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大鼠脑关键核团精准定位与快速取材虚拟仿真实验项目的建设及应用
1
作者 侯俊林 杨丽萍 +5 位作者 曹珊 李晓冰 赵培源 刘喜红 刘征 陈四清 《光明中医》 2024年第7期1415-1417,共3页
虚拟仿真实验是智能环境下教育发展的必然选择。大鼠脑组织关键核团的精准定位和快速取材是医学专业学生必备的实验技能,但本科生操作实验成功率低、实验成本较高,亟需建设虚拟仿真实验。文章从实验教学目标、实验教学过程与方法、交互... 虚拟仿真实验是智能环境下教育发展的必然选择。大鼠脑组织关键核团的精准定位和快速取材是医学专业学生必备的实验技能,但本科生操作实验成功率低、实验成本较高,亟需建设虚拟仿真实验。文章从实验教学目标、实验教学过程与方法、交互性操作步骤简介、实验教学特色等方面对大鼠脑关键核团精准定位与快速取材虚拟仿真实验项目的建设进行了介绍。该项目具有交互步骤清晰、沉浸式体验感好、可分步计分并附扣分说明等特点,有利于提升学生学习兴趣,提高学生的实验操作水平。小结部分简介了项目的应用,以期为医学院校其他虚拟仿真实验的建设提供参考。 展开更多
关键词 虚拟仿真 大鼠脑组织 核团定位 快速取材
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黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠脑微血管内皮细胞屏障功能的影响
2
作者 陆展辉 李艳玲 +4 位作者 孙婧怡 杨芙蓉 丁煌 邓常清 刘晓丹 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第10期1786-1792,共7页
目的观察黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,r BME... 目的观察黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASTⅣ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,r BMECs)屏障功能的影响。方法原代培养并鉴定r BEMCs,取第3代rBMECs,采用ASTⅣ与PNS高(100μmol/L+60μmol/L)、中(50μmol/L+30μmol/L)、低(25μmol/L+15μmol/L)剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组和模型组。CCK-8检测细胞存活情况,利用跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)检测细胞屏障功能的改变,免疫荧光检测血脑屏障连接蛋白Occludin和ZO-1蛋白含量,Western blot检测黏附分子ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达及NF-κB-p65的活化表达情况,ELISA检测细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平。结果成功培养分离rBMECs,阳性表达vWF。与对照组比较,模型组细胞存活数量明显减少(P<0.01),与模型组比较,ASTⅣ与PNS不同剂量配伍均能提高rBMECs的存活率(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,模型组TEER值、Occludin和ZO-1荧光强度显著降低(P<0.01),与模型组比较,ASTⅣ与PNS不同剂量配伍均能显著增高TEER值(P<0.01)、增加Occludin和ZO-1荧光强度(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,模型组TNF-α、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、p-NF-κB-p65表达显著增强(P<0.01),与模型组比较,ASTⅣ与PNS中高剂量配伍组TNF-α、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、p-NF-κB-p65表达量下降(P<0.01)。结论ASTⅣ配伍PNS能够显著抑制NF-κB活化,降低细胞炎症因子的表达,增高OGD/R模型rBMECs屏障功能,保护缺血缺氧后的脑组织。 展开更多
关键词 大鼠脑微血管内皮细胞 脑缺血再灌注 黄芪甲苷 三七总皂苷 屏障功能
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脂氧素A4对脓毒症大鼠脑损伤的抑制作用及机制研究
3
