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载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变进展过程中循环单核细胞亚群和斑块内增殖巨噬细胞的动态变化 被引量:3
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作者 李宵 周欣 +3 位作者 姬文婕 李玉秀 赵季红 李玉明 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期24-28,共5页
目的观察载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化病变进展过程中循环单核细胞亚群(Ly6G-CD11b+Ly Chi和Ly6G-CD11b+Ly6Clo)比例和斑块内局部增殖巨噬细胞密度的动态变化。方法 40只Apo E-/-小鼠随机分为正常饮食组和高脂饮食组,... 目的观察载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化病变进展过程中循环单核细胞亚群(Ly6G-CD11b+Ly Chi和Ly6G-CD11b+Ly6Clo)比例和斑块内局部增殖巨噬细胞密度的动态变化。方法 40只Apo E-/-小鼠随机分为正常饮食组和高脂饮食组,分别于饮食干预后第2周末、第4周末、第6周末和第8周末处死部分动物,油红O染色检测主动脉根部动脉粥样硬化斑块面积,免疫荧光染色和共聚焦显微镜成像检测斑块内的巨噬细胞和增殖巨噬细胞(F4/80和Ki67双阳性细胞),流式细胞术分析循环单核细胞亚群比例。结果随着高脂饮食时间的增加主动脉动脉粥样硬化病变逐渐加重;动脉斑块中总巨噬细胞和增殖巨噬细胞密度在高脂饮食后进行性升高,并于第4周末达到高峰;巨噬细胞与增殖巨噬细胞密度百分比在高脂饮食后进行性升高,并于第6周末达到高峰;随着高脂饮食时间的增加Ly6G-CD11b+Ly Chi单核细胞亚群比例逐渐增大。结论在Apo E-/-动脉粥样硬化模型发展过程中,循环Ly6G-CD11b+Ly Chi单核细胞呈递增趋势,增殖巨噬细胞密度在第4周达到平台期。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 单核细胞亚群 增殖巨噬细胞 载脂蛋白E基因敲除小鼠
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达格列净对ApoE^(-/-)小鼠单核巨噬细胞系统及动脉粥样硬化的影响
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作者 李宵 王丹丹 +4 位作者 马巍 李兵 贾俊栋 王泰然 赵季红 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第3期470-474,共5页
目的:研究达格列净对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的影响,探讨其抗AS作用的可能机制。方法:16只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠高脂饮食喂养8周形成AS模型后,随机分为对照组和实验组,每组8只,实验组予达格列净干预... 目的:研究达格列净对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的影响,探讨其抗AS作用的可能机制。方法:16只8周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠高脂饮食喂养8周形成AS模型后,随机分为对照组和实验组,每组8只,实验组予达格列净干预,对照组予同等剂量的生理盐水,两组干预4周后取材。油红O染色检测主动脉及主动脉瓣AS斑块面积比例;流式细胞术分析循环中单核细胞亚群的比例(Ly6G-CD11b+Ly6C hi和Ly6G-CD11b+Ly6C lo);免疫荧光染色和共聚焦显微镜成像检测斑块内的巨噬细胞和增殖的巨噬细胞(F4/80和Ki67双阳性细胞);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平。结果:实验组与对照组比较有降低主动脉及主动脉瓣斑块负荷的作用,降低循环中Ly6C^(hi)单核细胞比例,降低斑块内增殖巨噬细胞比例,降低LDL-C水平,且具有升高HDL-C作用。结论:达格列净可减轻ApoE^(-/-)小鼠AS负荷的作用,可能与调节单核细胞亚群和血脂代谢相关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 达格列净 单核细胞亚群 增殖巨噬细胞 血脂 实验研究
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虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调SIRT1对创伤后应激障碍模型大鼠血清miR-9表达及其ox-LDL诱导的巨噬细胞增殖和炎性因子的影响
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作者 李玉先 汪开新 +5 位作者 沙前坤 程先能 湛奇 何小琴 殷国海 唐智权 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第11期49-52,共4页
