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太子参参须多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究 被引量：4
1
作者 曾丽 陈赛红 +5 位作者 赵佳梅 陈颖清 黄一帆 张炎达 李健 马玉芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期79-87,共9页
为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制,本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况,筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL~400μg/mL。将25μg/mL~400μg/mL RPFRP... 为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制,本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况,筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL~400μg/mL。将25μg/mL~400μg/mL RPFRP作用于RAW264.7细胞并于不同时间后收获细胞培养物或上清液进行后续试验。采用中性红法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的吞噬活性,结果显示:RPFRP可极显著提高RAW264.7细胞吞噬活性(P<0.01),且该吞噬活性在PRFRP浓度为25μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高;Griess法检测RAW264.7细胞的NO产生量,结果显示:RAW264.7细胞上清液中NO含量显著升高(P<0.05),且呈RPFRP剂量依赖式升高;ELISA法检测RAW264.7细胞的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,结果显示:与空白对照组相比,RPFRP处理的RAW264.7细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α和IL-10的含量极显著或显著上升(P<0.01、P<0.05),且在RPFRP浓度为25μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高;qRT-PCR检测RAW264.7细胞的诱导型-氧化氮合酶(iNOS)、细胞因子、核转录因子-κB(NF-κB)、髓样分化因子88(MyD88)和Toll样受体4(TLR4)mRNA转录水平,结果显示:RPFRP处理的RAW264.7细胞中iNOS、IL-6、IL-10、TNF-α的mRNA转录水平均呈剂量依赖式增加(P<0.01),IL-1β、MyD88和NF-κB的mRNA转录水平在RPFRP浓度为25μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高(P<0.01),仅在RPFRP浓度为400μg/mL时有所降低,而TLR4 mRNA的转录水平则呈剂量依赖式降低(P<0.01);western blot检测RAW264.7细胞中TLR2、TLR4、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、MyD88、NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)、NF-κB蛋白中表达水平,结果显示:RPFRP处理的RAW264.7细胞中TLR2、MyD88、TRIF与胞核NF-κB蛋白的表达水平提高且在RPFRP浓度为50μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高,而该细胞中TLR4、IκB-α和胞浆NF-κB蛋白的表达水平则在RPFRP浓度为50μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式下降。综上可知,RPFRP可通过提高RAW264.7细胞的增殖能力、吞噬活性、分泌NO和细胞因子的能力等增强RAW264.7细胞的免疫功能,且RPFRP对RAW264.7细胞的免疫调控机制可能是通过TLR2/4-MyD88/TRIF-NF-κB信号通路活化RAW264.7细胞来完成。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 RAW264.7细胞 免疫调节
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太子参参须多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究 被引量：20
2
作者 闵思明 赵晓瑶 +5 位作者 陈赛红 甘思言 陈俊宇 朱晶 黄一帆 马玉芳 《动物医学进展》 北大核心 2020年第8期23-28,共6页