作者 赵鑫 智连云 陈丛 《中国处方药》 2023年第5期20-23,共4页
目的 探究脂氧素A4对脓毒症大鼠脑损伤的抑制作用及机制研究。方法 将24只大鼠进行随机分组:正常组、模型组和脂氧素A4组,每组8只。模型组和脂氧素A4组通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型:将大鼠麻醉后,于腹部做切口,结扎盲肠远端一... 目的 探究脂氧素A4对脓毒症大鼠脑损伤的抑制作用及机制研究。方法 将24只大鼠进行随机分组:正常组、模型组和脂氧素A4组,每组8只。模型组和脂氧素A4组通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症大鼠模型:将大鼠麻醉后,于腹部做切口,结扎盲肠远端一半,用针刺穿盲肠并从穿刺的孔中挤出一滴粪便后放回腹腔内,缝合伤口;正常组做假手术处理。模型建立后,对脂氧素A4组大鼠腹腔注射脂氧素A4(50μg/kg),对正常组和模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。给药后对大鼠进行神经功能评定,以Longa 5分为标准。评估各组血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)水平以及脑组织髓过氧化物酶(MPO)活性、脑组织含水量、脑组织病理变化、脑组织NADPH氧化酶2(NOX2)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白以及m RNA表达水平。结果 与正常组相比,模型组和脂氧素A4组大鼠的神经功能评分、TNF-α、IL-6、IL-1、MPO水平及脑组织含水量、脑组织病理损伤均明显升高,且脑组织NOX2和NF-κB蛋白以及m RNA表达水平均明显升高(P<0.05);与模型组相比,脂氧素A4组大鼠的神经功能评分、TNF-α、IL-6、IL-1、MPO水平、脑组织含水量均明显下降,大鼠脑组织病理损伤减轻,脑组织NOX2和NF-κB蛋白以及m RNA表达水平均明显降低(P<0.05)。结论 脂氧素A4能够有效抑制大鼠体内脑组织NOX2和NF-κB蛋白以及m RNA表达,降低TNF-α、IL-6、IL-1、MPO水平,抑制体内的氧化应激反应,减轻脓毒症大鼠的脑损伤。 展开更多
关键词 脂氧素A4 脓毒症大鼠脑损伤 抑制作用及机制
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基于组织病理学的大鼠脑干原发性功能损伤程度研究
4
作者 傅倩颖 石菁菁 +4 位作者 王国祥 朱林娜 王讯 杨袖菊 刘盛雄 《四川生理科学杂志》 2023年第6期941-947,共7页
目的:利用自制改进的Marmarou模型建立不同损伤高度的弥漫性轴索损伤(Diffuse axonal injury,DAI)大鼠模型,探讨通过苏木精-伊红(Hematoxylin eosin staining,HE)染色和β-淀粉样前体蛋白(β-Amyloid precursor protein,β-APP)免疫组... 目的:利用自制改进的Marmarou模型建立不同损伤高度的弥漫性轴索损伤(Diffuse axonal injury,DAI)大鼠模型,探讨通过苏木精-伊红(Hematoxylin eosin staining,HE)染色和β-淀粉样前体蛋白(β-Amyloid precursor protein,β-APP)免疫组化互相验证结合的方式对大鼠脑干原发性功能损伤程度进行定量研究。方法:健康成年雄性(Sprague-dawley,SD)大鼠24只,随机分为0 m正常组、1.25 m致伤组和2.25 m致伤组,采用改进的经典Marmarou模型制作大鼠脑干部位的DAI模型,正常组不进行打击。在致伤后进行过量麻醉取材制作HE染色切片和β-APP免疫组化染色切片,其中对HE染色切片计算脑干感兴趣区域内出血占比、脑水肿个数和锥体束出血占比;对β-APP免疫组化切片测定脑干感兴趣区域内的阳性细胞面积和累计光密度值(Integral optical density,IOD)。将不同损伤程度脑组织切片的HE染色分析与β-APP免疫组化染色结合做相关性分析。结果:不同致伤高度组的HE染色切片在光镜下可见神经束疏散、紊乱,血管淤滞,出现不同程度的散点状或长条状出血,细胞核显示不清,突触结构模糊不清等经典DAI病理特征;β-APP免疫组化出现轻度轴索损伤变化。测定脑干感兴趣区域内β-APP的阳性细胞面积和IOD值与HE染色的出血面积占比和锥体束出血面积占比呈正相关。结论:采用HE染色计算的大鼠脑干位置出血面积占比和锥体束区域出血面积占比和β-APP免疫组化计算的阳性细胞面积和IOD值可以定量区分大鼠脑干损伤程度,为判断大鼠脑干原发性功能损伤提供新角度,有助于为交通事故和法医检测等脑损伤机制的研究提供实验参考。 展开更多
