嵌合型抗原受体T细胞在恶性黑色素瘤中应用进展

1

作者 张立坤 岳武恒 邹征云 《中国麻风皮肤病杂志》 2024年第1期59-65,共7页

恶性黑素瘤细胞膜表达有多种生物标志物,可作为治疗靶点开发针对性的嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T),CAR-T目前对恶性黑素瘤中GD2、HER2、CD70、Gp100、NYESO-1等靶点已表现出良好的疗效。本文旨在梳理恶性黑素瘤CAR-T靶点及临床进展,分析... 恶性黑素瘤细胞膜表达有多种生物标志物,可作为治疗靶点开发针对性的嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T),CAR-T目前对恶性黑素瘤中GD2、HER2、CD70、Gp100、NYESO-1等靶点已表现出良好的疗效。本文旨在梳理恶性黑素瘤CAR-T靶点及临床进展,分析工程化T细胞的挑战与应对之策,以期CAR-T应用于恶性黑素瘤临床实践。 展开更多

关键词 恶性黑素瘤 嵌合型抗原受体T细胞 肿瘤免疫微环境

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嵌合型抗原受体T细胞疗法的研究进展

2

作者 刘立梅 高清平 王琼玉 《中国肿瘤》 CAS 2016年第6期453-458,共6页

嵌合型抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T cell)是通过基因修饰而表达肿瘤特异性的嵌合型抗原受体的T细胞,能重新识别特异的肿瘤相关性抗原(tumorassociated antigen,TAA),并对肿瘤细胞产生细胞毒性作用,发挥抗肿... 嵌合型抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T cell)是通过基因修饰而表达肿瘤特异性的嵌合型抗原受体的T细胞,能重新识别特异的肿瘤相关性抗原(tumorassociated antigen,TAA),并对肿瘤细胞产生细胞毒性作用,发挥抗肿瘤效应。许多临床研究已经证明该疗法的可行性及安全性,并已取得令人振奋的疗效。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体 过继性细胞免疫治疗 肿瘤相关性抗原 协同刺激

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嵌合型抗原受体T细胞治疗技术在B细胞肿瘤中的研究进展：第56届美国血液学会年会报道 被引量：3

3

作者 邓碧萍 刘红星 童春容 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2015年第2期71-73,78,共4页

嵌合型抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor Tcell，CAR—T）在B细胞肿瘤临床试验中已经显示了良好的前景，但是CAR—T的设计、肿瘤抗原的选择、T细胞的来源、CAR-T的临床应用策略等还有待进一步开发完善。CAR—T免疫细胞治疗技术... 嵌合型抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor Tcell，CAR—T）在B细胞肿瘤临床试验中已经显示了良好的前景，但是CAR—T的设计、肿瘤抗原的选择、T细胞的来源、CAR-T的临床应用策略等还有待进一步开发完善。CAR—T免疫细胞治疗技术是2014年第56届美国血液学会（ASH）年会的热点话题之一，其基础研究及临床试验均有突破性进展。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体T细胞 CD19 B细胞肿瘤 美国血液学会年会

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嵌合型抗原受体基因修饰T细胞治疗技术在儿童白血病的临床应用 被引量：2

4

作者 陈晓娟 竺晓凡 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2016年第4期274-277,共4页

生物技术的发展,催生了新一代以嵌合型抗原受体T(CART)细胞为代表的细胞治疗技术。CART细胞治疗难治、复发性儿童白血病取得了令人惊喜的初步疗效,为这一临床难题开辟了新的治疗思路。但其临床应用的长期疗效及安全性尚有待进一步观察。

