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机械应力对人子宫旁韧带成纤维细胞增殖及胶原代谢的影响
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作者 胡烨 张永莉 杜贵强 《中国生育健康杂志》 2023年第4期307-312,共6页
目的探讨人子宫旁韧带成纤维细胞增殖及胶原代谢受到机械应力的影响。方法选取2020年2月-2020年5月于上海市第一妇婴保健院医院妇科因良性肿瘤行子宫全切手术的5例患者,年龄43~49岁,均无盆底功能障碍疾病,均未绝经,使用酶消化法获得人... 目的探讨人子宫旁韧带成纤维细胞增殖及胶原代谢受到机械应力的影响。方法选取2020年2月-2020年5月于上海市第一妇婴保健院医院妇科因良性肿瘤行子宫全切手术的5例患者,年龄43~49岁,均无盆底功能障碍疾病,均未绝经,使用酶消化法获得人子宫旁韧带成纤维原代细胞并鉴定。对子宫旁韧带成纤维细胞进行不同时间(12 h及24 h)及不同大小(6%、12%及18%)周期性拉伸应力加载,检测成纤维细胞的增殖能力及细胞胶原代谢相关基因MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1的RNA水平的表达变化,以未加力细胞组作为对照组,进行对照分析。结果与对照组相比,6%、12%及18%的拉伸应力都可以抑制成纤维细胞的增殖能力,且在一定范围内随着应力增加(6%~12%)及作用时间延长(12~24 h)其抑制作用增加。与对照组相比,6%的拉伸应力使成纤维细胞MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1的RNA水平出现轻度上调趋势,但差异不显著(P>0.05)。12%及18%的拉伸应力使成纤维细胞MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1的RNA水平下调。且随作用力加大(12%~18%),MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ及LOXL1 mRNA表达都有进一步下降的趋势,其中LOXL1 mRNA表达有明显的下降(P<0.05);随着作用时间延长(12~24 h),MMP-2、TIMP-1、CollagenⅠmRNA的表达明显下降(P<0.05),而CollagenⅢ及LOXL1 mRNA的表达差异无统计学意义。在各基因中,CollagenⅢ和MMP-2 mRNA表达水平的最大下调幅度为21.1%和24.8%,TIMP-1、CollagenⅠ及LOXL1 mRNA分别达到43.6%、40.1%及47.9%。结论较短时间的轻度的拉伸应力似乎具有促进子宫骶韧带成纤维细胞的增殖及上调胶原相关基因表达的趋势,但仍需进一步实验验证;较大及较长时间的拉伸应力可以抑制成纤维细胞的增殖并使胶原相关基因表达下调,但各基因的下调具有不一致性。 展开更多
关键词 子宫旁韧带 成纤维细胞 机械应力 细胞增殖 胶原代谢
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人子宫旁韧带成纤维细胞原代培养的初步研究 被引量：5
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作者 丁文娟 洪莎莎 +6 位作者 闵洁 方桂 张小红 胡鸣 杨青 赵杨 洪莉 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第1期16-19,共4页
目的:初步探索和建立人子宫旁韧带成纤维细胞原代培养的方法,为盆腔器官脱垂的基础研究提供成熟的体外人盆底成纤维细胞系。方法:临床搜集因盆腔器官脱垂(POP)或非POP的良性妇科疾病而行子宫切除患者的子宫旁韧带(包括主韧带和骶韧带),... 目的:初步探索和建立人子宫旁韧带成纤维细胞原代培养的方法,为盆腔器官脱垂的基础研究提供成熟的体外人盆底成纤维细胞系。方法:临床搜集因盆腔器官脱垂(POP)或非POP的良性妇科疾病而行子宫切除患者的子宫旁韧带(包括主韧带和骶韧带),组织剪碎后采用改良的Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶消化法进行原代培养,待细胞长至贴满培养瓶底面80%以上时,消化传代,对所培养的成纤维细胞进行形态学观察及免疫荧光鉴定其来源。结果:原代培养第3-4天开始,可见有单个成纤维细胞迁出、生长,7-10d时可见少部分细胞逐渐贴壁形成较小的成纤维细胞团,第25天左右多个细胞团生长中心爬出的成纤维细胞互相连接聚集成片,铺满培养瓶底;采用免疫组化染色进行细胞鉴定,细胞波形蛋白表达阳性,角蛋白表达阴性,证实其为成纤维细胞。结论:本研究确立了体外人子宫旁韧带成纤维细胞原代培养,为后续研究POP发病机制提供成熟的体外宫旁韧带成纤维细胞。 展开更多
关键词 人子宫旁韧带 成纤维细胞 原代培养
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