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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测药物代谢酶基因多态性平台的建立 被引量:18
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作者 叶阿里 张海燕 +3 位作者 窦亚玲 孔令君 张睿 张晓峰 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第5期30-33,共4页
目的:建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测患者体内药物代谢酶基因多态性的平台。方法选取2013年10月~2014年6月在北京协和医院门诊就诊患者53例 EDTA抗凝外周血,提取全血基因组DNA,用 MALDI-TOF-MS... 目的:建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测患者体内药物代谢酶基因多态性的平台。方法选取2013年10月~2014年6月在北京协和医院门诊就诊患者53例 EDTA抗凝外周血,提取全血基因组DNA,用 MALDI-TOF-MS技术检测53例患者药物代谢酶基因 CYP2C9*2(rs1799853),CYP2C9*3(rs1057910), CYP2C19*2(rs4244285),CYP2C19*3(rs4986893),CYP2C19*4(rs28399504),CYP2C19*5(rs56337013)和 CYP2C19*17(rs12248560)的单核苷酸多态性(SNP)位点,并用 Sanger测序法进行验证。结果用 MALDI-TOF-MS 技术可以同时完成53份样本,2个药物代谢酶基因,7个 SNP位点的检测。53例患者中,发现CYP2C19*2(rs4244285)AG型25例, AA型6例,GG型22例,A等位基因频率为34.9%。CYP2C19*3(rs4986893)AG型4例,GG型49例,A等位基因频率为3.8%。CYP2C9*3(rs1057910)CA型5例,AA型48例,C等位基因频率为4.7%。未发现 CYP2C9*2(rs1799853), CYP2C19*4(rs28399504),CYP2C19*5(rs56337013)和CYP2C19*17(rs12248560)位点突变。经与 Sanger测序法比较,两种检测方法结果的符合率为100%。结论成功建立 MALDI-TOF-MS技术检测药物代谢酶基因多态性的平台,该平台具有高通量、准确的特点,对个性化用药治疗具有重要的临床应用价值。 展开更多
关键词 药物代谢酶 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 单核苷酸多态性
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测华法林代谢酶基因多态性 被引量:4
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作者 郭俊 李小燕 +4 位作者 蔡伦 张魁 董然 王绿娅 杜杰 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期410-413,共4页
目的用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术建立检测人群中华法林代谢酶基因多态性的方法。方法选取2011年1月至2013年1月北京安贞医院心脏外科心脏机械瓣膜置换术后接受华法林抗凝治疗的患者10例,采集外周血,提取全血... 目的用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术建立检测人群中华法林代谢酶基因多态性的方法。方法选取2011年1月至2013年1月北京安贞医院心脏外科心脏机械瓣膜置换术后接受华法林抗凝治疗的患者10例,采集外周血,提取全血基因组DNA,用MALDI-TOF-MS技术检测10例患者华法林代谢酶基因CYP2C9*2(rs1799853)、CYP2C9*3(rs1057910)、CYP2C9*6(rs9332131)、VKORC1 C>T(rs9923231)(-1639G>A)、GGCX G>C(rs11676382)的单核苷酸多态性(SNP)位点,并用Sanger测序法进行验证。结果用MALDI-TOF-MS技术可以同时完成10份标本3个华法林代谢酶基因5个SNP位点的检测。10名服华法林的心脏机械瓣膜置换术患者中,发现VKORC1-1639G>A AG型2例,AA型8例,A等位基因频率为90%。未发现CYP2C9*2(rs1799853)、CYP2C9*3(rs1057910)、CYP2C9*6(rs9332131)和GGCX G>C(rs11676382)突变。经与Sanger测序法比较,符合率为100%。结论成功建立MALDI-TOF-MS技术检测华法林代谢酶基因多态性的平台,该法具有高通量、快速、准确的特点,在个性化医疗上有较大的推广应用价值。 展开更多
关键词 心脏机械瓣膜置换术 华法林 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 单核苷酸多态性
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运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术分析分枝杆菌液体培养管污染菌菌群特征
