美科学家用基因阻断法让老鼠皮肤“返老还童”

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《生物学教学》 北大核心 2008年第5期78-79,共2页

据东方网2007年12月6日及2007年12月1日《参考消息》援引法新社美国芝加哥2007年11月29日电，美国加利福尼亚斯坦福大学医学院的研究人员发现，关闭一种与组织老化有关的基因可以使老鼠皮肤的基因表达和组织特征都恢复到年轻状态。

关键词 基因阻断 皮肤 老鼠 家用 科学 斯坦福大学 加利福尼亚 研究人员

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基因阻断了前列腺癌的进程

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作者 覃毅 《国外医学情报》 1995年第16期7-7,共1页

肿瘤细胞可以通过血行转移到身体的其他部位引发肿瘤形成。前列腺癌的扩散是很缓慢的,但是对于少数不幸的男性来说,前列腺癌可以转移而且是致命的。直至目前,医生们也很难诊断可能发生转移的前列腺癌。近期发表于5月12日的《Science》... 肿瘤细胞可以通过血行转移到身体的其他部位引发肿瘤形成。前列腺癌的扩散是很缓慢的,但是对于少数不幸的男性来说,前列腺癌可以转移而且是致命的。直至目前,医生们也很难诊断可能发生转移的前列腺癌。近期发表于5月12日的《Science》杂志上的一项研究表明,一种特殊基因表达减弱的前列腺癌患者可能有发生转移的危险。 展开更多

关键词 前列腺癌细胞 基因表达 血行转移 肿瘤形成 肿瘤细胞 肿瘤扩散 肿瘤抑制基因 进程 基因阻断 小鼠

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遗传性结直肠癌的基因阻断

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作者 陈园园 颜宏利 《中华结直肠疾病电子杂志》 2024年第1期1-5,共5页

遗传性结直肠癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,年轻化为其重要特征。随着肿瘤治疗技术和辅助生殖技术的进步以及患者对生育质量要求的提高,基因阻断可避免遗传性肿瘤基因向下一代传递,已成为该类患者最佳的辅助生育策略选择。本文就... 遗传性结直肠癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,年轻化为其重要特征。随着肿瘤治疗技术和辅助生殖技术的进步以及患者对生育质量要求的提高,基因阻断可避免遗传性肿瘤基因向下一代传递,已成为该类患者最佳的辅助生育策略选择。本文就遗传性结直肠癌的研究现状和基因阻断方法做一概述,并提出全流程解决方案。该方案亦可借鉴用于其他遗传性肿瘤的基因阻断实践。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 遗传性结直肠癌 基因阻断 辅助生殖 第三代试管婴儿技术 生育力保护 全流程解决方案

原文传递

遗传性结直肠癌及其基因阻断的研究现状与患者的临床管理

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作者 陈园园 颜宏利 《结直肠肛门外科》 2023年第2期110-114,共5页

遗传性结直肠癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,年轻化为其重要特征。随着肿瘤治疗技术、辅助生殖技术的进步及患者对生育质量要求的提高,如何帮助该类患者实现优生优育成为该领域的一个重要研究方向。基因阻断可避免遗传性肿瘤致病基... 遗传性结直肠癌的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,年轻化为其重要特征。随着肿瘤治疗技术、辅助生殖技术的进步及患者对生育质量要求的提高,如何帮助该类患者实现优生优育成为该领域的一个重要研究方向。基因阻断可避免遗传性肿瘤致病基因向下一代传递,已成为该类患者的最佳辅助生殖策略。本文就遗传性结直肠癌的研究现状和基因阻断方法作一概述,并提出全流程解决方案。同时,该方案亦可供借鉴用于其他遗传性肿瘤的基因阻断实践。 展开更多

关键词 遗传性结直肠癌 基因阻断 辅助生殖技术

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柔红霉素产生菌Streptomyces coeruleorubidus SIPI-1482中dnmV基因的克隆及阻断 被引量：6

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作者 尚珂 谢丽萍 +2 位作者 胡又佳 朱春宝 朱宝泉 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期307-310,共4页

