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高活力原代小鼠肝细胞的分离与纯化 被引量：7
1
作者 王燕 周露婷 +1 位作者 章卫平 谢志芳 《医学研究杂志》 2011年第3期28-31,共4页
目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝... 目的建立一种稳定的能获得高活力和高纯度原代小鼠肝细胞的分离和纯化方法。方法对传统的两步原位胶原酶灌注法进行4个方面的优化,主要包括选择逆向灌流、将持续灌注法改为间断灌注后夹闭门静脉法、严格控制胶原酶消化时间和将分离的肝细胞悬液进行低速Percoll单密度离心纯化。分离后的肝细胞进行体外培养。肝细胞活力和得率用台盼蓝染色法检测。结果新鲜分离的小鼠原代肝细胞活力能稳定达到87%±3%,平均活细胞总数为8×105每克小鼠体重,绝大部分细胞在体外培养2h后贴壁生长。结论优化后的肝细胞分离方法更为稳定、有效,分离到的肝细胞具有高活力的优点。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 分离 灌注 原代培养
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富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖小鼠肝细胞修复作用的研究 被引量：2
2
作者 杨启银 曩潇潇 +2 位作者 何瑶 闵涛岭 王晓炜 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期497-501,共5页
以不同浓度的沼泽红假单胞菌和不同剂量的富硒沼泽红假单胞菌灌喂D-半乳糖致衰老小鼠。结果表明,富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖致衰老小鼠肝细胞明显受损伤的细胞核、线粒体、内质网具有修复保护作用,并可以提高致衰老小鼠肝细胞细胞器... 以不同浓度的沼泽红假单胞菌和不同剂量的富硒沼泽红假单胞菌灌喂D-半乳糖致衰老小鼠。结果表明,富硒沼泽红假单胞菌对D-半乳糖致衰老小鼠肝细胞明显受损伤的细胞核、线粒体、内质网具有修复保护作用,并可以提高致衰老小鼠肝细胞细胞器的活力和肝细胞的抗氧化能力。 展开更多
关键词 沼泽红假单胞菌 硒 D-半乳糖 小鼠肝细胞 线粒体 修复
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螺旋藻复方合剂对运动小鼠肝细胞、心肌和骨骼肌细胞超微结构及HSP70表达的影响 被引量：3
3
作者 朱梅菊 高顺生 李红 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期567-570,585,共5页
目的:研究螺旋藻复方对递增大负荷运动小鼠肝脏、心肌和骨骼肌的保护作用及对HSP70表达的影响。方法:用光学显微镜和电子显微镜分别观察递增大负荷运动和递增大负荷运动加螺旋藻复方对小鼠心肌、骨骼肌和肝组织的形态学影响。用免疫组化... 目的:研究螺旋藻复方对递增大负荷运动小鼠肝脏、心肌和骨骼肌的保护作用及对HSP70表达的影响。方法:用光学显微镜和电子显微镜分别观察递增大负荷运动和递增大负荷运动加螺旋藻复方对小鼠心肌、骨骼肌和肝组织的形态学影响。用免疫组化法(SP法)研究适量运动、递增大负荷运动、适量运动加螺旋藻复方和递增大负荷运动加螺旋藻复方对小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞的HSP70蛋白表达的变化。结果:在光镜下,递增大负荷运动组小鼠心肌、骨骼肌和肝细胞出现了不同程度的水肿、变性和坏死,在电镜下,可见肌原纤维断裂、细胞肿胀、线粒体肿胀,空泡样变和细胞核核质溶解,可见凋亡小体。而递增大负荷运动加螺旋藻复方组小鼠心肌、骨骼肌和肝脏的病变程度明显减轻。运动各组小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞HSP70表达均显著高于正常组(均P<0.01),适量运动加螺旋藻复方组小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞HSP70表达均高于适量运动组(P<0.01或P<0.05)。递增大负荷运动加螺旋藻复方组小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和肝细胞HSP70表达均显著低于递增大负荷运动组(P<0.01或P<0.05),但与适量运动加螺旋藻复方组比较,无显著性差异(均P>0.05)。结论:螺旋藻复方能抵抗递增大负荷运动导致的组织细胞损伤,其分子机理可能与该方可提高运动诱导HSP70表达水平有关。 展开更多