为研究太子参参须多糖(RPFRP)对免疫抑制小鼠功能的影响,腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫抑制模型小鼠,灌胃RPFRP,称量计算器官指数(脾指数和胸腺指数),碳粒廓清法测定巨噬细胞功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测细胞因子... 为研究太子参参须多糖(RPFRP)对免疫抑制小鼠功能的影响,腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫抑制模型小鼠,灌胃RPFRP,称量计算器官指数(脾指数和胸腺指数),碳粒廓清法测定巨噬细胞功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测细胞因子含量。结果显示,RPFRP能下调免疫功能低下小鼠的脾脏指数,上调胸腺指数、碳粒廓清指数K和细胞因子IL-2、IFN-γ含量。说明RPFRP能通过改善免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、特异性细胞免疫和体液免疫功能,增强免疫功能低下小鼠的免疫功能。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 环磷酰胺 免疫调节 免疫抑制小鼠
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太子参参须多糖对小鼠OVA蛋白的免疫佐剂作用研究 被引量：9
3
作者 曾丽 甘思言 +5 位作者 杜蓥蓥 乔石 张炎达 黄一帆 王全溪 马玉芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期648-654,681,共8页
为研究太子参参须多糖(RPFRP)对模式抗原卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠的佐剂作用,本研究将60只雌性ICR小鼠随机分成空白对照组(CK组),单独免疫OVA组(OVA组),OVA+RPFRP低、中、高(50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg)剂量组(D、Z、G组)。在实验... 为研究太子参参须多糖(RPFRP)对模式抗原卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠的佐剂作用,本研究将60只雌性ICR小鼠随机分成空白对照组(CK组),单独免疫OVA组(OVA组),OVA+RPFRP低、中、高(50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg)剂量组(D、Z、G组)。在实验的第1 d~5 d和第16 d~20 d,除CK组和OVA组小鼠灌胃(ig)双蒸水之外,其他组小鼠分别灌胃对应剂量的RPFRP。第6 d和第21 d,除CK组小鼠经皮下注射0.2 mL PBS外,其余各组小鼠均经皮下注射OVA溶液0.2 mL(抗原含量≥99.9%),共免疫2次。第36 d迫杀各组小鼠,分别采用MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数(SI)及NK细胞活性,结果显示:与OVA组相比,OVA+各剂量RPFRP均能够显著提高T细胞的SI值(P<0.05),其中低、中剂量的RPFRP能够显著提高淋巴细胞的SI值。OVA+各剂量RPFRP组小鼠NK细胞的杀伤活性与CK和OVA组差异均不显著(P>0.05);采用ELISA法检测各组小鼠血清中细胞因子、特异性IgG抗体及其亚类含量,结果显示,与OVA组相比,OVA+各剂量RPFRP组的细胞因子含量及血清中IgG1抗体水平均有所提高但均差异不显著,G、Z组IgG2a抗体水平显著升高(P<0.05),G组IgG和IgG2b抗体水平均显著升高(P<0.05);采用RT-qPCR法检测各组小鼠脾淋巴细胞中的细胞因子以及转录因子的转录水平,结果显示,与OVA组相比,OVA+各剂量RPFRP组IL-4、IL-10、IFN-γ、转录因子T-bet、GATA mRNA转录水平和T-bet/GATA比值均无显著提高,仅G、Z组IL-2 mRNA的转录水平显著升高(P<0.05);采用流式细胞术检测各组小鼠脾细胞中CD3、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞亚群数量及CD4^(+)/CD8^(+)T细胞的比值,结果显示,与OVA组相比,G、Z组小鼠脾细胞中的CD3、CD8^(+)T细胞及G组CD4^(+)T细胞数量均显著升高(P<0.05),而G、Z组的CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比值明显降低(P<0.05),接近CK组的该比值。上述结果表明,RPFRP能在一定程度上提高小鼠脾淋巴细胞的增殖水平、NK细胞杀伤活性,调节IgG及其亚类抗体的分泌水平,调节相关细胞因子、转录因子的转录水平等,从而能在一定程度上提高小鼠对OVA的免疫应答能力,表现出一定的佐剂作用。本研究可丰富RPFRP的免疫学内容,为进一步寻找高效、无毒、安全的中药免疫佐剂提供一定数据参考。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 免疫模式抗原 小鼠 佐剂 免疫功能
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太子参参须多糖促进小鼠脾淋巴细胞体外增殖及细胞因子分泌的研究 被引量：7
4
作者 乔石 闵思明 +4 位作者 李若南 于丛爽 张炎达 黄一帆 马玉芳 《动物医学进展》 北大核心 2022年第3期73-77,共5页