从柔红霉素产生菌SIPI-1482菌株基因组DNA中PCR扩增得dnmV及其上游dnmU基因片段。利用同源重组对SIPI-1482菌株的dnmV基因进行基因阻断,得到一株遗传稳定的破坏子。验证了在该菌株中进行同源重组所需交换臂长度。

关键词 柔红霉素 同源重组 基因阻断

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柔红霉素产生菌SIPI-1482中dnmV基因功能的阻断及恢复 被引量：3

6

作者 尚珂 宫倩 +2 位作者 胡又佳 朱春宝 朱宝泉 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期64-68,共5页

dnmV基因产物为柔红霉素生物合成途径中TDP-15-脱氧已糖C4酮基还原酶,破坏该基因能阻断柔红糖胺的合成,进而阻断柔红霉素的产生。从天蓝淡红链霉菌(S．coeruleorubidus)SIPI- 1482基因组DNA中经PCR扩增出dnmV及其上游dnmU基因片段,并由... dnmV基因产物为柔红霉素生物合成途径中TDP-15-脱氧已糖C4酮基还原酶,破坏该基因能阻断柔红糖胺的合成,进而阻断柔红霉素的产生。从天蓝淡红链霉菌(S．coeruleorubidus)SIPI- 1482基因组DNA中经PCR扩增出dnmV及其上游dnmU基因片段,并由此构建了用于阻断dnmV基因的同源重组质粒pYG817,转化SIPI-1482菌株后成功地破坏了dnmV基因,发酵结果显示阻断突变株不再代谢产生柔红霉素,为引入新的基因来改变代谢产物的糖基结构打下了基础。通过导入dnmV基因表达质粒可重建该突变株的生物合成途径,恢复产生柔红霉素,但产量比出发菌株要低。 展开更多

关键词 dnmV 柔红霉素 同源重组 基因阻断 功能补偿

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玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 nsdA_(mgh)基因阻断突变株的构建 被引量：2

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作者 沈凤英 吴伟刚 +4 位作者 张艳杰 寇宏达 冀红柳 李亚宁 刘大群 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1741-1752,共12页

为研究从玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中克隆到的,与天蓝色链霉菌M 145中的一个重要负调控基因nsd A基因同源的nsdA_(mgh)基因的功能,本文构建了nsd A_(mgh)基因破坏型重组质粒pSRNA2500(pKC1139::1.5 kb nsdA_(mgh)::1.0 kb Km^r),转化E... 为研究从玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中克隆到的,与天蓝色链霉菌M 145中的一个重要负调控基因nsd A基因同源的nsdA_(mgh)基因的功能,本文构建了nsd A_(mgh)基因破坏型重组质粒pSRNA2500(pKC1139::1.5 kb nsdA_(mgh)::1.0 kb Km^r),转化ET12567(pUZ8002)获得接合转移供体菌ET12567(pUZ8002,pSRNA2500),通过接合转移将重组质粒导入玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63中。在高温和抗生素双重筛选压力下,筛选得到表型为Am^sKm^r的nsd A_(mgh)基因阻断突变株,通过PCR、Dot bloting和Southern blotting验证了突变株中的nsdA_(mgh)基因已被正确阻断。与出发菌株相比,突变株在摇瓶水平上对棉花黄萎病菌的抑制能力提高了一倍。 展开更多

关键词 玫瑰黄链霉菌MEN-MYCO-93-63 pKC1139 nsd A基因 基因阻断 同源重组

原文传递

龟裂链霉菌工业菌中zwf1基因的阻断对土霉素生物合成影响 被引量：3

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作者 郑子静 于岚 +3 位作者 唐振宇 郭元昕 肖慈英 郭美锦 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期35-38,69,共5页