关键词 螺旋藻复方 递增大负荷运动 形态学 热休克蛋白70 HSP70表达 小鼠肝细胞 螺旋藻复方 骨骼肌细胞 小鼠心肌 运动小鼠 细胞超微结构 复方合剂 大负荷运动
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小鼠肝细胞胰岛素信号转导的动力学研究 被引量：1
4
作者 丁慧荣 刘友平 +2 位作者 李洪 何涛 段承刚 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期33-35,共3页
目的从细胞整体水平观察细胞内信号蛋白在胰岛素刺激下发生的动力学变化,找出胰岛素相关信号蛋白的动力学改变及其对胰岛素信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,分析小鼠肝细胞在胰岛素(100 nmol/L)持... 目的从细胞整体水平观察细胞内信号蛋白在胰岛素刺激下发生的动力学变化,找出胰岛素相关信号蛋白的动力学改变及其对胰岛素信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,分析小鼠肝细胞在胰岛素(100 nmol/L)持续刺激不同时间得到的胰岛素信号蛋白磷酸化水平发生的动力学变化。结果小鼠肝细胞胰岛素信号转导相关磷蛋白有数十种,其中磷蛋白Shc、MKP3等的时间动力学曲线均呈峰型。结论在细胞整体水平,胰岛素多条信号转导途径之间存在相互交流,这种相互交流对信号转导的最终效应产生了复杂的整合和调控,使细胞对持续高浓度的胰岛素刺激产生了自适应控制。 展开更多
关键词 胰岛素 细胞信号转导 动力学 小鼠肝细胞
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高浓度EGF对小鼠肝细胞信号转导的动力学研究 被引量：2
5
作者 刘友平 丁慧荣 +1 位作者 吴民泸 李洪 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期643-646,649,共5页
目的:探讨高浓度表皮生长因子(EGF)对小鼠肝细胞信号转导的动力学改变。方法:从细胞整体水平的角度出发,采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源和双向电泳专用分析软件,分析小鼠肝细胞在高浓度的EGF信号持续刺激不... 目的:探讨高浓度表皮生长因子(EGF)对小鼠肝细胞信号转导的动力学改变。方法:从细胞整体水平的角度出发,采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源和双向电泳专用分析软件,分析小鼠肝细胞在高浓度的EGF信号持续刺激不同时间得到的EGF信号蛋白在EGF信号转导过程中其磷酸化水平发生的动力学变化。结果:在高浓度EGF持续刺激下,小鼠肝细胞内的某些结点信号蛋白如Eps15和ERK2的磷酸化动力学曲线表现为持续活化状态。结论:在高浓度的EGF持续刺激下,EGF信号网络系统中的某些信号蛋白将会发生一定的改变,这些改变可能与肿瘤的发生、发展有密切关系。 展开更多
关键词 细胞信号转导 动力学研究 浓度 表皮生长因子(EGF) EGF信号转导 放射性同位素 信号蛋白 双向电泳 动力学改变 数据库资源 动力学变化 磷酸化水平 小鼠肝细胞 整体水平 标记技术 分析软件 不同时间 活化状态 ERK2 网络系统
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超速玻璃化法冻存小鼠肝细胞球形聚集体的初步研究 被引量：2
6
作者 徐兵 杨晓梅 吴林岚 《肝脏》 2012年第2期113-114,共2页
现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于... 现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于冻存胚胎、卵巢、胎肝组织和脑细胞[2-5].本研究将小鼠肝细胞预培养成球形聚集肝细胞,用改进的超速玻璃化法冻存,解冻后与含胶原培养液混合、培养,通过检测培养上清液中ALT、AST、乳酸脱氢酶（LDH）浓度判断肝细胞受损漏出情况,检测白蛋白（ Alb）浓度判断肝细胞合成功能.对照组用单层贴壁培养分散肝细胞做同样冻存和检测. 展开更多
关键词 玻璃化法冻存 小鼠肝细胞 聚集体培养 球形聚集 肝细胞冻存 肝细胞培养 培养上清液 肝细胞受损
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小鼠肝细胞表皮生长因子信号转导相关磷蛋白的动力学研究
7
作者 刘友平 姚富丽 +1 位作者 杨烨 李洪 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第20期2913-2915,共3页