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作者 蓝吉慧 唐柳生 +2 位作者 黄葵 刘爱梅 董捷 《新发传染病电子杂志》 2024年第2期7-10,共4页
目的了解分枝杆菌液体培养时产生的污染菌菌群特征,分析产生污染的原因,寻找降低污染的方法。方法收集广西壮族自治区胸科医院2023年5月10日至8月25日送检的痰液和肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)标本进行分枝杆菌液体培... 目的了解分枝杆菌液体培养时产生的污染菌菌群特征,分析产生污染的原因,寻找降低污染的方法。方法收集广西壮族自治区胸科医院2023年5月10日至8月25日送检的痰液和肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)标本进行分枝杆菌液体培养,运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术对分枝杆菌液体培养后产生的污染菌进行鉴定,将鉴定出的菌种进行统计归类,分析污染菌的菌群特征。结果6090份呼吸道标本中分枝杆菌阳性标本864份,培养阳性率14.19%(864/6090),污染标本71份,污染率为1.17%(71/6090)。71份污染标本中共分离出74株污染菌,主要菌属为芽孢杆菌和曲霉菌,分别占31.08%(23/74)和24.32%(18/74)。其中灌洗液标本1429份,培养出分枝杆菌阳性标本279份,培养阳性率19.52%(279/1429),污染13株,污染率0.91%(13/1429);痰标本4661份培养出分枝杆菌585株,培养阳性率12.55%(585/4661),污染标本58份,污染率1.24%(58/4661);两种标本培养的阳性率比较,差异有统计学意义(χ^(2)=43.68,P<0.05),污染率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=1.06,P>0.05)。结论分枝杆菌液体培养时产生的污染菌菌群复杂,以芽孢杆菌、曲霉菌为主,因此,必须规范标本的采集和运送,采用有效的前处理方法,以达到降低液体培养污染率的目的。 展开更多
关键词 污染菌 分枝杆菌 辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术直接鉴定阳性血培养病原菌的应用评估 被引量:11
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作者 秦娟秀 黄芊 +3 位作者 高倩倩 谢乙慧 李敏 张灏旻 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期546-551,共6页
目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病... 目的比较MALDI Sepsityper^(TM) Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术直接鉴定血培养阳性病原菌的有效性。方法收集上海交通大学医学院附属仁济医院2016年4-6月血培养仪报警的非重复血培养瓶138个,以传统培养鉴定的方法为金标准,同时采用以上两种前处理方法处理阳性标本,再进行MALDI-TOF MS鉴定。结果本次共收集非重复的血培养阳性标本138份,排除6个假阳性血瓶,鉴定出的病原菌包括革兰阴性菌70株(53.03%)、革兰阳性菌57株(43.18%)、真菌3株和2例复数菌。MALDI Sepsityper^(TM)Kit和血清分离胶促凝管法两种前处理方法的血培养快速鉴定病原菌准确率分别为91.67%和84.09%,种鉴定准确率分别为83.33%和61.36%。两种前处理方法处理后,革兰阴性菌的准确率分别为98.57%和95.71%,革兰阳性菌的准确率分别为87.72%和78.59%,两者鉴定所需时间为40 min/样本和25 min/样本。结论虽然MALDI Sepsityper^(TM)Kit比血清分离胶促凝管法鉴定准确率稍高但两者差异无统计学意义(91.67%对84.09%,P>0.05),与MALDI Sepsityper^(TM) Kit相比,血清分离胶促凝管法是一种快速、易获得、低廉的MALDI-TOF MS直接鉴定血培养病原菌的前处理方法。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI Sepsityper^TM KIT 血清分离胶促凝管法 血培养 病原菌
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术研究人血清转铁蛋白稳定性及裂解产物 被引量:5
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作者 卓慧钦 金宏伟 +2 位作者 黄河清 黄慧英 蔡宗苇 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期791-796,共6页
