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Fah^(-/-)Rag2^(-/-)IL2Rg^(-/-)小鼠肝脏原位异种重建模型的建立及其评价
1
作者 张蒙 周琪 胡正 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1358-1365,共8页
目的:构建猪-小鼠肝细胞嵌合模型,探讨猪肝细胞在无T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)介导排斥条件下的移植及再生的相关条件,评估猪肝细胞在异种受体中的定居、增殖和功能因子分泌情况,为提高猪源化小鼠模型中猪肝细胞的重... 目的:构建猪-小鼠肝细胞嵌合模型,探讨猪肝细胞在无T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)介导排斥条件下的移植及再生的相关条件,评估猪肝细胞在异种受体中的定居、增殖和功能因子分泌情况,为提高猪源化小鼠模型中猪肝细胞的重建效率提供依据。方法:采用脾脏内注射法将猪肝细胞移植至Fah^(-/-)Rag2^(-/-)IL2Rg^(-/-)(FRG)小鼠体内,构建移植模型。将16只FRG小鼠随机分为对照组、空白对照组、实验组和绿色荧光蛋白(GFP)基因实验组,每组4只。空白对照组小鼠停止给予2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-1,4-环己二酮(NTBC),监测体质量;对照组4只小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;实验组小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;GFP基因实验组小鼠注射携带GFP基因猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d。观察各组小鼠体质量、生存情况。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,流式细胞术检测各组小鼠外周血中CD19+、CD3+和NK1.1+细胞表达情况,ELISA法检测各组小鼠血清中猪白蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠猪肝细胞再生效率。结果:与剪碎后再以胶原酶消化的方式比较,两步灌注法消化过程更温和、对细胞损伤更小,细胞活性可以达到92%。停止给予NTBC后,对照组小鼠体质量进行性降低,生命活力逐渐降低。连续停药第28天小鼠开始出现死亡现象。小鼠肝组织中出现肝细胞肿大、细胞浆疏松透亮和细胞核溶解等不可逆细胞损伤。空白对照组小鼠停药后血清中ALT水平逐渐升高。对照组停药小鼠重新给予NTBC后,体质量逐渐恢复至正常水平。流式细胞术,停止给予NTBC后,小鼠外周血中CD19+、CD3+和NK1.1+细胞完全缺失。免疫组织化学染色,实验组小鼠肝组织中未见深色Fah+阳性细胞,移植小鼠肝组织中可见深色Fah+阳性细胞,猪肝细胞再生效率为(11±4)%。GFP基因实验组小鼠可见同一视野经三色激光分别激发,猪肝细胞再生效率为(10±2)%。结论:成功构建了猪源化FRG小鼠肝脏嵌合模型,建立了长效稳定扩增猪肝细胞的小鼠模型。 展开更多
关键词 肝细胞异种移植 Fah 肝细胞 猪-小鼠肝细胞嵌合模型 免疫缺陷小鼠
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高活力原代小鼠肝细胞的分离与纯化 被引量：7
2
作者 王燕 周露婷 +1 位作者 章卫平 谢志芳 《医学研究杂志》 2011年第3期28-31,共4页
目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝... 目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 分离 灌注 原代培养
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富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖小鼠肝细胞修复作用的研究 被引量：2
3
作者 杨启银 曩潇潇 +2 位作者 何瑶 闵涛岭 王晓炜 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期497-501,共5页
以不同浓度的沼泽红假单胞菌和不同剂量的富硒沼泽红假单胞菌灌喂D-半乳糖致衰老小鼠。结果表明,富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖致衰老小鼠肝细胞明显受损伤的细胞核、线粒体、内质网具有修复保护作用,并可以提高致衰老小鼠肝细胞细胞器... 以不同浓度的沼泽红假单胞菌和不同剂量的富硒沼泽红假单胞菌灌喂D-半乳糖致衰老小鼠。结果表明,富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖致衰老小鼠肝细胞明显受损伤的细胞核、线粒体、内质网具有修复保护作用,并可以提高致衰老小鼠肝细胞细胞器的活力和肝细胞的抗氧化能力。 展开更多
