细胞增殖与凋亡是细胞进程中必需而又相互对立的机制.增殖与凋亡的平衡保障了成人正常发育和组织水平的体内平衡（homeostasis）.增殖和凋亡的失衡是肿瘤发生发展的重要机制.Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IA...细胞增殖与凋亡是细胞进程中必需而又相互对立的机制.增殖与凋亡的平衡保障了成人正常发育和组织水平的体内平衡（homeostasis）.增殖和凋亡的失衡是肿瘤发生发展的重要机制.Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族成员之一,具有抑制细胞凋亡和促进细胞有丝分裂和细胞增殖的作用,与许多肿瘤关系密切[1～3].头颈部鳞癌（squamous cell carcinoma of the head and neck, SCCHN）是人类常见的恶性肿瘤之一,全世界发病率约为14/10万,占全身恶性肿瘤的16%～40%,每年的新发病例约为50万.在我国亦比较常见,约占全身恶性肿瘤的10%[4].本研究综述了Survivin的结构和生物学特性,着重阐述了其在头颈鳞癌中对细胞增殖凋亡的作用及治疗意义,并提出了目前存在的问题与展望.展开更多
目的:研究花姜酮对人胃癌7901细胞株增殖凋亡的影响及凋亡过程中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和Bcl-2表达的变化。方法:胃癌7901细胞株培养接种,分为不给药的对照组和不同质...目的:研究花姜酮对人胃癌7901细胞株增殖凋亡的影响及凋亡过程中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和Bcl-2表达的变化。方法:胃癌7901细胞株培养接种,分为不给药的对照组和不同质量浓度花姜酮的给药组进行研究。通过四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验观察不同质量浓度花姜酮和时间对细胞增殖抑制的影响,不同花姜酮质量浓度下倒置显微镜观察7901细胞株细胞形态学变化,采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚染色法检测细胞凋亡情况,采用逆转录聚合酶链式反应检测Fas mRNA和FasL mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bax和Bcl-2的表达。结果:与对照组比较,不同质量浓度花姜酮均可抑制7901细胞的活性,且随着质量浓度和时间的增加,细胞增殖抑制率明显升高,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组中细胞形态均有明显改变,细胞逐渐皱缩、贴壁不牢,随着浓度增加其变化越明显,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组的细胞核染色质凝聚,逐渐出现凋亡,且随着浓度增加,细胞凋亡数目增多,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组中Fas、Fas L mRNA的表达显著升高,且随着浓度增加,Fas mRNA、Fas L mRNA的表达水平升高,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组中Bax的表达随花姜酮浓度增加显著升高,Bcl-2的表达随浓度增加显著下降,具浓度依赖性。结论:花姜酮可以抑制人胃癌7901细胞株增殖以及诱导7901细胞凋亡,其诱导细胞凋亡可能是通过上调Fas mRNA和Fas L mRNA表达,并上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达来实现的。展开更多
目的:构建携带人活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)的重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA,并探讨内质网应激(ER Stress,ERS)时其对人软骨肉瘤细胞SW1353增殖凋亡的影响。方法:将ATF6基因序列与靶向ATF6的si RNA序...目的:构建携带人活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)的重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA,并探讨内质网应激(ER Stress,ERS)时其对人软骨肉瘤细胞SW1353增殖凋亡的影响。方法:将ATF6基因序列与靶向ATF6的si RNA序列分别克隆到p Ad Track-cmv和p SES-HUS穿梭质粒上,然后分别与腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1在大肠杆菌BJ5183感受态中同源重组,得到腺病毒重组质粒p Ad-ATF6和p Ad-ATF6 si RNA,通过脂质体介导在HEK293细胞中进行包装和扩增。通过RT-PCR和Western blot检测病毒效果。流式细胞仪法(flow cytometry,FCM)、MTT法及Western blot检测ERS状态下ATF6对SW1353细胞增殖凋亡的影响。结果:成功获得了重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA。RT-PCR和Western blot结果表明,重组腺病毒能有效的感染细胞。FCM检测结果表明,ERS条件下,ATF6感染组S期细胞比例明显升高,凋亡率明显降低(P=0.000);Ad-ATF6 si RNA感染组S期细胞比例明显降低,凋亡率明显上升(P=0.000)。MTT与Western blot实验结果与FCM结果一致。结论:ERS状态下,ATF6能促进SW1353细胞的增殖,抑制其凋亡。展开更多
文摘细胞增殖与凋亡是细胞进程中必需而又相互对立的机制.增殖与凋亡的平衡保障了成人正常发育和组织水平的体内平衡（homeostasis）.增殖和凋亡的失衡是肿瘤发生发展的重要机制.Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族成员之一,具有抑制细胞凋亡和促进细胞有丝分裂和细胞增殖的作用,与许多肿瘤关系密切[1～3].头颈部鳞癌（squamous cell carcinoma of the head and neck, SCCHN）是人类常见的恶性肿瘤之一,全世界发病率约为14/10万,占全身恶性肿瘤的16%～40%,每年的新发病例约为50万.在我国亦比较常见,约占全身恶性肿瘤的10%[4].本研究综述了Survivin的结构和生物学特性,着重阐述了其在头颈鳞癌中对细胞增殖凋亡的作用及治疗意义,并提出了目前存在的问题与展望.