目的探讨小鼠肝细胞中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)信号转导相关磷蛋白的动力学改变及其对信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源,分析小鼠肝细胞在饱和浓度EGF持续... 目的探讨小鼠肝细胞中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)信号转导相关磷蛋白的动力学改变及其对信号转导最终生理效应的影响。方法采用双向电泳及放射性同位素标记技术,并结合相关数据库资源,分析小鼠肝细胞在饱和浓度EGF持续刺激不同时间得到的EGF信号相关磷蛋白磷酸化水平的动力学变化。结果小鼠肝细胞内EGF信号转导途径中,大多数的磷蛋白都表现为激活后很快恢复到未刺激状态;个别磷蛋白则表现为持续活化状态,如Eps15和ERK2。结论在细胞整体水平上,EGF信号途径中磷蛋白表现的动力学行为是受到整个信号转导系统整合后的动力学行为;个别磷蛋白表现为持续活化状态,这些改变可能与肿瘤的发生、发展有密切关系。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 表皮生长因子 磷蛋白 细胞信号转导 动力学
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镉中毒小鼠肝细胞的立体学定量研究
8
作者 李光鼎 杨文庆 +5 位作者 蒋功博 刘鲜林 刘辉 刘菲 高铁 许庭良 《中国医学物理学杂志》 CSCD 1991年第Z1期89-89,共1页
本文用立体学定量的方法,分析镉中毒小鼠肝细胞核、线粒体、脂滴的变化,确定肝细胞核及线粒体的平均体积、表面积显著缩小;脂滴的平均体积及表面积明显增大,与正常对照组有高度显著性差异(P【0.01)。细胞形态的计量研究越来越多地应用... 本文用立体学定量的方法,分析镉中毒小鼠肝细胞核、线粒体、脂滴的变化,确定肝细胞核及线粒体的平均体积、表面积显著缩小;脂滴的平均体积及表面积明显增大,与正常对照组有高度显著性差异(P【0.01)。细胞形态的计量研究越来越多地应用于形态学科领域,本文用立体学的方法定量研究镉中毒小鼠的肝细胞。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 镉中毒 立体学 定量研究 平均体积 肝细胞核 形态学科 脂滴 计量研究 显著性差异
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葡多酚对小鼠肝细胞乳酸脱氢酶影响
9
作者 刘辉 钟进义 李蕾 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1502-1502,共1页
关键词 小鼠肝细胞 乳酸脱氢酶 葡多酚 细胞增殖活性 体外细胞培养 多酚类物质 国内外研究 清除自由基
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ARIP2在小鼠肝细胞中表达与调控的实验研究
10
作者 林瑞新 武家成 +3 位作者 由广强 王铁龙 李欢 杨淑莉 《中国实验诊断学》 2017年第8期1422-1424,共3页
目的探讨激活素受体相互作用蛋白2(ARIP2)在小鼠肝细胞中的表达与调控。方法使用RT-PCR方法对ARIP2的mRNA转录水平及调控因素进行检测。结果 Activin A能够刺激小鼠肝细胞的ARIP2表达增加,其转录水平随作用时间的增加而升高;Activin A,... 目的探讨激活素受体相互作用蛋白2(ARIP2)在小鼠肝细胞中的表达与调控。方法使用RT-PCR方法对ARIP2的mRNA转录水平及调控因素进行检测。结果 Activin A能够刺激小鼠肝细胞的ARIP2表达增加,其转录水平随作用时间的增加而升高;Activin A,PMA及LPS均对小鼠肝细胞ARIP2mRNA的转录具有促进作用,而A23187对小鼠肝细胞ARIP2mRNA的转录具有抑制作用;ARIP2的过表达对Activin A诱导的小鼠肝细胞的ActRⅡA mRNA的转录具有抑制作用,而对ActRⅡB mRNA的转录无影响。结论ARIP2的表达受到Activin A,A23187,PMA及LPS等多种因素的影响,ARIP2通过对小鼠肝细胞ActRⅡA表达的影响,参加激活素作用信号传导的负反馈调控。 展开更多
关键词 激活素受体相互作用蛋白2 小鼠肝细胞 表达 调控
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富马毒素B1诱导的小鼠肝细胞凋亡及端粒酶活性改变
11