设空白对照组及太子参参须多糖(RPFRP)组,给药12.5、25、50、100、200、400μg/mL,分别与小鼠的脾细胞共同培养。经分光光度法筛选RPFRP对小鼠脾淋巴细胞的安全浓度范围,MTT法检测RPFRP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,流式细胞术检测药物... 设空白对照组及太子参参须多糖(RPFRP)组,给药12.5、25、50、100、200、400μg/mL,分别与小鼠的脾细胞共同培养。经分光光度法筛选RPFRP对小鼠脾淋巴细胞的安全浓度范围,MTT法检测RPFRP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,流式细胞术检测药物作用后小鼠脾淋巴细胞的凋亡,ELISA法检测药物作用后小鼠脾淋巴细胞上清液中细胞因子含量。结果与空白对照组相比,RPFRP可显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖(P<0.05),当RPFRP质量浓度在12.5μg/mL~400μg/mL时,其协同ConA可显著促进T淋巴细胞的增殖(P<0.05),当RPFRP质量浓度在50μg/mL~400μg/mL时,其协同LPS可显著促进B淋巴细胞的增殖(P<0.05);RPFRP处理组细胞总凋亡率较空白对照组明显下降(P<0.05),当RPFRP质量浓度在25μg/mL~100μg/mL时,处理组细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率均显著降低(P<0.05),RPFRP在刺激淋巴细胞分泌细胞因子(IL-2,IL-4,IL-6和IFN-γ)中具有不同程度的促进作用(P>0.05或P<0.05)。RPFRP可促进小鼠脾淋巴细胞增殖,一定质量浓度内能减少脾淋巴细胞的凋亡,促进脾淋巴细胞因子分泌,为RPFRP的开发应用提供参考。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 脾增殖细胞 细胞因子 小鼠
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太子参参须多糖对免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用研究 被引量：12
5
作者 乔石 闵思明 +5 位作者 甘思言 陈赛红 陈俊宇 张炎达 黄一帆 马玉芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期991-997,共7页
为探究太子参参须多糖(RPFRP)对环磷酰胺(CY)造成的免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用,本研究将96只雄性KM小鼠,随机分成CK组(空白对照组),CY组(模型组),100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg RPFRP组(即低、中、高剂量RPFRP组)和200 mg/kg AP... 为探究太子参参须多糖(RPFRP)对环磷酰胺(CY)造成的免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用,本研究将96只雄性KM小鼠,随机分成CK组(空白对照组),CY组(模型组),100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg RPFRP组(即低、中、高剂量RPFRP组)和200 mg/kg APS组(黄芪多糖组,阳性对照组)。实验开始后第1 d~第3 d,CK组每天腹腔注射(ip)适量生理盐水,其余各组分别ip 80 mg/kg的CY,对小鼠造成免疫抑制后于第4 d~第17 d,CK组和CY组小鼠每天灌胃(ig)双蒸水,RPFRP组和APS组分别ig相应剂量的RPFRP和APS。第18 d迫杀小鼠,无菌取脾制备脾细胞悬液,采用MTT法检测小鼠NK细胞对淋巴瘤细胞(YAC-1)的杀伤活性;利用流式细胞术检测T细胞亚群数量、脾淋巴细胞的凋亡;通过qRT-PCR检测小鼠脾细胞因子及转录因子mRNA的转录水平。结果显示,与CY组相比,中剂量的RPFRP能够显著增强免疫抑制小鼠NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性(p<0.05);RPFRP可显著提高免疫损伤小鼠脾脏中CD^(3+)、CD^(4+)、CD^(8+)T淋巴细胞含量以及CD^(4+)/CD^(8+)比值(p<0.05),显著降低因CY所致的小鼠脾淋巴细胞的凋亡(p<0.05);较CY组,各剂量RPFRP组小鼠IL-2 mRNA转录水平均显著升高(p<0.05),IL-4、IL-6 mRNA转录水平均显著下降(p<0.05),RPFRP低、中剂量组小鼠脾淋巴细胞IFN-γmRNA转录水平均显著升高(p<0.05),各剂量RPFRP组和APS组小鼠T盒子转录因子(T-bet)的转录水平也显著升高(p<0.05),GATA结合蛋白3(GATA-3)的转录水平则显著降低(p<0.05),且T-bet/GATA-3的比值更接近于CK组。上述结果表明,RPFRP能够改善因CY所致小鼠脾脏T淋巴细胞亚群数量的降低,调节小鼠脾细胞因子及转录因子mRNA的转录水平,降低脾淋巴细胞的凋亡,且中剂量的RPFRP能显著提高小鼠脾NK细胞的杀伤活性,从而发挥其对免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用。本研究为RPFRP的临床应用和对机体免疫作用的研究提供参考依据。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 免疫抑制小鼠 脾脏损伤 免疫修复
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