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miR-409-3p通过靶向脂肪酸结合蛋白4影响子宫内膜癌细胞转移的研究
1
作者 张雨 刘芳 《成都医学院学报》 CAS 2024年第4期603-609,共7页
目的用生物信息学方法预测脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的上游调控miRNA,体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa,了解微小核糖核酸-409-3p(miR-409-3p)是否通过抑制FABP4的表达水平,进而影响Ishikawa细胞的生物学行为。方法实验分为control组、miR-... 目的用生物信息学方法预测脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的上游调控miRNA,体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa,了解微小核糖核酸-409-3p(miR-409-3p)是否通过抑制FABP4的表达水平,进而影响Ishikawa细胞的生物学行为。方法实验分为control组、miR-409-3p mimics组、miR-409-3p inhibitor组、miR-409-3p NC组、FABP4-OE组及FABP4-shRNA组6组,采用实时定量聚合酶链式反应及蛋白质印迹法检测miR-409-3p及FABP4在Ishikawa中的表达情况;采用细胞增殖实验(CCK-8)、细胞侵袭及迁移实验(Transwell法)检测miR-409-3p与FABP4对Ishikawa细胞增殖、侵袭以及迁移能力的影响;用双荧光素酶报告基因实验在Ishikawa细胞中检测miR-409-3p对FABP4的调控作用。结果1)在Ishikawa细胞中下调FABP4的表达后,Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05);在Ishikawa细胞中上调FABP4的表达后,Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05)。2)在Ishikawa细胞中转染miR-409-3p mimics后,FABP4的表达水平以及Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05);而转染miR-409-3p inhibitor后,FABP4的表达水平以及Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力均显著升高(P<0.05)。3)双荧光素酶报告基因结果显示,在Ishikawa细胞中miR-409-3p可靶向调控FABP4。结论高表达的FABP4促进Ishikawa细胞增殖、侵袭及迁移,miR-409-3p可通过下调FABP4的表达进而抑制Ishikawa细胞发生转移。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 FABP4 miR-409-3p 增殖 侵袭 迁移
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基因间长链非编码RNA 467对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡及迁移和侵袭能力的影响 被引量：1
2
作者 王圆圆 关新垒 秦海霞 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第1期13-20,共8页
目的探讨基因间长链非编码RNA 467(linc00467)对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡及迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养子宫内膜癌细胞株HEC-1A、Ishikawa、KLE和RL-95-2,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测4种细胞中linc00467的相... 目的探讨基因间长链非编码RNA 467(linc00467)对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡及迁移和侵袭能力的影响。方法体外培养子宫内膜癌细胞株HEC-1A、Ishikawa、KLE和RL-95-2,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测4种细胞中linc00467的相对表达量,选择高表达linc00467的子宫内膜癌细胞株HEC-1A、Ishikawa进行后续实验。分别构建2个linc00467慢病毒沉默表达载体sh-linc00467#1、sh-linc00467#2和空载慢病毒质粒;将对数生长期HEC-1A、Ishikawa细胞分为sh-NC组、sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组,sh-NC组细胞转染空载慢病毒质粒,sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组细胞分别转染sh-linc00467#1和sh-linc00467#2;应用RT-qPCR法检测3组细胞中linc00467的相对表达量,5-乙炔基-2-脱氧尿苷(EdU)实验、克隆形成实验检测3组细胞增殖能力,流式细胞术检测3组细胞凋亡情况,划痕实验检测3组细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测3组细胞侵袭能力。结果HEC-1A细胞中linc00467 mRNA的相对表达量显著高于KLE和RL-95-2细胞(P<0.05);Ishikawa细胞中linc00467 mRNA的相对表达量显著高于KLE和RL-95-2细胞(P<0.05);HEC-1A与Ishikawa细胞中linc00467 mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05),KLE细胞中linc00467 mRNA的相对表达量显著低于RL-95-2细胞(P<0.05)。sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞中linc00467 mRNA的相对表达量显著低于sh-NC组(P<0.01);sh-linc00467#1组与sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞中linc00467 mRNA的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组EdU阳性HEC-1A、Ishikawa细胞数显著少于sh-NC组(P<0.01);sh-linc00467#1组与sh-linc00467#2组EdU阳性HEC-1A、Ishikawa细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞克隆数显著少于sh-NC组(P<0.01);sh-linc00467#1组与sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞克隆数比较差异无统计学意义(P>0.05)。sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞凋亡率显著高于sh-NC组(P<0.01);sh-linc00467#1组与sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞划痕愈合率显著低于sh-NC组(P<0.01);sh-linc00467#1组与sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa细胞划痕愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。sh-linc00467#1组和sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa侵袭细胞数显著少于sh-NC组(P<0.01);sh-linc00467#1组与sh-linc00467#2组HEC-1A、Ishikawa侵袭细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论下调linc00467表达可抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进子宫内膜癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 基因间长链非编码RNA 467 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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CircWHSC1调节miR-212-3p/CD47轴对子宫内膜癌细胞免疫逃逸和紫杉醇耐药性的影响 被引量：1
3
作者 耿熙雪 钱红霞 +1 位作者 韩燕 李丽 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第7期510-515,共6页
目的:探讨环状链非编码RNA(Circ)WHSC1调节微小RNA(miR)-212-3p/整合素相关蛋白(CD47)轴对子宫内膜癌(EC)细胞免疫逃逸和紫杉醇(PTX)耐药性的影响。方法:qRT-PCR检测EC细胞系(Ishikawa、RL95-2、HEC-1-A、HEC-1B)及人子宫内膜基质细胞(E... 目的:探讨环状链非编码RNA(Circ)WHSC1调节微小RNA(miR)-212-3p/整合素相关蛋白(CD47)轴对子宫内膜癌(EC)细胞免疫逃逸和紫杉醇(PTX)耐药性的影响。方法:qRT-PCR检测EC细胞系(Ishikawa、RL95-2、HEC-1-A、HEC-1B)及人子宫内膜基质细胞(ESC)系CL0453中CircWHSC1、miR-212-3p、CD47 mRNA表达水平;以Ishikawa细胞为研究对象,分为对照组、RNA干扰CircWHSC1载体(sh-CircWHSC1)组、阴性对照(sh-NC)组、sh-CircWHSC1+miR-212-3p抑制剂(miR-212-3p inhibitor)组、sh-CircWHSC1+抑制剂阴性对照(inhibitor NC)组;CCK-8分别检测各组Ishikawa细胞增殖及对PTX耐药性;流式细胞仪检测细胞凋亡状况;Western blot检测CD47及免疫逃逸蛋白(B7-H1、PD-L1)表达;双荧光素酶验证miR-212-3p分别与CircWHSC1、CD47靶向关系。结果:Ishikawa、RL95-2、HEC-1-A、HEC-1B细胞较CL0453细胞CircWHSC1、CD47 mRNA均显著增加,miR-212-3p表达显著下降(P<0.05);与对照组、sh-NC组相比,sh-CircWHSC1组CircWHSC1、CD47 mRNA、增殖率、IC 50、B7-H1、PD-L1表达均显著下降,凋亡率、miR-212-3p表达显著增加(P<0.05);与sh-CircWHSC1+inhibitor NC组相比,sh-CircWHSC1+miR-212-3p inhibitor组CD47 mRNA、增殖率、IC 50、B7-H1、PD-L1表达均显著增加,凋亡率、miR-212-3p表达显著下降(P<0.05)。miR-212-3p分别与CircWHSC1、CD47存在靶向关系。结论:干扰CircWHSC1表达可抑制Ishikawa细胞增殖,降低PTX耐药性,促进其凋亡,并可能抑制癌细胞免疫逃逸,其作用机制可能是通过调控miR-212-3p/CD47轴实现的。 展开更多
关键词 CircWHSC1 miR-212-3p/CD47轴 子宫内膜癌细胞 免疫逃逸 紫杉醇耐药性
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大豆皂苷调控miR-584-5p/HDAC1通路对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量：1
4
作者 帅仁亚 李晴宇 +1 位作者 范敏慧 徐炜 《中国现代医生》 2023年第33期35-40,共6页
目的研究大豆皂苷调控微小RNA-584-5p(microRNA-584-5p,miR-584-5p)/组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylasel,HDAC1)通路对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞增殖及凋亡的影响。方法以终浓度Oltg/rml、20μg/ml、40μg/ml、80μg... 目的研究大豆皂苷调控微小RNA-584-5p(microRNA-584-5p,miR-584-5p)/组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylasel,HDAC1)通路对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞增殖及凋亡的影响。方法以终浓度Oltg/rml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml的大豆皂苷处理体外培养的人EC细胞系HEC-1-A,以细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK-8)法测定各浓度处理后的细胞活力,计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))。