作者 罗萍 章亚倞 高蓉 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2004年第2期49-52,共4页
目的　了解富马毒素 B1 ( FB1 )诱导小鼠肝细胞凋亡与端粒酶活性改变之间的关系。方法　给实验BALB/c小鼠喂饲含 1 mg/ml FB1饮用水 ,分别在不同时间取小鼠肝组织 ,用 TUNEL方法观察小鼠肝细胞凋亡发生情况 ,同时用 RT-PCR-ELISA法检测... 目的　了解富马毒素 B1 ( FB1 )诱导小鼠肝细胞凋亡与端粒酶活性改变之间的关系。方法　给实验BALB/c小鼠喂饲含 1 mg/ml FB1饮用水 ,分别在不同时间取小鼠肝组织 ,用 TUNEL方法观察小鼠肝细胞凋亡发生情况 ,同时用 RT-PCR-ELISA法检测肝细胞端粒酶活性。结果　在摄入 FB1时间不同的各个实验组小鼠肝组织中均检测到端粒酶活性并观察到肝细胞凋亡明显增加。端粒酶活性随摄入 FB1时间增长而明显升高 ;但肝细胞凋亡与端粒酶活性变化有时相差异 ,表现为凋亡细胞指数先明显升高 ,然后逐渐减少的特点。结论FB1诱导小鼠肝细胞凋亡和其致癌作用是同时存在的 ,但表现为初期以细胞凋亡为主要损害形式 。 展开更多
关键词 富马毒素B1 小鼠肝细胞 端粒酶活性 细胞凋亡
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放射性^(32)P掺入小鼠肝细胞内的动力学研究
12
作者 刘友平 丁慧荣 +1 位作者 李洪 何涛 《泸州医学院学报》 2005年第5期388-390,共3页
目的:寻求放射性同位素^(32)P掺入到小鼠肝细胞内达到磷平衡的时间点。方法:采用^(32)P掺入标记小鼠肝细胞磷蛋白不同时间点,SDS-PAGE对不同掺入标记时间的全细胞蛋白进行分离,放射自显影后进行半定量分析,获得^(32)P掺入标记的时间动... 目的:寻求放射性同位素^(32)P掺入到小鼠肝细胞内达到磷平衡的时间点。方法:采用^(32)P掺入标记小鼠肝细胞磷蛋白不同时间点,SDS-PAGE对不同掺入标记时间的全细胞蛋白进行分离,放射自显影后进行半定量分析,获得^(32)P掺入标记的时间动力学曲线。结果:^(32)P掺入标记培养小鼠肝细胞磷蛋白是一动态过程,直到8小时后达到平衡。结论:放射性^(32)P掺入到小鼠肝细胞内的磷平衡时间至少需8h,本实验为小鼠肝细胞放射性^(32)P掺入标记实验提供了准确的掺入平衡时间点。 展开更多
关键词 ^32P掺入标记法 肝细胞 动力学 磷蛋白 放射性同位素 小鼠肝细胞 ^32P 细胞内 动力学研究 掺入 SDS-PAGE 不同时间 平衡时间
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多房棘球蚴囊液对小鼠肝细胞凋亡与自噬影响的研究 被引量：3
13
作者 徐凯 尹凤娇 +6 位作者 张耀刚 吴传玲 李文登 任利 樊海宁 王海久 王志鑫 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2022年第1期81-86,94,共7页
背景多房棘球蚴病是一种流行于北半球的人兽共患寄生虫病,由于不能形成完整的“囊壁”,其病灶中的囊液持续外渗,不断刺激宿主肝细胞,使肝细胞出现“丢失”的情况。目的初步探究多房棘球蚴囊液(hydatid cyst fluid,HCF)对小鼠肝AML-12细... 背景多房棘球蚴病是一种流行于北半球的人兽共患寄生虫病,由于不能形成完整的“囊壁”,其病灶中的囊液持续外渗,不断刺激宿主肝细胞,使肝细胞出现“丢失”的情况。目的初步探究多房棘球蚴囊液(hydatid cyst fluid,HCF)对小鼠肝AML-12细胞凋亡与自噬的影响。方法CCK-8法筛选合适的HCF浓度后,将小鼠AML-12细胞分为对照组、HCF 0.4 mg/mL组和HCF 0.8 mg/mL组。CCK-8法检测各组小鼠肝AML-12细胞活性(浓度选择);流式细胞术检测小鼠肝AML-12细胞凋亡情况;Western blot法检测DDIT4、Beclin-1、Caspase-3、PCNA、LC3等凋亡自噬相关蛋白的表达情况;单丹磺酰尸胺(monodansyl cadaverine,MDC)法检测细胞自噬的情况,透射电镜下观察HCF对小鼠肝AML-12细胞超微结构的影响。