目的运用代谢工程手段对龟裂链霉菌工业菌(Industrial Streptomyces rimosus,SRI)进行基因改造,提高土霉素(oxytetracycline,OTC)产量。方法利用pKC1139质粒阻断SRI基因组中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase)编... 目的运用代谢工程手段对龟裂链霉菌工业菌(Industrial Streptomyces rimosus,SRI)进行基因改造,提高土霉素(oxytetracycline,OTC)产量。方法利用pKC1139质粒阻断SRI基因组中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase)编码基因zwf1。结果筛选得到一株OTC高产突变株,将突变株与原始菌株进行发酵,发现OTC产量比原始菌株提高了36.2%。结论 SRI基因组中zwf1基因的缺失使细胞合成土霉素的能力增强;龟裂链霉菌中初级代谢关键基因调控会影响次级代谢。 展开更多

关键词 龟裂链霉菌工业菌 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 基因阻断 土霉素生物合成

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圈卷产色链霉菌san7324和san7324L基因阻断对形态分化和尼可霉素产生的影响

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作者 孙军 李敬敬 +3 位作者 李月 王川 蔡原 谭华荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期235-246,共12页

【目的】圈卷产色链霉菌全局性调控基因wblA阻断突变后,尼可霉素不再产生。RNA-seq和转录分析表明san7324基因在野生型菌株中可以正常转录,而在wblA阻断突变株(ΔwblA)中不能转录,为此本文旨在揭示san7324与尼可霉素产生的关系。【方法... 【目的】圈卷产色链霉菌全局性调控基因wblA阻断突变后,尼可霉素不再产生。RNA-seq和转录分析表明san7324基因在野生型菌株中可以正常转录,而在wblA阻断突变株(ΔwblA)中不能转录,为此本文旨在揭示san7324与尼可霉素产生的关系。【方法】利用同源双交换策略对san7324进行基因阻断,而后通过基因遗传回补及对尼可霉素生物合成相关基因的转录分析等方法研究san7324的功能。【结果】在相同培养条件下,阻断突变株Δsan7324与野生型菌株相比失去了合成尼可霉素的能力。我们通过同源比对发现圈卷产色链霉菌中还存在一个与san7324同源的基因san7324L,该基因的阻断导致尼可霉素产量降低。当san7324和san7324L两个基因同时被阻断后,得到的突变株Δsan7324-san7324L生长稀疏而且不能正常发育分化形成灰色表型的孢子或孢子链,只能形成白色表型的气生菌丝,同时也丧失了合成尼可霉素的能力。当这两个基因(san7324-san7324L)回补双突变株后,则恢复了野生型的表型(能形成孢子链并恢复尼可霉素的产生)。进一步的研究初步表明san7324和san7324L的阻断主要影响了尼可霉素生物合成基因簇中途径特异性调控基因sanG的转录水平,从而影响圈卷产色链霉菌的发育分化和尼可霉素的产生。【结论】该结果为链霉菌形态分化与生理代谢关系的研究提供了更多的证据,同时为多效调控基因wblA作用机制的阐明奠定了基础。 展开更多

关键词 圈卷产色链霉菌 基因阻断 形态分化 尼可霉素

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透析ADPKD家庭成员对阻断基因病的意愿调查

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作者 吴明洪 刘悦 +4 位作者 朱博韬 王悦 智旭 杨洁 郑丹侠 《中国血液净化》 CSCD 2022年第8期584-587,共4页

目的调查常染色体显性多囊性肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)育龄家庭成员对辅助生殖阻断家族病的知晓率及意愿并进行科普宣传。方法通过血液或腹膜透析中心或者肾内科寻找病因为ADPKD的透析患者,对其家族18... 目的调查常染色体显性多囊性肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)育龄家庭成员对辅助生殖阻断家族病的知晓率及意愿并进行科普宣传。方法通过血液或腹膜透析中心或者肾内科寻找病因为ADPKD的透析患者,对其家族18~45岁的家族成员进行问卷调查,科普,再次问卷调查。结果共40人完成全程问卷,男18例,女22例;年龄(33.4±6.8)岁;已确诊ADPKD 30例。ADPKD近年进展较快的知识知晓率在本次科普后提高,如在肾囊肿前有早期诊断手段从57.5%到95.0%(χ^(2)=15.531,P<0.001),生殖干预有助于繁育健康子代从55.0%到92.5%(χ^(2)=14.526,P<0.001)。调查者对ADPKD易伴发多囊肝、腰痛、ADPKD的遗传方式和遗传概率知晓率在科普前已经>80%;对基因检测及胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)接受度85%以上,本科普将自我评价了解基因检测从57.5%提高到85.0%(χ^(2)=7.384,P=0.007),将自我评价了解PGT从52.5%提高到77.5%(χ^(2)=5.495,P=0.019)。结论本研究尝试以透析中心的ADPKD患者作为源头开展ADPKD的精准生殖阻断科普教育,为后续肾内医生及透析护士参与“预防ADPKD”提供经验。 展开更多