将对数生长期的HEC-1-A细胞随机分为对照组、大豆皂苷组、miR-584-5p抑制剂组、大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂组、大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂阴性对照组,分组转染及用药处理后,以CCK-8法测定各组细胞活力;以流式细胞实验检测各组细胞凋亡率;以免疫印迹实验检测各组细胞HDAC1蛋白、增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及凋亡相关蛋白[天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(cysteine-containing aspartate-specific proteases 9,caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein,Bax)]表达;以实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)实验检测各组细胞miR-584-5p与HDAC1 mRNA表达。结果不同浓度大豆皂苷可抑制HEC-1-A细胞生长,IC_(50)为98.56μg/ml。与对照组相比,大豆皂苷组与大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂阴性对照组的细胞活力、PCNA蛋白表达、HDACl mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率、caspase-9及Bax蛋白表达、miR-584-5p表达增高(P<0.05);miR-584-5p抑制剂组的细胞各指标与大豆皂苷组相反。miR-584-5p抑制剂可减弱大豆皂苷对细胞各指标的作用。结论大豆皂苷可上调miR-584-5p表达,下调HDAC1表达,促使EC细胞凋亡,抑制其增殖。 展开更多
关键词 大豆皂苷 miR-584-5p/HDAC1通路 子宫内膜癌细胞 增殖 凋亡
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沉默HMGB1对子宫内膜癌细胞生物活性和MMP-9、VEGF表达的影响 被引量：4
5
作者 迪丽拜尔·依马木 阿尔孜古丽·库尔班 托鲁尼阿依·吐尔逊 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1749-1753,共5页
目的探讨沉默高迁移率族蛋白(HMG)B1对子宫内膜癌细胞生物活性和基质金属蛋白酶(MMP)-9、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选取子宫内膜癌患者83例分为转移组(25例)及未转移组(58例),选取同期健康子宫内膜病理检查患者40例为健康组,... 目的探讨沉默高迁移率族蛋白(HMG)B1对子宫内膜癌细胞生物活性和基质金属蛋白酶(MMP)-9、血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选取子宫内膜癌患者83例分为转移组(25例)及未转移组(58例),选取同期健康子宫内膜病理检查患者40例为健康组,将HEC-1A细胞分为KK组(空白组)、BB组(HMGB1空转染组)、ZZ组(HMGB1 siRNA转染组);免疫组化检测HMGB1阳性率;逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测HMGB1、MMP-9 mRNA表达;噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪及Transwell法检测HEC-1A细胞增殖、凋亡及迁移能力;Western印迹检测VEGF、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)7蛋白表达水平。结果健康组HMGB1阳性率明显低于转移组及非转移组(均P<0.05),非转移组HMGB1阳性率明显低于转移组(P<0.05);HMGB1、MMP-9 mRNA表达水平在KK组与BB组HEC-1A细胞中表达差异无统计学意义(P>0.05),ZZ组HEC-1A细胞中HMGB1、MMP-9 mRNA表达水平较KK组、BB组明显升高(P<0.05);KK组与BB组HEC-1A细胞在0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 d时A值比较无明显差距(P>0.05);在各时间点ZZ组HEC-1A细胞A值明显低于KK组、BB组(P<0.05);48 h时KK组HEC-1A细胞凋亡率与BB组差异无统计学意义(P>0.05);ZZ组HEC-1A细胞凋亡率明显高于KK组与BB组(P<0.05);KK组HEC-1A细胞迁移数量与BB组差异无统计学意义(P>0.05);ZZ组HEC-1A细胞迁移数量较KK组与BB组明显减少(P<0.05);VEGF、IGFBP7在KK组、BB组HEC-1A细胞中的表达差异无统计学意义(P>0.05);ZZ组HEC-1A细胞中VEGF、IGFBP7表达水平明显低于KK组与BB组(P<0.05)。结论沉默HMGB1后子宫内膜癌细胞的生物活性降低,凋亡加剧,其作用机制可能与降低了MMP-9、VEGF、IGFBP7表达水平有关。 展开更多
关键词 沉默高迁移率族蛋白(HMG)B1 子宫内膜癌细胞 基质金属蛋白酶(MMP)-9 血管内皮生长因子(VEGF)
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大黄素通过TGF-β1/SMAD4通路对子宫内膜癌细胞生物学行为的影响及其机制 被引量：2
6
作者 王晓暖 温云花 +1 位作者 韦秋圆 李婷娜 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第20期3758-3763,共6页
目的:探讨大黄素(Emodin)对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)的影响及作用机制。方法:使用不同浓度的大黄素(0.5~10.0μmol/L)分别处理人子宫内膜癌HEC-1B细胞,检测细胞增殖... 目的:探讨大黄素(Emodin)对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)的影响及作用机制。方法:使用不同浓度的大黄素(0.5~10.0μmol/L)分别处理人子宫内膜癌HEC-1B细胞,检测细胞增殖确定最佳给药浓度。HEC-1B细胞分为对照组(Control组)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)组、Emodin组、Emodin+TGF-β1组、Disitertide(TGF-β1抑制剂)组,分别检测HEC-1B细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、TGF-β1、SMAD家族成员4(mothers against decapentaplegic homolog 4,SMAD4)蛋白表达。