多粘类芽胞杆菌新菌株X-11及其对番茄和水稻的促生效应 被引量：1

1

作者 刘文志 贺丹 +4 位作者 李鹏 傅应林 张译心 温华杰 于文清 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期249-259,共11页

【目的】从小麦(Triticum aestivum L)根际筛选到了一株细菌菌株(编号X-11),为该菌株在植物促生上应用提供依据。【方法】结合形态特征、生理生化特性、16S rDNA序列及基因组测序对其进行了鉴定,并测定其对番茄(Solanum lycopersicum)... 【目的】从小麦(Triticum aestivum L)根际筛选到了一株细菌菌株(编号X-11),为该菌株在植物促生上应用提供依据。【方法】结合形态特征、生理生化特性、16S rDNA序列及基因组测序对其进行了鉴定,并测定其对番茄(Solanum lycopersicum)和水稻(Oryza sativa)的促生效应。【结果】该菌株菌落圆形、半透明、凸起、黏稠;菌体杆状,形成芽胞,革兰氏阴性;具有固氮,还原硝酸盐,产吲哚、分泌铁载体及分解有机磷的功能。基于16S rDNA序列比对将X-11菌株归类为多粘类芽胞杆菌种群,基于非冗余蛋白数据库的基因比对表明其与最近缘菌株基因相似率55.7%,证明其为一个新菌株。X-11菌液浸种显著增加了番茄发芽率和胚根伸长度,灌根(R)及灌根结合叶面喷施(R+L)显著提高了番茄叶片中过氧化物酶(POD)活性,R+L处理使超氧化物歧化酶(SOD)活性提高了34.58%。水稻1叶1心期施用X-11菌液,根长增加了6.8%;立针期或1叶1心期施用X-11菌液,使秧苗SOD活性分别提高了90.4%和51.8%。【结论】X-11被鉴定为多粘类芽胞杆菌新菌株,是多种功能的植物根际促生菌,在植物促生方面具有开发应用潜力。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 植物根际促生菌 番茄 水稻

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多粘类芽胞杆菌X-11培养条件优化及其对马家柚的促生效果

2

作者 于文清 廖雅莉雯 +3 位作者 张译心 李珊珊 李鹏 刘文志 《上饶师范学院学报》 2024年第3期44-57,共14页

多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)X-11(简称X-11)是本课题组前期研究筛选到的植物根际促生菌,具有固氮、抗菌和促生功能,有开发应用潜力。为优化X-11菌株的培养条件,采用二因素实验设计,通过摇瓶培养试验,研究培养基初始酸碱度(p... 多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)X-11(简称X-11)是本课题组前期研究筛选到的植物根际促生菌,具有固氮、抗菌和促生功能,有开发应用潜力。为优化X-11菌株的培养条件,采用二因素实验设计,通过摇瓶培养试验,研究培养基初始酸碱度(pondus hydrogenii,pH)和培养时间以及培养基装液量和培养温度对X-11菌液活细胞数及其胞外纤维素酶(包括木聚糖酶在内)活性的影响,以及优化培养条件下培养的X-11菌液对马家柚幼苗的促生效应。结果表明:用初始pH8的马铃薯蔗糖液体培养基(potato dextrose broth,PDB)培养40小时(h)时,X-11活细胞的数最多,达4.78×10^(6)菌落形成数/毫升(colony forming units/mL,CFU/mL);用复装液量为35毫升(mL)的复合培养基在35度(℃)培养时,X-11活细胞数最多,达4.47×10^(7)CFU/mL;用初始pH7的PDB培养56 h或48 h时,X-11胞外纤维素酶和木聚糖酶活性均最高,分别达3.93 U(mg/mL/min)和2.26 U;用装液量为20 mL的PDB在25℃培养时,X-11菌液胞外纤维素酶及木聚糖酶活性均最高,分别达5.14 U和3.30 U。采用PDB培养时,X-11培养液活细胞数在初始pH与培养时间之间存在交互作用,但纤维素酶及木聚糖酶活性在初始pH与培养时间之间的交互作用不明显;采用复合培养基培养时,X-11培养液活细胞数在装液量与培养温度之间存在交互作用;采用PDB或复合培养基培养时,X-11胞外纤维素酶活性在装液量和培养温度之间均存在交互作用;采用PDB培养时,X-11胞外木聚酶活性在装液量和培养温度之间存在显著交互作用。综上,X-11菌株接种于初始pH8的复合培养基中、摇瓶装液量为35 mL/100 mL、在35℃培养40 h时,X-11菌液活细胞数显著增加;X-11菌株接种于初始pH7的PDB中、摇瓶装液量为20 mL/100 mL、在25℃培养48 h或56 h时,X-11菌液胞外纤维素酶和木聚糖酶活性显著提高。用收获高活细胞数的优化条件培养的X-11菌液对马家柚(Citrus grandis L.Osbeck)幼苗进行灌根处理,可显著促进其幼苗生长,X-11菌液处理的马家柚的主茎高度和分枝数分别较对照增加63.5%和3.5倍。研究结果可为X-11菌剂制备及其在植物促生和病害生物防治上的应用提供依据。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 培养条件 纤维素酶 木聚糖酶 马家柚