关键词 组织病理学 大鼠脑干 原发性损伤 功能损伤程度
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红景天苷对全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α表达的影响 被引量：25
5
作者 宋月英 齐刚 +1 位作者 李亚萍 韩景田 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期907-908,共2页
关键词 全脑缺血再灌注损伤 红景天苷 大鼠脑组织 肿瘤坏死因子-Α 红景天属植物 缺血性脑损伤 药用植物 滋补强壮 扶正固本 有效成分
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孕酮对缺血/再灌注大鼠脑皮层水肿的影响 被引量：14
6
作者 李东亮 赵红岗 +1 位作者 王东霞 丁延峰 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期327-329,共3页
目的 :探讨孕酮 (progesterone ,PROG)对脑水肿的影响。方法 :48只大鼠随机分为 6组 :即缺血 /再灌 (I/R)组 ,二甲基亚砜 (DMSO)组 ,预防 (pretreatment)组 ,防治 (pre +posttreatment)组 ,治疗 (posttreatment)组 ,地塞米松 (DEXA)组... 目的 :探讨孕酮 (progesterone ,PROG)对脑水肿的影响。方法 :48只大鼠随机分为 6组 :即缺血 /再灌 (I/R)组 ,二甲基亚砜 (DMSO)组 ,预防 (pretreatment)组 ,防治 (pre +posttreatment)组 ,治疗 (posttreatment)组 ,地塞米松 (DEXA)组。采用大鼠局灶性脑缺血 /再灌注 (I/R)模型 ,测定大脑中动脉阻塞 (MCAO) 2 4h后脑皮层水、钠、钾、钙含量。结果 :与DMSO组相比 ,应用PROG预防及防治组均能明显降低缺血皮层的H2 O(P <0 .0 1)、Na+ (P <0 .0 1)、Ca2 + (P <0 .0 1)含量 ,升高K+ (P <0 .0 1)含量 ,而治疗组虽能明显降低H2 O(P <0 .0 5 )、Na+ (P <0 .0 1) ,但降低Ca2 + (P >0 .0 5 )和升高K+ (P >0 .0 5 )的效果不显著。DEXA组的结果与PROG预防或防治组类似。结论 展开更多
关键词 孕酮 脑缺血再灌注 脑水肿 大鼠脑皮层
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低氧大鼠脑线粒体体外转录活性的研究 被引量：7
7
作者 高文祥 柳君泽 +1 位作者 吴利平 蔡明春 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期323-326,共4页
目的 :探讨低氧对大鼠脑线粒体DNA表达的影响及其与能量生成的关系。方法 :雄性Wistar大鼠随机分为 3组 :急性低氧组 (AH)、慢性低氧组 (CH)和对照组 ,其中急、慢性低氧组动物分别连续暴露于模拟海拔 40 0 0m高原 3d(AH)和 40d(CH)。分... 目的 :探讨低氧对大鼠脑线粒体DNA表达的影响及其与能量生成的关系。方法 :雄性Wistar大鼠随机分为 3组 :急性低氧组 (AH)、慢性低氧组 (CH)和对照组 ,其中急、慢性低氧组动物分别连续暴露于模拟海拔 40 0 0m高原 3d(AH)和 40d(CH)。分离脑线粒体 ,分别测定线粒体体外转录活性、F0 F1 ATP酶活性以及ATP对线粒体体外转录的影响。结果 :急性低氧大鼠脑线粒体体外转录活性及F0 F1 ATP酶活性显著降低 ,慢性低氧时有所回升 ,两者呈线性相关。ATP对大鼠脑线粒体体外转录活性呈双相效应。结论 :低氧时脑线粒体转录活性改变可能参与低氧抑制线粒体能量代谢的机制 。 展开更多
关键词 低氧 线粒体 体外转录 大鼠脑 能量代谢
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高效液相色谱-柱后固定化酶反应器-电化学检测法分析大鼠脑微透析液中的乙酰胆碱和胆碱 被引量：8
8
作者 叶惟泠 马晓峰 梅镇彤 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期375-378,共4页
建立了用高效液相色谱分离－柱后固定化酶反应器酶解－电化学检测器检测酶解最终产物Ｈ２Ｏ２的方法，分析了麻醉和自由活动大鼠脑微透析液中乙酰胆碱（ＡＣｈ）和胆碱（Ｃｈ）的含量。至少在０．２～１００μｍｏｌ／Ｌ范围内ＡＣｈ和... 建立了用高效液相色谱分离－柱后固定化酶反应器酶解－电化学检测器检测酶解最终产物Ｈ２Ｏ２的方法，分析了麻醉和自由活动大鼠脑微透析液中乙酰胆碱（ＡＣｈ）和胆碱（Ｃｈ）的含量。至少在０．２～１００μｍｏｌ／Ｌ范围内ＡＣｈ和Ｃｈ的浓度与其响应的线性关系良好，它们的检测极限都可达５０ｆｍｏｌ。对高效液相色谱结合固定化酶反应器的分析方法作了简要的讨论。 展开更多
