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尾型同源盒基因-2过表达对结肠癌细胞生物学性状的影响 被引量:4
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作者 李守帅 孙学军 +1 位作者 郑见宝 任海亮 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期114-118,127,共6页
目的观察尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞生物学性状的影响,探讨CDX2基因在结肠癌发生发展中的作用。方法克隆人结肠CDX2基因,构建含CDX2的pEGFP-C1-CDX2表达载体,同时设pEGFP-C1空载体组及空白对照组。利用脂质体法将pEGFP-C1-CDX2... 目的观察尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞生物学性状的影响,探讨CDX2基因在结肠癌发生发展中的作用。方法克隆人结肠CDX2基因,构建含CDX2的pEGFP-C1-CDX2表达载体,同时设pEGFP-C1空载体组及空白对照组。利用脂质体法将pEGFP-C1-CDX2和pEGFP-C1质粒分别转染Lovo细胞,应用Western blotting技术检测Lovo细胞中CDX2基因的表达;应用MTT法及流式细胞仪检测CDX2对Lovo细胞增殖、凋亡及周期的影响;应用ELISA法检测CDX2过表达对Lovo细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响。结果成功构建含CDX2真核表达载体。瞬时转染pEGFP-C1-CDX2的Lovo细胞48 h有较高水平的CDX2蛋白的表达;与pEGFP-C1空载体组及空白对照组比较,转染pEGFP-C1-CDX2组的Lovo细胞在转染72 h时生长未见明显抑制,G1期及S期所占比例无明显改变,凋亡率亦无明显增加(P均>0.05),但MMP-2分泌明显减少(P<0.05)。结论 CDX2过表达对Lovo细胞增殖、凋亡及周期无明显影响,但能够明显减弱Lovo细胞的侵袭力,从而对结肠癌浸润转移起抑制作用。 展开更多
关键词 尾型同源盒基因-2 结直肠癌 增殖 凋亡 周期 基质金属蛋白酶-2
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下调尾型同源盒基因-2对结肠癌细胞的侵袭及迁移能力的影响及其机制 被引量:3
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作者 郑见宝 祁杰 +6 位作者 王训凯 李孝彬 王孝珑 陈南征 余钧辉 韩阳 孙学军 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期492-496,共5页
目的观察下调尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探讨CDX2基因在结肠癌发生发展过程中的作用及机制。方法构建CDX2RNAi慢病毒载体,并转染人结肠癌SW480、HT29细胞,应用Western blotting及qRT-PCR技术检测CDX... 目的观察下调尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探讨CDX2基因在结肠癌发生发展过程中的作用及机制。方法构建CDX2RNAi慢病毒载体,并转染人结肠癌SW480、HT29细胞,应用Western blotting及qRT-PCR技术检测CDX2基因的干扰效率;应用Transwell及划痕实验检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞侵袭、迁移能力的影响;Western blotting及RT-PCR检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因(E-cadherin、ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail)表达的影响。结果构建的CDX2RNAi慢病毒载体可有效地抑制SW480、HT29细胞中CDX2基因的表达;转染LV-CDX2-shRNA组与转染空病毒组(LV-NT-shRNA)及空白对照组相比,侵袭、迁移能力显著增强(P<0.05);且E-cadherin表达下降,ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail表达均升高。结论下调CDX2可诱导EMT发生,从而增强结肠癌细胞的侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 尾型同源盒基因-2(CDX2) 结肠癌 侵袭 迁移 上皮-间质转化(EMT)
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携带人尾型同源盒基因-2基因慢病毒表达载体的构建及鉴定
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作者 谭刚 王家瑞 《湖北民族学院学报(医学版)》 2013年第2期13-16,共4页
目的构建尾型同源盒基因-2(CDX2)基因的慢病毒表达载体并进行鉴定。方法 PCR扩增CDX2基因片段后,将其克隆入慢病毒表达载体pWPI,通过PCR、酶切和测序鉴定重组质粒。重组质粒转染包装细胞293T后获得包装的病毒颗粒。病毒颗粒感染直肠癌细... 目的构建尾型同源盒基因-2(CDX2)基因的慢病毒表达载体并进行鉴定。方法 PCR扩增CDX2基因片段后,将其克隆入慢病毒表达载体pWPI,通过PCR、酶切和测序鉴定重组质粒。重组质粒转染包装细胞293T后获得包装的病毒颗粒。病毒颗粒感染直肠癌细胞XB1847,经PCR和Western Blot证明重组慢病毒携带的CDX2在XB1847细胞内表达的情况。结果经PCR扩增、酶切及测序验证,重组质粒构建成功,命名为pWPI-CDX2。PCR和Western Blot证明重组慢病毒感染XB1847细胞后CDX2能稳定表达。结论成功构建了携带CDX2的慢病毒载体,为研究CDX2在直肠癌中的功能提供了实验基础。 展开更多