目的 探讨虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对创伤后应激障碍模型大鼠血清微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)表达及其氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL... 目的 探讨虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对创伤后应激障碍模型大鼠血清微小RNA-9(microRNA-9,miR-9)表达及其氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)诱导的巨噬细胞增殖和炎性因子的影响。方法 选取100只大鼠,建立创伤后应激障碍大鼠模型,50只给予虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷,作为虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷组,另外50只不做任何处理作为模型组。培养大鼠巨噬细胞THP-1,对照组:加入普通培养基;ox-LDL组:80μmol/L ox-LDL处理细胞24 h;虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组:100μmol/L虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷预处理2 h后,再加入80μmol/L ox-LDL处理24 h。实时定量PCR(qRT-PCR)检测SIRT1 mRNA和miR-9表达水平;四甲基偶氮唑蓝(Tetramethylazolazole blue, MTT)检测细胞增殖情况;采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1 β,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)炎性因子水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、周期素依赖性激酶2(Cyclin dependent kinase 2,CDK2)、p21蛋白表达。结果 与模型组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷组SIRT1 mRNA表达水平显著上升(P<0.05),miR-9表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,ox-LDL组细胞增殖率、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而p21蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组细胞增殖率、CyclinD1、CDK2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而p21蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,ox-LDL组SOD含量显著降低(P<0.05),但MDA含量和ROS水平显著升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组SOD含量显著升高(P<0.05),但MDA含量和ROS水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,ox-LDL组TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05)。与ox-LDL组相比,虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷+ox-LDL组TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低(P<0.05)。结论 虎黄烧伤搽剂中白藜芦醇苷通过上调SIRT1降低创伤后应激障碍模型大鼠血清miR-9表达水平,且增加ox-LDL诱导的巨噬细胞增殖能力,同时降低炎性因子水平。 展开更多
关键词 虎黄烧伤搽剂 白藜芦醇苷 大鼠 MIR-9 OX-LDL诱导 细胞增殖 炎性因子
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巨噬细胞增殖和凋亡与动脉粥样硬化 被引量:10
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作者 陈孔 曾高峰 唐朝克 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期965-969,共5页
动脉粥样硬化(As)是一种由动脉壁脂质沉积所引发的一种病理生理过程,与巨噬细胞介导的慢性炎性反应高度相关。As早期,巨噬细胞通过吞噬作用清除斑块中修饰脂蛋白、细胞碎片和死亡细胞,限制斑块生长。随着病程进展,斑块中巨噬细胞凋亡增... 动脉粥样硬化(As)是一种由动脉壁脂质沉积所引发的一种病理生理过程,与巨噬细胞介导的慢性炎性反应高度相关。As早期,巨噬细胞通过吞噬作用清除斑块中修饰脂蛋白、细胞碎片和死亡细胞,限制斑块生长。随着病程进展,斑块中巨噬细胞凋亡增多且清除功能下降,引起继发性细胞坏死和炎性反应,促成不稳定斑块形成。巨噬细胞增殖和凋亡与As发生发展密切相关。本文主要针对巨噬细胞增殖和凋亡对As发生发展的影响做一综述,为As防治提供理论依据。 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞凋亡 动脉粥样硬化