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产脂肪酶多粘类芽胞杆菌的产酶条件和固定化优化及对模拟油污废水的降解研究

3

作者 王娜 赵文倩 +3 位作者 张盈盈 蔡灏漾 李泽舒 褚衍亮 《微生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期31-39,共9页

以筛选自健康桑树叶片的内生细菌多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)为实验菌株,对其产脂肪酶进行分析,探讨菌株在油污废水净化领域的应用潜力。在透明圈法定性分析的基础上,研究了影响菌株产酶的因素,优化了产酶条件;采用壳聚糖-... 以筛选自健康桑树叶片的内生细菌多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)为实验菌株,对其产脂肪酶进行分析,探讨菌株在油污废水净化领域的应用潜力。在透明圈法定性分析的基础上,研究了影响菌株产酶的因素,优化了产酶条件;采用壳聚糖-戊二醛固定的方法对脂肪酶进行固定,探讨了固定化酶对模拟油污废水的降解能力。结果表明,菌株具有产脂肪酶特性,所产脂肪酶的最适反应温度为39℃,最适反应pH值为7.0。通过碳氮源筛选发现,蔗糖(60 g/L)和菜籽饼粉(15 g/L)最适合作为菌株培养基发酵产酶。设置培养基初始pH为7.0,培养温度32℃,发酵培养2 d,脂肪酶活性即可达到最大值。脂肪酶可有效固定在壳聚糖-戊二醛载体上。降解模拟油污废水时,游离酶在反应48 h时降解度达638.88 mg/mgprot,而后持续下降;固定化酶在反应36 h时,降解度达4174.44 mg/mgprot,且在60 h内,一直保持在相对恒定的水平。60 h后,固定化酶的降解度虽然显著下降,但相比于游离酶仍然保持较高的降解能力。内生细菌多粘类芽胞杆菌具有良好的产脂肪酶及降解油污能力,在废水净化领域有潜在的应用前景。 展开更多

关键词 内生细菌 脂肪酶 多粘类芽胞杆菌 固定化 油污废水

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多粘类芽胞杆菌JE53对香梨采后黑斑病菌抑制效果及贮藏品质的影响 被引量：1

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作者 郝金辉 林胜楠 +7 位作者 吴梓菲 王宁 詹发强 史应武 何亚芳 杨蓉 侯新强 包慧芳 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期1266-1274,共9页

探究多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa JE53对互隔交链孢Alternaria alternata的抑制效果及香梨贮藏品质的影响,为香梨采后黑斑病的生物防控奠定基础。以无菌水(CK)和1-甲基环丙烯(1-MCP)为对照组、JE53发酵液为处理组,分别处理香... 探究多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa JE53对互隔交链孢Alternaria alternata的抑制效果及香梨贮藏品质的影响,为香梨采后黑斑病的生物防控奠定基础。以无菌水(CK)和1-甲基环丙烯(1-MCP)为对照组、JE53发酵液为处理组,分别处理香梨果实后,一部分采用损伤接种香梨黑斑病菌互隔交链孢A.alternata,置于人工气侯箱贮藏,测定JE53对链格孢菌的抑制效果;一部分置于人工气侯箱贮藏,定期测定果实贮藏品质和生理特性指标。结果表明:JE53可有效抑制梨黑斑病菌在梨果实上的生长,损伤接种条件下,贮藏144 h时抑菌率为30.73%;还可显著提高梨果实中过氧化物酶、过氧化氢酶、苯丙氨酸解氨酶活性,能较好保持果实色度、硬度及可溶性固形物和可滴定酸含量,减少丙二醛积累及抗坏血酸损耗,降低果实失重率。上述结果表明:JE53可有效抑制香梨采后黑斑病病原菌在果实上的生长,并能较好的保持果实品质,可作为香梨采后黑斑病生防菌资源。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 生物防治 贮藏品质 生理特性