建立荷瘤小鼠模型检验大黄素对子宫内膜癌移植瘤生长的影响。结果:0.5~10.0μmol/L的大黄素可显著抑制HEC-1B细胞增殖,选择浓度为2.5μmol/L的大黄素进行后续实验。与Control组比较,TGF-β1组HEC-1B细胞集落形成数、迁移与侵袭数及N-cadherin、Vimentin、TGF-β1表达水平显著升高,E-cadherin、SMAD4表达水平降低(P<0.05),Emodin组与Disitertide组HEC-1B细胞集落形成数、迁移与侵袭数及N-cadherin、Vimentin、TGF-β1表达水平显著降低,细胞凋亡率及E-cadherin、SMAD4表达水平显著升高(P<0.05);与Emodin组比较,Emodin+TGF-β1组HEC-1B细胞集落形成数、迁移与侵袭数及N-cadherin、Vimentin、TGF-β1表达水平显著升高,细胞凋亡率及E-cadherin、SMAD4表达水平降低(P<0.05);大黄素可显著抑制移植瘤生长。结论:大黄素通过调控TGF-β1/SMAD4通路抑制子宫内膜癌肿瘤生长。 展开更多
关键词 大黄素 TGF-β1/SMAD4通路 子宫内膜癌细胞 增殖 凋亡 迁移与侵袭
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GATA结合蛋白6对子宫内膜癌细胞活性的影响及作用机制
7
作者 路瑶 戴蕾 +1 位作者 赵春丽 赵秀芬 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第20期5084-5087,共4页
目的探讨珠蛋白转录因子(GATA)结合蛋白6对子宫内膜癌细胞活性的影响及作用机制。方法常规培养人子宫内膜癌系(HEC)-151,转染并分组:空白对照组(含10%胎牛血清的DMEM细胞培养基);GATA结合蛋白6空载质粒组(加入空载体质粒);GATA结合蛋白... 目的探讨珠蛋白转录因子(GATA)结合蛋白6对子宫内膜癌细胞活性的影响及作用机制。方法常规培养人子宫内膜癌系(HEC)-151,转染并分组:空白对照组(含10%胎牛血清的DMEM细胞培养基);GATA结合蛋白6空载质粒组(加入空载体质粒);GATA结合蛋白6过表达质粒组(加入过表达质粒);GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组(加入siRNA阴性对照);GATA结合蛋白6siRNA组(加入siRNA)。同时常规培养人子宫内膜上皮细胞hEEC。CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖活力和凋亡率;划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。RT-PCR检测GATA结合蛋白6、星形胶质细胞上调基因(AEG)-1 mRNA表达。Western印迹检测人细胞凋亡调节因子(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-9、钙黏蛋白E、波形蛋白表达。结果人子宫内膜癌细胞中GATA结合蛋白6 mRNA、AEG-1 mRNA表达水平明显高于人子宫内膜上皮细胞(P<0.01)。GATA结合蛋白6过表达质粒组细胞活力明显高于GATA结合蛋白6空载质粒组、空白对照组,细胞凋亡率明显低于GATA结合蛋白6空载质粒组、空白对照组(P<0.01);GATA结合蛋白6 siRNA组细胞活力明显低于GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组,细胞凋亡率明显高于GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组(P<0.01)。GATA结合蛋白6过表达质粒组细胞迁移距离、侵袭细胞数明显高于GATA结合蛋白6空载质粒组、空白对照组(P<0.01)。GATA结合蛋白6 siRNA组明显低于GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组(P<0.01)。GATA结合蛋白6过表达质粒组GATA结合蛋白6、AEG-1 mRNA表达水平明显高于GATA结合蛋白6空载质粒组、空白对照组(P<0.01),GATA结合蛋白6siRNA组明显低于GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组(P<0.01)。GATA结合蛋白6过表达质粒组Bax、Caspase-9、钙黏蛋白E表达水平明显低于空白对照组,GATA结合蛋白6空载质粒组,波形蛋白表达水平明显高于空白对照组、GATA结合蛋白6空载质粒组(P<0.01);GATA结合蛋白6 siRNA组Bax、Caspase-9、钙黏蛋白E表达水平明显高于GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组,波形蛋白表达水平明显低于GATA结合蛋白6 siRNA阴性对照组(P<0.01)。结论下调GATA结合蛋白6表达可能通过抑制AEG-1表达,减弱人子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 GATA结合蛋白6 星形胶质细胞上调基因-1 子宫内膜癌细胞 增殖 迁移 侵袭 凋亡
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七氟醚调节VEGF/VEGFR2信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和血管生成的影响 被引量：1
8
作者 李正凯 冯玉 +2 位作者 冯锋 王崇 薛金磊 《中国计划生育学杂志》 2023年第8期1777-1782,共6页
目的:探讨七氟醚调节血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和血管生成的影响。方法:将子宫内膜癌细胞HEC-1A分为对照组、七氟醚组、si-NC组、si-VEGF组、七氟醚+pc-NC组、七氟醚+pc... 目的:探讨七氟醚调节血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和血管生成的影响。方法:将子宫内膜癌细胞HEC-1A分为对照组、七氟醚组、si-NC组、si-VEGF组、七氟醚+pc-NC组、七氟醚+pc-VEGF组;MTT、Edu法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Matrigel胶三维培养观察血管生成情况,qRT-PCR检测各组细胞中VEGF mRNA和VEGFR2 mRNA表达水平,Western blot检测细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、核蛋白(Ki-67)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)以及与VEGF/VEGFR2信号通路相关蛋白表达水平。