制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3+)、单铁HTF(HTF-Fe3+)和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解... 制备质谱纯人血清转铁蛋白(HTF),供分子结构分析。选用SDS-PAGE、胶外酶解、基质辅助激光解吸/电离质谱技术(MALDI-TOF)、数据库检索和比对技术鉴定铁饱和HTF、双铁HTF(HTF-2Fe3+)、单铁HTF(HTF-Fe3+)和脱铁HTF(apoHTF)的稳定性和裂解产物。以乙腈溶液作为洗脱相,发现铁饱和HTF在RP-HPLC分离纯化过程中产生裂解现象。铁饱和HTF和HTF-2Fe3+经乙腈处理后均能产生不同分子量的短肽裂解产物,指出HTF结构稳定性与络合铁离子数量有关。铁组分改善了HTF分子结构的稳定性。采用比对法,研究在乙腈作用下HTF裂解成为各种各样短肽的规律,初步阐明其裂解机理。在乙腈作用下,HTF可能通过蛋白质去折叠途径,形成不同多聚态HTF或多肽裂解产物。推测目前用于临床诊断先天性糖基化紊乱(CDG)和慢性酒精滥用(CAA)疾病低准确率的起因可能是受HTF裂解产物或多聚体的干扰。 展开更多
关键词 血清转铁蛋白 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 胶内酶解 反相高效液相色谱 标志蛋白
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应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测载脂蛋白E基因多态性 被引量:4
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作者 欧雪玲 赵方 +2 位作者 许传超 伍新尧 区敬华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期564-567,共4页
【目的】应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测人类载脂蛋白E(apoE)基因的多态性。【方法】用PCR扩增出含apoE两个单核苷酸多态性(SNPs)位点(334T/C和472C/T)的DNA片段作为模板,经延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOFMS进行检测... 【目的】应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测人类载脂蛋白E(apoE)基因的多态性。【方法】用PCR扩增出含apoE两个单核苷酸多态性(SNPs)位点(334T/C和472C/T)的DNA片段作为模板,经延伸反应,产物纯化后利用MALDI-TOFMS进行检测。从而确定样本apoE基因型。【结果】应用本技术对50例广东地区无关个体进行apoE基因多态性检测,共检出3种常见的apoE基因型,其中以apoEΣ3/3型最多,占总数的74.00%;等位基因频率分布以ε3(87.00%)最高。【结论】本实验建立的基于MALDI-TOFMS与引物延伸技术检测apoE基因多态性的方法,具有快速、准确和可靠的特点。 展开更多
关键词 APOE 载脂蛋白E因多态性 MS 常见 检出 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 单核苷酸多态性 MALDI-TOF DNA片段 SNP
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在新生儿β-地中海贫血筛查中的应用 被引量:7
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作者 黄盛文 许吟 +2 位作者 吴娴 周曼 刘兴梅 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第5期341-343,共3页
目的建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术的β-地中海贫血(β-地贫)基因突变检测方法,探讨其在新生儿β-地贫筛查中的临床价值。方法收集新生儿脐血DNA样本515例,针对中国人群中常见的10种β-地贫基因突变类型... 目的建立基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术的β-地中海贫血(β-地贫)基因突变检测方法,探讨其在新生儿β-地贫筛查中的临床价值。方法收集新生儿脐血DNA样本515例,针对中国人群中常见的10种β-地贫基因突变类型,分别设计一套PCR引物和延伸反应引物。待测样本经PCR和延伸反应后,所得产物用Sequenom Mass Array飞行时间质谱仪进行检测,根据质谱图中的峰值确定每份样本的基因型,并用反向点杂交进行验证。结果 515份样本10个突变位点的总判读成功率为99.55%,检测结果与反向点杂交结果完全一致;共检出β-地贫14例,均为突变杂合子,阳性检出率为2.72%;其中,基因型CD41-42/N 6例,CD17/N 5例,IVS-Ⅱ-654/N 2例,CD71-72/N 1例。结论 MALDI-TOF MS技术准确性高,检测时间短,通量高,适用于新生儿β-地贫筛查。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 引物延伸 新生儿筛查
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术分析三七和海兔神经连索内的皂甙组分 被引量:4
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作者 冯丽剑 黄琳 +1 位作者 卓慧钦 黄河清 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1727-1732,共6页