关键词 大鼠脑微透析液 乙酰胆碱 胆碱 HPLC 分析
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参麦注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响 被引量：13
9
作者 左霞 陈红英 +3 位作者 陈德森 李英 王文杰 李贤玉 《环球中医药》 CAS 2015年第4期407-410,共4页
目的研究参麦注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 SD大鼠40只随机分为对照组、模型组及参麦组,模型组及参麦组均经右侧颈动脉线栓大脑中动脉Willis环,阻断血流30分钟后再灌注30分钟,并反复3次的方法,建立大鼠脑缺血再... 目的研究参麦注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法 SD大鼠40只随机分为对照组、模型组及参麦组,模型组及参麦组均经右侧颈动脉线栓大脑中动脉Willis环,阻断血流30分钟后再灌注30分钟,并反复3次的方法,建立大鼠脑缺血再灌注损伤的模型。采用尾静脉给药,每天1次,连续6天,对照组给予等体积生理盐水。观测缺血再灌注0、30、60分钟及1天、3天、6天共计6个时间点局部脑血流量(regional cerebral blood flow,RCBF)及脑电图(electroencephalogram,EEG)棘波振幅。并计算脑缺血再灌注前及6天后脑梗死范围。结果参麦注射液组在第3天、6天2个时点测得值显示RCBF显著升高、EEG棘波波幅明显降低,显著降低再灌注6天后脑梗死范围,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论参麦注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与其具有抑制大鼠脑缺血再灌注后大脑异常放电,降低血管平滑肌细胞膜Na+-K+-ATP酶活性,松弛脑血管平滑肌改善微循环增加脑血流量有关。 展开更多
关键词 参麦注射液 大鼠脑缺血 再灌注损伤 局部脑血流 脑电图 梗死范围
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离心机训练对大鼠脑及其它组织IL-6和TNFα基因表达水平的影响 被引量：6
10
作者 刘建彬 王洪波 +2 位作者 刘丽 梁雪清 于立身 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期649-653,共5页
为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、... 为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、脑、肺、肾和小肠组织 ,分别提取mRNA并定量 .用地高辛标记IL 6和TNFαcDNA作为探针 ,进行狭缝杂交 ,杂交结果通过光密度扫描定量后 ,进行统计学处理 .离心机训练不同时间 ,比较大鼠各组织IL 6和TNFα基因表达水平的变化 .结果显示随着训练时间的延长 ,表达水平均有所差异 .提示训练对大鼠脑及其它主要组织IL 6和TNFα基因表达水平有影响 。 展开更多
关键词 离心机训练 大鼠脑 IL-6 TNFΑ 基因表达水平 脑组织 心肌组织 加速度耐力
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微柱高效液相色谱法测定大鼠脑微透析液中的乙酰胆碱和胆碱 被引量：5
11
作者 贾兴元 吴安石 +1 位作者 岳云 刘敬忠 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期33-35,共3页
用所建立的微柱高效液相色谱分离、柱后固定化酶反应器酶解、电化学检测器检测的方法,对用不同浓度异氟醚麻醉前后的大鼠脑微透析液中的乙酰胆碱和胆碱的浓度进行了测定。在乙酰胆碱和胆碱的浓度为10～2000nmol/L时,其浓度分别与各自相... 用所建立的微柱高效液相色谱分离、柱后固定化酶反应器酶解、电化学检测器检测的方法,对用不同浓度异氟醚麻醉前后的大鼠脑微透析液中的乙酰胆碱和胆碱的浓度进行了测定。在乙酰胆碱和胆碱的浓度为10～2000nmol/L时,其浓度分别与各自相应峰高的线性关系良好,两者的检测限(以信噪比为3计)均可达5nmol/L。微透析液中乙酰胆碱和胆碱的含量在大鼠清醒时最高,随着异氟醚吸入浓度的增加,乙酰胆碱和胆碱含量明显降低。在大鼠海马和脑皮层中乙酰胆碱浓度的降低与大鼠吸入异氟醚的浓度相关(P<0 05)。研究结果表明,异氟醚麻醉剂抑制大鼠大脑皮层和海马中乙酰胆碱的释放程度与其剂量有关。 展开更多
