猪传染性胃肠炎病毒S截短蛋白在干酪乳杆菌表面展示表达的研究

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作者 田斌 余丽芸 +6 位作者 侯喜林 王桂华 刘振格 郭东伟 刘秋晨 齐浩 林红丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期874-877,共4页

为构建细菌外膜展示表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S截短蛋白的重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),本研究采用RT-PCR扩增TGEV S基因的截短片段BC和AD,构建了重组pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei,利用western blot、间接免疫荧光法(IFA... 为构建细菌外膜展示表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S截短蛋白的重组干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),本研究采用RT-PCR扩增TGEV S基因的截短片段BC和AD,构建了重组pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei,利用western blot、间接免疫荧光法(IFA)和流式细胞术(FACS)检测外源蛋白在干酪乳杆菌的表面表达与定位。IFA和FACS结果显示重组菌株pLA-BC/L.casei和pLA-AD/L.casei表面均能够检测到截短的S和PgsA融合表达蛋白与TGEV阳性血清的特异性荧光信号,而对照菌没有检测到荧光信号。表明本研究构建的的TGEV重组L.casei具有胞外展示表达TGEV抗原蛋白的功能,可以作为TGEV候选疫苗应用于动物试验研究。 展开更多

关键词 猪传染性胃肠炎病毒 重组干酪乳杆菌 表面展示表达

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乳酸乳球菌表面展示表达系统的构建及其鉴定 被引量：2

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作者 谷贵章 宋达峰 顾青 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第6期17-21,共5页

目的：旨在构建一个将抗原靶向于乳酸乳球菌细胞表面的表达系统。方法：运用PCR技术从金黄色葡萄球菌基因组中克隆出蛋白A（SPA）C-末端544个碱基对的锚定域序列（Spax）。通过酶切、连接将Spax构建入分泌型质粒pAMJ399形成携有整合外... 目的：旨在构建一个将抗原靶向于乳酸乳球菌细胞表面的表达系统。方法：运用PCR技术从金黄色葡萄球菌基因组中克隆出蛋白A（SPA）C-末端544个碱基对的锚定域序列（Spax）。通过酶切、连接将Spax构建入分泌型质粒pAMJ399形成携有整合外源基因位点BglⅡ的pAMJ400质粒。将报告蛋白一绿色荧光蛋白的基因（Gfp）插入载体pAMJ400的整合位点产生模式质粒pAMJ401并电转化其于乳酸乳球菌MG1363。绘制转化子MGI363（pAMJ401）生长曲线确认诱导期。调节pH值（6．0-6．5）诱导转化子并在荧光显微镜下观察杂合蛋白（GFP：SPAX）的表达情况。结果：在395nm的蓝色激发光下，诱导后的细菌发出较明亮的绿色荧光，而未诱导的细菌几乎不产生荧光。结论：成功地构建了乳酸乳球菌表面展示表达系统，此系统可以作为口服活菌疫菌研究的可行性操作平台。 展开更多

关键词 乳酸乳球菌 表达系统 展示表达

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盐运文化在博物馆展示中的表达与演绎

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作者 袁晶晶 《中国民族博览》 2024年第6期247-249,共3页

盐运文化作为贵州省仁怀市的重要文化遗产之一,具有丰富的历史价值和文化内涵。然而,在博物馆展示中,如何有效地表达和演绎盐运文化,使观众能够深入了解和体验其中的精髓,是一个值得研究和探讨的问题。本论文旨在探讨盐运文化在贵州省... 盐运文化作为贵州省仁怀市的重要文化遗产之一,具有丰富的历史价值和文化内涵。然而,在博物馆展示中,如何有效地表达和演绎盐运文化,使观众能够深入了解和体验其中的精髓,是一个值得研究和探讨的问题。本论文旨在探讨盐运文化在贵州省仁怀市博物馆展示中的表达与演绎,分析传统与现代展示模式的优缺点,并提出合理优化方案,旨在提升盐运文化展示的艺术性、教育性和观赏性,满足观众的需求和期待。 展开更多

关键词 博物馆 盐运文化 表达展示

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酿酒酵母表面展示表达系统及应用 被引量：9

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作者 郭钦 张伟 +1 位作者 阮晖 何国庆 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期116-122,共7页

酵母细胞表面展示表达系统是一种固定化表达异源蛋白质的真核展示系统,即把异源靶蛋白基因序列与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞,利用酿酒酵母细胞内蛋白转运到膜表面的机制(GPI锚定)使靶蛋白定位于酵母细胞表面并进行表达。它... 酵母细胞表面展示表达系统是一种固定化表达异源蛋白质的真核展示系统,即把异源靶蛋白基因序列与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞,利用酿酒酵母细胞内蛋白转运到膜表面的机制(GPI锚定)使靶蛋白定位于酵母细胞表面并进行表达。它利用细胞表面展示技术使外源蛋白固定化于细胞表面,从而生产微生物细胞表面蛋白,可应用于生物催化剂、细胞吸附剂、活疫苗、环境治理、蛋白质文库筛选、高亲和抗体、生物传感器、抗原/抗体库构建、免疫检测及亲和纯化、癌症诊断等领域。主要介绍了该技术的基本原理、研究现状、应用及发展前景。 展开更多