结果:对照组细胞具有良好的管腔结构。与对照组相比,七氟醚组、si-VEGF组和七氟醚+pc-NC组HEC-1A细胞管腔结构明显被破坏,OD490(24h、48h)值和细胞增殖率、细胞迁移个数和侵袭个数、VEGF mRNA和VEGFR2 mRNA表达、VEGF-A、VE-cadherin、Ki-67、VEGF、VEGFR2蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05),七氟醚组与si-VEGF组HEC-1A细胞各项检测指标均无差异(P>0.05);与七氟醚+pc-NC组相比,七氟醚+pc-VEGF组HEC-1A细胞管腔结构破坏程度显著减轻,OD490(24h、48h)值和细胞增殖率、迁移个数和侵袭个数、VEGF mRNA和VEGFR2 mRNA表达、VEGF-A、VE-cadherin、Ki-67、VEGF、VEGFR2蛋白表达显著升高,细胞凋亡率、Caspase-3表达显著降低(均P<0.05)。结论:七氟醚通过阻断VEGF/VEGFR2信号通路,抑制子宫内膜癌细胞增殖、血管生成,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 七氟醚 血管内皮生长因子 信号通路 血管生成
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青蒿琥酯对人子宫内膜癌细胞RL95-2的生长抑制作用 被引量：8
9
作者 郑军生 王明华 +2 位作者 黄敏 骆云鹏 米粲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2221-2223,共3页
目的研究青蒿琥酯在体外对人子宫内膜癌RL95-2细胞的生长抑制作用及其可能机制。方法通过MTT法实验观察青蒿琥酯在体外对RL95-2细胞的抑制作用;透射电镜观察癌细胞的形态学改变;免疫组化检测细胞浆Caspase3活性;流式细胞术观察青蒿琥酯... 目的研究青蒿琥酯在体外对人子宫内膜癌RL95-2细胞的生长抑制作用及其可能机制。方法通过MTT法实验观察青蒿琥酯在体外对RL95-2细胞的抑制作用;透射电镜观察癌细胞的形态学改变;免疫组化检测细胞浆Caspase3活性;流式细胞术观察青蒿琥酯对细胞周期的影响及检测细胞线粒体膜电位Δψm和细胞内ROS水平。结果青蒿琥酯对RL95-2细胞具有增殖抑制作用,其半数细胞抑制浓度(IC50)为26.29μg/ml。透射电镜见:细胞呈早期凋亡改变:核染色质聚集于核膜周围,呈团块状;免疫组化检测细胞浆Caspase3表达阳性;流式细胞仪检测:细胞周期阻滞发生在G/0G1期;细胞内ROS升高(P<0.05);细胞线粒体膜电位Δψm降低(P<0.05)。结论青蒿琥酯在体外作用于人子宫颈癌RL95-2细胞,可能通过诱导细胞凋亡抑制癌细胞增殖。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 人子宫内膜癌细胞株RL95—2 氧自由基 线粒体膜电位 细胞凋亡
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来曲唑对人子宫内膜癌细胞作用的研究 被引量：14
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作者 王巧莲 梁元姣 +2 位作者 吴元赭 郝群 卓士超 《医学研究生学报》 CAS 2007年第6期627-630,I0001,共5页
目的:探讨第3代芳香化酶抑制剂来曲唑(letrazole)对子宫内膜癌细胞生长的抑制作用。方法:体外培养人子宫内膜癌细胞株RL-952,培养液中加入来曲唑和(或)丙酸睾酮、醋酸甲地孕酮(MA),用计数法分析细胞的生长,用流式细胞仪检测细胞周期和... 目的:探讨第3代芳香化酶抑制剂来曲唑(letrazole)对子宫内膜癌细胞生长的抑制作用。方法:体外培养人子宫内膜癌细胞株RL-952,培养液中加入来曲唑和(或)丙酸睾酮、醋酸甲地孕酮(MA),用计数法分析细胞的生长,用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡细胞,并对药物处理过的细胞进行苏木精-伊红(H-E)染色、光镜下观察细胞形态和凋亡细胞。结果:来曲唑联合丙酸睾酮、MA对RL-952子宫内膜癌细胞周期有影响,使G0/G1期的细胞增加,S期、G2/M期细胞减少;单用丙酸睾酮或来曲唑对RL-952子宫内膜癌细胞周期均无明显影响。结论:芳香化酶抑制剂来曲唑可抑制丙酸睾酮所致RL-952子宫内膜癌细胞株的增殖。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞株 来曲唑 醋酸甲地孕酮
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曲古抑菌素A和紫杉醇对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3
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作者 张嵩 张焱 +3 位作者 李胜 王红梅 牟晓燕 姜淑娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第6期516-521,共6页
目的:研究曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)和紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人子宫内膜癌细胞株KLE增殖和凋亡的影响。方法:TSA和PTX、卡铂(carboplatin,Carbo)、多柔比星(doxorubicin,Dox)单独或联合作用于KLE细胞,锥虫蓝法观察药物对肿瘤... 目的:研究曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)和紫杉醇(paclitaxel,PTX)对人子宫内膜癌细胞株KLE增殖和凋亡的影响。方法:TSA和PTX、卡铂(carboplatin,Carbo)、多柔比星(doxorubicin,Dox)单独或联合作用于KLE细胞,锥虫蓝法观察药物对肿瘤细胞生长的影响;Annexin V、Hoechst染色和线粒体膜电位检测细胞凋亡;Western blotting检测肿瘤细胞凋亡信号通路中多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、半胱天冬氨酸蛋白酶9(caspase-9)和乙酰化微管蛋白的表达。结果:PTX、Carbo、Dox和TSA对KLE细胞增殖均有抑制作用,TSA和PTX联用后抑制作用最强。Annexin V染色、Hoechst染色、线粒体膜电位法和PARP、Caspase-9的检测显示,单用PTX或TSA均可诱导细胞凋亡,联合应用产生最强的协同作用。Western blotting和免疫组化分析显示,PTX和TSA均可诱导微管蛋白乙酰化,联合用药后微管蛋白乙酰化明显增加。结论:TSA和PTX联合使用有明显的协同作用,能显著抑制子宫内膜癌KLE细胞生长和诱导细胞凋亡,其机制与激活线粒体凋亡信号通路和增强微管蛋白乙酰化有关。 展开更多
