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尿石素B对骨髓来源巨噬细胞向破骨细胞分化的调控机制
1
作者 罗晰 陈建权 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第11期2201-2209,共9页
背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助... 背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助于探索新的治疗靶点,筛选研发更安全、有效的治疗药物,为阻断破骨细胞过度活化提供新思路。目的:利用骨髓来源的巨噬细胞建立体外破骨细胞分化模型,探究尿石素B对核因子κB受体活化因子配体介导破骨细胞分化的影响,并系统性分析其作用机制。方法:(1)采用CCK-8法筛选尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的安全工作浓度;(2)用不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数目及面积大小;(3)不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的破骨分化,通过实时荧光定量PCR检测破骨特异性基因的相对表达水平;(4)蛋白印迹实验观察尿石素B对骨髓来源巨噬细胞P65、ERK信号通路的影响;(5)蛋白印迹实验检测尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的破骨分化关键转录因子活化T细胞核因子1和c-Fos的影响。结果与结论:(1)50μmol/L及以下浓度的尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的增殖无影响,能显著抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(2)尿石素B主要在破骨形成前中期抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(3)尿石素B可下调骨髓来源巨噬细胞中破骨特异性基因的相对表达水平;(4)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源巨噬细胞的P65和ERK磷酸化水平,进而抑制破骨细胞形成;(5)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源的巨噬细胞中破骨分化关键转录因子活化T细胞核因子1和c-Fos的表达;(6)提示尿石素B通过P65/ERK信号轴下调破骨关键转录因子活化T细胞核因子1、c-Fos的表达,抑制下游破骨特异性基因的表达,从而抑制骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化。 展开更多
关键词 尿石素b P65 ERK 活化T细胞核因子1 C-FOS 骨髓来源巨噬细胞 破骨细胞分化
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尿石素B对人神经胶质瘤U118 MG细胞生物学行为的影响及其机制
2
作者 刘翠兰 李建军 +4 位作者 姜贺 刘晶 王丹 李晨 赵娣 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期566-574,共9页
目的:观察尿石素B(UB)对人神经胶质瘤(GBM)的U118 MG细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养U118 MG细胞,将细胞分为对照组(0μmol·L^(-1)UB)和不同浓度(20、40、80、120、160和200μmol·L^(-1))U... 目的:观察尿石素B(UB)对人神经胶质瘤(GBM)的U118 MG细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养U118 MG细胞,将细胞分为对照组(0μmol·L^(-1)UB)和不同浓度(20、40、80、120、160和200μmol·L^(-1))UB组,培养24、48和72 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖率。将U118 MG细胞分为对照组(0μmol·L^(-1)UB)和不同浓度(40、80和120μmol·L^(-1))UB组,采用细胞克隆形成实验检测各组U118 MG细胞克隆形成率,划痕愈合实验检测各组U118 MG细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组U118 MG细胞侵袭百分率,流式细胞术检测各组U118 MG细胞凋亡率和不同细胞周期U228 MG细胞百分率,Western blotting法检测各组U118 MG细胞中波形蛋白(Vimentin)、上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果:CCK-8法检测,作用24、48和72 h后,与对照组比较,不同浓度UB组U118 MG细胞增殖率明显降低(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。细胞克隆形成实验,与对照组比较,40、80和120μmol·L^(-1)UB组U118 MG细胞克隆形成率降低(P<0.01),且呈浓度依赖性;划痕愈合实验,作用24和48 h后,与对照组比较,40、80和120μmol·L^(-1)UB组U118MG细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性;Transwell小室实验,与对照组比较,40、80和120μmol·L^(-1)UB组侵袭U118 MG细胞百分率明显降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性;流式细胞术,与对照组比较,80和120μmol·L^(-1)UB组U118 MG细胞凋亡率升高(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性,G2/M期细胞百分率升高(P<0.05或P<0.01);Western blotting法检测,与对照组比较,不同浓度UB组U118 MG细胞中Vimentin和Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),E-cadherin和Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论:UB能够抑制人GBM的U118 MG细胞增殖、迁移和侵袭,抑制U118 MG细胞中Bcl-2蛋白表达并上调Bax蛋白表达,诱导细胞凋亡,并引起细胞周期G2/M期阻滞。 展开更多