关键词 嵌合型抗原受体T细胞 细胞治疗 安全性

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嵌合型抗原受体T细胞在实体肿瘤治疗的现状和展望

5

作者 韩晓建 金艾顺 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第2期157-162,共6页

从1989年Gross与Eshhar提出嵌合型抗原受体（CAR）T细胞的理念，到2014年FDA授予CTL019“突破性治疗”荣誉，CAR-T细胞治疗肿瘤已走过25年。从早期的单-CD3ζ结构域到后来的串联CD28、CD137等，随着人类对肿瘤免疫研究的深入，以及临床... 从1989年Gross与Eshhar提出嵌合型抗原受体（CAR）T细胞的理念，到2014年FDA授予CTL019“突破性治疗”荣誉，CAR-T细胞治疗肿瘤已走过25年。从早期的单-CD3ζ结构域到后来的串联CD28、CD137等，随着人类对肿瘤免疫研究的深入，以及临床试验研究开展，CART细胞治疗得到不断优化。虽然CD19为靶点的淋巴瘤治疗获得成功，但实体肿瘤治疗仍处于临床试验摸索阶段。基于促进CART细胞向肿瘤局部迁移浸润以及克服抗肿瘤微环境的免疫抑制作用等理念及技术优化，CART治疗实体肿瘤的研究越来越深入。未来CART治疗的适应症将不断扩大。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体T细胞 CD19 实体肿瘤 细胞免疫治疗

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嵌合抗原受体T细胞治疗胶质母细胞瘤的进展 被引量：1

6

作者 杨坤(综述) 陈谦学(审校) 《中国临床神经外科杂志》 2021年第6期477-479,共3页

胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是成人最常见的颅内恶性肿瘤[1],标准的治疗方案包括最大而安全的肿瘤切除辅以放疗和化疗,但预后很差,中位生存期仅12~15个月[2]。近年来,晚期癌症的治疗更多地转向免疫治疗。目前,有多种形式的免疫治疗... 胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)是成人最常见的颅内恶性肿瘤[1],标准的治疗方案包括最大而安全的肿瘤切除辅以放疗和化疗,但预后很差,中位生存期仅12~15个月[2]。近年来,晚期癌症的治疗更多地转向免疫治疗。目前,有多种形式的免疫治疗,如树突状细胞疫苗、免疫检查点抑制剂和过继T细胞疗法(adoptive T cell therapy,ACT)。ACT包括肿瘤浸润淋巴细胞、细胞因子诱导的杀伤细胞、工程T细胞和嵌合型抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor modified T-cell,CAR-T)等。CAR-T是将病人的T细胞加工并表达相关嵌合抗原受体后,回输至肿瘤病人体内并对抗原相关肿瘤细胞进行杀伤的一种新型治疗手段。本文就CAR-T在GBM治疗中研究进展进行综述。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 嵌合型抗原受体修饰T细胞 免疫治疗 CAR-T

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开关型嵌合抗原受体T细胞的研究进展 被引量：1

7

作者 王秋霞 时丽丽 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2209-2213,共5页

近两年,嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)在血液瘤治疗方面取得了巨大成就。但传统型CAR-T细胞治疗时伴随的不良反应如细胞因子风暴、脱靶效应及神经毒性,严重威胁患者生命安全。而且传统型CAR-T细胞胞外区... 近两年,嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)在血液瘤治疗方面取得了巨大成就。但传统型CAR-T细胞治疗时伴随的不良反应如细胞因子风暴、脱靶效应及神经毒性,严重威胁患者生命安全。而且传统型CAR-T细胞胞外区为固定的某类单链抗体可变区(single-chain variable fragment,scFv),因此只能靶向一种固定的靶点,若肿瘤靶抗原突变或消失,CAR-T细胞也将失效。近年来,领域前沿涌现了一批开关型CAR-T(switchable CAR-T,sCAR-T)设计,用以解决上述问题。此类设计将传统的CAR-T细胞分解为CAR-T细胞和分子开关,使得CAR-T的激活完全依赖于分子开关,不仅拓展了CAR-T细胞的通用性,还可以通过开关控制CAR-T细胞生物学活性,从而降低传统型CAR-T细胞带来的不良反应。本文就现有报道的sCAR-T进行分类总结,目的是为更多的CAR-T设计及优化提供思路,为sCAR-T进入临床治疗奠定基础。 展开更多

关键词 嵌合抗原受体T细胞 开关型嵌合抗原受体T细胞 抗体偶联物型开关 药物偶联物型开关 药物型开关

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TCR/CAR修饰的T细胞在肿瘤免疫治疗中的研究进展和优化策略 被引量：6