关键词 酿酒酵母 细胞表面展示表达 凝集素 絮凝素

原文传递

酿酒酵母表面展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶学性质研究 被引量：2

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作者 郭钦 阮晖 +1 位作者 张伟 何国庆 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期26-31,共6页

固定化酶是酵母表面展示技术的1个重要应用方向。本文应用食品级酵母展示表达系统进行表达,成功获得具有生物活性且固定在酿酒酵母细胞表面的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,并测定其酶学性质。结果表明,与分泌表达的自由酶相比,展示表达的β-1,3-... 固定化酶是酵母表面展示技术的1个重要应用方向。本文应用食品级酵母展示表达系统进行表达,成功获得具有生物活性且固定在酿酒酵母细胞表面的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,并测定其酶学性质。结果表明,与分泌表达的自由酶相比,展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质发生了改变。其最适温度为60℃,热稳定性增强。50℃保温3 h,对酶活几乎没有影响。60℃保温1 h后的酶活为初始酶活的129.2%。随着该温度下保温时间的延长,酶活迅速下降,保温3h后的酶活为初始酶活的64.6%。70℃保温1 h,酶活增加到初始酶活的109.2%;1 h后酶活开始下降;70℃保温3 h后残留酶活仅为初始酶活的35.8%。展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶最适pH为6.0,在pH 4-7范围内酶的稳定性较好。 展开更多

关键词 展示表达 Β-1 3-1 4-葡聚糖酶 酶学性质 酿酒酵母

原文传递

微生物脂肪酶的重组表达 被引量：3

6

作者 阎金勇 闫云君 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期135-140,共6页

微生物脂肪酶在传统和新型工业催化领域中的应用越来越广泛与深入。作为脂肪酶规模化制备主要途径的高效重组表达,为脂肪酶催化剂的最终形成及工业催化奠定了坚实的技术基础。概述并讨论了微生物脂肪酶重组表达的最新策略和发展趋势,阐... 微生物脂肪酶在传统和新型工业催化领域中的应用越来越广泛与深入。作为脂肪酶规模化制备主要途径的高效重组表达,为脂肪酶催化剂的最终形成及工业催化奠定了坚实的技术基础。概述并讨论了微生物脂肪酶重组表达的最新策略和发展趋势,阐述密码子优化、融合共表达、杂合启动子、同源高效表达、细胞表面展示和表达文库的高通量筛选等技术特点及其表达应用现状,指出细胞表面展示表达和表达文库高通量筛选体系为脂肪酶重组表达注入强劲活力;在此基础上对几种代表性微生物脂肪酶的重组表达进展作一综述,为微生物脂肪酶的重组表达研究及工业生产提供借鉴。 展开更多

关键词 微生物脂肪 酶表达体系 展示表达 融合表达 高通量筛选

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表达PEDV-S1蛋白的重组枯草芽孢杆菌构建及鉴定 被引量：2

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作者 刘伟 刘卫贞 +2 位作者 窦速林 侯喜林 余丽芸 《黑龙江八一农垦大学学报》 2018年第2期61-65,共5页

猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起新生仔猪严重腹泻和死亡,给养猪业造成巨大经济损失。根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)调节动物胃肠道菌群平衡的功能和结构特征,选择其作为PEDV S1蛋白表达的宿主菌,构建重组基因工程枯草芽孢杆菌。... 猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起新生仔猪严重腹泻和死亡,给养猪业造成巨大经济损失。根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)调节动物胃肠道菌群平衡的功能和结构特征,选择其作为PEDV S1蛋白表达的宿主菌,构建重组基因工程枯草芽孢杆菌。实验将重组质粒p LA-PEDV-S1电转至枯草芽孢杆菌,提取枯草芽孢杆菌的重组质粒,采用PCR、Western blot和免疫荧光方法鉴定阳性质粒DNA。获得了重组pLA-PEDV-S1/B.Subtilis,S1蛋白成功展示表达在菌体表面,重组PEDV S1蛋白能够和猪源PEDV阳性血清结合,具有反应原性。该重组菌可能成为预防PEDV感染的口服疫苗候选菌株。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 猪流行性腹泻病毒 展示表达

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纤维化大鼠肝组织与物质代谢相关蛋白质动态变化及扶正化瘀方的调节作用 被引量：16

8

作者 刘莺 刘平 +4 位作者 胡义扬 徐列明 王磊 慕永平 都广礼 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期224-227,共4页