基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术能高效解吸三七提取液(Panaxnotoginseng Extraction,PNE)中的混合皂甙分子为皂甙离子,并供质量分析器检测与分析。选用MALDI-TOF质谱技术直接分析色谱纯皂甙样品的纯度,其检测灵敏度... 基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术能高效解吸三七提取液(Panaxnotoginseng Extraction,PNE)中的混合皂甙分子为皂甙离子,并供质量分析器检测与分析。选用MALDI-TOF质谱技术直接分析色谱纯皂甙样品的纯度,其检测灵敏度优于反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。优化提取中药三七(Panax notoginseng,PN)的混合皂甙,选用MALDI-TOF质谱技术直接分析PNE中的皂甙种类和相对含量,发现PNE至少含有20种不同分子结构的皂甙组分,其中人参皂甙(Ginsenoside)Rg1和三七皂甙(Notoginsen-oside)R1含量相对较高。选用薄板层析法(TLC)制备PNE中的R1皂甙。MALDI-TOF质谱技术研究蓝斑背肛海兔(Notarcus leachiicirrosus Stimpson,NLCS)神经连索内的超微量R1的组成与分布。建立PNE皂甙的指纹图谱,并适合于评价中药三七的品质和分析体内超微量皂甙的代谢过程与机理。 展开更多
关键词 三七 皂甙 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 指纹图谱
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奈达铂耐药食管鳞癌患者血清双向电泳联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术的蛋白筛选 被引量:3
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作者 马俊 顾勇 +2 位作者 鲁建军 缪蓉 罗红鹤 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1825-1827,共3页
目的探讨奈达铂耐药食管鳞癌患者及奈达铂敏感患者的血清蛋白表达谱的差异性及食管鳞癌奈达铂耐药的相关血清蛋白。方法采用固相p H梯度双向凝胶电泳分离奈达铂敏感及奈达铂耐药患者的血清蛋白样本共40例,建立双向凝胶电泳(2-DE)图谱,... 目的探讨奈达铂耐药食管鳞癌患者及奈达铂敏感患者的血清蛋白表达谱的差异性及食管鳞癌奈达铂耐药的相关血清蛋白。方法采用固相p H梯度双向凝胶电泳分离奈达铂敏感及奈达铂耐药患者的血清蛋白样本共40例,建立双向凝胶电泳(2-DE)图谱,再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术及数据库鉴定部分差异蛋白质。结果采用2-DE技术成功获得分辨率高和重复性好的蛋白表达图谱,凝胶图像软件分析后获得差异≥1.5倍以上的蛋白质共68个,经质谱分析鉴定出8种蛋白,其中表达增高的有谷胱甘肽转硫酶(GST)P1、乳酸脱氢酶(LDH)-B、Sox-2、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)-1和基质金属蛋白酶(MMP)-7,表达降低的有E-钙黏蛋白(E-cadherin)、激活素结合蛋白(FS)和磷酸甘油酸激酶(PGK)1。结论应用2-DE技术分离奈达铂耐药食管鳞癌患者及奈达铂敏感患者的血清蛋白表达谱,并通过MALDITOF-MS技术鉴定出与食管鳞癌奈达铂耐药相关的蛋白,为食管鳞癌耐药相关标志物的筛选提供了新的技术方法及候选分子。 展开更多
关键词 双向凝胶电泳 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 食管鳞癌 耐药 奈达铂
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对分枝杆菌液体培养系统菌种鉴定的临床研究 被引量:7
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作者 杜岩青 秦中华 张丽霞 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期871-877,共7页
目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为... 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为临床早期、精准治疗提供病原学依据。方法选取我院Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960分枝杆菌快速液体培养的阳性培养物为研究对象,通过不同的孵育时间、不同大小的研磨珠处理、不同的破壁方式摸索出MALDI-TOF MS对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960阳性培养物鉴定的"最优处理方法",并将所有结果与基因芯片法菌种鉴定做参照进行比对,鉴定不一致的结果通过基因测序确认。