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获得重构基因的简捷方法——重叠延伸PCR
被引量:
9
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作者
刘玲丽
谭岩
+7 位作者
刘力华
张琨
时阳
许淑芬
方艳秋
段秀梅
姜艳芳
王晓祺
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期713-716,共4页
目的 :构建 IFN- β信号肽序列与白细胞介素 18(IL- 18)成熟肽的重组嵌合分子。方法 :从 BAL B/ c鼠基因组 DNA扩增 IFN- β信号肽序列 ;由小鼠 Pro- IL- 18真核表达质粒获得 IL- 18成熟肽序列 ;以非对称 PCR技术得到IFN- β信号肽编码...
目的 :构建 IFN- β信号肽序列与白细胞介素 18(IL- 18)成熟肽的重组嵌合分子。方法 :从 BAL B/ c鼠基因组 DNA扩增 IFN- β信号肽序列 ;由小鼠 Pro- IL- 18真核表达质粒获得 IL- 18成熟肽序列 ;以非对称 PCR技术得到IFN- β信号肽编码区的反义链和 IL- 18成熟肽正链 ;采用重叠延伸 PCR(SOE- PCR)产生具有 IFN- β信号肽与 IL- 18成熟肽的嵌合编码序列 ;定向连方式构建嵌合 IL- 18的表达质粒并测序。结果 :连续胶 PAGE表明非对称 PCR可分别扩增出两个靶序列的特异性单链 ,大小符合预期。IFN- β信号肽对称 PCR产物与 IL- 18非对称 PCR产物混合作为模板 ,进行重叠延伸 ;电泳分析可见清晰的嵌合片段 ;测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成 ,且无移码。结论 :重叠延伸 PCR是一种获得重构基因的简捷方法。
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关键词
嵌合白细胞介素18
重叠延伸PCR
非对称PCR
下载PDF
职称材料
题名
获得重构基因的简捷方法——重叠延伸PCR
被引量:
9
1
作者
刘玲丽
谭岩
刘力华
张琨
时阳
许淑芬
方艳秋
段秀梅
姜艳芳
王晓祺
机构
吉林大学第一医院中心实验室
吉林省疾病预防控制中心
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第5期713-716,共4页
基金
卫生部临床学科重点科研项目 (2 0 0 1314 5 )
吉林省科技厅重点科研项目 (2 0 0 2 0 4 0 3)
+1 种基金
吉林省卫生厅科研项目(0 2 0 )
长春市科委科研项目 (0 1- 78S0 2 )
文摘
目的 :构建 IFN- β信号肽序列与白细胞介素 18(IL- 18)成熟肽的重组嵌合分子。方法 :从 BAL B/ c鼠基因组 DNA扩增 IFN- β信号肽序列 ;由小鼠 Pro- IL- 18真核表达质粒获得 IL- 18成熟肽序列 ;以非对称 PCR技术得到IFN- β信号肽编码区的反义链和 IL- 18成熟肽正链 ;采用重叠延伸 PCR(SOE- PCR)产生具有 IFN- β信号肽与 IL- 18成熟肽的嵌合编码序列 ;定向连方式构建嵌合 IL- 18的表达质粒并测序。结果 :连续胶 PAGE表明非对称 PCR可分别扩增出两个靶序列的特异性单链 ,大小符合预期。IFN- β信号肽对称 PCR产物与 IL- 18非对称 PCR产物混合作为模板 ,进行重叠延伸 ;电泳分析可见清晰的嵌合片段 ;测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成 ,且无移码。结论 :重叠延伸 PCR是一种获得重构基因的简捷方法。
关键词
嵌合白细胞介素18
重叠延伸PCR
非对称PCR
Keywords
chimera IL-
18
overlap extention PCR
asymmetric PCR
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
获得重构基因的简捷方法——重叠延伸PCR
刘玲丽
谭岩
刘力华
张琨
时阳
许淑芬
方艳秋
段秀梅
姜艳芳
王晓祺
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
9
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