关键词 大鼠脑微透析液 乙酰胆碱 胆碱 浓度测定 微柱高效液相色谱法 异氟醚麻醉剂 神经递质
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不同碘摄入量对子代大鼠脑神经递质及其相关酶活性的研究 被引量：10
12
作者 王赞鑫 闫睿 +2 位作者 锁静 陈渊 林来祥 《中国地方病防治》 北大核心 2006年第3期129-131,共3页
目的通过研究子代大鼠脑组织中神经递质含量及相关酶活性,探讨不同碘摄入量对脑功能的影响。方法断乳后1月的W istar大鼠随机分为4组:低碘组,适碘组,10倍碘组,50倍碘组,分别饮用含不同碘浓度的水,饲养3月后随机交配,仔鼠饲养28 d后,断... 目的通过研究子代大鼠脑组织中神经递质含量及相关酶活性,探讨不同碘摄入量对脑功能的影响。方法断乳后1月的W istar大鼠随机分为4组:低碘组,适碘组,10倍碘组,50倍碘组,分别饮用含不同碘浓度的水,饲养3月后随机交配,仔鼠饲养28 d后,断头取其大脑组织,称重,测定单胺氧化酶(MAO)和胆碱酯酶(ChE)活性。结果与适碘组相比,其它各组大鼠脑重量均明显降低(P<0.05或P<0.01),但低碘组最明显;20%脑组织匀浆中蛋白质含量,低碘组明显降低(P<0.01);低碘组仔鼠脑内MAO活性明显升高(P<0.01),ChE活性明显降低(P<0.01);50倍碘组大鼠MAO活性明显升高(P<0.01)。结论碘缺乏和严重碘过量可影响子代大鼠脑的神经递质及其相关酶活性,但碘缺乏的影响远比碘过量严重。 展开更多
关键词 碘缺乏 碘过量 大鼠脑 神经递质 相关酶类
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疏血通注射液对大鼠脑缺血耐受作用及神经生长因子表达的影响 被引量：8
13
作者 周俊英 刘柳 罗祖明 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期943-944,共2页
关键词 神经生长因子 疏血通注射液 大鼠脑缺血 耐受作用 injection 缺血性损伤 脑缺血耐受 factor 动物实验 缺血预处理
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饲料中硒锌水平对铅暴露大鼠脑和肾脏病理变化的影响 被引量：4
14
作者 汪会玲 孟晶 +2 位作者 徐海滨 赖建强 荫士安 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期507-508,共2页
关键词 肾脏病理变化 铅暴露 锌水平 中硒 大鼠脑 儿童铅中毒 饲料 流行病学调查 学习记忆能力 营养因素
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HPLC-荧光检测法测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质及相关物质 被引量：16
15
作者 林凌云 李慧 许崇涛 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期557-559,共3页
目的采用HPLC-荧光检测方法测定大鼠脑组织中的单胺类递质及相关物质。方法脑组织匀浆用提取液(含0.1mol.L-1HClO4和0.2 mmol.L-1EDTA)提取后进样。色谱柱用Waters Nova-Pak C18(150 mm×3.9 mm,4μm);流动相为甲醇-缓冲液(14:86);... 目的采用HPLC-荧光检测方法测定大鼠脑组织中的单胺类递质及相关物质。方法脑组织匀浆用提取液(含0.1mol.L-1HClO4和0.2 mmol.L-1EDTA)提取后进样。色谱柱用Waters Nova-Pak C18(150 mm×3.9 mm,4μm);流动相为甲醇-缓冲液(14:86);流速1.0 ml.min-1;荧光检测波长λEX=280 nm,λEM=330 nm。结果7种单胺类神经递质及相关物质的标准曲线在一定浓度内线性关系良好,方法的加样回收完全,精密度好。结论所建方法简便、快速、准确,可用于脑组织中单胺类神经递质及相关物质的测定。 展开更多
关键词 大鼠脑组织 单胺类神经递质 高效液相色谱-荧光检测
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大鼠脑cDNA文库的构建 被引量：4
16
作者 宋学文 赵崇 +2 位作者 周仁 郭善一 张镜宇 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第2期169-172,共4页