关键词 常染色体显性多囊性肾病 科学普及 早期诊断 基因阻断 意愿

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反义阻断CROC-1基因表达导致细胞生长变慢 被引量：1

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作者 陈建明 余应年 陈星若 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期577-580,共4页

目的 :建立CROC - 1基因表达被阻断的FL -CROC - 1-细胞系 ,研究CROC - 1基因在细胞生长中的作用。方法 :运用反义技术将新近发现的人泛素缀合酶样蛋白基因CROC - 1的适当长度cDNA片断克隆到本室改建的真核细胞表达载体pMAMneo -amp-中 ... 目的 :建立CROC - 1基因表达被阻断的FL -CROC - 1-细胞系 ,研究CROC - 1基因在细胞生长中的作用。方法 :运用反义技术将新近发现的人泛素缀合酶样蛋白基因CROC - 1的适当长度cDNA片断克隆到本室改建的真核细胞表达载体pMAMneo -amp-中 ,经限制性内切酶图谱分析筛选出反向插入的表达CROC - 1反义RNA的重组质粒。将此反义表达重组质粒 (pMAM -antiCROC - 1)用改良的磷酸钙法转染人羊膜FL细胞并用含G418的培养基筛选 ,测定G418抗性的FL -CROC - 1-细胞系的生长速度。结果 :建立的FL-CROC - 1-细胞系在地塞米松诱导下CROC - 1基因表达被反义抑制后 ,其生长速度较对照FL细胞及转染了载体pMAMneo -amp-的FL细胞 (FL -MAMneo)的明显要慢 (P <0 0 5 )。结论 :本研究成功地建立了CROC -1基因表达被阻断的FL -CROC - 1-细胞系 ,并提示CROC - 1基因编码的泛素缀合酶样蛋白在细胞生长中起正调控作用。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 反义阻断CROC-1基因 DNA损伤

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Geldanamycin产生菌生物合成相关基因的克隆与分析 被引量：6

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作者 高群杰 尚广东 +5 位作者 杨樱 孙桂芝 王以光 陶佩珍 娄志贤 姚天爵 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期13-17,27,共6页

目的　从 geldanamycin产生菌吸水链霉菌 (S.hygroscopicus)中克隆生物合成基因 ,为阐明生物合成机制及改造其结构奠定基础。方法　以链霉菌 /大肠埃希氏菌穿梭 cosmids p KC5 0 5为载体构建了插入片段为 2 0～ 30 kb的 S.hygroscopicus... 目的　从 geldanamycin产生菌吸水链霉菌 (S.hygroscopicus)中克隆生物合成基因 ,为阐明生物合成机制及改造其结构奠定基础。方法　以链霉菌 /大肠埃希氏菌穿梭 cosmids p KC5 0 5为载体构建了插入片段为 2 0～ 30 kb的 S.hygroscopicus总 DNA文库。以利福霉素中与 3-氨基 - 5 -羟基苯甲酸 (AHBA)合成相关基因为探针 ,经菌落杂交 ,Southern杂交筛选同源基因片段。测序结果与 Genbank进行同源性比较分析 ,并以attp- 噬菌体载体 KC5 15利用基因阻断实验对克隆的基因片段进行功能鉴定。结果　构建的基因文库含重组基因比率高、基因组覆盖率高 ,稳定性好。经同源基因探针杂交 ,从文库中筛选出 9个阳性 cosmids克隆p CGB2 0、p CGB2 6、p CGB2 8、p CGB2 9、p CGB36、p CGB45、p CGB49、p CGB6 3、p CGB75。测序分析表明 ,cosmidp CGB2 0中 Bam HI- Bam HI 8kb片段两端的不完整 ORF编码蛋白与竹桃霉素 (oleandomycin) PKS Module 5、Module 6 (一致性为 79% )和红霉内酯合成酶 ORF2 (一致性为 75 % )、ORF1(一致性为 73% )、ORF3(一致性为 70 % )高度同源 ;Bam HI- Bam HI3kb片段一端与编码类结核分枝杆菌的磷酸吡哆醛依赖的氨基转移酶家族中半胱氨酸脱硫酶的 DNA有同源性 ,该家族与 AHBA合成酶关系密切。 展开更多