关键词 曲古抑菌素A 紫杉醇 子宫内膜癌细胞 凋亡
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过表达MicroRNA-195抑制子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力 被引量：5
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作者 张玉虹 孙喜斌 +3 位作者 石克威 马会 于治芳 陈江平 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2020年第1期1-5,共5页
目的:观察MicroRNA-195对子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。方法:取对数生长期人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,分别转染MicroRNA-195模拟物(MicroRNA-195过表达组)、MicroRNA-195抑制物(MicroRNA-195低表达组)及阴性对照质粒Micr... 目的:观察MicroRNA-195对子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。方法:取对数生长期人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,分别转染MicroRNA-195模拟物(MicroRNA-195过表达组)、MicroRNA-195抑制物(MicroRNA-195低表达组)及阴性对照质粒MicroRNA-NC(空白质粒组)。转染48h后,qRT-PCR法检测细胞中MicroRNA-195表达,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力,Western blot法检测Akt、p-Akt蛋白表达。将转染MicroRNA-195模拟物、MicroRNA-195抑制物及阴性对照质粒MicroRNA-NC的人子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别注射至裸鼠皮下,每天检测肿瘤体积,实验周期为3周。结果:MicroRNA-195过表达可抑制人子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),提高p-Akt蛋白表达(P<0.05);MicroRNA-195低表达可促进人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),降低p-Akt蛋白表达(P<0.05)。MicroRNA-195过表达可抑制裸鼠体内人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖(P<0.05),MicroRNA-195低表达可促进裸鼠体内人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖(P<0.05)。结论:MicroRNA-195可抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 MicroRNA-195 PI3K/AKT信号通路 子宫内膜癌细胞 细胞增殖 迁移与侵袭
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不同子宫内膜癌细胞系中G蛋白耦联受体30mRNA及蛋白表达观察 被引量：4
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作者 叶佳 杨晓清 +2 位作者 盛楠 马勤宜 张玉泉 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第19期31-33,共3页
目的观察不同子宫内膜癌细胞系中G蛋白耦联受体30(GPR30)mRNA及蛋白的表达变化。方法收集正常增生期人子宫内膜组织,原代培养子宫内膜腺上皮细胞并鉴定。体外培养人子宫内膜癌细胞系ISK(ERα阳性、ERβ阳性、高分化)、RL95-2(ERα阳性... 目的观察不同子宫内膜癌细胞系中G蛋白耦联受体30(GPR30)mRNA及蛋白的表达变化。方法收集正常增生期人子宫内膜组织,原代培养子宫内膜腺上皮细胞并鉴定。体外培养人子宫内膜癌细胞系ISK(ERα阳性、ERβ阳性、高分化)、RL95-2(ERα阳性、ERβ阳性、中分化)、HEC-1-B(ERα阴性、ERβ阳性、中分化)、KLE(ERα阴性、ERβ阴性、低分化)。采用real-time PCR法检测正常子宫内膜腺上皮细胞及不同子宫内膜癌细胞系中的GPR30 mRNA,采用Western blotting法检测GPR30蛋白。结果子宫内膜腺上皮细胞、ISK细胞系、RL95-2细胞系、HEC-1-B细胞系、KLE细胞系中GPR30 mRNA相对表达量分别为0.016±0.002、0.032±0.004、0.049±0.003、0.051±0.006、0.083±0.001,GPR30蛋白相对表达量分别为0.31±0.22、0.57±0.01、1.21±0.04、1.34±0.05、1.77±0.01。各子宫内膜癌细胞系中GPR30 mRNA及蛋白相对表达量均高于子宫内膜腺上皮细胞(P均<0.05);ISK细胞系中GPR30 mRNA及蛋白相对表达量最低,与RL95-2细胞系、HEC-1-B细胞系、KLE细胞系相比,P均<0.05;KLE细胞系中GPR30 mRNA及蛋白相对表达量高于HEC-1-B细胞系及RL95-2细胞系(P均<0.05)。结论不同子宫内膜癌细胞系中GPR30 mRNA及蛋白均呈高表达,且在高、中、低分化的子宫内膜癌细胞系中表达水平逐渐增高。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 子宫内膜癌细胞系 G蛋白耦联受体30 孕激素受体 子宫内膜腺上皮细胞
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PGE_2通过Wnt/β-catenin信号通路促进子宫内膜癌细胞生长的研究 被引量：4
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作者 张静渊 白小明 +3 位作者 张丽 张海 马娟 冷静 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1255-1260,共6页