结果CCK-8结果显示24 h、48 h、72 h时0.8 mg/mL、1.6 mg/mL、3.2 mg/mL、6.4 mg/mL HCF组和48 h、72 h时0.4 mg/mL HCF组的AML-12细胞增殖抑制率均较对照组明显升高(P<0.01);流式细胞计数检测结果显示0.4 mg/mL、0.8 mg/mL HCF作用于细胞48 h后细胞凋亡率明显升高(P<0.01);MDC法结果显示0.4 mg/mL、0.8 mg/mL HCF作用于细胞48 h后出现大量高亮度类圆形团块,平均荧光强度明显升高(P<0.01);Western blot法检测结果显示,与对照组相比,0.4 mg/mL、0.8 mg/mL HCF组DDIT4、PCNA、Caspase-3、Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著升高(P<0.01);与0.4 mg/mL HCF组相比,0.8 mg/mL HCF组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。透射电镜下可见对照组细胞质未见明显肿胀,线粒体基质较均匀,嵴少量减少,自噬水平低;0.4 mg/mL HCF组线粒体损伤程度较低,轻微肿胀,嵴少量断裂,胞内可见较多自噬溶酶体;0.8 mg/mL HCF组细胞线粒体损伤程度高,线粒体膜破损、基质外溢,嵴缺失,胞内可见较大面积自噬溶酶体。结论HCF对体外培养的AML-12细胞的增殖有明显抑制作用,DDIT4表达增高,并促进AML-12细胞自噬的发生,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 多房棘球蚴 囊液 小鼠肝细胞 细胞凋亡 细胞自噬
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环丙沙星对小鼠肝细胞自噬研究 被引量：1
14
作者 周萍 樊静 +3 位作者 梁韡 袁小艳 廖黎 张舒 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期160-160,I0001-I0003,共4页
目的研究环丙沙星对小鼠肝细胞的自噬作用及基因表达。方法小鼠随机分为对照组和实验组,实验组小鼠给药环丙沙星1周,采用自噬溶酶体荧光探针检测小鼠肝细胞自噬溶酶体,利用全基因组表达谱基因芯片技术筛选差异基因。结果自噬溶酶体荧光... 目的研究环丙沙星对小鼠肝细胞的自噬作用及基因表达。方法小鼠随机分为对照组和实验组,实验组小鼠给药环丙沙星1周,采用自噬溶酶体荧光探针检测小鼠肝细胞自噬溶酶体,利用全基因组表达谱基因芯片技术筛选差异基因。结果自噬溶酶体荧光探针检测到实验组小鼠肝细胞荧光强度降低,全基因组表达谱芯片技术发现Akr1b7/Pfkfb3调节果糖及甘露糖代谢信号通路有统计学显著差异(P<0.05)。结论环丙沙星(13.5g/kg)抑制小鼠肝细胞自噬,Pfkfb3基因可能是环丙沙星给药后影响自噬以及糖代谢的靶点之一,并且可能是通过AMPK/m TORC1途径影响自噬。 展开更多
关键词 自噬 小鼠肝细胞 环丙沙星 基因芯片
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小鼠肝细胞核凋亡的超微结构观察 被引量：4
15
作者 吴旻 赵允 翟中和 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期21-26,共6页
用胡萝卜细胞胞浆制备的非细胞体系中 ,加入纯化的小鼠肝细胞核并以细胞色素 C诱导细胞核发生凋亡。在透射电子显微镜和扫描电子显微镜下都观察到凋亡的细胞核呈现典型的凋亡形态学特征 ,例如染色质的凝集及趋边化 ,细胞核表面形成空泡... 用胡萝卜细胞胞浆制备的非细胞体系中 ,加入纯化的小鼠肝细胞核并以细胞色素 C诱导细胞核发生凋亡。在透射电子显微镜和扫描电子显微镜下都观察到凋亡的细胞核呈现典型的凋亡形态学特征 ,例如染色质的凝集及趋边化 ,细胞核表面形成空泡化结构并有大量的凋亡小体结构出现。在此基础上对凋亡小体结构在形成及排出核外的过程进行了详细的观察和分析。 展开更多
关键词 细胞色素C 小鼠肝细胞核 非细胞体系 超微结构 透射电镜 扫描电镜 形态学 细胞凋亡
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葛根素调控miR-7抗小鼠肝细胞缺氧-复氧存活和细胞凋亡的作用机制 被引量：2
16
作者 张威 王帅 +1 位作者 王喜梅 张帆 《安徽医药》 CAS 2020年第9期1718-1724,I0003,共8页