8

作者 陆文斌 宫雪超 +1 位作者 金建华 胡文蔚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期163-173,共11页

过继性T细胞疗法在治疗癌症方面已显示出非凡潜力,特别针对B细胞恶性肿瘤。体外重定向工程T细胞主要使用2种不同策略。一种方法是向T细胞中引入全新设计的合成结构-嵌合型抗原受体(CAR),包含抗体片段(单链抗体scFv可变区)、跨膜结构域(... 过继性T细胞疗法在治疗癌症方面已显示出非凡潜力,特别针对B细胞恶性肿瘤。体外重定向工程T细胞主要使用2种不同策略。一种方法是向T细胞中引入全新设计的合成结构-嵌合型抗原受体(CAR),包含抗体片段(单链抗体scFv可变区)、跨膜结构域(带铰链/间隔区)和信号转导多重元件。另一种是利用T细胞受体(TCR)众所周知的能力:识别与主要组织相容性复合体(MHC)结合的特异性抗原肽,向T细胞中转入靶向癌症相关肽/人类白细胞抗原复合物(HLA)的TCR。虽然已有许多报道描述了这2种方法,但本综述重点关注最新进展。伴随早期成功,CAR也很快暴露出其合成结构亟待优化配置问题,而且对实体瘤的疗效还不理想。在诸多重要特征中,CAR/抗原复合体大小和化学计量的重要性逐渐显现。最近,在TCR介导的突变多肽(新抗原)作为T细胞反应靶点的T细胞免疫治疗研究表明,新抗原也许能为TCR介导的过继性T细胞疗法提供新契机。 展开更多

关键词 T细胞受体 嵌合型抗原受体 免疫疗法

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CAR-T细胞在肿瘤治疗中的研究进展 被引量：15

9

作者 赵玲娣 高全立 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期190-194,共5页

以嵌合型抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)为基础的细胞免疫治疗是一种新的治疗恶性肿瘤的模式,为部分晚期实体瘤患者带来治愈的希望。选择合适的目标靶分子、应用安全的基因转导方法、防治CAR-T细胞治疗的不良反应、将使CAR-T... 以嵌合型抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)为基础的细胞免疫治疗是一种新的治疗恶性肿瘤的模式,为部分晚期实体瘤患者带来治愈的希望。选择合适的目标靶分子、应用安全的基因转导方法、防治CAR-T细胞治疗的不良反应、将使CAR-T细胞造福越来越多的晚期肿瘤患者。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体 免疫治疗 肿瘤

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CAR-T细胞治疗实体肿瘤的新策略 被引量：6

10

作者 武少贤 夏建川 蒋敬庭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期854-858,共5页

嵌合型抗原受体修饰T(chimeric antigen receptor modified T,CAR-T)细胞治疗作为一种新的过继性免疫疗法在血液肿瘤中已取得了较好的疗效。在实体肿瘤中,肿瘤微环境中存在大量免疫抑制细胞、免疫抑制分子以及胞外基质,对迁移的CAR-T细... 嵌合型抗原受体修饰T(chimeric antigen receptor modified T,CAR-T)细胞治疗作为一种新的过继性免疫疗法在血液肿瘤中已取得了较好的疗效。在实体肿瘤中,肿瘤微环境中存在大量免疫抑制细胞、免疫抑制分子以及胞外基质,对迁移的CAR-T细胞的细胞毒性效应产生抑制作用,在实体肿瘤内严重抑制CAR-T细胞的抗肿瘤效力。同时,大多数实体肿瘤存在肿瘤异质性且缺乏相对特异性肿瘤抗原,CAR-T细胞在实体肿瘤部位的归巢能力差并伴随着脱靶效应,使其在实体瘤中的疗效欠佳。与血液肿瘤相比,实体瘤具有复杂的生物学特性,需要针对性的策略才能保证CAR-T细胞抗肿瘤长期有效。本文就CAR-T细胞的发展、在实体瘤治疗中的困惑及治疗策略的研究进展作一阐述。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体T细胞 实体肿瘤 免疫抑制微环境