关键词 沼泽红假单胞菌 硒 D-半乳糖 小鼠肝细胞 线粒体 修复
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不同药物杀灭原头节对小鼠肝细粒棘球蚴感染的影响 被引量：3
4
作者 吕海龙 彭心宇 +3 位作者 张士杰 阿杜瓦一 杨宏强 孙红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期295-297,共3页
关键词 囊型肝包虫手术 小鼠肝细粒棘球蚴感染 药物处理 动物模型
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热应激小鼠肝癌细胞(H_(22))源Exosomes的抗肿瘤免疫机制 被引量：1
5
作者 孙迪 杨麟 +2 位作者 沈宜 汪少华 向自武 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期681-686,691,共7页
目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以E... 目的制备小鼠肝癌细胞(H22)源Exosomes及热应激小鼠肝癌细胞(H22)源HS-Exo(heat stressedExosomes,HS-Exo),研究其对小鼠可能的抗肿瘤免疫机制。方法用超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化获得Exosomes及HS-Exo,透射电镜观察其形态。以Exosomes为对照,观察HS-Exo的蛋白组分、产量及其激发宿主抗肝癌免疫应答效应,用Western blot方法检测两者所含有的相关蛋白情况。用MTT法检测免疫小鼠脾细胞增殖和脾淋巴细胞的细胞毒活性。用免疫组化法检测经两者免疫后小鼠肿瘤组织中CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果HS-Exo与Exosomes形态相似,HS-Exo所含的重要免疫蛋白表达增加(P<0.05),用HS-Exo免疫小鼠后比用Exosomes免疫小鼠能更有效地抑制肿瘤生长,更好地诱导淋巴细胞增殖,更显著增强小鼠脾淋巴细胞的细胞毒活性以及更明显的肿瘤治疗作用(P<0.05)。结论热应激制备HS-Exo的方法具有可行性,HS-Exo比Exosomes具有更强的免疫活性和肿瘤治疗作用。 展开更多
关键词 EXOSOMES 小鼠肝癌细胞(H22) HS-Exo 肿瘤免疫
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虾青素对氧化应激小鼠肝原代细胞的保护作用 被引量：2
6
作者 张珊珊 郑鑫 +2 位作者 吴旻 张晓音 沈家鲲 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期98-102,共5页
试验旨在研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的影响。采用改进的原位二步灌流法提取ICR小鼠肝原代细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率、活细胞率的变化,生物化学法测定细胞中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、γ... 试验旨在研究虾青素对过氧化氢(H_2O_2)诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的影响。采用改进的原位二步灌流法提取ICR小鼠肝原代细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率、活细胞率的变化,生物化学法测定细胞中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的活性变化;荧光定量PCR测定CAT、γ-GCS催化亚基(GCLC)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)mRNA相对表达量的变化,ELISA法检测细胞中Keap1、Nrf2蛋白的变化。结果表明:虾青素能够降低H_2O_2诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的细胞凋亡率、MDA含量、Nrf2和Keap1 mRNA相对表达量(P<0.05),提升活细胞率、CAT和γ-GCS活性(P<0.05)、CAT和GCLC的mRNA相对表达量(P<0.05),抑制Nrf2蛋白及Keap1蛋白的表达(P<0.05)。虾青素能够促进相关抗氧化酶的活性,抑制Nrf2蛋白及Keap1蛋白表达进而抑制Keap1-Nrf2-ARE信号通路的激活。 展开更多
关键词 虾青素 小鼠肝原代细胞 氧化应激 Keap1蛋白 Nrf2蛋白
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螺旋藻复方合剂对运动小鼠肝细胞、心肌和骨骼肌细胞超微结构及HSP70表达的影响 被引量：3
7