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多粘类芽胞杆菌胞外多糖在微生物农药剂型中的功能研究 被引量：11

5

作者 刘振华 魏鸿刚 +2 位作者 李元广 鲍柳 李淑兰 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期603-607,共5页

为探明生防菌胞外多糖在微生物农药制剂加工中的应用潜力及价值,考察了多糖粗提物对农药载体的助悬浮作用及对生防菌的热保护和紫外保护作用。结果表明:多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa(HY96-2)胞外多糖对硅藻土、高岭土和碳酸钙... 为探明生防菌胞外多糖在微生物农药制剂加工中的应用潜力及价值,考察了多糖粗提物对农药载体的助悬浮作用及对生防菌的热保护和紫外保护作用。结果表明:多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa(HY96-2)胞外多糖对硅藻土、高岭土和碳酸钙3种载体具有明显的助悬浮作用,当载体中多糖粗提物添加量为0.25 g/g时,3种载体的悬浮率可分别提高62.6%、161.8%和284.0%。此外,该胞外多糖对HY96-2芽胞还表现出明显的热保护作用,对HY96-2和海洋芽胞杆菌Bacillus marinus(B-9987)的营养细胞及芽胞表现出明显的紫外保护作用:添加质量体积分数为0.5%的多糖粗提物后,HY96-2芽胞在80℃处理20 min后的存活率比对照提高了31.0%,经紫外(UV-B,290～320 nm)照射6 h后,HY96-2营养细胞和芽胞的存活率分别比对照提高了14.1%和22.6%,B-9987营养细胞和芽胞的存活率分别比对照提高了36.4%和29.5%。该胞外多糖可用作多粘类芽胞杆菌可湿性粉剂加工中的助剂,以替代或减少化学助剂的使用。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 胞外多糖 可湿性粉剂 助悬浮 热保护 紫外保护

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多粘类芽胞杆菌DN-1防治水稻纹枯病初步研究 被引量：5

6

作者 胡飞 李昌春 +3 位作者 周子燕 胡本进 徐丽娜 郑进国 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期524-528,共5页

多粘类芽胞杆菌是一种能防治多种病原真菌病害的生防细菌.本文通过抑菌率测定、盆栽试验、田间防效试验首次研究不同浓度多粘类芽胞杆菌DN-1对水稻纹枯病的防治效果,试验结果表明当终浓度在5～120亿芽孢/L（667 m^2用水量50 L）时,对水... 多粘类芽胞杆菌是一种能防治多种病原真菌病害的生防细菌.本文通过抑菌率测定、盆栽试验、田间防效试验首次研究不同浓度多粘类芽胞杆菌DN-1对水稻纹枯病的防治效果,试验结果表明当终浓度在5～120亿芽孢/L（667 m^2用水量50 L）时,对水稻纹枯病室内抑菌率达62.21％～90.54％;盆栽试验防效达46.19％～77.11％;药后12、24 d,2013年田间防效分别达43.43％～75.70％、59.01％～79.64％;2014年田间防效均分别达50.72％～77.26％、53.65％～77.29％;DN-1终浓度在120亿芽孢/L时两年间田间防治效果与井冈霉素A 60 g.a.i/hm^2处理相当,低于噻呋酰胺60 g.a.i/hm^2处理. 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 水稻纹枯病 终浓度 抑菌率 防治效果

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多粘类芽胞杆菌对植物土传病害的防控及促生长作用研究进展 被引量：10

7

作者 张楠 陈岩 +5 位作者 王丽丽 李晓宇 王佳宁 周通 曲芳京 徐永平 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期91-97,共7页

多粘类芽胞杆菌是具有极高应用价值和安全性的生防菌株,对人和动植物均无致病性,某些菌株能够分泌多肽蛋白、酶和植物激素等活性产物,这些产物能够防治植物土传病害并促进植物生长和增产。针对近年来多粘类芽胞杆菌在防治土传病害及植... 多粘类芽胞杆菌是具有极高应用价值和安全性的生防菌株,对人和动植物均无致病性,某些菌株能够分泌多肽蛋白、酶和植物激素等活性产物,这些产物能够防治植物土传病害并促进植物生长和增产。针对近年来多粘类芽胞杆菌在防治土传病害及植物促生长等方面的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 植物土传病 生物防治

