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题名双酶连续催化生物合成D-丙氨酸
被引量：4
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作者
张卫卫
魏宇
张宏娟
焦庆才
刘均忠
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机构
医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院
南京医科大学药学院
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出处
《精细化工》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第10期1132-1138,1160,共8页
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基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(21302100)~~
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文摘
建立了天冬氨酸消旋酶和D-氨基酸转氨酶双酶连续催化制备D-丙氨酸的方法。利用天冬氨酸消旋酶全细胞催化L-天冬氨酸消旋得到DL-天冬氨酸,离心去除天冬氨酸消旋酶全细胞后升温灭活残留的游离天冬氨酸消旋酶,再加入经镍柱亲和纯化的D-氨基酸转氨酶酶液,催化D-天冬氨酸(D-Asp)和丙酮酸(PA)经转氨反应生成D-丙氨酸。经单因素实验得到天冬氨酸消旋酶最佳催化条件为:反应温度40℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲溶液(pH=7.0),底物L-天冬氨酸质量浓度为100 g/L。D-氨基酸转氨酶最佳催化条件为:反应温度42℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲液(pH=7.0),4 mmol/L磷酸吡哆醛,DL-天冬氨酸质量浓度为50 g/L,底物n(PA)∶n(D-Asp)=1∶10。转化产物经等电点结晶和阳离子树脂分离得到D-丙氨酸。在该条件下,D-天冬氨酸转化率达94%,D-丙氨酸收率为84%,对映体过量值(ee值)=98%。
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关键词
双酶连续催化
天冬氨酸消旋酶
D-氨基酸转氨酶
D-丙氨酸
生物工程
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Keywords
double enzyme continuous catalysis
aspartic acid racemase
D-amino acid transaminase
D-alanine
biological engineering
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
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