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多巴胺D_1类受体在小鼠巨噬细胞上的表达及其对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 杨迪 韩愈 +5 位作者 寇恂 符金娟 刘渔凯 王震 何多芬 曾春雨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期11-14,共4页
目的检测小鼠巨噬细胞上的多巴胺D1类受体表达及探讨其对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞增殖的影响。方法以小鼠巨噬细胞RAW264.7为靶细胞,Western blot法检测多巴胺D1类受体的表达。不同浓度的ox-LDL(10、20、40μg/mL)诱导RAW264.7细胞的增... 目的检测小鼠巨噬细胞上的多巴胺D1类受体表达及探讨其对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞增殖的影响。方法以小鼠巨噬细胞RAW264.7为靶细胞,Western blot法检测多巴胺D1类受体的表达。不同浓度的ox-LDL(10、20、40μg/mL)诱导RAW264.7细胞的增殖,观察在多巴胺受体激动剂(Fenoldopam)10-7mol/L、拮抗剂(SCH23390)10-6mol/L及MAPK信号通路的特异性阻断剂(PD98059)10-6mol/L存在的情况下,RAW264.7增殖的变化情况,细胞增殖用3H-TdR掺入量表示。Western blot法检测磷酸化的ERK、总ERK1/2及增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果多巴胺D1类受体在RAW264.7细胞上表达。Fenoldopam(10-7mol/L)、PD98059(10-6mol/L)能明显抑制ox-LDL(20μg/ml)诱导的RAW264.7细胞增殖,且SCH23390(10-6mol/L)预处理可以逆转Fenoldopam(10-7mol/L)对RAW264.7细胞增殖的抑制作用。在MAPK阻断剂PD98059存在的情况下,Fenoldopam作用丧失,此外,Fenoldopam(10-7mol/L)可降低ox-LDL升高的PCNA以及磷酸化ERK水平。结论小鼠巨噬细胞RAW264.7上有多巴胺D1类受体的表达,且刺激多巴胺D1类受体可明显抑制ox-LDL诱导的RAW264.7细胞增殖作用,该作用可能通过影响MAPK/ERK这一信号转导通路来实现。 展开更多
关键词 多巴胺D1类受体 细胞增殖 动脉粥样硬化
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HMG盒蛋白1抑制巨噬细胞移动抑制因子启动子的转录激活
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作者 雷福明 毛泽斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期30-35,共6页
HMG盒蛋白1(HMG box-containing protein 1,HBP1)是一种转录抑制因子.HBP1表达上调可抑制肿瘤细胞的增殖和转移,并且在肿瘤细胞中HBP1常常发生丢失或转位,这表明HBP1是一种抑癌基因.HBP1所调节的靶基因无疑将为HBP1的肿瘤抑制机制提供... HMG盒蛋白1(HMG box-containing protein 1,HBP1)是一种转录抑制因子.HBP1表达上调可抑制肿瘤细胞的增殖和转移,并且在肿瘤细胞中HBP1常常发生丢失或转位,这表明HBP1是一种抑癌基因.HBP1所调节的靶基因无疑将为HBP1的肿瘤抑制机制提供新的线索.本研究通过生物信息学分析发现,在促细胞增殖基因-巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)启动子区域-811 bp至-792 bp发现高亲和力的HBP1反应元件.缺失和突变分析表明,HBP1通过该元件抑制MIF启动子活性.此外,免疫共沉淀研究显示,HBP1在细胞内与该元件结合,并且抑制MIF的转录.功能分析进一步证实,在细胞培养液中加入重组MIF可部分消除HBP1对大肠癌细胞LOVO的抑制作用.这些结果提示,MIF是HBP1的一个靶基因.HBP1通过抑制促细胞增殖基因MIF的表达抑制肿瘤细胞生长. 展开更多
关键词 HMG盒蛋白1(HBP1) 细胞增殖基因-细胞移动抑制因子(MIF) 人大肠癌LOVO细胞
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一款胚芽为核心的八宝粥的营养成分分析及体外活性评价
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作者 韩晓峰 王成祥 +3 位作者 文剑 马芙俊 马淑红 段盛林 《中国食物与营养》 2019年第7期46-51,共6页