目的探讨扶正化瘀方干预治疗肝纤维化的作用。方法将Wistar大鼠随机分正常组、模型组、扶正化瘀方(简称中药)组。大鼠皮下注射40%CCl4-橄榄油溶液造模,正常组仅用生理盐水皮下注射,中药组用中药灌胃,取肝组织做病理、羟脯氨酸、蛋白质... 目的探讨扶正化瘀方干预治疗肝纤维化的作用。方法将Wistar大鼠随机分正常组、模型组、扶正化瘀方(简称中药)组。大鼠皮下注射40%CCl4-橄榄油溶液造模,正常组仅用生理盐水皮下注射,中药组用中药灌胃,取肝组织做病理、羟脯氨酸、蛋白质的分步提取。蛋白质定量后进行二维电泳,凝胶银染,运用PDQUEST2-DE图像分析软件对获得的蛋白质图谱进行分析,运用MALDI-TOF-MS鉴定了30多个差异表达的蛋白质。结果(1)模型组大鼠出现生命活动整体反应(如体重、活动度等)下降;(2)肝纤维化过程中存在物质代谢障碍;(3)蛋白质组改变质谱结果显示模型组和正常大鼠肝组织差异表达的蛋白质与物质代谢相关的蛋白质有:过氯酸可溶性蛋白质、磷脂酰肌醇转移蛋白酶、磷酸甘油酸激酶、内质网-60蛋白酶;(4)中药组大鼠肝组织中过氯酸可溶性蛋白质、磷脂酰肌醇转移蛋白酶、磷酸甘油酸激酶、内质网-60蛋白酶的表达趋近正常。结论在肝纤维化过程中伴有蛋白质合成与分解异常和糖酵解活动增强;中药调节物质代谢相关蛋白质的表达是抗肝纤维化的途径之一。 展开更多

关键词 肝纤维化 扶正化瘀方 蛋白质组 差异表达展示 物质代谢

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巧借绘画，探寻学生心理健康基本策略 被引量：1

9

作者 韦柳英 《小学教学参考》 2019年第27期94-95,共2页

小学生正处于直观性、形象性思维阶段,运用绘画型日记对于学生心理健康是一种极好的尝试。所谓心理绘画就是要尝试运用学生的图式来展现自己的内在心态,呈现学生对外界事物的客观认知。提出要强化交流,用心理绘画搭建情感交融桥梁;强化... 小学生正处于直观性、形象性思维阶段,运用绘画型日记对于学生心理健康是一种极好的尝试。所谓心理绘画就是要尝试运用学生的图式来展现自己的内在心态,呈现学生对外界事物的客观认知。提出要强化交流,用心理绘画搭建情感交融桥梁;强化表达,用心理绘画创设心声倾吐路径;交流分析,用心理绘画构筑话语交互平台;探寻开掘,用心理绘画捕捉健康良好资源;交流展示,用心理绘画创设成功体验通道。 展开更多

关键词 强化交流 展示表达 探寻开掘 交流分析

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自然的解读与实践——禄丰侏罗纪世界遗址馆

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作者 彭怡芬 徐若峰 《城市建筑》 2013年第2期230-230,共1页

通过介绍禄丰侏罗纪世界遗址馆的设计与施工过程,探讨各建筑设计对自然的理解与尊重以及与各学科之间合作与配合的意义。

关键词 理解与尊重 表达与展示 磨合与协调

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倾听,情境课堂的源头活水

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作者 桑琴 《小学教学参考（语文版）》 2018年第12期54-54,共1页

一个人学会了倾听,就能走进他人的心灵,心灵与心灵互动,就能漾起心海的涟漪,变得灵动而智慧。培养学生的倾听能力,要为学生树立起标志形象,要引导学生进行倾听的表达与展示。

关键词 情境课堂 倾听 标志形象 表达展示

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媒介技术迭代下的用户权利扩张——基于Web 1.0到Web 3.0演进历程中的观察分析 被引量：8

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作者 郭全中 袁柏林 《新闻与写作》 CSSCI 北大核心 2023年第2期77-85,共9页

用户权利包括信息获取权、表达展示权、经济权等。从Web 1.0到Web2.0,互联网技术平权的权利范围和程度进一步扩大,互联网平台化发展与生态化运营的技术平权程度变高,但互联网平台企业处于绝对优势地位制约了进一步的平权,亟需通过新一... 用户权利包括信息获取权、表达展示权、经济权等。从Web 1.0到Web2.0,互联网技术平权的权利范围和程度进一步扩大,互联网平台化发展与生态化运营的技术平权程度变高,但互联网平台企业处于绝对优势地位制约了进一步的平权,亟需通过新一代技术的发展来进一步扩张用户权利。基于区块链技术综合体的下一代互联网Web 3.0,把用户权利尤其是用户数据权和选择权归还给用户本人,建立起以用户为中心的新逻辑,真正实现用户深度参与的共建共享共治,用户从根本上获得了更多的信息获取权、自我表达展示权以及经济权。 展开更多

关键词 用户权利 技术平权 信息获取权 表达展示权 经济权 Web 3.0

原文传递