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土壤因子对海洋多粘类芽胞杆菌L_1-9在黄瓜根表土壤定殖的影响 被引量：3

8

作者 王淑芳 汪晶晶 +5 位作者 曹雪梅 李欢 王琦 王军强 马桂珍 暴增海 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期675-680,共6页

本试验考察了土壤温度、有机质含量和pH对海洋生防细菌多粘类芽胞杆菌L_1-9在黄瓜根表土壤中定殖的影响。采用实时荧光定量PCR方法检测了不同时期黄瓜根表土壤中菌株L_1-9的16S r DNA拷贝数。结果表明,土壤有机质含量、土壤温度和pH对菌... 本试验考察了土壤温度、有机质含量和pH对海洋生防细菌多粘类芽胞杆菌L_1-9在黄瓜根表土壤中定殖的影响。采用实时荧光定量PCR方法检测了不同时期黄瓜根表土壤中菌株L_1-9的16S r DNA拷贝数。结果表明,土壤有机质含量、土壤温度和pH对菌株L_1-9在黄瓜根表的定殖有显著影响(P<0.01)。25℃定殖数量最高,为5.79×108拷贝/g土,是15℃时的3.4倍;添加有机肥20~40 g/kg土壤,可以促进菌株L_1-9在黄瓜根际定殖;pH 7时,菌株L_1-9在黄瓜根表土壤中的定殖数量最高。本研究为海洋生防菌L_1-9防治黄瓜土传病害提供了理论依据。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 根表土壤 定殖 实时荧光定量PCR

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多粘类芽胞杆菌LB−9的诱变及抑菌防病效果研究 被引量：2

9

作者 李小杰 刘畅 +6 位作者 李成军 姚晨虓 白静科 于冰娜 邱睿 陈玉国 李淑君 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期771-777,共7页

为获得对烟草疫霉菌生防效果更佳的拮抗菌株,对多粘类芽胞杆菌LB−9进行基因诱变。利用原生质体电转化法,构建了菌株LB−9的Tn−5转座插入突变体库,获得约2000个转化子,通过平板对峙法筛选出对烟草疫霉菌拮抗能力增强且效果稳定的突变菌株3... 为获得对烟草疫霉菌生防效果更佳的拮抗菌株,对多粘类芽胞杆菌LB−9进行基因诱变。利用原生质体电转化法,构建了菌株LB−9的Tn−5转座插入突变体库,获得约2000个转化子,通过平板对峙法筛选出对烟草疫霉菌拮抗能力增强且效果稳定的突变菌株3个,其中编号为A13的突变菌株对烟草疫霉菌的抑制效果达到80%以上,与原始菌株LB−9的抑菌率相比提高了20%以上。采用室内盆栽接种法研究了正突变菌株A13对烟草黑胫病的防控效果,并利用实时荧光定量PCR法初步分析了其诱导烟株体内抗病相关基因的表达。结果表明,正突变菌株A13处理烟株7 d后,对烟草黑胫病的防效高于原始菌株LB−9,防效可达80%以上,同时可诱导烟株体内不同信号通路中抗性相关基因的上调表达。本研究为多粘类芽胞杆菌插入诱变育种方法研究提供了理论支撑,对烟草黑胫病的生物防治具有重要意义。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 诱变 烟草疫霉菌 防效 诱导抗病性

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一株多粘类芽胞杆菌防治油茶炭疽病初探 被引量：1

10

作者 胡飞 胡本进 +3 位作者 李昌春 周子燕 徐丽娜 李瑞雪 《中国森林病虫》 北大核心 2015年第4期1-5,共5页

多粘类芽胞杆菌是一种能防治多种病原真菌病害的生防细菌。通过室内孢子萌发抑制率、抑菌率测定、林间防治试验首次研究不同芽胞浓度的多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa DN-1对油茶炭疽病的防治效果。结果表明,当终浓度在（10～16... 多粘类芽胞杆菌是一种能防治多种病原真菌病害的生防细菌。通过室内孢子萌发抑制率、抑菌率测定、林间防治试验首次研究不同芽胞浓度的多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa DN-1对油茶炭疽病的防治效果。结果表明,当终浓度在（10～160）亿芽胞/L（667 m^2用水量50 L）时,对4株油茶炭疽病病原菌Colletotrichum gloeosporioides Penz.孢子萌发抑制率41.50%～88.75%;抑菌率35.81%～77.56%;在汤池镇和舒茶镇两地,发病初期施药后30 d林间防效为29.80%～68.91%和31.11%～67.55%;发病高峰期施药后30 d林间防效为26.61%～50.20%和21.95%～52.66%;DN-1终浓度160亿芽胞/L时,在发病初期施药两地林间防治效果与百菌清相当;而在发病高峰期施药林间防治效果低于百菌清。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 油茶炭疽病 胶孢炭疽菌 孢子萌发抑制率 抑菌率 防治效果