研究了一款以胚芽为核心的八宝粥的营养成分和抗氧化性能力,以及胚芽球蛋白对RAW264.7巨噬细胞的增殖作用。首先测定了此款八宝粥的各种氨基酸含量,重点考察了γ-氨基丁酸(GABA)的含量;其次分别采用还原Fe^3+、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(... 研究了一款以胚芽为核心的八宝粥的营养成分和抗氧化性能力,以及胚芽球蛋白对RAW264.7巨噬细胞的增殖作用。首先测定了此款八宝粥的各种氨基酸含量,重点考察了γ-氨基丁酸(GABA)的含量;其次分别采用还原Fe^3+、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、邻苯三酚自氧化法和Folin-Ciocalteu法测定了该产品的总还原力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力和总多酚的含量;最后分离提取出胚芽球蛋白,并且通过细胞实验分析球蛋白对巨噬细胞的增殖能力。结果表明:该产品氨基酸含量丰富,尤其是GABA含量比较突出,该产品具有很好的抗氧化能力;巨噬细胞的增殖实验表明,该产品具有提高机体的免疫能力的潜力。 展开更多
关键词 八宝粥 胚芽 营养成分 抗氧化性 细胞增殖
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小球藻热水提取物功能成分的活性跟踪分离 被引量:4
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作者 贾敬 徐殿胜 +3 位作者 庄秀园 张道敬 陶黎明 李元广 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期743-756,共14页
本研究旨在以自由基清除作用和促巨噬细胞增殖作用为导向,对小球藻热水提取物(CPE)的分离纯化产物进行活性跟踪,以确定CPE的主要功能成分。采用高压热水提取、Sevag除蛋白、乙醇沉淀和超滤的方法得到CPE粗多糖,然后通过DEAE52离子交换... 本研究旨在以自由基清除作用和促巨噬细胞增殖作用为导向,对小球藻热水提取物(CPE)的分离纯化产物进行活性跟踪,以确定CPE的主要功能成分。采用高压热水提取、Sevag除蛋白、乙醇沉淀和超滤的方法得到CPE粗多糖,然后通过DEAE52离子交换层析柱和Sephadex G-100对CPE粗多糖组分进一步分离纯化。研究结果表明,通过上述方法对CPE进行分离纯化,得到3种高活性成分PS-1-4-2、PS-1-3-2和PS-2-3-3,经凝胶渗透色谱GPC分析得知其分子质量分别为3.97×10~4 Da、2.28×10~4 Da和4.1×10~3 Da。活性跟踪结果表明,CPE能够清除自由基并促进巨噬细胞Ana-1细胞生长,主要是由于其多种活性组分共同发挥作用,清除自由基作用的功能成分主要集中于PS-1-3、PS-1-4、PS-2-3和PS-2-4,促Ana-1细胞增殖作用的功能成分主要集中于PS-1-3、PS-1-4和PS-2-3。本研究确立了CPE主要功能成分的活性筛选手段,并获得3种新型功能成分,可用于指导小球藻高附加值产品的开发,从而进一步推动微藻能源的产业化进程,实现"高附加值微藻产品、微藻能源与微藻固碳"一体化的示范作用。 展开更多
关键词 小球藻热水提取物 活性跟踪分离 自由基清除作用 细胞增殖作用
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原桃胶粗多糖单糖组成分析及其活性研究
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作者 向燕茹 陈建伟 《食品科技》 CAS 北大核心 2019年第5期199-203,207,共6页
采用热水提取、乙醇沉淀的方法获得原桃胶粗多糖,并用蒽酮-硫酸法测定该粗多糖中糖含量为93.28%,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量为0.10%。原桃胶粗多糖在2mol/L硫酸中完全水解后测定其单糖组成,建立了HPLC-ELSD测定原桃胶粗多糖中单糖组... 采用热水提取、乙醇沉淀的方法获得原桃胶粗多糖,并用蒽酮-硫酸法测定该粗多糖中糖含量为93.28%,考马斯亮蓝法测定其蛋白质含量为0.10%。原桃胶粗多糖在2mol/L硫酸中完全水解后测定其单糖组成,建立了HPLC-ELSD测定原桃胶粗多糖中单糖组成方法。色谱柱:Waters XBridge^TM Amide,柱温30℃,进样量10μL,流动相乙腈-水(82:18),流速0.8mL/min,漂移管110℃,气体流量2.5L/min。实验证明:该方法精密度、重复性、稳定性、加样回收率良好。测定结果显示,该粗多糖由木糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比为13.97:55.60:1.37:11.94:17.12。同时原桃胶多糖具有较好的抗氧化活性和促巨噬细胞增殖能力。自由基清除实验中原桃胶粗多糖对ABTS^+、OH^-自由基均有一定的清除能力,在6.7mg/mL时对ABTS+自由基的清除率达50%,13.7mg/mL时对OH-自由基的清除率达50%。在对巨噬细胞的增殖影响中,当多糖浓度为50μg/mL时,与空白组比较,其促进巨噬细胞生长的增殖率达67.16%,能起到增强免疫力的作用。 展开更多
关键词 粗多糖 单糖组成 HPLC-ELSD 抗氧化 细胞增殖
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