结果Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养报阳性后增加孵育时间可提高检出率及鉴定分值,同时使用0.5 mm的氧化锆珠研磨,使用超声震荡混匀处理,鉴定效果最佳。鉴定结果方面,液体系统报阳的420份阳性标本,基因芯片法鉴定结果为结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核菌占28.81%(121/420),9例未鉴定出,未鉴定占2.14%(9/420),错误鉴定占0.95%(4/420),总鉴定率为97.86%(411/420);采用MALDI-TOF MS质谱鉴定420份阳性标本中鉴定出419例,其中结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核占30.00%(126/420),星型奴卡菌0.48%(2/420),巴西奴卡菌占0.24%(1/420),1例未鉴定出,总鉴定率为99.76%。质谱鉴定分值≥2.0的400例占95.24%,分值在1.7~2.0的19例占4.52%,分值<1.7的1例占0.24%。结论本实验实现了Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养阳性培养物的直接质谱鉴定,缩短了培养鉴定的时间,将分枝杆菌鉴定到种水平,能区分出结核菌与非结核菌,同时也能将与分枝杆菌相似的奴卡菌鉴定出来,对临床疾病的鉴别诊断起到了积极的作用。 展开更多
关键词 Bactec^(TM)MGIT^(TM)960液体培养 辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在直接鉴定血流感染病原菌中的应用 被引量:11
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作者 方盼盼 杨俊梅 +2 位作者 杨俊文 高凯杰 王颍源 《中国临床新医学》 2019年第5期518-522,共5页
目的探讨利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立血流感染病原菌快速、准确的鉴定方法。方法收集郑州大学附属儿童医院检验科2017-07~2017-12血培养仪阳性报警血培养瓶524个,抽吸血培养瓶中血液至血清分离胶管,... 目的探讨利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立血流感染病原菌快速、准确的鉴定方法。方法收集郑州大学附属儿童医院检验科2017-07~2017-12血培养仪阳性报警血培养瓶524个,抽吸血培养瓶中血液至血清分离胶管,采用差速离心法富集细菌,利用MALDI-TOF MS对富集后的菌液进行快速鉴定,并与传统培养24~48 h后形成的菌落最终鉴定结果进行比较。结果阳性报警血培养瓶524个,496个为单菌株血流感染,16个为混合菌感染,12例血培养报警假阳性结果。在496个单菌株所致血流感染样本中,菌株的属、种鉴定符合率分别为98.6%(489/496)和95.8%(475/496)。其中,120株革兰阴性菌属、种鉴定符合率分别为99.2%(119/120)和98.3%(118/120); 376株革兰阳性菌属、种鉴定符合率分别为98.4%(370/376)和94.9%(357/376)。16个混合菌感染样本及12个血培养报警假阳性样本均未得到鉴定结果。结论该研究利用MALDI-TOF MS对差速离心富集后的菌液进行直接鉴定,与传统的培养鉴定方法相比,对血流感染中主要病原菌的鉴定符合率较高,且方法快速、简便,成本低廉,有效缩短了检测时间,而且鉴定准确率高,适合在临床微生物实验室中推广应用。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 血流感染 细菌鉴定
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在快速检测病原菌中的研究进展 被引量:2
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作者 王沛 杨燕妮 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期678-680,共3页
传统的临床微生物学检验依赖于长时间的对病原菌的分离、培养及复杂的生化鉴定,有些病原微生物的生化反应不典型则难以准确鉴定。分子生物学技术如PCR技术要求较高,常规实验室不易开展。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS... 传统的临床微生物学检验依赖于长时间的对病原菌的分离、培养及复杂的生化鉴定,有些病原微生物的生化反应不典型则难以准确鉴定。分子生物学技术如PCR技术要求较高,常规实验室不易开展。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种跨学科的检测新技术,在细菌和真菌的快速鉴定、细菌的耐药性检测、流行病学分析方面呈现出较传统鉴定法较多的优势。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 常见病原菌 临床检测
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术分离鉴定生鲜猪肉中沙门氏菌/大肠杆菌类似菌 被引量:12