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多粘类芽胞杆菌利用生物柴油副产物粗甘油生产乙偶姻 被引量：3

11

作者 杨晗 纪晓俊 +1 位作者 聂志奎 黄和 《生物加工过程》 CAS CSCD 2014年第4期11-15,共5页

研究多粘类芽胞杆菌利用廉价底物生物柴油副产物粗甘油批次发酵生产乙偶姻,考察不同pH条件、不同转速下乙偶姻、2,3-丁二醇和乙酸3种主要产物的产量,根据发酵结果设计一种三阶段溶氧调节的方法,结果表明:经76h批次发酵,乙偶姻产量为14.6... 研究多粘类芽胞杆菌利用廉价底物生物柴油副产物粗甘油批次发酵生产乙偶姻,考察不同pH条件、不同转速下乙偶姻、2,3-丁二醇和乙酸3种主要产物的产量,根据发酵结果设计一种三阶段溶氧调节的方法,结果表明:经76h批次发酵,乙偶姻产量为14.62 g/L,副产物2,3-丁二醇和乙酸分别为1.24和2.93 g/L;副产物量低,且易于分离,可以有效减少后期分离提取产物的成本。 展开更多

关键词 甘油 多粘类芽胞杆菌 生物柴油 乙偶姻

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抗植物病原线虫的多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵培养基和发酵条件优化 被引量：5

12

作者 杨景艳 程万里 +5 位作者 曾立 黄典 蔡珉敏 郑龙玉 喻子牛 张吉斌 《化学与生物工程》 CAS 2018年第6期25-31,共7页

多粘类芽胞杆菌KM2501-1可以有效抑制南方根结线虫对植物的危害,促进植物生长,具有良好的应用前景。采用正交实验和单因素实验分别对多粘类芽胞杆菌KM2501-1的发酵培养基和发酵条件进行了优化。结果表明,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵培... 多粘类芽胞杆菌KM2501-1可以有效抑制南方根结线虫对植物的危害,促进植物生长,具有良好的应用前景。采用正交实验和单因素实验分别对多粘类芽胞杆菌KM2501-1的发酵培养基和发酵条件进行了优化。结果表明,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵培养基的最优配方为:可溶性淀粉3%、豆粕3%、氯化钙0.05%、氯化钠0.25%;最适发酵初始pH值为8.5,最适发酵温度为28℃。将多粘类芽胞杆菌KM2501-1在优化培养基中的发酵上清液稀释5倍后,作用根结线虫48 h的校正死亡率为87.15%,比优化前提高了61.61%;多粘类芽胞杆菌KM2501-1在优化培养基中发酵48 h后的芽胞数为2.5×10~8 cfu·mL^(-1),是优化前的6.25倍,芽胞率达到100%时发酵周期为48 h,优化效果十分显著。该研究为多粘类芽胞杆菌KM2501-1的中试和大规模发酵生产提供了基础数据。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌KM2501-1 发酵培养基 发酵条件 杀线虫活性 芽胞数

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多粘类芽胞杆菌分离鉴定及其对甘薯蔓割病的防治效果 被引量：1

13

作者 徐颖华 柴沙沙 +7 位作者 李成阳 张文英 王崇 雷剑 靳晓杰 宋峥 杨新笋 王连军 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1057-1065,共9页

