为研究不同类型愈伤组织的叶绿体活性氧(ROS)代谢相关基因表达,探讨尾叶桉再生型愈伤组织转绿和不定芽分化之间的关系,将9 d苗龄的尾叶桉(Eucalyptus urophylla S. T. Blake)幼苗下胚轴接种在添加N-苯基-N-噻唑基脲、6-苄氨基腺嘌呤、吲...为研究不同类型愈伤组织的叶绿体活性氧(ROS)代谢相关基因表达,探讨尾叶桉再生型愈伤组织转绿和不定芽分化之间的关系,将9 d苗龄的尾叶桉(Eucalyptus urophylla S. T. Blake)幼苗下胚轴接种在添加N-苯基-N-噻唑基脲、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸的标准平板计数琼脂培养基(SPCA)中,外植体先膨大形成白色愈伤组织,8周后分化形成不同类型的愈伤组织(绿色带芽点愈伤组织、绿色愈伤组织、红色愈伤组织、白色愈伤组织)。4种愈伤组织中叶绿素质量分数分别为0.24、0.18、0.07、0.03 mg/g。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)检测叶绿体rbcL基因和6个ROS代谢相关基因(TDP1、SOD2、DAR1、TRM4、TRF2、WTR1)的表达。qPCR检测到8周前的白色愈伤组织中4个叶绿体基因rbcL、TDP1、SOD2和DAR1的转录。其中,rbcL、TDP1、SOD2的转录水平随愈伤组织块的膨大不断升高,DAR1基因转录水平则较低。8周后,叶绿体rbcL基因和6个活性氧代谢相关基因均在绿色带芽点愈伤组织、绿色愈伤组织、红色愈伤组织中转录。设定红色愈伤组织中对应基因的表达量为1,绿色愈伤组织中,上述7个叶绿体基因(rbcL、TDP1、SOD2、DAR1、TRM4、TRF2、WTR1)相对表达量分别为8.84、3.36、2.89、2.65、2.53、1.28和7.49,绿色带芽点愈伤组织中7个基因的相对表达量分别为19.57、3.72、4.59、3.53、4.73、3.08和4.12。结果表明,愈伤组织转绿和不定芽分化过程中,叶绿体发育开始启动、叶绿素大量合成、rbcL转录显著增强,叶绿体中与活性氧代谢相关基因的表达水平升高。展开更多
文摘为研究不同类型愈伤组织的叶绿体活性氧(ROS)代谢相关基因表达,探讨尾叶桉再生型愈伤组织转绿和不定芽分化之间的关系,将9 d苗龄的尾叶桉(Eucalyptus urophylla S. T. Blake)幼苗下胚轴接种在添加N-苯基-N-噻唑基脲、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚-3-乙酸的标准平板计数琼脂培养基(SPCA)中,外植体先膨大形成白色愈伤组织,8周后分化形成不同类型的愈伤组织(绿色带芽点愈伤组织、绿色愈伤组织、红色愈伤组织、白色愈伤组织)。4种愈伤组织中叶绿素质量分数分别为0.24、0.18、0.07、0.03 mg/g。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)检测叶绿体rbcL基因和6个ROS代谢相关基因(TDP1、SOD2、DAR1、TRM4、TRF2、WTR1)的表达。qPCR检测到8周前的白色愈伤组织中4个叶绿体基因rbcL、TDP1、SOD2和DAR1的转录。其中,rbcL、TDP1、SOD2的转录水平随愈伤组织块的膨大不断升高,DAR1基因转录水平则较低。8周后,叶绿体rbcL基因和6个活性氧代谢相关基因均在绿色带芽点愈伤组织、绿色愈伤组织、红色愈伤组织中转录。设定红色愈伤组织中对应基因的表达量为1,绿色愈伤组织中,上述7个叶绿体基因(rbcL、TDP1、SOD2、DAR1、TRM4、TRF2、WTR1)相对表达量分别为8.84、3.36、2.89、2.65、2.53、1.28和7.49,绿色带芽点愈伤组织中7个基因的相对表达量分别为19.57、3.72、4.59、3.53、4.73、3.08和4.12。结果表明,愈伤组织转绿和不定芽分化过程中,叶绿体发育开始启动、叶绿素大量合成、rbcL转录显著增强,叶绿体中与活性氧代谢相关基因的表达水平升高。