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作者 李滨洲 陈飞 +5 位作者 郭珍珍 和春昊 吴秋玲 金钺 王亚宾 陈丽颖 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第4期717-722,共6页
目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术鉴别生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门氏菌的常规检验中出现的类似菌。方法在郑州市不同地区分... 目的利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术鉴别生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门氏菌的常规检验中出现的类似菌。方法在郑州市不同地区分批次采集164份生鲜猪肉样品,按照国标方法进行增菌培养,选择性培养基HE和EMB对细菌进行分离纯化。通过MALDI-TOF-MS技术对疑似菌落进行鉴定;提取被检菌株基因组DNA,根据MALDI-TOF-MS鉴定出的细菌种类,参考Gen Bank中相关菌株的已知基因序列分别设计引物,进行PCR扩增、测序和序列比对,以验证MALDI-TOF-MS鉴定结果。结果经MALDI-TOF-MS方法鉴定,从68个疑似菌株中分别检出柠檬酸杆菌(Citrobacter)6株、奇异变形杆菌(Proteobacteria)5株、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)9株、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)1株、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)3株、不动杆菌(Acinetobacter)1株。PCR结果与MALDI-TOF-MS鉴定结果完全一致。结论 MALDI-TOF-MS可用于生鲜猪肉检验过程中大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定。本次共检出6种在HE和EMB培养基上与沙门氏菌/大肠杆菌菌落特征类似的肠杆菌科其他细菌,说明在生鲜猪肉中存在着一定程度的条件致病性肠道细菌污染,因此具有一定的食品安全风险。 展开更多
关键词 生鲜肉 辅助激光解吸电离 飞行时间质谱 条件致病菌 肠道病原菌
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在分枝杆菌检测中的应用进展 被引量:3
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作者 张红敏 余卫业 +4 位作者 刘研研 李艳艳 冯里茹 于微 王俊 《新发传染病电子杂志》 2017年第3期183-187,共5页
分枝杆菌是一类细长略弯曲,有时呈分枝状或丝状体的杆菌,细胞壁含有大量分枝茵酸。分枝杆菌种类较多,主要可分为结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex,MTC)、非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)和麻风... 分枝杆菌是一类细长略弯曲,有时呈分枝状或丝状体的杆菌,细胞壁含有大量分枝茵酸。分枝杆菌种类较多,主要可分为结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex,MTC)、非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)和麻风分枝杆菌(mycobacterium laprae)三大类,部分分枝杆菌可通过感染引起人体多个组织、器官损伤,是威胁人民群众健康的重大传染性疾病。2016年,世界卫生组织估算全球新发结核病患者1040万例,因结核病死亡人数约180万[1]。 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 电离飞行时间质谱技术 辅助激光解吸 TUBERCULOSIS 世界卫生组织 结核病患者 检测 麻风分枝杆菌
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纳米磁珠联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对甲状腺微小结节良恶性的鉴别价值 被引量:3
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作者 詹宇红 章晓芳 +3 位作者 张险峰 马丽珍 丁金旺 时晶晶 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2019年第5期281-282,共2页