目的:探讨PGE2对子宫内膜癌细胞生长的促进作用及分子机制。方法:免疫组织化学(EnVision)法检测正常子宫内膜与子宫内膜癌组织中β-catenin的表达;用PGE2、EP2受体激动剂Butaprost、EP2受体拮抗剂AH6809处理子宫内膜癌Ishikawa细胞株,以... 目的:探讨PGE2对子宫内膜癌细胞生长的促进作用及分子机制。方法:免疫组织化学(EnVision)法检测正常子宫内膜与子宫内膜癌组织中β-catenin的表达;用PGE2、EP2受体激动剂Butaprost、EP2受体拮抗剂AH6809处理子宫内膜癌Ishikawa细胞株,以WST-8细胞增殖实验检测各实验组细胞的增殖率;用Western blot方法分别检测β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β在未处理组、PGE2处理组、EP2受体激动剂处理组和EP2受体拮抗剂处理组中的表达;免疫荧光技术检测β-catenin在未处理组和PGE2处理组中表达定位的情况。结果:免疫组织化学法结果显示β-catenin在正常子宫内膜组织中仅存在膜表达,而子宫内膜癌组织中为胞浆和胞核的表达。WST-8实验结果显示:经PGE2、Butaprost和AH6809处理后,细胞的增殖率相对于对照组分别为183.9%、151.9%、72.1%。Western blot实验结果显示:PGE2处理后,β-catenin蛋白表达上升至235.7%而p-β-catenin水平下降至76.8%,p-GSK-3β水平升高至204.3%;EP2受体激动剂+PGE2处理组显示β-catenin蛋白表达上升至279.7%而p-β-catenin水平下降至33.6%,p-GSK-3β水平升高至236.7%;EP2受体拮抗剂+PGE2处理组显示β-catenin蛋白表达上升至185.2%而p-β-catenin水平下降至73.9%,p-GSK-3β水平升高至116.2%。免疫荧光技术探测结果表明:PGE2处理子宫内膜癌细胞后,β-catenin蛋白在癌细胞胞浆中的表达信号明显强于未处理组,并出现明显核内表达信号。结论:PGE2能促进子宫内膜癌细胞的增殖,并伴有β-catenin蛋白的过表达和入核,其机制可能涉及到EP2受体激活和Wnt/β-catenin信号转导通路。 展开更多
关键词 PGE2 子宫内膜癌细胞 WNT/Β-CATENIN信号转导通路 EP2受体
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PRB介导子宫内膜癌细胞对MPA敏感性的作用机制研究 被引量：3
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作者 王晶 孙笑 +1 位作者 王丽华 王玉东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1252-1256,共5页
目的明确孕激素受体B(PRB)介导子宫内膜癌细胞对醋酸甲羟孕酮(MPA)的敏感性,及观察干扰PRB表达,MPA对内膜癌细胞生物学行为的影响。方法利用慢病毒载体系统转染对孕激素敏感的Ishikawa细胞,干扰PRB表达,实时荧光定量PCR(qPCR)及Western ... 目的明确孕激素受体B(PRB)介导子宫内膜癌细胞对醋酸甲羟孕酮(MPA)的敏感性,及观察干扰PRB表达,MPA对内膜癌细胞生物学行为的影响。方法利用慢病毒载体系统转染对孕激素敏感的Ishikawa细胞,干扰PRB表达,实时荧光定量PCR(qPCR)及Western blot检测Ishikawa细胞PRB的mRNA和蛋白水平。MTT法、流式细胞技术(FACS)、Transwell法分别检测MPA对内膜癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响;Western blot检测MPA对子宫内膜癌细胞丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的影响。结果慢病毒载体介导的RNA干扰Ishikawa细胞明显抑制了PRB的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);MPA对Ishikawa细胞具有抑制增殖、侵袭,并促进凋亡的作用(P<0.01);干扰PRB表达后,孕激素作用则相反,且激活MAPK/ERK通路。结论 PRB介导了子宫内膜癌细胞对MPA的敏感性,干扰PRB的表达,MPA可通过激活ERK1/2-MAPK通路,影响内膜癌细胞的生物学行为。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 丝裂原活化蛋白激酶 细胞外信号调节激酶 醋酸甲羟孕酮 孕激素受体B 孕激素耐药
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莪术油对人子宫内膜癌细胞株RL-95-2抑制作用的体外研究 被引量：17
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作者 赵华 汤为学 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期158-160,i0002,共4页
目的研究莪术油注射液在体外对人子宫内膜癌细胞株RL-95-2细胞周期进程的干扰及其可能的机制。方法通过MTT法实验观察莪术油在体外对RL-95-2的抑制作用;流式细胞仪分析其细胞周期的改变;免疫细胞化学法观察部分细胞周期素的表达。结果... 目的研究莪术油注射液在体外对人子宫内膜癌细胞株RL-95-2细胞周期进程的干扰及其可能的机制。方法通过MTT法实验观察莪术油在体外对RL-95-2的抑制作用;流式细胞仪分析其细胞周期的改变;免疫细胞化学法观察部分细胞周期素的表达。结果莪术油注射液对RL-95-2的抑制作用呈时间-剂量依赖性,中效浓度(72h)为222.36μg/ml,1/2此剂量的莪术油作用于Rl-95-2细胞株24小时、48小时、72小时均可引起G0/G1期细胞比例增加,S期、G2/M期细胞比例减少,统计学表明这种改变差异有非常显著性(P<0.01)。免疫细胞化学法显示Cy-clinD1、CyclinE、P16表达增加,CyclinA、突变型P53表达减低。结论莪术油注射液在体外可抑制人子宫内膜癌细胞株RL-95-2增殖,可能系通过促进P16表达增加,而改变细胞周期进程,同时抑制突变型P53表达从而抑制细胞生长的。 展开更多
关键词 莪术油注射液 人子宫内膜癌细胞株RL-95-2 细胞周期
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转化生长因子β_1对子宫内膜癌细胞系Ishikawa体外增殖、细胞周期、凋亡的影响 被引量：4
17
作者 李莹莹 刘贵鹏 +1 位作者 王东娇 张璐 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期255-257,共3页