关键词 GELDANAMYCIN 生物合成基因 基因文库 基因阻断 安莎霉素类抗生素

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格尔德霉素基因工程高产菌株的构建和培养 被引量：5

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作者 赫卫清 周红霞 +2 位作者 王红远 高群杰 王以光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期15-20,共6页

在格尔德霉素产生菌吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)中存在两种3-氨基-5-羟基苯甲酸(3-amino-5-hydroxybenzoic acid,AHBA)的生物合成基因簇,根据同源性可分为苯醌类和萘醌类。已证明其中苯醌类的AHBA生物合成基因... 在格尔德霉素产生菌吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus 17997)中存在两种3-氨基-5-羟基苯甲酸(3-amino-5-hydroxybenzoic acid,AHBA)的生物合成基因簇,根据同源性可分为苯醌类和萘醌类。已证明其中苯醌类的AHBA生物合成基因簇负责格尔德霉素(geldanamycin,Gdm)起始单位的合成,而萘醌类的AHBA基因簇可能参与未知安莎化合物的生物合成。为提高吸水链霉菌17997菌种的Gdm发酵产量,并研究高产菌种在固体培养基上孢子的生长周期。采用基因阻断技术,将吸水链霉菌17997中的萘醌类AHBA生物合成基因簇(shnSOP)进行破坏,以获得ΔSOP菌株,从而减少对合成所需共同底物AHBA的争夺。HPLC分析结果表明ΔSOP菌株Gdm的发酵产量比原株提高185%。同时,通过孢子计数发现该菌株在固体培养基上的孢子生长经历2个周期,第2代孢子菌种的Gdm产量较高。 展开更多

关键词 吸水链霉菌17997 格尔德霉素 基因阻断 孢子形成周期

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格尔德霉素生物合成基因功能的验证 被引量：6

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作者 赫卫清 刘玉瑛 +1 位作者 孙桂芝 王以光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1133-1139,共7页

格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)作为热休克蛋白90的特异性抑制剂,是非常有前景的抗肿瘤和抗病毒的药物,我们已从吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus17997)的基因文库中获得了Gdm大部分生物合成基因。为了研究主要基因的功能,选... 格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)作为热休克蛋白90的特异性抑制剂,是非常有前景的抗肿瘤和抗病毒的药物,我们已从吸水链霉菌17997(Streptomyces hygroscopicus17997)的基因文库中获得了Gdm大部分生物合成基因。为了研究主要基因的功能,选择了聚酮合酶基因(Polyketide synthase gene,pks)的第六模块、单加氧酶基因(Mono-oxygenase gene,gdmM)和氨甲酰基转移酶基因(Carbamoyltransferase gene,gdmN)3个基因作为靶点分别进行基因阻断,获得了基因同源双交换的阻断变株△pks、△gdmM和△gdmN。经HPLC检测证实这些基因的阻断变株均不产生Gdm,基因回复实验排除了基因阻断所可能造成的极性效应对其它基因表达的影响,说明所克隆的pks、gdmM和gdmN基因确实是Gdm生物合成所必需的基因。 展开更多