作者 朱梅菊 高顺生 李红 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期567-570,585,共5页
目的:研究螺旋藻复方对递增大负荷运动小鼠肝脏、心肌和骨骼肌的保护作用及对HSP70表达的影响。方法:用光学显微镜和电子显微镜分别观察递增大负荷运动和递增大负荷运动加螺旋藻复方对小鼠心肌、骨骼肌和肝组织的形态学影响。用免疫组化... 目的:研究螺旋藻复方对递增大负荷运动小鼠肝脏、心肌和骨骼肌的保护作用及对HSP70表达的影响。方法:用光学显微镜和电子显微镜分别观察递增大负荷运动和递增大负荷运动加螺旋藻复方对小鼠心肌、骨骼肌和肝组织的形态学影响。用免疫组化法(SP法)研究适量运动、递增大负荷运动、适量运动加螺旋藻复方和递增大负荷运动加螺旋藻复方对小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞的HSP70蛋白表达的变化。结果:在光镜下,递增大负荷运动组小鼠心肌、骨骼肌和肝细胞出现了不同程度的水肿、变性和坏死,在电镜下,可见肌原纤维断裂、细胞肿胀、线粒体肿胀,空泡样变和细胞核核质溶解,可见凋亡小体。而递增大负荷运动加螺旋藻复方组小鼠心肌、骨骼肌和肝脏的病变程度明显减轻。运动各组小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞HSP70表达均显著高于正常组(均P<0.01),适量运动加螺旋藻复方组小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞HSP70表达均高于适量运动组(P<0.01或P<0.05)。递增大负荷运动加螺旋藻复方组小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞HSP70表达均显著低于递增大负荷运动组(P<0.01或P<0.05),但与适量运动加螺旋藻复方组比较,无显著性差异(均P>0.05)。结论:螺旋藻复方能抵抗递增大负荷运动导致的组织细胞损伤,其分子机理可能与该方可提高运动诱导HSP70表达水平有关。 展开更多
关键词 螺旋藻复方 递增大负荷运动 形态学 热休克蛋白70 HSP70表达 小鼠肝细胞 螺旋藻复方 骨骼肌细胞 小鼠心肌 运动小鼠 细胞超微结构 复方合剂 大负荷运动
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“加减-贯煎”对四氯化碳所致小鼠肝脏损伤的影响 被引量：3
8
作者 周广耀 胡祖光 +1 位作者 宾陈玉 赵秋云 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1989年第6期14-14,共1页
我所临床研究室用加减一贯煎治疗肝病疗效良好。我们采用四氯化碳中毒性肝损伤的动物模型,观察了该方对肝损伤动物的SGPT、肝脏甘油三酯、肝糖元、血清尿酸代谢的影响。现将实验报告如下: 材料和方法 一、加减一贯煎:由我所药化研究室... 我所临床研究室用加减一贯煎治疗肝病疗效良好。我们采用四氯化碳中毒性肝损伤的动物模型,观察了该方对肝损伤动物的SGPT、肝脏甘油三酯、肝糖元、血清尿酸代谢的影响。现将实验报告如下: 材料和方法 一、加减一贯煎:由我所药化研究室提供。组方:沙参、当归、生地黄、枸杞子、半枝莲、郁金等,制成100％水煎剂。 二、动物与急性肝损伤模型复制方法: 小鼠雌雄兼用,体重22～26克。 展开更多
关键词 急性肝损伤模型 一贯煎 肝糖元 动物模型 尿酸代谢 复制方法 SGPT 疏肝活血 小鼠肝细胞 肝细胞坏死
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小鼠肝细胞胰岛素信号转导的动力学研究 被引量：1
9
作者 丁慧荣 刘友平 +2 位作者 李洪 何涛 段承刚 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期33-35,共3页
目的从细胞整体水平观察细胞内信号蛋白在胰岛素刺激下发生的动力学变化,找出胰岛素相关信号蛋白的动力学改变及其对胰岛素信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,分析小鼠肝细胞在胰岛素(100 nmol/L)持... 目的从细胞整体水平观察细胞内信号蛋白在胰岛素刺激下发生的动力学变化,找出胰岛素相关信号蛋白的动力学改变及其对胰岛素信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,分析小鼠肝细胞在胰岛素(100 nmol/L)持续刺激不同时间得到的胰岛素信号蛋白磷酸化水平发生的动力学变化。结果小鼠肝细胞胰岛素信号转导相关磷蛋白有数十种,其中磷蛋白Shc、MKP3等的时间动力学曲线均呈峰型。结论在细胞整体水平,胰岛素多条信号转导途径之间存在相互交流,这种相互交流对信号转导的最终效应产生了复杂的整合和调控,使细胞对持续高浓度的胰岛素刺激产生了自适应控制。 展开更多
关键词 胰岛素 细胞信号转导 动力学 小鼠肝细胞
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葡多酚与硫辛酸对^(60)Coγ致小鼠肝损伤拮抗作用 被引量：4
10