关键词 尿石素b 神经胶质瘤 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 细胞凋亡
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尿石素B对地塞米松诱导小鼠肌萎缩的改善作用及机制 被引量：3
3
作者 王丛丛 李军 +2 位作者 鲁飞翔 吕裕霞 刘庆春 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期1963-1966,共4页
目的探讨尿石素B对地塞米松诱导的小鼠肌萎缩的改善作用及机制。方法将32只昆明鼠随机分为:正常组,正常给药组,模型组,模型给药组。每周1次采集相关数据,包括小鼠体成分、抓力;用HE染色法对小鼠腓肠肌肌纤维的石蜡切片进行染色,并计算... 目的探讨尿石素B对地塞米松诱导的小鼠肌萎缩的改善作用及机制。方法将32只昆明鼠随机分为:正常组,正常给药组,模型组,模型给药组。每周1次采集相关数据,包括小鼠体成分、抓力;用HE染色法对小鼠腓肠肌肌纤维的石蜡切片进行染色,并计算横截面面积;用RT-PCR分析与肌蛋白密切相关的泛素蛋白酶通路中的基因Myogenin、MyoD、MuRF-1及Atrogin-1mRNA表达水平的变化。结果与正常组比较,正常给药组小鼠体重、瘦体重、抓力及肌纤维横截面积稍下降,但差异无统计学意义(P>0.05),模型组体重、瘦体重含量、抓力及肌纤维横截面面积均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),而模型给药组各指标均较模型组有所提升,但差异无统计学意义(P>0.05),但仍明显低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组Myogenin、MyoD mRNA表达水平分别是正常组的0.24、0.35倍,模型给药组则是正常组的0.87、0.60倍,各组间差异有统计学意义(P<0.05);MuRF-1、Atrogin mRNA表达水平在模型组与模型给药组较正常组均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),模型组表达水平是正常组的17.66、11.01倍,模型给药组分别是4.23、4.05倍,较模型组有所下降,但仍高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论尿石素B能够有效改善地塞米松诱导的肌萎缩,对肌少症有潜在的治疗意义。 展开更多
关键词 尿石素b 地塞米松 骨骼肌萎缩 泛素化
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尿石素B对胶质母细胞瘤U251细胞生物学行为的影响
4
作者 刘翠兰 赵娣 +3 位作者 代娟娟 王丹 李晨 刘松 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第2期187-192,共6页
目的检测尿石素B(UB)对胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及细胞周期的影响和机制。方法用不同剂量的UB处理胶质母细胞瘤U251细胞,运用CCK-8方法、克隆形成、划痕愈合、Transwell侵袭实验检测UB对U251细胞增殖、迁移、侵袭的影响... 目的检测尿石素B(UB)对胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及细胞周期的影响和机制。方法用不同剂量的UB处理胶质母细胞瘤U251细胞,运用CCK-8方法、克隆形成、划痕愈合、Transwell侵袭实验检测UB对U251细胞增殖、迁移、侵袭的影响;用流式细胞术检测UB对细胞周期和凋亡的调控作用;运用Western blot方法检测UB对下游信号通路蛋白ERK、AKT、p38、JNK磷酸化水平的影响。结果与对照组相比,24 h和48 h时,UB可降低U251细胞的吸光度值(P<0.01),且呈浓度依赖性;UB可减低细胞克隆形成百分比(P<0.01);UB能降低划痕愈合百分比(P<0.05或P<0.01);UB能降低侵袭细胞数量百分比(P<0.01);UB能显著诱导细胞凋亡(P<0.01),并使细胞周期阻滞于G_(2)/M期(P<0.01);UB能显著提高ERK的磷酸化水平(P<0.05或P<0.01),并抑制AKT的磷酸化水平(P<0.05或P<0.01)。结论UB能抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期,并调控ERK和AKT的磷酸化水平。 展开更多
关键词 尿石素b U251细胞 增殖 迁移 侵袭 细胞凋亡 细胞周期
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尿石素B衍生物合成及抗膀胱癌T24细胞增殖活性
5
作者 田弥 周本宏 +1 位作者 兰昱 卢笛笙 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期1066-1070,共5页
目的:利用拼合原理合成一系列尿石素B衍生物并探究其对人膀胱癌T24细胞的抗增殖活性。方法:通过烷基化反应,以尿石素B为母核,环状胺基结构(吡咯烷、N-甲基哌嗪、4-甲基哌啶、吗啡啉)为末端,1,3-二溴丙烷作为连接两者的柔性碳链,合成一... 目的:利用拼合原理合成一系列尿石素B衍生物并探究其对人膀胱癌T24细胞的抗增殖活性。方法:通过烷基化反应,以尿石素B为母核,环状胺基结构(吡咯烷、N-甲基哌嗪、4-甲基哌啶、吗啡啉)为末端,1,3-二溴丙烷作为连接两者的柔性碳链,合成一系列尿石素B衍生物。同时利用CCK-8实验测定尿石素B衍生物和阳性药5-氟尿嘧啶对人膀胱癌T24细胞的抗增殖活性。结果:成功合成了4种尿石素B衍生物;在CCK-8实验中,UB1和UB2作用不同时间的IC50都大于150μmol·L^(-1),对T24细胞增殖抑制作用较小;UB3与5-氟尿嘧啶抑制T24细胞增殖的活性相当,而UB4的抑制作用更加显著,在给药24,36,48 h后测得IC50分别达到了16.95,15.51,6.34μmol·L^(-1)。结论:4种衍生物中UB3和UB4均可不同程度抑制膀胱癌T24细胞增殖,而UB4抑制T24细胞增殖活性最强。该研究为尿石素B衍生物开发成抗癌活性高、溶解性好、成药性强、结构新颖的有效药物提供了科学依据。 展开更多
关键词 尿石素b衍生物 合成 膀胱癌T24细胞 细胞增殖
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