关键词 吸水链霉菌17997 格尔德霉素(Gdm) 基因阻断 基因回复

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AHBA合酶基因的筛选与放线菌素D产生菌的发现 被引量：3

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作者 张会图 刘爱明 +5 位作者 武临专 孙桂芝 韩锋 高群杰 张玉琴 王以光 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期30-33,共4页

根据3,5-AHBA合酶基因序列的保守性所设计的简并引物,通过PCR的方法,从20株未知产物放线菌菌株中,获得两个AHBA合酶基因阳性菌株(S.violaceusniger 4353和Streptomyces rochei 4088)。同源性分析显示,克隆到的3,5-AHBA合酶与已知的3,5-A... 根据3,5-AHBA合酶基因序列的保守性所设计的简并引物,通过PCR的方法,从20株未知产物放线菌菌株中,获得两个AHBA合酶基因阳性菌株(S.violaceusniger 4353和Streptomyces rochei 4088)。同源性分析显示,克隆到的3,5-AHBA合酶与已知的3,5-AHBA合酶蛋白序列有一定的同源性(86%～87%)。对其中一株阳性菌株4353(S.violaceusniger 4353)的发酵活性产物进行了化学分离纯化和TLC、HPLC-UV、MS、~1H-NMR和^(13)C-NMR等分析结构鉴定,表明其发酵产生的一个活性成分为放线菌素D。基因单交换阻断实验结果证明,4353菌株所产生的放线菌素D确实与3,5-AHBA合酶基因相关。本文对获得这一结果的可能原因进行了讨论。 展开更多

关键词 3 5-AHBA合酶基因 基因阻断 放线菌素D

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非洲绿猴肾细胞外源绿色荧光蛋白基因表达的RNA干扰 被引量：3

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作者 陈学辉 崔芳岩 +1 位作者 孟和 潘玉春 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期46-49,共4页

非洲绿猴肾细胞 (Vero)是多种病毒的适应细胞。本研究将外源的绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染到Vero-E6中 ,并利用体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA(siGFP)对其表达进行干扰。结果显示 :siGFP能有效阻断外源的绿色荧光蛋白基因在Vero... 非洲绿猴肾细胞 (Vero)是多种病毒的适应细胞。本研究将外源的绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染到Vero-E6中 ,并利用体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA(siGFP)对其表达进行干扰。结果显示 :siGFP能有效阻断外源的绿色荧光蛋白基因在Vero -E6细胞中的表达 ,而不相关的siRNA则对绿荧光蛋白基因的表达没有影响。这为利用RNAi技术在Vero -E6细胞中 ,抑制外源基因的表达以及通过RNAi技术进行抗病毒的研究奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 非洲绿猴 肾细胞 外源绿色荧光蛋白 基因表达 RNA干扰 基因阻断技术 抗病毒 转录后基因沉默

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链霉菌胞外多糖139A生物合成中引导糖基转移酶基因的克隆和鉴定 被引量：2

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作者 王玲燕 李师弢 +2 位作者 郭连宏 姜蓉 李元 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第8期723-729,共7页

链霉菌 139能够产生一种新的胞外多糖 139A ,该多糖具有抗类风湿性关节炎的活性。为研究多糖 139A的生物合成基因簇 ,首要策略是克隆到在多糖 139A的生物合成中起关键作用的引导糖基转移酶基因。根据其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序... 链霉菌 139能够产生一种新的胞外多糖 139A ,该多糖具有抗类风湿性关节炎的活性。为研究多糖 139A的生物合成基因簇 ,首要策略是克隆到在多糖 139A的生物合成中起关键作用的引导糖基转移酶基因。根据其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序列的两个保守区域设计简并引物 ,通过PCR方法扩增出相应的DNA片段作为探针 ,从链霉菌 139基因组文库中分离到引导糖基转移酶基因ste5 ,并定位于约 32kb的基因簇上。序列分析发现其蛋白序列与引导糖基转移酶具有较高的同源性 ,其C 端含有A ,B和C 3个保守区 ,N 端具有 5个跨膜区。引导糖基转移酶基因阻断突变株不能够产生多糖 139A表明其参与多糖 139A的生物合成。 展开更多