采用简单高效的ｃＤＮＡ合成技术制备Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑ｃＤＮＡ基因文库，以纯化的ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ－（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶的作用下，合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ。ｃｏｌｉ... 采用简单高效的ｃＤＮＡ合成技术制备Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑ｃＤＮＡ基因文库，以纯化的ｐｏｌｙ（Ａ）＋－ＲＮＡ为模板，含ＮｏｔＩ切点的ｏｌｉｇｏ－（ｄＴ）１５为引物，在反转录酶的作用下，合成第一股单链ｃＤＮＡ；用Ｅ。ｃｏｌｉＲＮａｓｅＨ除去模板ＲＮＡ，并以Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ聚合酶Ｉ，Ｅ．ｃｏｌｉＤＮＡ连接酶和Ｔ４ＤＮＡ聚合酶催化合成ｃＤＮＡ第二条链，即成为双链ｃＤＮＡ；此双股ｃＤＮＡ除０．５μｇ用于插入ｐＳＰＯＲＴＩ载体，转入Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α，建成ｃＤＮＡ文库外，其余保存在－２０℃，以此ｃＤＮＡ为模板，应用ＰＣＲ方法，先后克隆了谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ，１８００ｂＰ）、神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ，１３４０ｂＰ），甲状腺激素受体（Ｔ３－ｒｅｃｅｐｔｏｒ，１２３０ｂｐ）、胆囊收缩素（ＣＣＫ，３４５ｂｐ）的全编码基因． 展开更多
关键词 CDNA文库 Wistar大鼠脑 分子克隆
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KA注射致痫大鼠脑组织中CX43的表达及其意义 被引量：7
17
作者 蔡正旭 张淑琴 +4 位作者 郭慧淑 刘群 杨立彬 梁建民 王宇虹 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期115-117,共3页
目的　探讨CX4 3与癫痫之间的关系。方法　利用免疫组织化学方法、Westernblot方法测定KA致痫后大鼠不同脑区、不同时程的CX4 3的分布及表达。结果　KA致痫后大鼠的大脑皮层及海马均有CX4 3阳性表达。KA致痫后3h大鼠的海马各区及皮层CX... 目的　探讨CX4 3与癫痫之间的关系。方法　利用免疫组织化学方法、Westernblot方法测定KA致痫后大鼠不同脑区、不同时程的CX4 3的分布及表达。结果　KA致痫后大鼠的大脑皮层及海马均有CX4 3阳性表达。KA致痫后3h大鼠的海马各区及皮层CX4 3阳性细胞数逐渐增多,并持续上升,时程越长阳性细胞数目越多。上述变化在海马比皮层明显。结论　星形胶质细胞的缝隙连接与癫痫的发生和发展上有密切联系。 展开更多
关键词 CX43 大鼠脑组织 Westernblot方法 致痫 KA 其意义 表达及 免疫组织化学方法 注射 星形胶质细胞 不同脑区 阳性表达 大脑皮层 细胞数目 缝隙连接 海马 癫痫 时程
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柴贝止痫汤影响大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白、核因子p65表达的研究 被引量：8
18
作者 鄢泽然 张青 +3 位作者 王潇慧 王越 聂莉媛 刘金民 《环球中医药》 CAS 2014年第4期241-246,共6页
目的探索中药柴贝止痫汤对离体大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65表达的影响。方法培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,传至3代时分为正常组、模型... 目的探索中药柴贝止痫汤对离体大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65表达的影响。方法培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,传至3代时分为正常组、模型组和中药组,正常组常规培养,模型组用100 nmol/L的地塞米松作用细胞24小时,诱导细胞膜上BCRP表达增加;中药组在造模基础上分别用柴贝止痫汤四个浓度(10μg/ml、100μg/ml、500μg/ml、1 mg/ml)干预模型细胞24小时。Western blot检测各组细胞BCRP、NF-κB p65的表达,差异比较采用方差分析;Real-time PCR检测Bcrp mRNA的扩增,相对定量法比较各组间扩增差异。结果柴贝止痫汤10μg/ml、100μg/ml组BCRP表达及Bcrp mRNA的扩增均较模型组降低(P<0.05);柴贝止痫汤1 mg/ml组NF-κB p65的表达较模型组降低(P<0.05)。结论柴贝止痫汤可以下调地塞米松诱导的大鼠脑微血管内皮细胞BCRP及Bcrp mRNA的表达;可能对NF-κB p65的表达有下调作用。 展开更多