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CAR-T细胞治疗的神经毒性副反应处理新策略 被引量：4

11

作者 刘兆楠 韩为东 蒋敬庭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期617-622,共6页

嵌合型抗原受体修饰T (chimeric antigen receptor modified T,CAR-T)细胞疗法是肿瘤免疫治疗的重要手段之一,CAR-T细胞的靶向性、杀伤活性、增殖性和持久性较常规T细胞明显提高,并且经过不断的改进演变,其在血液系统肿瘤治疗中取得了... 嵌合型抗原受体修饰T (chimeric antigen receptor modified T,CAR-T)细胞疗法是肿瘤免疫治疗的重要手段之一,CAR-T细胞的靶向性、杀伤活性、增殖性和持久性较常规T细胞明显提高,并且经过不断的改进演变,其在血液系统肿瘤治疗中取得了巨大的成效,受到广泛的关注。然而,其治疗过程中出现的神经毒性,也称CAR-T细胞相关脑病综合征(CAR-T cell relevant encephalopathy syndrome,CRES),影响了CAR-T疗法的临床应用。探索CRES的发病机制及其高风险因素、寻找相应的处理策略,对预防和治疗CRES具有重要意义。本文以CD19-CAR-T 细胞治疗为例,就CRES的发病症状、发病机制、高风险因素及应对策略作一综述,为临床治疗提供参考。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体修饰T细胞 神经毒性 CAR-T细胞相关脑病综合征 应对策略

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CAR-T的设计原理及其在卵巢癌治疗中的应用挑战 被引量：2

12

作者 徐学群 丘瑾 孙旖 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期169-173,共5页

嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)是通过基因工程方法表达特定靶抗原抗体单链可变区(sc Fv)的T细胞。随着CAR-T在血液系统肿瘤治疗疗效的确定,实体肿瘤的研究者们也开始试用CAR-T治疗。然而,CAR-T在实体肿瘤中的治疗疗效远远低于预期。本文对... 嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)是通过基因工程方法表达特定靶抗原抗体单链可变区(sc Fv)的T细胞。随着CAR-T在血液系统肿瘤治疗疗效的确定,实体肿瘤的研究者们也开始试用CAR-T治疗。然而,CAR-T在实体肿瘤中的治疗疗效远远低于预期。本文对CAR-T的设计原理做了简单的总结并讨论各种形式CAR-T及其优缺点。在此基础上,我们也讨论了CAR-T在实体肿瘤中疗效低的原因。最后,我们以卵巢癌为例对CAR-T研究存在的挑战做了前瞻性的预测。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体T细胞 卵巢癌

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CAR-T细胞治疗突破实体肿瘤微环境新策略的研究进展 被引量：1

13

作者 关丽萍 蒋敬庭 吴昌平 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期264-267,共4页

免疫治疗可通过提高患者自身免疫力以达到抗肿瘤目的,其中嵌合型抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor modified T cells,CAR-T)在血液系统肿瘤中已显现出良好疗效。实体肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中免疫抑制细胞... 免疫治疗可通过提高患者自身免疫力以达到抗肿瘤目的,其中嵌合型抗原受体修饰T细胞(chimeric antigen receptor modified T cells,CAR-T)在血液系统肿瘤中已显现出良好疗效。实体肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中免疫抑制细胞及分子等可限制CAR-T细胞在肿瘤部位浸润及其在浸润部位产生细胞毒作用。因此CAR-T细胞治疗在血液系统肿瘤中的显著疗效未在实体肿瘤中呈现。本文就如何突破TME限制,提高CAR-T细胞归巢能力及细胞毒作用,从而提高其在实体瘤中的疗效做一综述。 展开更多

关键词 实体肿瘤 嵌合型抗原受体 肿瘤微环境

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复发难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤患者行CAR-T细胞免疫治疗的护理 被引量：6