【目的】筛选对甘薯蔓割病病原菌具有拮抗作用的芽胞杆菌,为甘薯蔓割病的生物防治提供菌种资源。【方法】通过平板对峙法从玉米根际土壤中筛选对甘薯蔓割病病原菌具有拮抗作用的芽胞杆菌;通过生物学特征和16S rDNA序列分析对拮抗菌株进... 【目的】筛选对甘薯蔓割病病原菌具有拮抗作用的芽胞杆菌,为甘薯蔓割病的生物防治提供菌种资源。【方法】通过平板对峙法从玉米根际土壤中筛选对甘薯蔓割病病原菌具有拮抗作用的芽胞杆菌;通过生物学特征和16S rDNA序列分析对拮抗菌株进行分类鉴定;通过盆栽试验进行拮抗菌株对甘薯蔓割病的防效试验,并检测拮抗菌株对甘薯叶片脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性及可溶性蛋白含量的影响。【结果】从玉米根际土壤中分离获得1株乳白色且具有拮抗作用的芽胞杆菌,命名为HAAS05,通过16S rDNA鉴定及系统发育进化树比对分析,将HAAS05菌株鉴定为多粘类芽胞杆菌(Paenibacillus polymyxa)。盆栽试验结果显示,HAAS05菌株对甘薯蔓割病有明显的拮抗效果;OD;=0.20和OD;=0.40的HAAS05菌悬液处理第10 d后,甘薯叶片中ABA含量较仅接种病原菌处理(201.94 ng/g)显著降低(P<0.05,下同),分别为52.29和107.10 ng/g,而GA含量较仅接种病原菌处理(7.05 ng/g)显著升高,分别为8.10和10.31 ng/g,甘薯叶片SOD活性和可溶性蛋白含量均较仅接种病原菌处理显著升高,而POD活性变化无明显规律。【结论】多粘类芽胞杆菌HAAS05菌株对甘薯蔓割病有较好的拮抗作用,具有一定的开发应用潜力。 展开更多

关键词 甘薯 蔓割病 多粘类芽胞杆菌 生物防治

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生防多粘类芽胞杆菌P1悬浮剂的研制 被引量：2

14

作者 于稳欠 李宏玉 +3 位作者 陈晨 吴紫燕 宋晓雨 毛伟力 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期1007-1015,共9页

本研究通过流点法、生物相容性、正交试验等方法,对多粘类芽胞杆菌PaenibacilluspolymyxaP1悬浮剂(P1-SC)的配方所添加的助剂进行了筛选。结果表明,当P1-SC的配方为:P1菌粉为10%(≥10.18lg cfu/g)、润湿分散剂500#和MOA-7均为2.5%、增... 本研究通过流点法、生物相容性、正交试验等方法,对多粘类芽胞杆菌PaenibacilluspolymyxaP1悬浮剂(P1-SC)的配方所添加的助剂进行了筛选。结果表明,当P1-SC的配方为:P1菌粉为10%(≥10.18lg cfu/g)、润湿分散剂500#和MOA-7均为2.5%、增稠剂硅酸镁铝和黄原胶分别为0.75%和0.15%、防腐剂万立净C25 0.20%、防冻剂丙三醇3%、消泡剂0.3%、并用软水补足至100%时,所制得的P1-SC中的活菌数≥9.18 lg cfu/mL、细度(通过75μm筛)≥95%、pH在5.0~8.0、持久起泡量(1 min后)≤30 mL、倾倒后残余物质量≤5.0%、洗涤后残余物质量≤0.5%、悬浮率≥90%,达到了企业对悬浮剂的检测标准。同时,对P1-SC中P1芽胞在不同温度条件下的货架期进行了测定。6个月的贮存测试结果表明,45℃活菌数下降了6%,而在4℃和25℃P1的活菌数没有发生明显变化。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 悬浮剂 配方 筛选 稳定性

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内生多粘类芽胞杆菌纤溶酶基因PPFE-I在大肠杆菌中融合表达及活性分析 被引量：2

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作者 吕凤霞 陆兆新 +5 位作者 别小妹 林谦 张充 曹林 郭瑶 汤彦翀 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1128-1134,共7页

以内生多粘类芽胞杆菌EJS-3基因组DNA为模板,PCR扩增PPFE-I基因,并克隆到pMD19-T载体上,构建克隆载体pMD-PPFE-I,经测序正确后,将PPFE-I基因克隆至表达载体pET-DsbA上构建重组表达质粒pET-DsbA/PPFE-I,将其转化至E.coli BL21(DE3),在IPT... 以内生多粘类芽胞杆菌EJS-3基因组DNA为模板,PCR扩增PPFE-I基因,并克隆到pMD19-T载体上,构建克隆载体pMD-PPFE-I,经测序正确后,将PPFE-I基因克隆至表达载体pET-DsbA上构建重组表达质粒pET-DsbA/PPFE-I,将其转化至E.coli BL21(DE3),在IPTG诱导下实现了融合蛋白DsbA-PPFE-I的表达,表达产物酶活性达228IU/mL。表达产物用SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定。SDS-PAGE电泳检测表明融合蛋白主要以可溶形式表达,占菌体总蛋白的18.4%。Western blotting结果表明在相应分子量处有一条特异性条带,证实该蛋白为DsbA-PPFE-I融合蛋白。表达产物通过Ni亲和柱、凝血酶酶切及Sephadex G-100等步骤进行分离纯化,并用MALDI-TOF质谱对重组酶进行了鉴定。纯化后的表达产物在纤维蛋白平板上表现出明显的纤溶活性。 展开更多