文摘目的:研究花姜酮对人胃癌7901细胞株增殖凋亡的影响及凋亡过程中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和Bcl-2表达的变化。方法:胃癌7901细胞株培养接种,分为不给药的对照组和不同质量浓度花姜酮的给药组进行研究。通过四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验观察不同质量浓度花姜酮和时间对细胞增殖抑制的影响,不同花姜酮质量浓度下倒置显微镜观察7901细胞株细胞形态学变化,采用4',6-二脒基-2-苯基吲哚染色法检测细胞凋亡情况,采用逆转录聚合酶链式反应检测Fas mRNA和FasL mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bax和Bcl-2的表达。结果:与对照组比较,不同质量浓度花姜酮均可抑制7901细胞的活性,且随着质量浓度和时间的增加,细胞增殖抑制率明显升高,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组中细胞形态均有明显改变,细胞逐渐皱缩、贴壁不牢,随着浓度增加其变化越明显,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组的细胞核染色质凝聚,逐渐出现凋亡,且随着浓度增加,细胞凋亡数目增多,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组中Fas、Fas L mRNA的表达显著升高,且随着浓度增加,Fas mRNA、Fas L mRNA的表达水平升高,具浓度依赖性;不同质量浓度花姜酮组中Bax的表达随花姜酮浓度增加显著升高,Bcl-2的表达随浓度增加显著下降,具浓度依赖性。结论:花姜酮可以抑制人胃癌7901细胞株增殖以及诱导7901细胞凋亡,其诱导细胞凋亡可能是通过上调Fas mRNA和Fas L mRNA表达,并上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达来实现的。
文摘目的:构建携带人活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)的重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA,并探讨内质网应激(ER Stress,ERS)时其对人软骨肉瘤细胞SW1353增殖凋亡的影响。方法:将ATF6基因序列与靶向ATF6的si RNA序列分别克隆到p Ad Track-cmv和p SES-HUS穿梭质粒上,然后分别与腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1在大肠杆菌BJ5183感受态中同源重组,得到腺病毒重组质粒p Ad-ATF6和p Ad-ATF6 si RNA,通过脂质体介导在HEK293细胞中进行包装和扩增。通过RT-PCR和Western blot检测病毒效果。流式细胞仪法(flow cytometry,FCM)、MTT法及Western blot检测ERS状态下ATF6对SW1353细胞增殖凋亡的影响。结果:成功获得了重组腺病毒Ad-ATF6和Ad-ATF6 si RNA。RT-PCR和Western blot结果表明,重组腺病毒能有效的感染细胞。FCM检测结果表明,ERS条件下,ATF6感染组S期细胞比例明显升高,凋亡率明显降低(P=0.000);Ad-ATF6 si RNA感染组S期细胞比例明显降低,凋亡率明显上升(P=0.000)。MTT与Western blot实验结果与FCM结果一致。结论:ERS状态下,ATF6能促进SW1353细胞的增殖,抑制其凋亡。