目的探讨转化生长因子β(1TGF-β1)对子宫内膜癌细胞系Ishikawa体外增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法用MTT法检测细胞增殖水平,通过流式细胞术观察细胞周期和凋亡的变化。结果TGF-β1以时间依赖方式明显抑制Ishikawa细胞的生长(P<0.... 目的探讨转化生长因子β(1TGF-β1)对子宫内膜癌细胞系Ishikawa体外增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法用MTT法检测细胞增殖水平,通过流式细胞术观察细胞周期和凋亡的变化。结果TGF-β1以时间依赖方式明显抑制Ishikawa细胞的生长(P<0.05),各浓度间差异显著,随浓度增高抑制更加显著(P<0.05)。TGF-β1促进Ishikawa细胞凋亡,细胞凋亡百分比随时间及浓度的增加而增长;TGF-β1阻滞细胞停滞于G1期,S期的比例显著降低。结论TGF-β1能抑制人子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 人子宫内膜癌细胞 ISHIKAWA 凋亡 细胞周期
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家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞生长影响 被引量：3
18
作者 贺莉芳 万启惠 +1 位作者 刘晖 张曦 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期528-529,共2页
目的探讨家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞(JEC)的影响。方法细胞计数法、四甲基偶氨噻唑蓝(MTT)法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC细胞生长的影响;MTT法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对正常人牙周膜细胞生长的影响;苏木素一伊红(HE)染色法观察细胞... 目的探讨家蝇幼虫抗菌蛋白对子宫内膜癌细胞(JEC)的影响。方法细胞计数法、四甲基偶氨噻唑蓝(MTT)法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对JEC细胞生长的影响;MTT法测定家蝇幼虫抗菌蛋白对正常人牙周膜细胞生长的影响;苏木素一伊红(HE)染色法观察细胞凋亡,并计算细胞凋亡指数(AI)。结果高浓度组JEC细胞数及吸光度(A)值明显降低,细胞增殖抑制率随浓度的增加而增大;各浓度组正常人牙周膜细胞的A值和细胞增殖抑制率与对照组比较差异均无统计学意义;HE染色见细胞凋亡,各浓度组AI均明显高于对照组。结论家蝇幼虫抗菌蛋白可能是通过诱导细胞凋亡来抑制JEC细胞生长。 展开更多
关键词 家蝇幼虫 抗菌蛋白 子宫内膜癌细胞(JEC)
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索拉非尼对子宫内膜癌细胞HEC-1B增殖、凋亡的影响 被引量：3
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作者 陈阳 王丽 +3 位作者 何静 程维良 吕海侠 田冬梅 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第18期2839-2841,共3页
目的:探讨多分子靶向药物索拉菲尼对体外培养人子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖、凋亡的影响。方法:MTT检测细胞活力/增殖情况,免疫印迹检测细胞内caspase3蛋白水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;对比阴性对照组(正常培养的细胞),分析索拉菲尼对... 目的:探讨多分子靶向药物索拉菲尼对体外培养人子宫内膜癌细胞(HEC-1B)增殖、凋亡的影响。方法:MTT检测细胞活力/增殖情况,免疫印迹检测细胞内caspase3蛋白水平;流式细胞仪检测细胞凋亡;对比阴性对照组(正常培养的细胞),分析索拉菲尼对子宫内膜癌细胞增殖/凋亡的影响。结果:索拉菲尼对子宫内膜癌细胞增殖有抑制作用,且随着药物浓度增加作用也增强(P<0.05);与对照组相比,索拉菲尼处理组细胞caspase3蛋白表达及凋亡率均明显增加(P<0.05)。结论:索拉菲尼对体外培养的人子宫内膜癌细胞有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 索拉菲尼 人子宫内膜癌细胞 凋亡 CASPASE3
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黄芪注射液对人子宫内膜癌细胞β-catenin和E-cadherin表达的影响 被引量：4
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作者 欧阳小明 郅程 +2 位作者 周芸 廖德贵 赖妙玲 《分子影像学杂志》 2016年第3期292-296,共5页
目的研究黄芪注射液对子人宫内膜癌HEC-1-B细胞β-catenin和E-cadherin基因和蛋白表达的影响。方法分别采用RT-PCR和免疫组化的方法检测β-catenin和E-cadherin基因和蛋白的表达。用含不同浓度的黄芪注射液的条件培养基分别培养人子宫... 目的研究黄芪注射液对子人宫内膜癌HEC-1-B细胞β-catenin和E-cadherin基因和蛋白表达的影响。方法分别采用RT-PCR和免疫组化的方法检测β-catenin和E-cadherin基因和蛋白的表达。用含不同浓度的黄芪注射液的条件培养基分别培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B 24、48、72 h后,应用RT-PCR检测各组细胞中β-catenin、E-cadherin基因表达,应用免疫细胞化学法检测HEC-1-B中β-catenin、E-cadherin蛋白表达。结果 RT-PCR结果显示,随着子宫内膜癌细胞在含有黄芪注射液的条件培养基中培养时间的延长,细胞中E-cadherin基因表达逐步增强(P<0.05),而β-catenin基因表达逐步减弱(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,与对照组比较,黄芪注射液可明显降低子宫内膜癌HEC-1-B细胞中β-catenin蛋白的表达、增加E-cadherin蛋白的表达(P<0.05),而且黄芪注射液浓度越高处理时间越长β-catenin表达更低(P<0.05),黄芪注射液浓度越高E-cadherin表达更高(P<0.05)。结论黄芪注射液可呈剂量和时间依赖性促进E-cadherin基因和蛋白的表达、抑制β-catenin基因和蛋白的表达,从而使WNT信号通路受到抑制。这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。 展开更多
关键词 黄芪注射液 人子宫内膜癌细胞 Β-CATENIN E-CADHERIN
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