关键词 尾型同源盒基因-2 慢病毒表达载体 直肠癌
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尾型同源盒基因2沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP多药耐药性的逆转 被引量:5
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作者 罗文 杨杰 +3 位作者 廉超 王晓通 谢玉波 肖强 《中华消化外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期55-61,共7页
目的探讨尾型同源盒基因2(Cdx2)沉默对逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP多药耐药性的影响。方法将对数生长期的人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP接种于培养板中,分为3组:感染RNA干扰Cdx2基因沉默重组慢病毒载体(pLL—Cdx2-shRNA)作... 目的探讨尾型同源盒基因2(Cdx2)沉默对逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP多药耐药性的影响。方法将对数生长期的人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP接种于培养板中,分为3组:感染RNA干扰Cdx2基因沉默重组慢病毒载体(pLL—Cdx2-shRNA)作为实验组;感染慢病毒空载体作为阴性对照组;空白对照组不做任何处理。Westernblot及RT—PCR检测Cdx2及凋亡相关基因C—myc、cyclinD1、survivin等蛋白及mRNA表达水平;MTT法检测3组细胞对化疗药物阿霉素、5.氟尿嘧啶、顺铂的敏感性;流式细胞技术检测3组细胞阿霉素的泵出率、细胞周期分布及细胞凋亡情况。计量资料用面±s表示,多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用SNK—q检验,计数资料采用,检验。结果实验组、阴性对照组、空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP中各蛋白相对表达量:Cdx2分别为0.187±0.060、0.535±0.033、0.567±0.014,C—myc分别为0.086±0.004、0.379±0.006、0.354±0.004,cyclin D1分别为0.016±±0.005、0.141±0.003、0.162±0.008,survivin分别为0.276±0.012、0.672±0.009、0.517±0.313,与阴性对照组和空白对照组比较,实验组上述蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(F=247.385,3.353,597.882,98.628,P〈0.05)。实验组、阴性对照组、空白对照组mRNA相对表达量:cdx2分别为0.184±0.010、0.894±0.056、0.837±0.049,c—myc分别为0.212±0.022、0.538±0.021、0.545±0.032,cyclinD1分别为0.045±0.009、0.163±0.009、0.157±0.010,survivin分另4为0.401±0.027、0.824±0.016、0.782±0.056,与阴性对照组和空白对照组比较,实验组上述基因mRNA表达量明显下降,差异有统计学意义(F=243.776,161.793,138.523,118.426,P〈0.05)。MTT法检测实验组、阴性对照组和空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP阿霉素Ic50值分别为(0.12±0.05)mg/L、(0.33±0.08)mg/L、(0.39±0.15)mg/L,5-氟尿嘧啶Ic50值分别为(0.52±0.13)mg/L、(4.10±1.25)mg/L、(4.05±1.44)mg/L,顺铂Ic50值分别为(0.82±0.13)mg/L、(2.81±0.50)mg/L、(3.28±1.03)mg/L。实验组、阴性对照组、空白对照组中人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP对阿霉素泵出率分别为0.21%、0.37%和0.35%。与阴性对照组和空白对照组比较,实验组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP对阿霉素、5一氟尿嘧啶和顺铂的Ic。值及对阿霉素的泵出率显著降低,差异均有统计学意义(F=8.101,13.854,15.159,X2=7.106,P〈0.05)。实验组、阴性对照组与空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDPG0/G1期细胞比例分别为17.87%、34.71%、37.20%,与阴性对照组和空白对照组比较,实验组G0/G1期细胞减少,差异有统计学意义(X^2=1.055,P〈0.05);实验组G1/M期的细胞比例为11.93%,细胞凋亡率为31.13%,均明显高于阴性对照组的0.26%、16.58%和空白对照组的0.35%、13.18%,差异有统计学意K(X^2=2.249,11.030,P〈0.05)。结论Cdx2基因沉默可有效提高人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP对化疗药物的敏感性,增加化疗药物在胃癌细胞内的蓄积浓度,逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901/DDP的耐药性。 展开更多
