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水稻5.3 kb Gt1启动子克隆以及Gt1启动子引导优质大豆球蛋白Gy7基因表达载体构建
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作者 徐申中 顾婷玉 +1 位作者 于洋 李建粤 《现代农业科学》 2008年第11期14-17,共4页
以越光水稻基因组为模板,在成功克隆5.3 kb谷蛋白Gt1基因5’上游和信号肽序列基础上,将其定向插入到pCAMBIA1300质粒中,构建了中间载体p1300-5.3 kb Gt1;再将富含赖氨酸的优质大豆球蛋白Gy7全基因序列及cDNA编码序列分别定向插入p1300-5... 以越光水稻基因组为模板,在成功克隆5.3 kb谷蛋白Gt1基因5’上游和信号肽序列基础上,将其定向插入到pCAMBIA1300质粒中,构建了中间载体p1300-5.3 kb Gt1;再将富含赖氨酸的优质大豆球蛋白Gy7全基因序列及cDNA编码序列分别定向插入p1300-5.3 kb Gt1质粒上Gt1基因信号肽下游,再在2个载体Gy7全基因序列及cDNA编码序列下游都正向插入Gt1 3’UTR,完成由5.3 kb谷蛋白Gt1基因启动子及信号肽引导的大豆球蛋白Gy7基因2种表达载体的构建。此试验为利用转基因技术改良水稻稻米营养品质以及将水稻种子作为生物反应器等方面研究奠定了基础。 展开更多
关键词 5.3kb Gt1基因启动子克隆 大豆球蛋白gy7基因 大豆球蛋白gy7cDNA Gt1基因3’UTR 表达载体构建
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南农87C-38大豆优质11S球蛋白Gy7基因克隆及序列分析 被引量:2
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作者 顾婷玉 李建粤 +1 位作者 米东 肖刚 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期840-846,852,共8页
大豆种子不仅富含蛋白质,而且赖氨酸含量较高,利用大豆高赖氨酸基因能够弥补谷类作物种子赖氨酸含量的不足。运用现代分子生物学技术,从高蛋白大豆南农87C-38中克隆11S球蛋白Gy7全基因及cDNA序列。经生物公司测序后,利用vectorNTI软件... 大豆种子不仅富含蛋白质,而且赖氨酸含量较高,利用大豆高赖氨酸基因能够弥补谷类作物种子赖氨酸含量的不足。运用现代分子生物学技术,从高蛋白大豆南农87C-38中克隆11S球蛋白Gy7全基因及cDNA序列。经生物公司测序后,利用vectorNTI软件将所克隆的Gy7全基因及cDNA序列与Genbank(AF319776和AF319777)报道的序列进行比对分析,同源性分别为99%和99.6%。序列比对结果显示,Gy7基因cDNA与Genbank报道的序列之间所有的核苷酸差异都位于第3外显子。由此推测,第1、第2和第4外显子编码的氨基酸对于G7多肽形成特定高级结构可能具有非常重要的作用,它们在进化过程中受到的选择压力可能比第3外显子更强。根据遗传密码表推测,克隆的Gy7与Genbank报道的cDNA序列所编码的多肽,两者存在2个氨基酸组成的差异。大豆球蛋白Gy7优质基因的获得为今后利用转基因技术改良水稻、小麦等谷类作物的营养品质奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆 11S球蛋白gy7基因 11S球蛋白gy7cDNA序列 克隆 序列分析
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大豆7S与11S球蛋白QTL元分析及候选基因挖掘 被引量:1
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作者 陈庆山 张泽鑫 +3 位作者 刘函西 齐照明 韩思宁 董晓慧 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1-9,19,共10页
大豆蛋白作为重要营养来源,其含量在大豆种子中约占40%。7S球蛋白(b-伴大豆球蛋白)和11S球蛋白(大豆球蛋白)约占种子总蛋白70%,其含量直接影响大豆蛋白品质及特性。因此,大豆7S与11S球蛋白含量相关QTL定位与候选基因挖掘非常重要。研究... 大豆蛋白作为重要营养来源,其含量在大豆种子中约占40%。7S球蛋白(b-伴大豆球蛋白)和11S球蛋白(大豆球蛋白)约占种子总蛋白70%,其含量直接影响大豆蛋白品质及特性。因此,大豆7S与11S球蛋白含量相关QTL定位与候选基因挖掘非常重要。研究调查国内外已报道的42个7S与11S球蛋白相关QTL数据,通过利用BioMercator ver.2.1软件对其进行元分析得到11个Meta-QTL区间。利用《京都基因与基因组百科全书》和基因本体数据库分析Meta-QTL区域基因,确定18个参与调控7S与11S球蛋白含量的相关基因作为候选基因,该候选基因分别参与植物生长发育、氨基酸生物合成等过程。其中1个基因被注释为编码2S白蛋白超家族蛋白,6个基因与蛋白质合成相关细胞器的生长发育相关,5个基因被注释为编码影响贮藏蛋白积累的转录因子家族蛋白,6个基因与贮藏蛋白运输的分子机制相关。研究结果对大豆7S和11S球蛋白相关QTL定位及分子辅助育种具有重要意义。 展开更多
关键词 大豆 7S球蛋白 11S球蛋白 元分析 候选基因挖掘
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大豆11S球蛋白Gy5(A_3B_4)的基因克隆和序列分析 被引量:4
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作者 陈三凤 深泽亲房 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期215-217,共3页
大豆11S球蛋白(Glycinin)是大豆种子的主要贮藏蛋白,分子量为360kD,由6对相同的蛋白亚基(每对亚基的分子量约60kD)构成。每对亚基又是由一个酸性A肽(35~45kD)和一个碱性B肽(22kD)通过二硫键连接而成。A肽和B肽源... 大豆11S球蛋白(Glycinin)是大豆种子的主要贮藏蛋白,分子量为360kD,由6对相同的蛋白亚基(每对亚基的分子量约60kD)构成。每对亚基又是由一个酸性A肽(35~45kD)和一个碱性B肽(22kD)通过二硫键连接而成。A肽和B肽源自同一个基因,即首先由一个大的mR?.. 展开更多
关键词 大豆球蛋白 gy5(A3B4)基因 外显子 DNA 序列分析
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大豆11S球蛋白基因Gy1启动子克隆及序列分析
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作者 米东 逯慧 +1 位作者 严琛 李建粤 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2009年第4期414-417,共4页
以高蛋白大豆品种南农87C-38总DNA为模板,采用PCR法扩增获得约1100bp大小的DNA片段,回收该片段并克隆到pUCm-T载体上,选取阳性克隆进行PCR和酶切检测,再进行测序分析.序列分析显示该片段含1174个核苷酸,采用Vector NTI软件将试验中克隆... 以高蛋白大豆品种南农87C-38总DNA为模板,采用PCR法扩增获得约1100bp大小的DNA片段,回收该片段并克隆到pUCm-T载体上,选取阳性克隆进行PCR和酶切检测,再进行测序分析.序列分析显示该片段含1174个核苷酸,采用Vector NTI软件将试验中克隆的序列与GenBank E07850报道的Gy1启动子和GenBank X15121报道的Gy1启动子及信号肽对应序列分别进行比对,同源性分别为99.6%和99.3%,确定该片断为南农87C-38大豆11S球蛋白基因Gy1启动子及信号肽.该启动子的成功克隆,可为今后利用基因工程技术改良大豆种子营养品质研究奠定基础. 展开更多
关键词 大豆 11S球蛋白基因 gy1 启动子 克隆
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