关键词 微生物胞外多糖 生物合成 糖基转移酶 基因阻断 链霉菌

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格尔德霉素生物合成的调控基因 被引量：2

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作者 赫卫清 雷健 +1 位作者 刘玉瑛 王以光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期717-722,共6页

从吸水链霉菌17997中克隆了格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)生物合成酶基因簇,通过生物信息学分析发现两个LAL(Large ATP-bindingregulators of the LuxR family)家族的调控基因gdmRI和gdmRII,基因阻断和基因回复实验证实这两个基因产物... 从吸水链霉菌17997中克隆了格尔德霉素(Geldanamycin,Gdm)生物合成酶基因簇,通过生物信息学分析发现两个LAL(Large ATP-bindingregulators of the LuxR family)家族的调控基因gdmRI和gdmRII,基因阻断和基因回复实验证实这两个基因产物都正调控Gdm的生物合成。 展开更多

关键词 格尔德霉素(Geldanamycin Gdm) 调控基因 基因阻断

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TCDD诱发斑马鱼胚胎shh基因表达降低及其对下颌发育的影响 被引量：1

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作者 杨景峰 董武 +1 位作者 曹颖霞 王思珍 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期506-512,共7页

2,3,7,8-四氯-二苯基-对-二恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)为毒性 很强的环境污染物质。用O-1．0μg／L的TCDD处理受精后24 h(24 hpf)的斑马鱼胚至观察时为止,进行了形 态学观察、基因阻断、原位杂交、TUNEL染色以及... 2,3,7,8-四氯-二苯基-对-二恶英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)为毒性 很强的环境污染物质。用O-1．0μg／L的TCDD处理受精后24 h(24 hpf)的斑马鱼胚至观察时为止,进行了形 态学观察、基因阻断、原位杂交、TUNEL染色以及免疫学染色等实验。结果表明,TCDD处理后会引起斑马鱼 下颌短小,Shh基因在下颌部表达降低;而在芳烃基受体AhR功能阻断的胚胎中,TCDD并没有引起斑马鱼下 颌短小,同时也没有观察到Shh基因表达缺失;免疫学染色表明TCDD和Shh阻断物质Cyclopamine均可引起 斑马鱼下颌区域增殖细胞的减少。TCDD引起的下颌短小可能是首先引起以AhR为媒介的Shh表达缺失,进而 造成下颌部增殖细胞减少。 展开更多

关键词 Shh基因 芳烃基受体 二恶英 基因阻断 下颌 斑马鱼

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吸水链霉菌Streptomyces hygroscopicus 17997中噬菌体基因转移系统的建立及其应用 被引量：4

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作者 高慧英 王以光 +3 位作者 高群杰 尚广东 孙桂芝 杨樱 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期407-411,共5页

由吸水链霉菌Streptomyceshygroscopicus 17997产生的格尔德霉素geldanamycin(GA)属安莎类抗生素 ,具有良好的抗肿瘤和抗病毒活性。本文应用链霉菌温和噬菌体C3 1衍生的KC5 15载体 ,在吸水链霉菌S .hygroscopicus17997中建立并优化了S... 由吸水链霉菌Streptomyceshygroscopicus 17997产生的格尔德霉素geldanamycin(GA)属安莎类抗生素 ,具有良好的抗肿瘤和抗病毒活性。本文应用链霉菌温和噬菌体C3 1衍生的KC5 15载体 ,在吸水链霉菌S .hygroscopicus17997中建立并优化了S .hygroscopicus 17997的基因转染体系。利用所建立的基因转染体系 ,以基因阻断技术从S .hygroscopicus 17997基因文库含有多组PKS基因柯斯质粒中 ,鉴定了与GAPKS生物合成相关基因的柯斯质粒 。 展开更多

关键词 吸水链霉菌 噬菌体基因转移系统 应用 基因阻断 格尔德霉素 生物合成基因

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