作者 宗传龙 周白云 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1229-1230,共2页
关键词 ^60Coγ线 小鼠肝损伤 拮抗作用 硫辛酸 葡多酚 谷胱甘肽过氧化物酶 细胞线粒体 超氧化物歧化酶
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四氯化碳与乙醇经口所致小鼠肝损伤病理模型重现性的比较 被引量：4
11
作者 阎向东 郑珊 熊晓燕 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期136-138,共3页
关键词 四氯化碳 小鼠肝损伤 病理模型 北京市疾病预防控制中心 重现性 肝细胞脂肪变性 肝损伤模型 经口 化学性肝损伤 指标比较 1998年 形态学检查 保护功能 病理改变 病理变化 病变程度 不同时间 重复性 乙醇性 敏感 生化
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硫代乙酰胺致小鼠肝损伤时转化生长因子-β_1/Smad3表达的变化及意义 被引量：2
12
作者 杨云 张海燕 刘立新 《中国药物与临床》 CAS 2011年第12期1389-1390,I0002,共3页
硫代乙酰胺（TAA）是一种弱致癌物,具有肝毒性。其诱导的肝纤维化模型简单可靠,造模时间短,模型成功率高,且形成相对稳定[1]。肝纤维化是多种慢性肝病共有的病理过程。目前,肝纤维化仍是影响肝硬化发病率和病死率的重要原因[2]。肝纤维... 硫代乙酰胺（TAA）是一种弱致癌物,具有肝毒性。其诱导的肝纤维化模型简单可靠,造模时间短,模型成功率高,且形成相对稳定[1]。肝纤维化是多种慢性肝病共有的病理过程。目前,肝纤维化仍是影响肝硬化发病率和病死率的重要原因[2]。肝纤维化是可逆的病理改变,而肝硬化是不可逆的。因此。 展开更多
关键词 硫代乙酰胺 小鼠肝损伤 肝纤维化模型 转化 病理过程 慢性肝病 病理改变 肝硬化
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超速玻璃化法冻存小鼠肝细胞球形聚集体的初步研究 被引量：2
13
作者 徐兵 杨晓梅 吴林岚 《肝脏》 2012年第2期113-114,共2页
现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于... 现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于冻存胚胎、卵巢、胎肝组织和脑细胞[2-5].本研究将小鼠肝细胞预培养成球形聚集肝细胞,用改进的超速玻璃化法冻存,解冻后与含胶原培养液混合、培养,通过检测培养上清液中ALT、AST、乳酸脱氢酶（LDH）浓度判断肝细胞受损漏出情况,检测白蛋白（ Alb）浓度判断肝细胞合成功能.对照组用单层贴壁培养分散肝细胞做同样冻存和检测. 展开更多
关键词 玻璃化法冻存 小鼠肝细胞 聚集体培养 球形聚集 肝细胞冻存 肝细胞培养 培养上清液 肝细胞受损
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高浓度EGF对小鼠肝细胞信号转导的动力学研究 被引量：2
14
作者 刘友平 丁慧荣 +1 位作者 吴民泸 李洪 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期643-646,649,共5页
目的:探讨高浓度表皮生长因子(EGF)对小鼠肝细胞信号转导的动力学改变。方法:从细胞整体水平的角度出发,采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源和双向电泳专用分析软件,分析小鼠肝细胞在高浓度的EGF信号持续刺激不... 目的:探讨高浓度表皮生长因子(EGF)对小鼠肝细胞信号转导的动力学改变。方法:从细胞整体水平的角度出发,采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源和双向电泳专用分析软件,分析小鼠肝细胞在高浓度的EGF信号持续刺激不同时间得到的EGF信号蛋白在EGF信号转导过程中其磷酸化水平发生的动力学变化。结果:在高浓度EGF持续刺激下,小鼠肝细胞内的某些结点信号蛋白如Eps15和ERK2的磷酸化动力学曲线表现为持续活化状态。结论:在高浓度的EGF持续刺激下,EGF信号网络系统中的某些信号蛋白将会发生一定的改变,这些改变可能与肿瘤的发生、发展有密切关系。 展开更多
关键词 细胞信号转导 动力学研究 浓度 表皮生长因子(EGF) EGF信号转导 放射性同位素 信号蛋白 双向电泳 动力学改变 数据库资源 动力学变化 磷酸化水平 小鼠肝细胞 整体水平 标记技术 分析软件 不同时间 活化状态 ERK2 网络系统
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红花黄色素对老龄小鼠肝线粒体氧化损伤保护作用的实验研究 被引量：1
15
作者 江旭东 欧芹 +1 位作者 孙佳彬 魏晓东 《黑龙江医药》 CAS 2005年第5期341-343,共3页