关键词 内生菌 多粘类芽胞杆菌 纤溶酶 基因克隆 融合表达

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影响多粘类芽胞杆菌发酵液抑菌活性因素的研究

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作者 吴士云 孙力军 +1 位作者 孙德坤 高玉伟 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期232-234,238,共4页

目的以点青霉菌作为指示菌,研究影响植物内生多粘芽胞杆菌发酵液抑菌活性的部分因素,为鉴定发酵液的抑菌物质提供基础研究。方法通过对多粘类芽胞杆菌发酵液进行不同处理(改变pH、加热、乙醇处理和蛋白酶酶解),采用牛津杯法观察处理后... 目的以点青霉菌作为指示菌,研究影响植物内生多粘芽胞杆菌发酵液抑菌活性的部分因素,为鉴定发酵液的抑菌物质提供基础研究。方法通过对多粘类芽胞杆菌发酵液进行不同处理(改变pH、加热、乙醇处理和蛋白酶酶解),采用牛津杯法观察处理后发酵液对点青霉菌抑菌活性的变化。结果多粘类芽胞杆菌发酵液的抑菌效果在酸性条件下稳定,抑菌效果明显;而在中性和碱性范围内不稳定,抑菌效果不明显;多粘类芽胞杆菌发酵液中的有些抑菌物质具备良好的热稳定性;80%乙醇处理的发酵上清液有抑菌作用;经蛋白酶酶解后发酵液的抑菌活性变化不大。结论多粘类芽胞杆菌产生的乙醇沉淀物具有抑菌作用;发酵液中可能含有类细菌素的抑菌物质。 展开更多

关键词 内生多粘类芽胞杆菌 发酵液 抑菌活性

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多粘类芽胞杆菌ZF197对白菜茎基腐病防治效果 被引量：15

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作者 黄艺烁 谢学文 +3 位作者 石延霞 柴阿丽 李磊 李宝聚 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1059-1071,共13页

从露地大白菜根际土壤中分离获得一株对白菜茎基腐病病原菌白菜立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有显著抑制效果的生防细菌ZF197,通过形态特征、生理生化特征和多基因系统进化树分析对其进行鉴定;通过大白菜离体叶片和温室盆栽试验研究... 从露地大白菜根际土壤中分离获得一株对白菜茎基腐病病原菌白菜立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)有显著抑制效果的生防细菌ZF197,通过形态特征、生理生化特征和多基因系统进化树分析对其进行鉴定;通过大白菜离体叶片和温室盆栽试验研究其对白菜茎基腐病防治效果,并鉴定其在白菜根部的定殖能力;通过酶学试验和抑菌谱试验研究其生物学特性;采用三明治法测定其发酵液的最适培养基和发酵时间。结果表明,菌株ZF197为多粘类芽胞杆菌(Paenibacilluspolymyxa),对大白菜离体叶片立枯丝核菌的防效可达82.35%,盆栽防效可达78.57%;该菌株可在白菜根部稳定定殖,处理20 d后定殖量趋于稳定,保持在2.37×10^5 cfu·g^-1左右;菌株ZF197具有广谱拮抗作用,能够有效抑制8种病原真菌和6种病原细菌的生长,其代谢过程中有蛋白酶和纤维素酶的产生。菌株ZF19796h发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高,可达58.58%;以棉籽饼粉作为碳源的发酵液对立枯丝核菌的抑制率最高。 展开更多

关键词 大白菜 多粘类芽胞杆菌 立枯丝核菌 抑菌谱 发酵 防效

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多粘类芽胞杆菌KM2501-1杀南方根结线虫活性产物研究 被引量：6

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作者 程万里 陈珍 +2 位作者 杨雪 黄典 张吉斌 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1629-1637,共9页

