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重组酿酒酵母磷酸胆碱胞苷转移酶(CCT酶)基因的工程菌稳定性研究 被引量：2
1
作者 李晓丹 夏冰 汪仁 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第5期49-50,69,共3页
为了进一步研究基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-29a-cct在培养基中传代50次过程中菌种的稳定性,通过将菌体和菌落的形态、质粒的稳定性、质粒酶切图谱和重组CCT酶的表达量及活性作为指标进行考察,来评价该工程菌的稳定性。结果显示,重... 为了进一步研究基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-29a-cct在培养基中传代50次过程中菌种的稳定性,通过将菌体和菌落的形态、质粒的稳定性、质粒酶切图谱和重组CCT酶的表达量及活性作为指标进行考察,来评价该工程菌的稳定性。结果显示,重组CCT酶基因的工程菌在转接50次的过程中质粒稳定性高,其保有率为90%,表达产物可达发酵液总蛋白的15%以上。该菌在第50代后仍具有转化活性,说明工程菌转化活性稳定。 展开更多
关键词 磷酸胆碱胞苷转移酶(CCT酶) 质粒稳定性 工程菌稳定性 转化活性
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重组嘧啶核苷磷酸化酶工程菌菌种的稳定性考察 被引量：7
2
作者 姜立春 郭晓萍 +2 位作者 涂朝勇 舒晓燕 阮期平 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期295-297,共3页
目的研究基因工程菌E.coliTOP10F’在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性。方法以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱和重组嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)的表达量和酶活性为指标进行考察,以评价工程菌的稳定性。结果重组P... 目的研究基因工程菌E.coliTOP10F’在LB培养基中传代50代过程中菌种的稳定性。方法以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱和重组嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)的表达量和酶活性为指标进行考察,以评价工程菌的稳定性。结果重组PyNPase工程菌在传代50代的过程中质粒稳定性高,传代10代内质粒稳定性(ST)为100%,其表达产物可达发酵液总蛋白的20%,其活性为1.18 U.ml-1,传代50代的菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态。结论重组嘧啶核苷磷酸化酶工程菌菌种稳定。 展开更多
关键词 重组嘧啶核苷磷酸化酶 质粒稳定性 表达稳定性 工程菌稳定性
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重组水蛭素Ⅲ工程菌菌种稳定性考察 被引量：5
3
作者 韦利军 阮期平 +1 位作者 郭海 吴梧桐 《药物生物技术》 CAS CSCD 2004年第2期86-90,共5页
研究基因工程菌E .coliAS1.35 7在LB培养基中传代 5 0代过程中菌种的稳定性。以菌体和菌落的形态、质粒稳定性 (ST)、质粒酶切图谱和水蛭素的表达量以及比活等方面进行考察 ,以评价工程菌的稳定性。重组水蛭素Ⅲ工程菌在传代 5 0代的过... 研究基因工程菌E .coliAS1.35 7在LB培养基中传代 5 0代过程中菌种的稳定性。以菌体和菌落的形态、质粒稳定性 (ST)、质粒酶切图谱和水蛭素的表达量以及比活等方面进行考察 ,以评价工程菌的稳定性。重组水蛭素Ⅲ工程菌在传代 5 0代的过程中质粒稳定性高 ,传代 10代内质粒稳定性 (ST)为 98% ,且表达稳定 ,表达产物可达发酵液可溶性蛋白总量的 6 0 % ,产物的抗凝血酶活力大于 2 .0× 10 3 ATU/ml,传代 5 0代的菌体与菌落呈典型的大肠杆菌形态。重组水蛭素Ⅲ工程菌菌种稳定。 展开更多
关键词 重组水蛭素 质粒稳定性 工程菌稳定性
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鲨肝刺激物类似物sHSA原核表达载体质粒稳定性的考察 被引量：1
4
作者 赵艳景 王颖 《药物生物技术》 CAS CSCD 2008年第3期191-194,共4页
研究原核表达载体pET-sHSA基因工程菌株传代50代过程中菌种的稳定性。采用LB液体培养基传代的方法考察了传代对菌种稳定性的影响,以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱及表达量等方面进行考察,以评价工程菌的稳定性。结果... 研究原核表达载体pET-sHSA基因工程菌株传代50代过程中菌种的稳定性。采用LB液体培养基传代的方法考察了传代对菌种稳定性的影响,以菌体和菌落的形态、质粒稳定性(ST)、质粒酶切图谱及表达量等方面进行考察,以评价工程菌的稳定性。结果表明:pET-sHSA工程菌株在传代50代过程中具有较高的质粒稳定性,传代10代内质粒稳定性(ST)高达97%,传50代后质粒稳定性(ST)为82%。且重组产物表达量保持稳定,表达产物可达发酵液可溶性蛋白总量的40%,由此证明了表达载体pET-sHSA工程菌株具有传代稳定性,适合工业化生产。 展开更多
关键词 pET-sHSA 质粒稳定性 工程菌稳定性
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