关键词 柴贝止痫汤 乳腺癌耐药蛋白 大鼠脑微血管内皮细胞 难治性癫痫
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甘珀酸干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响 被引量：5
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作者 张桂青 麻超 +4 位作者 骆翔 喻志源 徐沙贝 王伟 高杰 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期261-267,共7页
目的观察缝隙连接阻断剂甘珀酸对局灶性脑缺血/再灌注损伤的影响。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),将动物随机分为脑缺血60min再灌注(MCAO)组,脑缺血再灌注加甘珀酸干预(MCAO+CBX)组和假手术组(sham)。采用尼氏染色显示脑... 目的观察缝隙连接阻断剂甘珀酸对局灶性脑缺血/再灌注损伤的影响。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),将动物随机分为脑缺血60min再灌注(MCAO)组,脑缺血再灌注加甘珀酸干预(MCAO+CBX)组和假手术组(sham)。采用尼氏染色显示脑梗死灶并计算梗死灶体积;应用免疫荧光与TUNEL染色法分别观察脑缺血后3d与7d不同时间点缺血边缘区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达和细胞凋亡情况。结果(1)缺血后3d、7d MCAO+CBX组大鼠梗死体积小于MCAO组,3d、7d MCAO+CBX组大鼠梗死体积较MCAO组分别缩小5%和4.6%;(2)缺血后3d、7d于缺血边缘区可见大量TUNEL阳性染色细胞,且MCAO组大鼠缺血边缘区细胞凋亡数目明显多于MCAO+CBX大鼠(P<0.001);(3)缺血后3d和7d组缺血边缘区GFAP表达明显增强,3d的MCAO组与MCAO+CBX组大鼠缺血边缘区GFAP的表达均较假手术组强(P<0.05),7d的MCAO+CBX组大鼠缺血边缘区GFAP的表达较假手术组强(P<0.001),但明显弱于MCAO组大鼠(P<0.01);结论缝隙连接阻断剂甘珀酸可减少大鼠大脑中动脉阻塞后脑梗死体积,其机制可能与阻断缝隙连接后缺血边缘区神经元凋亡降低有关,星型胶质细胞的反应性变化参与了该过程。 展开更多
关键词 甘珀酸 大鼠脑缺血 神经元 凋亡
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康复训练对大鼠脑梗塞后血管构筑的改变 被引量：17
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作者 李玲 徐莉 +2 位作者 饶志仁 王冰水 焦西英 《现代康复》 CSCD 2000年第6期842-843,共2页
目的:研究康复功能训练后大鼠脑梗塞血管构筑的改变。方法 :27只SD大鼠采用光化学法制作脑梗塞模型 ;24h后随机分3组 ,康复组给予功能训练 ,制动组置于笼内固定 ,自由活动组置于普通笼内饲养 ,观察康复后的血管构筑情况。结果 :24h3组... 目的:研究康复功能训练后大鼠脑梗塞血管构筑的改变。方法 :27只SD大鼠采用光化学法制作脑梗塞模型 ;24h后随机分3组 ,康复组给予功能训练 ,制动组置于笼内固定 ,自由活动组置于普通笼内饲养 ,观察康复后的血管构筑情况。结果 :24h3组梗塞外侧区、损伤对侧相应区较正常鼠的血管略有增大 ,下侧区略有降低 ,康复组梗塞外侧区1周 ,下侧区1～2周 ,损伤对侧相应区1周较制动组的密度有差异(P<0.01)。康复组2～3周、自由组3周较正常鼠密度增高(P<0.05)。结论 :康复功能训练可增加大脑的血液循环 ,改善脑缺血 ,促进脑组织的代偿、修复。 展开更多
关键词 康复训练 大鼠脑梗塞 血管构筑
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