关键词 胃肿瘤 尾型同源盒基因-2 胃癌耐顺铂SGC7901细胞 多药耐药性
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MCM7和CDX2蛋白在Ⅱ期结直肠癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 张新星 于瑞莲 +1 位作者 代小松 谢沁 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第3期495-501,共7页
目的:探讨微型染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance proteins 7,MCM7)和尾型同源盒基因-2蛋白(caudal-related homeobox gene 2,CDX2)在Ⅱ期结直肠癌组织中的表达水平及其与预后相关的临床意义.方法:采用免疫组织化学法检测220... 目的:探讨微型染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance proteins 7,MCM7)和尾型同源盒基因-2蛋白(caudal-related homeobox gene 2,CDX2)在Ⅱ期结直肠癌组织中的表达水平及其与预后相关的临床意义.方法:采用免疫组织化学法检测220例Ⅱ期结直肠癌患者癌组织与癌旁组织中MCM7和CDX2蛋白的表达水平;分析MCM7和CDX2蛋白的表达与Ⅱ期结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系.结果:MCM7蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为62%,显著高于癌旁正常组织(12%,P<0.001).CDX2蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率76%,显著低于癌旁正常组织(98%,P<0.01).M C M7和C D X2蛋白的表达与Ⅱ期结直肠癌患者的性别、年龄和浸润深度均无关(P>0.05),MCM7的表达仅与肿瘤的分化程度呈正相关(P<0.01),CDX2蛋白的表达仅与肿瘤的分化程度呈负相关(P<0.01).在结直肠癌组织中,MCM7和CDX2蛋白的表达呈负相关(r=-0.773,P<0.05).生存分析的结果显示,220例Ⅱ期结直肠癌患者的中位无病生存时间为51 mo.MCM7阳性/CDX2阴性患者的预后最差,而MCM7阴性/CDX2阳性患者的预后最好.结论:MCM7和CDX2蛋白表达水平的联合检测对预测Ⅱ期结直肠癌患者的预后具有重要的临床意义,但是否可作为判断结直肠癌患者预后的标志物仍需进一步研究. 展开更多
关键词 Ⅱ期结直肠癌 染色体维持蛋白7 尾型同源盒基因-2蛋白 预后
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直肠癌组织CDX2蛋白表达及其临床意义 被引量:2
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作者 叶绍兵 王家瑞 +1 位作者 黎军 张锋 《广西医学》 CAS 2013年第7期882-885,共4页
目的探讨直肠癌患者尾型同源盒基因-2(CDX2)蛋白的表达情况及临床意义。方法采用Western Blot检测50例直肠癌组织及癌旁组织CDX2蛋白的表达,以20例健康人的正常直肠组织作为对照组。结果 CDX2蛋白在癌组织中表达量低于癌旁组织(P<0.0... 目的探讨直肠癌患者尾型同源盒基因-2(CDX2)蛋白的表达情况及临床意义。方法采用Western Blot检测50例直肠癌组织及癌旁组织CDX2蛋白的表达,以20例健康人的正常直肠组织作为对照组。结果 CDX2蛋白在癌组织中表达量低于癌旁组织(P<0.05);CDX2蛋白在癌旁组织中表达量低于对照组(P<0.05);CDX2蛋白在直肠癌组织中的表达量与Dukes分期、组织分化、淋巴结转移和3年生存率有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤的部位及病理组织学分类无明显关系(P>0.05)。结论 CDX2蛋白的表达情况可作为评估直肠癌肿瘤恶性程度、临床分期及侵袭转移的参考指标;检测CDX2蛋白表达有助于判断直肠癌患者预后。 展开更多
关键词 直肠癌 尾型同源盒基因-2蛋白 预后
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CDX2基因与白血病关系的研究进展 被引量:3
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作者 李迎侠(综述) 潘凯丽(审校) 钱新宏(审校) 《国际儿科学杂志》 2011年第1期85-88,共4页
尾型同源盒基因(CDX)家族成员CDX2基因是促进胚胎发育和参与造血调控的主控基因.新近研究发现,CDX2在各型白血病中异常表达,是与白血病发生、发展和颅后相关的新的致白血病基因,可望成为白血病微小残留病检测的泛基因标志.CDX2通过调... 尾型同源盒基因(CDX)家族成员CDX2基因是促进胚胎发育和参与造血调控的主控基因.新近研究发现,CDX2在各型白血病中异常表达,是与白血病发生、发展和颅后相关的新的致白血病基因,可望成为白血病微小残留病检测的泛基因标志.CDX2通过调节HOX基因参与白血病转化,进一步探讨CDX2的致白血病机制及其与白血病的关系,对预测白血病复发及个体化、靶向治疗意义重大. 展开更多
关键词 尾型同源盒基因-2 白血病 同源基因 微小残留病
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