目的探讨葛根素对缺氧-复氧(H-R)诱导小鼠肝细胞损伤的影响及其分子机制。方法将小鼠肝细胞采用随机数字表法分为对照组、H-R组、不同浓度(70μmol/L、140μmol/L、280μmol/L、560μmol/L)葛根素组、H-R+葛根素组、H-R+miR-7组、H-R+mi... 目的探讨葛根素对缺氧-复氧(H-R)诱导小鼠肝细胞损伤的影响及其分子机制。方法将小鼠肝细胞采用随机数字表法分为对照组、H-R组、不同浓度(70μmol/L、140μmol/L、280μmol/L、560μmol/L)葛根素组、H-R+葛根素组、H-R+miR-7组、H-R+miR-7阴性对照(miR-con)组、H-R+葛根素+anti-miR-7组、H-R+葛根素+anti-miR-7阴性对照(anti-miR-con)组、H-R+葛根素+佛波酯(PMA)组。实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-7水平,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、核因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达。结果葛根素预处理后,H-R小鼠肝细胞活性明显增强(P<0.05),Ki-67蛋白表达量、miR-7表达量显著增加(P<0.05)。与H-R组比较,280μmol/L葛根素预处理后,H-R小鼠肝细胞凋亡率[(14.72±1.20)%比(25.85±1.58)%]、Bax、NF-κB p65表达量降低,Bcl-2蛋白表达量增加(均P<0.05)。与H-R+miR-con组相比,过表达miR-7显著提高H-R小鼠肝细胞miR-7水平、细胞活性[(81.29±7.56)比(0.28±0.04)]、Ki-67、Bcl-2蛋白水平,降低细胞凋亡率[(15.65±1.56)%比(26.65±1.25)%]、Bax蛋白水平(均P<0.05)。干扰miR-7表达部分逆转葛根素对小鼠肝细胞H-R后细胞凋亡、Bax和NF-κB p65表达的抑制作用,以及部分逆转葛根素对小鼠肝细胞H-R后细胞活性、miR-7、Ki-67、Bcl-2表达的促进作用。结论葛根素显著促进H-R诱导的小鼠肝细胞增殖并抑制细胞凋亡,可能是通过调控miR-7表达,抑制NF-κB信号通路活性发挥作用。 展开更多
关键词 葛根素 再灌注损伤 细胞低氧 小鼠肝细胞 细胞凋亡 miR-7 核因子-κB
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亚砷酸钠对小鼠肝细胞AML12损伤的作用机制
17
作者 赵哲仪 王正蓉 +3 位作者 方兴艳 王甜 罗昭逊 谢婷婷 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第1期1-6,共6页
目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12损伤作用的机制。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,设置6个NaAsO_(2)浓度[0(对照)、10、15、20、25及30μmol/L]组,分别用相应浓度的NaAsO_(2)处理AML12细胞24 h;采用化学比色法和... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对小鼠肝细胞AML12损伤作用的机制。方法取对数生长期的小鼠正常肝细胞AML12,设置6个NaAsO_(2)浓度[0(对照)、10、15、20、25及30μmol/L]组,分别用相应浓度的NaAsO_(2)处理AML12细胞24 h;采用化学比色法和油红O染色法检测各组AML12细胞内丙二醛(MDA)和脂质含量水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法分别检测各组小鼠AML12细胞内法尼醇X受体(FXR)、小异二聚体伴侣(SHP)mRNA和FXR、SHP、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达。结果与对照组相比,10-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内MDA含量升高、但FXR和SHP mRNA及FXR蛋白相对表达量下降(P<0.05),2-33 pmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内脂滴含量增加(P<0.05),20-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内SHP蛋白相对表达量降低(P<0.05),25-30 μmol/L NaAsO_(2)组小鼠AML细胞内BAX蛋白相对表达量增高(P<0.05)。结论NaAsO_(2)可致小鼠肝细胞AML12损伤,其机制可能与FXR-SHP信号通路的失调有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 亚砷酸钠 小鼠肝细胞AML12 氧化应激 脂肪变性 法尼醇X受体 小异二聚体伴侣
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转化的小鼠肝细胞能表达TGFαmRNA
18
作者 臧洁 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期4-4,共1页
