到番茄的基因组中。初步抗蚜虫 (MyzuspersicaeSulzer)试验证明 ,转基因番茄有一定的抗蚜虫效果。 3株转基因植株的NPTⅡ基因在自交子代中的分离比例符合 3∶1孟德尔遗传规律。 展开更多
关键词 番茄 蚜虫 GAN 抗虫育种 基因转化
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细菌几丁质酶基因转化番茄的研究 被引量：10
12
作者 任春梅 高必达 +2 位作者 张学文 何迎春 苏建明 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期298-301,共4页
为了获得抗真菌病的番茄材料 ,采用农杆菌介导法将细菌几丁质酶基因转化番茄子叶 ,获得了抗卡那霉素的转化植株 ,PCR检测初步证明细菌几丁质酶基因已整合到番茄的基因组 .同时对番茄耐 Kan水平、转化受体的预培养以及共培后洗涤抑菌进... 为了获得抗真菌病的番茄材料 ,采用农杆菌介导法将细菌几丁质酶基因转化番茄子叶 ,获得了抗卡那霉素的转化植株 ,PCR检测初步证明细菌几丁质酶基因已整合到番茄的基因组 .同时对番茄耐 Kan水平、转化受体的预培养以及共培后洗涤抑菌进行了研究 .结果表明 :卡那霉素质量浓度为 5 0 m g/ L 时就能完全抑制番茄子叶再生 ;共培后直接用抑菌剂洗涤的抑菌效果较好 ;番茄子叶预培养 展开更多
关键词 细菌 几丁质酶 基因转化 番茄 农杆菌介导法
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农杆菌介导rolC基因转化烟草植株的研究 被引量：14
13
作者 章镇 孙爱君 +1 位作者 房经贵 盛炳成 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期25-29,共5页
通过根癌农杆菌介导手段 ,将来自发根农杆菌的rolC基因转化到烟草 (Nicotianatabacum )植株的基因组 ,并借助GUS组织化学法 ,PCR扩增法和Southern杂交进行了鉴定证实。rolC基因改变转基因烟草植株某些性状的特点 ,如植株高度变矮、花冠... 通过根癌农杆菌介导手段 ,将来自发根农杆菌的rolC基因转化到烟草 (Nicotianatabacum )植株的基因组 ,并借助GUS组织化学法 ,PCR扩增法和Southern杂交进行了鉴定证实。rolC基因改变转基因烟草植株某些性状的特点 ,如植株高度变矮、花冠变小、雄蕊变短等 。 展开更多
关键词 烟草 ROLC基因 基因转化 农杆菌介导 转基因植株
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木薯的组织培养和基因转化 被引量：13
14
作者 李洪清 李美茹 +1 位作者 梁承邺 黄毓文 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期359-366,共8页
木薯是重要的热带作物之一， 其块根富含淀粉， 是热带、亚热带地区近５ 亿人粮食的主要来源。简单介绍近年来运用生物技术改良木薯的研究进展。
关键词 木薯 组织培养 基因转化 改良 育种 粮食作物
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棉花茎尖分生组织在微粒轰击法基因转化中的应用 被引量：15
15
作者 朱卫民 吴敬音 +3 位作者 佘建明 蔡小宁 朱祯 李向辉 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 1998年第2期74-78,共5页
利用棉花茎尖分生组织易于再生成完整植株的特点，结合使用基因枪轰击法将ＣＰＴＩ基因导入棉花茎尖分生组织。经过再生、筛选等培养过程已获得若干卡那霉素抗性株。棉花品种、棉株茎尖的发育天数及茎尖附带的下胚轴长度等对转化效果都... 利用棉花茎尖分生组织易于再生成完整植株的特点，结合使用基因枪轰击法将ＣＰＴＩ基因导入棉花茎尖分生组织。经过再生、筛选等培养过程已获得若干卡那霉素抗性株。棉花品种、棉株茎尖的发育天数及茎尖附带的下胚轴长度等对转化效果都有不同程度的影响。筛选的起始时间、培养基的转换时间及卡那霉素的浓度梯度等因素对筛选效果有明显影响。 展开更多
关键词 棉花 茎法分生组织 基因转化 微粒轰击
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月季的组织培养和基因转化研究进展 被引量：15
16