目的应用纳米磁珠联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time offlight mass spectrometry,MALDI-TOFM S)技术检测甲状腺微小结节患者的血清蛋白标志物,探讨对甲状腺微小结节良恶性鉴别... 目的应用纳米磁珠联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time offlight mass spectrometry,MALDI-TOFM S)技术检测甲状腺微小结节患者的血清蛋白标志物,探讨对甲状腺微小结节良恶性鉴别的诊断价值。方法应用纳米磁珠联合MALDI-TOF-MS技术检测甲状腺微小结节115例的血清,其中微小恶性结节65例,微小良性结节对照50例,获得鉴别诊断甲状腺微小结节良恶性的最佳血清标志物,建立诊断模型。结果单独区分甲状腺微小结节良恶性鉴别意义最强的3个蛋白质峰分别为3320.19、8127.39、4302.35(m/z),构建甲状腺微小恶性结节最佳诊断模型,交叉检验敏感性为88.6%,特异性为80%。验证组盲法监测该诊断模型的敏感性为80%,特异性为86.7%。结论纳米磁珠联合MALDI-TOF-MS技术能在甲状腺微小结节患者血清中筛选出区分良恶性的特异性强、敏感性高的差异蛋白,对甲状腺微小结节的良恶性鉴别有临床意义。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 诊断 鉴别 辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在临床微生物鉴定中的应用及价值 被引量:12
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作者 顾兵 李永军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期814-817,共4页
20世纪90年代末,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术开始用于病原菌鉴定,目前已逐步用于临床微生物检验工作,对临床感染性疾病的快速... 20世纪90年代末,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术开始用于病原菌鉴定,目前已逐步用于临床微生物检验工作,对临床感染性疾病的快速诊断意义重大。本文阐述MALDI-TOF MS技术鉴定微生物的原理和流程、在临床微生物鉴定中的应用和对微生物检验结果回报时间(TAT)改进的作用。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间 质谱 回报时间 微生物 感染性疾病
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测支气管肺泡灌洗液对涂阴或无痰肺结核的诊断价值 被引量:8
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作者 侯婧 王华 刘盛盛 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第13期1599-1603,共5页
目的分析基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)对涂阴或无痰肺结核(PTB)的诊断价值。方法以2020年1月至2021年12月安徽省胸科医院收治的87例疑似涂阴或无痰PTB患者为研究对象,对其BALF进行MALDI-T... 目的分析基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)对涂阴或无痰肺结核(PTB)的诊断价值。方法以2020年1月至2021年12月安徽省胸科医院收治的87例疑似涂阴或无痰PTB患者为研究对象,对其BALF进行MALDI-TOF MS、SAT-TB、Gene-Xpert及BD960法检测,并对其诊断价值进行比较。结果MALDI-TOF MS诊断涂阴或无痰PTB敏感性为68.5%(37/54),优于SAT-TB 13.0%(7/54)、Gene-Xpert 40.7%(22/54)、BD960法27.8%(15/54)(均P<0.01)。MALDITOF MS法AUC值为0.827,优于SAT-TB 0.550、Gene-Xpert 0.704、BD960法0.639(均P<0.01)。MALDITOF MS分别联合上述3种方法的AUC并不优于其单独检测。结论MALDI-TOF MS是较准确的辅助诊断涂阴或无痰PTB的新方法,有较好的应用前景。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 结核 支气管肺泡灌洗液 诊断
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基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在临床感染性曲霉菌快速鉴定中的应用 被引量:2
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作者 沈松坤 陈涌泉 《国际医药卫生导报》 2018年第6期918-920,共3页
目的探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOFMS,VITEKMSV3.0)技术在临床侵袭性曲霉菌鉴定中的应用价值。方法分离来自于临床侵袭性曲霉菌感染患者标本中的曲霉菌,在不同的真菌培养条件下进行纯培养,应用MALDI—TOFMS技... 目的探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI—TOFMS,VITEKMSV3.0)技术在临床侵袭性曲霉菌鉴定中的应用价值。方法分离来自于临床侵袭性曲霉菌感染患者标本中的曲霉菌,在不同的真菌培养条件下进行纯培养,应用MALDI—TOFMS技术对其进行鉴定,并与传统形态学鉴定技术鉴定结果进行比较分析。