转化生长因子α(TGFα)可以由许多细胞、尤其是转化细胞产生。细胞转化能启动并维持TGFαmRNA的表达及其多肽产物的生成。TGFα与表皮生长因子(EGF)的受体结合,以自分泌的方式刺激细胞生长。曾有报道,EGF可诱导体外培养正常角化细胞的TG... 转化生长因子α(TGFα)可以由许多细胞、尤其是转化细胞产生。细胞转化能启动并维持TGFαmRNA的表达及其多肽产物的生成。TGFα与表皮生长因子(EGF)的受体结合,以自分泌的方式刺激细胞生长。曾有报道,EGF可诱导体外培养正常角化细胞的TGFαmRNA聚集,雌激素对大鼠乳癌细胞也有此种作用。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞 TGFαmRNA 转化生长因子 细胞转化 细胞生长 乳癌细胞 大鼠 体外培养 受体结合 表皮生长因子
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表达白细胞介素-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用
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作者 刘勇 胡大荣 +4 位作者 谭晓华 范公忍 胡学玲 韩聚强 吴忆贫 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第2期147-150,共4页
目的:探讨瘤内注射mIL-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法:构建真核表达质粒载体pDC511mIL-12,ELISA方法检测质粒载体在真核细胞中的表达,淋巴母细胞增殖法检测mIL-12的生物学活性;分别于小鼠肝癌H22皮下移植瘤内直接注射质粒D... 目的:探讨瘤内注射mIL-12质粒DNA抗小鼠肝癌皮下移植瘤的作用。方法:构建真核表达质粒载体pDC511mIL-12,ELISA方法检测质粒载体在真核细胞中的表达,淋巴母细胞增殖法检测mIL-12的生物学活性;分别于小鼠肝癌H22皮下移植瘤内直接注射质粒DNA,观察各组小鼠存活时间、肿瘤体积变化及各组小鼠脾脏细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活性。注射质粒DNA后1月进行瘤体组织病理学观察。结果:mIL-12基因治疗组与空载体对照组相比,肿瘤生长显著受抑制(F=4.10,P=0.03),小鼠存活期显著延长(X2=4.48,P=0.03),并且小鼠脾细胞CTL杀伤活性增强。质粒DNA瘤内注射1月后,pDC511mIL-12组肿瘤病灶炎性细胞浸润明显,病灶内肿瘤细胞广泛坏死。结论:瘤内注射mIL-12表达质粒DNA可抑制小鼠肝癌皮下移植瘤生长,能提高机体抗肿瘤免疫应答。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞癌 小鼠白细胞介素-12 免疫基因治疗 疾病模型
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Diethylnitrosamine诱导的小鼠肝细胞癌中存在SP细胞
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作者 张朵 朱海英 +2 位作者 谢东甫 王新民 胡以平 《福州总医院学报》 2008年第1期34-35,29,共3页
荧光染料Hoezhst33342可以与DNA结合，—直以来在细胞周期研究中得到广泛应用。1996年，GoDdeu等首次用Hoeehst33342染色的方法，从全骨髓细胞中分离出一小部分不着色的细胞，这类细胞具有很强的排除染料的功能。移植到经致死剂量处理... 荧光染料Hoezhst33342可以与DNA结合，—直以来在细胞周期研究中得到广泛应用。1996年，GoDdeu等首次用Hoeehst33342染色的方法，从全骨髓细胞中分离出一小部分不着色的细胞，这类细胞具有很强的排除染料的功能。移植到经致死剂量处理的小鼠体内能够重建造血系统。这引起了人们的广泛兴趣。后来Kim M等通过进一步的深入研究将这种可以排出Hoezhst3334的能力称为SP（side population）表型，将具有这种表型的细胞称为SP细胞。根据SP细胞在不同种类干细胞中广泛存在并具有表型上的保守性，人们开始推测“SP表型”有可能作为潜在的新的干细胞标志，并决定着其功能方面的特性。 展开更多
关键词 P细胞 小鼠肝细胞癌 荧光染料 DNA结合 P表型 细胞周期 骨髓细胞 造血系统
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