目的:探讨老龄小鼠肝线粒体结构和功能的增龄性改变和红花黄色素(Safflower Yellow Pigment,SYP)对肝线粒体抗氧化损伤的保护作用。方法:以衰老小鼠为研究对象,测定了肝线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn—超氧化物歧化酶(Mn—SOD)活性,Ca^(2+)... 目的:探讨老龄小鼠肝线粒体结构和功能的增龄性改变和红花黄色素(Safflower Yellow Pigment,SYP)对肝线粒体抗氧化损伤的保护作用。方法:以衰老小鼠为研究对象,测定了肝线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn—超氧化物歧化酶(Mn—SOD)活性,Ca^(2+)—ATPase 活性、复合体Ⅰ及复合体Ⅱ+Ⅲ活性,观察不同剂量 SYP 对上述各指标的影响。结果:老年组肝线粒体 Mn—SOD 活性、Ca^(2+)—ATPase 活性、复活体Ⅰ和复合体Ⅱ+Ⅲ活性显著降低,而 MDA 含量升高;SYP 大、中剂量组可升高 Mn—SOD、Ca^(2+)—ATPase、复合体Ⅰ及复合体Ⅱ+Ⅲ活性。结论:红花黄色素通过提高机体抗氧化能力、保护复合体酶活性、改善细胞内钙离子超载而起到延缓衰老的作用。 展开更多
关键词 红花黄色素 老年小鼠 线粒体 氧化损伤 线粒体氧化损伤 红花黄色素 保护作用 小鼠肝 ATPASE活性 老龄 实验研 丙二醛(MDA) 超氧化物歧化酶
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黄芪注射液对四氯化碳损伤小鼠肝的保护作用 被引量：7
16
作者 欧阳雁玲 张明升 《太原科技》 2002年第3期26-27,共2页
观察黄芪注射液 (HQI)对四氯化碳 (CCl4)所致肝损伤的保护作用。采用CCl4所致肝损伤模型 ,并测定功能 ,肝组织学检查及肝组织匀浆脂质过氧化。结果为 ,CCl4模型组小鼠血清GPT为 (94 5 .7±14 6 .1)U/ 10 0mL ,显著高于正常对照组 (P... 观察黄芪注射液 (HQI)对四氯化碳 (CCl4)所致肝损伤的保护作用。采用CCl4所致肝损伤模型 ,并测定功能 ,肝组织学检查及肝组织匀浆脂质过氧化。结果为 ,CCl4模型组小鼠血清GPT为 (94 5 .7±14 6 .1)U/ 10 0mL ,显著高于正常对照组 (P <0 .0 1)。HQI低、高剂量组的血清GPT分别为 (5 76 .3±97.4 )U/ 10 0mL和 (5 18 6± 78.8)U/ 10 0mL ,均显著低于模型组 (P <0 .0 1)。HQI治疗组肝组织MDA浓度显著低于模型组 ,病理学损伤减轻。结论为 ,注射 3g/kg～ 10g/kgHQI可减轻CCl4引起的小鼠肝脏损伤。本实验结果提示 。 展开更多
关键词 四氯化碳损伤 小鼠肝 保护作用 黄芪注射液 脂质过氧化物 肝损伤 小鼠试验
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Wnt3a诱导小鼠肝前体细胞上皮-间质转化
17
作者 胡代曦 张锡峰 +2 位作者 芦永良 冯涛 黄佳祎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第20期2208-2211,共4页
目的探讨Wnt3a对小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化的影响。方法将表达Wnt3a的腺病毒Ad-GFPWnt3a转入小鼠肝前体细胞中,与空白对照组相比,观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定... 目的探讨Wnt3a对小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化的影响。方法将表达Wnt3a的腺病毒Ad-GFPWnt3a转入小鼠肝前体细胞中,与空白对照组相比,观察其形态变化。细胞划痕实验和细胞迁移实验观察其对小鼠肝前体细胞迁移能力的影响。实时荧光定量Real-time PCR和Western blot分别检测小鼠肝前体细胞中上皮标志物和间质标志物的表达改变。结果镜下观察,高表达Wnt3a的小鼠肝前体细胞由不规则多边形变为长梭形。细胞划痕实验结果显示,Ad-Wnt3a组细胞48h迁移距离为(0.53±0.05)mm,Ad-GFP组细胞48 h迁移距离为(0.33±0.02)mm,相对对照组,其迁移距离增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞迁移实验结果显示,Ad-GFP组24 h穿过小孔的细胞为(10.33±2.08)个,而Ad-Wnt3a组穿过的细胞为(62.00±3.60)个,相对对照组,其穿过小孔的细胞数量增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR和Western blot结果显示,间质标志物N-cadherin、vimentin和snail的mRNA和蛋白水平表达上调,相反上皮标志物E-cadherin和CK-18的mRNA水平和蛋白水平表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Wnt3a能够促使小鼠肝前体细胞发生上皮-间质转化,提示其可能参与了肝纤维化的发展进程。 展开更多