【目的】南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种危害严重的土传性植物病原线虫,给农业生产造成了巨大的经济损失,前期研究发现多粘类芽胞杆菌(Panebacillus polymyxa)KM2501-1具有很好的温室防治南方根结线虫效果,且可产生多种挥... 【目的】南方根结线虫(Meloidogyne incognita)是一种危害严重的土传性植物病原线虫,给农业生产造成了巨大的经济损失,前期研究发现多粘类芽胞杆菌(Panebacillus polymyxa)KM2501-1具有很好的温室防治南方根结线虫效果,且可产生多种挥发性杀线虫活性物质,但对其非挥发性产物是否有杀线虫活性没有研究。本研究拟进一步分离鉴定其产生的杀线虫活性代谢产物,发掘新的杀线虫药物。【方法】对菌株KM2501-1进行液体发酵并离心收集发酵上清液,通过硅胶柱层析、高效液相色谱分离等方法得到高纯度的杀线虫活性物质,并通过液相色谱质谱联用分析、核磁共振等技术鉴定杀线虫活性物质的结构。【结果】生物活性检测显示,多粘类芽胞杆菌KM2501-1发酵上清液具有较强的南方根结线虫触杀活性,并能有效抑制南方根结线虫卵孵化,体外杀线虫效率高达87.66%,抑制卵孵化效率达92.26%。结构鉴定结果显示多粘类芽胞杆菌产生的杀线虫活性物质为环二肽类物质cyclo(Pro-Phe),800 mg/L的cyclo(Pro-Phe)杀线虫效率达84.75%。进一步的显微观测结果表明,与对照组相比,活性物质cyclo(Pro-Phe)处理后的根结线虫肠道组织紊乱、结构发生破坏。【结论】多粘类芽胞杆菌KM2501-1产生的cyclo(Pro-Phe)是一个具有杀线虫新功能的活性物质,其可能通过破坏线虫肠道杀死线虫。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 南方根结线虫 杀线虫活性 cyclo(Pro-Phe)

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多粘类芽胞杆菌SC2基因敲除体系的建立 被引量：2

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作者 张文娣 丁延芹 +2 位作者 姚良同 刘凯 杜秉海 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1258-1266,共9页

【目的】建立多粘类芽胞杆菌SC2的基因敲除体系。【方法】利用电转化把温敏型自杀质粒pRN5101导入到多粘类芽胞杆菌SC2中。采用基因重组技术敲除SC2中的多粘菌素基因E(pmxE),得到突变株SC2-E。利用抗细菌性能检测和高效液相色谱分析合... 【目的】建立多粘类芽胞杆菌SC2的基因敲除体系。【方法】利用电转化把温敏型自杀质粒pRN5101导入到多粘类芽胞杆菌SC2中。采用基因重组技术敲除SC2中的多粘菌素基因E(pmxE),得到突变株SC2-E。利用抗细菌性能检测和高效液相色谱分析合成多粘菌素的能力,来证实pmxE基因是否被敲除。【结果】成功构建了多粘类芽胞杆菌SC2的基因敲除体系。pRN5101转入SC2后能够在28℃复制,39℃自杀。突变株失去了合成多粘菌素的能力,成功敲除pmxE基因,验证了此体系的可用性。【结论】首次构建了多粘类芽胞杆菌的基因敲除体系,拓展了pRN5101的使用范围,为研究多粘类芽胞杆菌的基因功能提供了高效的遗传操作工具。 展开更多

关键词 多粘类芽胞杆菌 pRN5101 基因敲除 多粘菌素基因E

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粘杆菌素高产菌株的选育 被引量：1

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作者 赖滨霞 《福建畜牧兽医》 2010年第6期19-21,共3页

以多粘芽胞杆菌BT-163为出发菌株,采用诱变与定向筛选相结合的方式,即根据粘杆菌素生物合成途径的调控机制和本身的分子结构特点,选用重金属离子和氨基酸结构类似物进行筛选,获得高产突变株。这些突变株比原菌株生产能力高出60%以上,并... 以多粘芽胞杆菌BT-163为出发菌株,采用诱变与定向筛选相结合的方式,即根据粘杆菌素生物合成途径的调控机制和本身的分子结构特点,选用重金属离子和氨基酸结构类似物进行筛选,获得高产突变株。这些突变株比原菌株生产能力高出60%以上,并应用在大规模发酵生产中。平均效价从430000u/mL提高到630000u/mL。 展开更多

关键词 粘杆菌素 多粘类芽胞杆菌 诱变育种 定向筛选 突变株

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