14

作者 胡雁 濮益琴 《中西医结合护理（中英文）》 2019年第6期123-125,共3页

目的总结复发难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗的护理。方法选取血液科收治的复发难治性DLBCL患者12例,12例均证实存在CD19抗原表达,给予抗CD19嵌合抗原受体T细胞(CD19-CAR-T)注射液(NCT02976... 目的总结复发难治性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)免疫治疗的护理。方法选取血液科收治的复发难治性DLBCL患者12例,12例均证实存在CD19抗原表达,给予抗CD19嵌合抗原受体T细胞(CD19-CAR-T)注射液(NCT02976857,Cellular Biomedicine Group)治疗。护理内容包括预处理化的护理,抗CD19CAR-T细胞回输的护理,密切监测生命体征,严密观察出入量和生化、凝血功能等指标,心理治疗。结果经单疗程抗CD19CAR-T细胞治疗后,12例患者中3例完全缓解(CR),2例部分缓解(PR),3例疾病稳定(SD),4例患者治疗后持续疾病进展,最终死亡。结论护理人员应掌握CAR-T细胞免疫治疗的知识,采取针对性的护理措施,降低复发难治性DLBCL患者免疫治疗风险。 展开更多

关键词 弥漫性大B细胞淋巴瘤 非霍奇金淋巴瘤 复发 嵌合型抗原受体T细胞 免疫治疗 凝血功能

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基于肿瘤微环境的CAR-T细胞疗法研究现状 被引量：1

15

作者 武少贤 蒋敬庭 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1031-1036,共6页

通过机体免疫系统发挥抗肿瘤作用是目前新型的癌症治疗方法。嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)疗法作为一种新的免疫疗法在血液系统肿瘤中已经取得良好的治疗效果。然而,由于实体瘤具有复杂的脉管系统和基质屏障,它们会显著影响T细胞迁移和... 通过机体免疫系统发挥抗肿瘤作用是目前新型的癌症治疗方法。嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T)疗法作为一种新的免疫疗法在血液系统肿瘤中已经取得良好的治疗效果。然而,由于实体瘤具有复杂的脉管系统和基质屏障,它们会显著影响T细胞迁移和功能。肿瘤微环境(TME)中表达的各种免疫抑制分子阻止T细胞活化,并且肿瘤的高代谢率竞争性地抑制了免疫细胞的代谢。目前,针对实体肿瘤,已经开展许多临床前研究和临床试验,包括优化CAR的结构,增强CAR-T细胞向实体瘤部位的运输,中和TME中的抑制性分子等。随着研究的深入,我们将进一步揭示CAR-T细胞治疗在实体瘤中的作用机理,以充分发挥CAR-T细胞在实体瘤中的作用。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体 肿瘤微环境 实体肿瘤

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急性髓系白血病免疫治疗药物的研究进展 被引量：5

16

作者 陈泽慧 李越洋 田晨 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期2089-2092,共4页

急性髓系白血病(AML)是一种髓系细胞分化异常的恶性肿瘤。随着肿瘤免疫研究的不断深入,免疫治疗在AML患者中的作用日益受到重视,免疫治疗可能成为AML的有效治疗方案,为该病的预后与生存提供新的武器。本文总结目前AML免疫治疗的主要方... 急性髓系白血病(AML)是一种髓系细胞分化异常的恶性肿瘤。随着肿瘤免疫研究的不断深入,免疫治疗在AML患者中的作用日益受到重视,免疫治疗可能成为AML的有效治疗方案,为该病的预后与生存提供新的武器。本文总结目前AML免疫治疗的主要方法如抗体依赖药物、嵌合型抗原受体T细胞疗法、免疫检测点抑制剂等,对免疫治疗药物及临床试验最新研究进展作一综述。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 抗体依赖药物 嵌合型抗原受体T细胞 免疫检测点抑制剂

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CART-19在血液恶性肿瘤治疗中的临床应用 被引量：4

17

作者 吴利 罗玉萍 《实用临床医学（江西）》 CAS 2017年第8期105-107,共3页

嵌合型抗原受体基因修饰的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CART)免疫疗法是通过基因工程方法改造宿主T细胞,使其能自主靶向结合并杀死肿瘤细胞的治疗方法。该疗法临床研究最多的是CART-19,其是以B细胞表面特异性蛋白... 嵌合型抗原受体基因修饰的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CART)免疫疗法是通过基因工程方法改造宿主T细胞,使其能自主靶向结合并杀死肿瘤细胞的治疗方法。该疗法临床研究最多的是CART-19,其是以B细胞表面特异性蛋白CD19为靶抗原的CART细胞,主要用于治疗急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,BLL)和B细胞系肿瘤。文章就CART-19在血液恶性肿瘤中治疗的临床应用进展作一综述。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体基因修饰的T细胞-19 血液恶性肿瘤 治疗 临床应用