关键词 WNT3A 小鼠肝前体细胞 上皮-间质转化
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小鼠肝细胞表皮生长因子信号转导相关磷蛋白的动力学研究
18
作者 刘友平 姚富丽 +1 位作者 杨烨 李洪 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期2913-2915,共3页
目的探讨小鼠肝细胞中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)信号转导相关磷蛋白的动力学改变及其对信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源,分析小鼠肝细胞在饱和浓度EGF持续... 目的探讨小鼠肝细胞中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)信号转导相关磷蛋白的动力学改变及其对信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源,分析小鼠肝细胞在饱和浓度EGF持续刺激不同时间得到的EGF信号相关磷蛋白磷酸化水平的动力学变化。结果小鼠肝细胞内EGF信号转导途径中,大多数的磷蛋白都表现为激活后很快恢复到未刺激状态;个别磷蛋白则表现为持续活化状态,如Eps15和ERK2。结论在细胞整体水平上,EGF信号途径中磷蛋白表现的动力学行为是受到整个信号转导系统整合后的动力学行为;个别磷蛋白表现为持续活化状态,这些改变可能与肿瘤的发生、发展有密切关系。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 表皮生长因子 磷蛋白 细胞信号转导 动力学
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表达白细胞介素-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用
19
作者 刘勇 胡大荣 +4 位作者 谭晓华 范公忍 胡学玲 韩聚强 吴忆贫 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第2期147-150,共4页
目的:探讨瘤内注射mIL-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法:构建真核表达质粒载体pDC511mIL-12,ELISA方法检测质粒载体在真核细胞中的表达,淋巴母细胞增殖法检测mIL-12的生物学活性;分别于小鼠肝癌H22皮下移植瘤内直接注射质粒D... 目的:探讨瘤内注射mIL-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法:构建真核表达质粒载体pDC511mIL-12,ELISA方法检测质粒载体在真核细胞中的表达,淋巴母细胞增殖法检测mIL-12的生物学活性;分别于小鼠肝癌H22皮下移植瘤内直接注射质粒DNA,观察各组小鼠存活时间、肿瘤体积变化及各组小鼠脾脏细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活性。注射质粒DNA后1月进行瘤体组织病理学观察。结果:mIL-12基因治疗组与空载体对照组相比,肿瘤生长显著受抑制(F=4.10,P=0.03),小鼠存活期显著延长(X2=4.48,P=0.03),并且小鼠脾细胞CTL杀伤活性增强。质粒DNA瘤内注射1月后,pDC511mIL-12组肿瘤病灶炎性细胞浸润明显,病灶内肿瘤细胞广泛坏死。结论:瘤内注射mIL-12表达质粒DNA可抑制小鼠肝癌皮下移植瘤生长,能提高机体抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞癌 小鼠白细胞介素-12 免疫基因治疗 疾病模型
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镉中毒小鼠肝细胞的立体学定量研究
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作者 李光鼎 杨文庆 +5 位作者 蒋功博 刘鲜林 刘辉 刘菲 高铁 许庭良 《中国医学物理学杂志》 CSCD 1991年第Z1期89-89,共1页
本文用立体学定量的方法,分析镉中毒小鼠肝细胞核、线粒体、脂滴的变化,确定肝细胞核及线粒体的平均体积、表面积显著缩小;脂滴的平均体积及表面积明显增大,与正常对照组有高度显著性差异(P【0.01)。细胞形态的计量研究越来越多地应用... 本文用立体学定量的方法,分析镉中毒小鼠肝细胞核、线粒体、脂滴的变化,确定肝细胞核及线粒体的平均体积、表面积显著缩小;脂滴的平均体积及表面积明显增大,与正常对照组有高度显著性差异(P【0.01)。细胞形态的计量研究越来越多地应用于形态学科领域,本文用立体学的方法定量研究镉中毒小鼠的肝细胞。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 镉中毒 立体学 定量研究 平均体积 肝细胞核 形态学科 脂滴 计量研究 显著性差异
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