结果88株菌株分别在沙保弱液体培养基、沙保弱琼脂培养基和察式琼脂培养基上培养,MALDI—TOFMS技术鉴定正确率分别为95.74%、95.45%和95.17%,形态学技术鉴定正确率分别为82.10%、86.08%和81.82%,不同培养基上培养鉴定正确率差异均具有统计学意义(χ2=136.936,P=O.000;χ2=75.918,P=O.000;χ2=122.612,P=O.000);88株菌株分别培养48h、72h、96h和120h,MALDI—TOFMS技术鉴定正确率分别为90.15%、97.35%、97.35%和96.97%,形态学技术鉴定正确率分别为77.27%、82.58%、85.23%和88.26%,不同培养时间鉴定正确率差异均具有统计学意义(χ2=65.824,P=O.000;χ2=132.021,P=0.000;χ2=93.598,P=O.000;χ2=61.382,P=O.000)。结论MALDI—TOFMS技术对临床侵袭性曲霉菌鉴定的准确率高于形态学鉴定技术,可在临床侵袭性曲霉菌鉴定中推广应用。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI-TOF MS 形态学鉴定技术 曲霉菌
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核糖体蛋白保存条件对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定曲霉菌的影响 被引量:1
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作者 张福军 陈涌泉 《国际医药卫生导报》 2018年第8期1161-1163,1259,共4页
目的 探讨核糖体蛋白保存条件对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS,VITEK MS V 3.0)技术鉴定曲霉菌的影响。方法 从临床侵袭性曲霉菌感染患者标本中分离的曲霉菌,提取用于MALDI-TOF MS技术进行鉴定的核糖体蛋白,保存... 目的 探讨核糖体蛋白保存条件对基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS,VITEK MS V 3.0)技术鉴定曲霉菌的影响。方法 从临床侵袭性曲霉菌感染患者标本中分离的曲霉菌,提取用于MALDI-TOF MS技术进行鉴定的核糖体蛋白,保存于不同条件下,应用MALDI-TOF MS技术对其进行鉴定,比较分析不同保存条件下MALDI-TOF MS技术的鉴定结果。结果 在4℃、-20℃和-80℃保存温度下鉴定正确率分别为97.73%、98.01%和97.73%,差异无统计学意义(χ2=0.087,P=0.957),核糖体蛋白在48 h、72 h、120 h和168 h保存时间下鉴定正确率分别为97.73%、97.44%、98.01%和98.01%,差异无统计学意义(χ2=0.827,P=0.843),在4℃、-20℃和-80℃条件下保存不同时间,其鉴定结果的质谱峰无明显变化。结论 用于质谱分析的菌株核糖体蛋白在4℃、-20℃或-80℃条件下,可稳定保存7 d,其鉴定结果的质谱峰无明显变化,对MALDI-TOF MS技术鉴定结果无影响。 展开更多
关键词 辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MALDI-TOF MS 曲霉菌 核糖体蛋白
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病原真菌基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定准确性影响因素研究进展
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作者 陈甜甜 绳涵月 +4 位作者 耿圆圆 张舒 赵飞 金丹 龚杰 《疾病监测》 北大核心 2025年第2期232-238,共7页
由于免疫功能低下患者的不断增多,侵袭性真菌感染(IFI)在过去几年中显著增长。IFI发病率和死亡率高,通常难以诊断和治疗。据估计,侵袭性真菌感染每年可导致约150万人死亡,死亡率超过50.00%。临床实验室中对丝状真菌的鉴定通常基于对分... 由于免疫功能低下患者的不断增多,侵袭性真菌感染(IFI)在过去几年中显著增长。IFI发病率和死亡率高,通常难以诊断和治疗。据估计,侵袭性真菌感染每年可导致约150万人死亡,死亡率超过50.00%。临床实验室中对丝状真菌的鉴定通常基于对分离培养的菌落进行形态学及分子生物学检查,这一过程耗时长且操作步骤相对复杂。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术简单、快速、高效、通量高、成本低,弥补了临床上微生物常规鉴定的短板。目前,MALDI-TOF MS技术已经成为大多数临床实验室细菌鉴定的主流平台。然而,其在丝状真菌鉴定中的应用一直较为滞后,主要归因于缺乏真菌蛋白质提取方案的规范化工作流程,并且真菌数据库不够完善。对于病原真菌MALDI-TOF MS鉴定结果的影响因素的研究非常有限。本综述描述并分析了病原真菌MALDI-TOF MS鉴定准确性的影响因素,重点关注并比较了不同培养条件和数据库等对MALDI-TOF MS技术鉴定病原真菌的影响。 展开更多
关键词 侵袭性真菌感染 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术 培养条件 数据库
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