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CAR-T免疫疗法:肿瘤靶向治疗的新策略 被引量：2

18

作者 李孟捷 邹秋玲 党尉 《上海医药》 CAS 2017年第3期24-27,61,共5页

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)细胞是一种全新的治疗恶性肿瘤的策略,它有别于传统的手术、放疗、化疗、抗体药物治疗。CAR-T细胞疗法在血液肿瘤的治疗中有显著疗效。本文将综述CAR-T的结构和抗肿瘤的原理、CAR-T细胞在临床上的应用以及CAR-... 嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)细胞是一种全新的治疗恶性肿瘤的策略,它有别于传统的手术、放疗、化疗、抗体药物治疗。CAR-T细胞疗法在血液肿瘤的治疗中有显著疗效。本文将综述CAR-T的结构和抗肿瘤的原理、CAR-T细胞在临床上的应用以及CAR-T细胞治疗所面临的挑战及广阔前景。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体 免疫治疗 肿瘤

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干扰TOX基因联合抗CD38 CAR-T细胞的构建及其对血液肿瘤细胞增殖和凋亡能力的影响

19

作者 宋志茹 刘秀盈 +3 位作者 朱晶晶 刘静静 冯娅茹 王建勋 《山东医药》 CAS 2022年第2期1-6,17,共7页

目的构建干扰胸腺细胞选择相关高迁移率群体盒(TOX)基因联合抗CD38 CAR-T细胞,观察其对血液肿瘤细胞增殖和凋亡能力的影响。方法采集健康志愿者外周血,分离单个核细胞(PBMC),提取原代T淋巴细胞。构建以shRNA技术靶向抑制TOX的抗CD38 CA... 目的构建干扰胸腺细胞选择相关高迁移率群体盒(TOX)基因联合抗CD38 CAR-T细胞,观察其对血液肿瘤细胞增殖和凋亡能力的影响。方法采集健康志愿者外周血,分离单个核细胞(PBMC),提取原代T淋巴细胞。构建以shRNA技术靶向抑制TOX的抗CD38 CAR分子,分别命名为TOX-shRNA1-CD38 CAR和TOX-shRNA2-CD38 CAR,另设计一条不针对任何靶点的无意义RNA序列作为对照,命名为CD38 CAR分子。将分子酶切并连接逆病毒载体包装质粒pMFG,获得pMFG-TOX-shRNA1-MYC-CD38 CAR、pMFG-TOX-shRNA2-MYC-CD38 CAR和pMFG-MYC-CD38 CAR。将人原代T淋巴细胞分为CD38 TOX-shRNA1-CD38 CAR-T组、TOX-shRNA2-CD38 CAR-T组、CAR-T组,分别转导pMFG-TOX-shRNA1-MYC-CD38 CAR、pMFG-TOX-shRNA2-MYC-CD38 CAR和pMFG-MYCCD38 CAR质粒,获得CD38 CAR-T细胞、TOX-shRNA1-CD38 CAR-T细胞和TOX-shRNA2-CD38 CAR-T细胞。采用RT-QPCR法检测三组细胞中TOX mRNA的相对表达量;记录三组细胞0~10 d体外培养生长倍数,观察细胞增殖能力。选取CD38高表达的人多发性骨髓瘤荧光素酶标记细胞RPMI-Luc、人Burkitt’s淋巴瘤荧光素酶标记细胞Raji-Luc作为靶细胞,与三组CAR-T细胞分别共培养48 h;另取三组CAR-T细胞单独培养作为对照,不加肿瘤细胞。采用流式细胞术检测三组CAR-T细胞表面CD69的表达效率,评价CAR-T细胞活化情况;对三组细胞进行CFSE染色,采用流式细胞术观察CAR-T细胞增殖能力;荧光素酶化学发光法观察CAR-T细胞在不同效靶比(1∶2、1∶4、1∶8)时对肿瘤细胞的杀伤效率;ELISA法检测三组CAR-T细胞上清中IFN-γ释放量;流式细胞术检测三组细胞表面PD-1表达量,评估CAR-T细胞的耗竭程度。结果 CD38 CAR-T组、TOX-shRNA1-CD38 CAR-T组、TOXshRNA2-CD38 CAR-T组的转导效率分别为41.51%、41.28%、44.84%,均超过40%。与CD38 CAR-T组比较,TOXshRNA2-CD38 CAR-T组TOX mRNA表达水平降低(P <0.05),TOX-shRNA1-CD38 CAR-T组无明显变化(P>0.05)。三组CAR-T细胞体外培养0~10 d均稳定增殖,三组间生长倍数比较差异无统计学意义(P <0.05)。三组与肿瘤细胞共培养后,CD69表达效率均升高(P均<0.01)。与单独培养的CAR-T细胞相比,三组CAR-T细胞与Raji-Luc、RPMI-Luc细胞共培养后FITC信号左移,增殖加快,三组增殖能力比较无统计学差异(P> 0.05)。与CD38 CAR-T组相比,TOX-shRNA2-CD38 CAR-T组在不同效靶比时对肿瘤细胞的杀伤效率均提高,γ干扰素释放水平升高,细胞表面PD-1表达水平降低(P <0.05或<0.01),而TOX-shRNA1-CD38 CAR-T组与CD38 CAR-T组比较,肿瘤细胞的杀伤效率、γ干扰素释放水平、细胞表面PD-1表达水平均无统计学差异(P均>0.05)。结论成功构建了靶向抑制TOX基因联合抗CD38 CAR-T细胞,TOX-shRNA-CD38 CAR-T细胞能够有效抑制TOX表达;经肿瘤细胞激活后,其体外增殖活性及抗肿瘤能力显著增强,且TOX-shRNA-CD38 CAR-T细胞耗竭也得到改善。 展开更多