作者 李美茹 李洪清 +1 位作者 孙梓健 陈贻竹 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期243-249,共7页
分子生物学技术在花卉产业中展示了巨大的、潜在的应用前景。月季是世界性的重要观赏花卉 ,其生物技术研究一直是国际的热点。
关键词 月季 胚状体发生 器官发生 基因转化
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人工合成柞蚕抗菌肽D基因转化沙田柚 被引量：18
17
作者 郑启发 陈大成 +1 位作者 黄自然 胡桂兵 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期103-107,共5页
采用根癌农杆菌介导法将柞蚕抗菌肽Ｄ基因导入沙田柚上胚轴等外植体，经卡那霉素筛选，获得了若干转基因植株对这些植株进行胭脂碱电泳检测、点印迹杂交、ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析。
关键词 沙田柚 根癌农杆菌 抗菌肽D基因 基因转化
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双价抗菌肽基因转化辣椒 被引量：22
18
作者 李乃坚 余小林 +3 位作者 李颖 黄自然 张银东 王得元 《热带作物学报》 CSCD 2000年第4期45-51,共7页
在建立高效快速辣椒（Ｃａｐｓｉｃｕｍ　 ａｎｎｕｕｍ　 Ｌ，）子叶离体培养和植株再生体系的基础上，将昆虫抗菌肽Ｂ、Ｄ基因构建而成的双价质粒ｐＣＤＢ－ＩＩ以农杆菌为介导转入５个辣椒栽培品种，共获得ＫａｎＲ植株１２００多株... 在建立高效快速辣椒（Ｃａｐｓｉｃｕｍ　 ａｎｎｕｕｍ　 Ｌ，）子叶离体培养和植株再生体系的基础上，将昆虫抗菌肽Ｂ、Ｄ基因构建而成的双价质粒ｐＣＤＢ－ＩＩ以农杆菌为介导转入５个辣椒栽培品种，共获得ＫａｎＲ植株１２００多株，对部分ＫａｎＲ植株进行点杂交、ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测，结果证明了外源基因被成功整合。盆栽接青枯菌试验，结果显示，转基因植株具有较强的抗病力。 展开更多
关键词 辣椒 抗菌肽 双基因表达载体 基因转化
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mtlD/gutD双价耐盐基因转化秦美猕猴桃的研究 被引量：21
19
作者 樊军锋 李嘉瑞 +2 位作者 韩一凡 李玲 彭学贤 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第3期53-58,共6页
在已建立的秦美猕猴桃叶片最佳再生系统的基础上 ,利用叶盘法和基因枪相结合的方法进行了秦美猕猴桃双价耐盐基因 m tl D/gut D的转化研究 ,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素 (选择性抗生素 )连续筛选 ,获得了 2 0株卡那霉素抗性转... 在已建立的秦美猕猴桃叶片最佳再生系统的基础上 ,利用叶盘法和基因枪相结合的方法进行了秦美猕猴桃双价耐盐基因 m tl D/gut D的转化研究 ,经诱导不定芽及诱导生根阶段卡那霉素 (选择性抗生素 )连续筛选 ,获得了 2 0株卡那霉素抗性转化植株。抗性植株经 PCR检测 ,有 6株呈阳性。耐盐试验表明 4株阳性植株抗 Na-Cl能力比对照均有不同程度提高。 PCR及耐盐试验初步证明耐盐基因转化获得成功。 展开更多
关键词 mtlD/gutD双价耐盐基因 秦美猕猴桃 耐盐测定 基因转化
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根癌农杆菌介导绿色荧光蛋白基因转化印度酸桔的研究 被引量：20
20
作者 石玮 李东栋 +1 位作者 邓秀新 伊华林 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期109-112,共4页
通过根癌农杆菌介导将绿色荧光蛋白基因转入印度酸桔的胚性愈伤组织中 ,经潮霉素筛选 ,获得抗性愈伤组织 ,并再生植株。对这些植株进行GUS染色、PCR分析、绿色荧光检测和Sourthern杂交验证 ,结果表明绿色荧光蛋白已经在转基因植株中表达。
关键词 愈伤组织 根癌农杆菌 介导 绿色荧光蛋白 基因转化 印度酸桔
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