关键词 嵌合型抗原受体基因修饰的T细胞 胸腺细胞选择相关高迁移率群体盒基因 多发性骨髓瘤 淋巴瘤 细胞免疫治疗

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外周血细胞参数对CD19-CART治疗难治/复发急性B淋巴细胞白血病疗效的预测作用

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作者 张战强 张改玲 +4 位作者 苏云超 何九江 张敏 杨君芳 张弦 《中华养生保健》 2022年第14期1-4,共4页

目的研究外周血细胞参数在CD19-嵌合型抗原受体T细胞(CD19-CAR-T)治疗难治/复发急性B淋巴细胞白血病中的作用。方法回顾性分析2017年5月~2020年5月在北京陆道培医院接受CD19-CAR-T治疗难治/复发急性B淋巴细胞白血病患者的临床资料,比较... 目的研究外周血细胞参数在CD19-嵌合型抗原受体T细胞(CD19-CAR-T)治疗难治/复发急性B淋巴细胞白血病中的作用。方法回顾性分析2017年5月~2020年5月在北京陆道培医院接受CD19-CAR-T治疗难治/复发急性B淋巴细胞白血病患者的临床资料,比较治疗后46例CAR-T细胞治疗后微小残留病(MRD)阴性患者(MRD阴性组)和38例微小残留病阳性患者(MRD阳性组)治疗过程中的外周血细胞参数。结果MRD阴性组在CD19-CAR-T细胞回输时白细胞、血红蛋白、血小板和中性粒细胞数值,明显高于MRD阳性组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。MRD阴性组在回输第7天、第14天、第21天的血小板数值明显高于MRD阳性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论CD19-CAR-T细胞回输时外周血细胞数值高,第7天、第14天、第21天血小板数值高,可能预示CD19-CAR-T细胞治疗有效;与化疗相比较,CD19-CAR-T细胞治疗后的造血恢复速度更快。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 嵌合型抗原受体 血小板 难治 复发

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