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人巨细胞病毒地方分离株的鉴定及其UL83序列分析 被引量：1
1
作者 史永林 陈敬贤 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第6期612-616,共5页
目的鉴定从合肥市某医院先天性脑瘫患儿尿标本中分离的4株人巨细胞病毒（HCMV）毒株并对其UL83基因序列进行分析，为HCMV感染的预防及pp65蛋白疫苗的研制提供参考依据。方法应用细胞培养法复苏病毒，间接免疫荧光法检测pp65蛋白表达，... 目的鉴定从合肥市某医院先天性脑瘫患儿尿标本中分离的4株人巨细胞病毒（HCMV）毒株并对其UL83基因序列进行分析，为HCMV感染的预防及pp65蛋白疫苗的研制提供参考依据。方法应用细胞培养法复苏病毒，间接免疫荧光法检测pp65蛋白表达，并用特异性引物对UL73基因进行PCR，扩增的产物经凝胶纯化后测序；序列结果运用DNAMAN软件和GenBank登录的3株代表性HCMV毒株进行核苷酸和氨基酸序列比对。结果HCMV AD169株与HCMV-1分离株的UL83基因核苷酸及编码氨基酸序列的同源性均为100％，与其余3株的同源性也达99．26％～99．69％；4株HCMV分离株与Merlin株、Towne株在相应基因片段核苷酸及氨基酸的同源性最低的分别为98．95％，99．06％。结论UL83序列分析结果表明，HCMV UL83编码pp65蛋白的优势抗原决定簇氨基酸序列无变化。 展开更多
关键词 巨细胞病毒/分离和提纯 生物学鉴定法/方法 序列分析 DNA
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多重PCR方法鉴定人巨细胞病毒临床病毒分离株 被引量：4
2
作者 丁俊彩 苏海浩 +3 位作者 胡兢晶 郭媛媛 谢斌华 王波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第13期2312-2314,共3页
目的:应用多重PCR技术鉴定体外培养、分离获得的人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株。方法:以先天性感染HCMV的新生儿为研究对象,采集尿液标本进行病毒分离,将分离获得的临床低传代病毒感染HELF细胞,提取病毒DNA,针对较保守基因IE和LA,设计... 目的:应用多重PCR技术鉴定体外培养、分离获得的人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株。方法:以先天性感染HCMV的新生儿为研究对象,采集尿液标本进行病毒分离,将分离获得的临床低传代病毒感染HELF细胞,提取病毒DNA,针对较保守基因IE和LA,设计两对引物,同时扩增IE和LA基因,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果:成功分离获得2株HCMV临床低传代病毒株(D2、D3),经多重PCR同时扩增出209bp(IE)和401bp(LA)目的片段。结论:多重PCR可以作为病毒分离后,基础研究中鉴定HCMV临床病毒株的一种方法。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 多重PCR 临床病毒株 病毒分离 细胞病变效应
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二甲亚砜对人巨细胞病毒初次分离促进作用的实验观察 被引量：1
3
作者 张文艳 胡勇 +5 位作者 余莉 方草晖 类延花 金晶 吴建军 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第1期16-18,共3页
目的　观察二甲亚砜 (DMSO)对人巨细胞病毒(HCMV)初次分离的影响。方法　将临床收集的 11例患者尿标本接种至两组人胚成纤维细胞 (HF)细胞中进行HCMV分离。 1组为DMSO细胞组 ,即在培养液中添加了终浓度为1%的DMSO ;另 1组为常规细胞组... 目的　观察二甲亚砜 (DMSO)对人巨细胞病毒(HCMV)初次分离的影响。方法　将临床收集的 11例患者尿标本接种至两组人胚成纤维细胞 (HF)细胞中进行HCMV分离。 1组为DMSO细胞组 ,即在培养液中添加了终浓度为1%的DMSO ;另 1组为常规细胞组接种组 ,设为对照 ,不作任何处理。待细胞出现HCMV特征性细胞病变 (CPE)时 ,通过PCR法测定HCMVDNA加以确证。结果　 11例标本中 ,两组均有 5例标本出现HCMVCPE ,且标本号一致。但DMSO细胞组CPE出现时间比对照组提前约 9～ 12d。结论　DMSO对HCMV初次分离的阳性结果没影响 ,但可使HCMV特征性CPE的出现得以提前 ,加快了临床标本中HCMV的分离。 展开更多
关键词 二甲亚砜 人巨细胞病毒 分离 实验 提纯
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三例经脑脊液培养分离证实的巨细胞病毒性脑炎 被引量：1
4
作者 陈贵海 王明丽 +2 位作者 杨佩玲 李京培 史百芬 《临床神经病学杂志》 CAS 1998年第6期358-360,共3页
目的进一步探讨巨细胞病毒性脑炎（ＣＭＶＥ）的诊断及病原学检测。方法报告３例经脑脊液（ＣＳＦ）培养分离，辅以多聚酶链反应法检测ＤＮＡ及酶联免疫法检测病毒特异性抗体证实的ＣＭＶＥ患者。结果临床上均有意识模糊，以精神异常为... 目的进一步探讨巨细胞病毒性脑炎（ＣＭＶＥ）的诊断及病原学检测。方法报告３例经脑脊液（ＣＳＦ）培养分离，辅以多聚酶链反应法检测ＤＮＡ及酶联免疫法检测病毒特异性抗体证实的ＣＭＶＥ患者。结果临床上均有意识模糊，以精神异常为突出首发症状，重症时可出现瘫痪。原始反射阳性为最多见的体征。３例均至少有一次分离结果阳性，并同时有ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性。结论要减少ＣＭＶＥ的误诊与漏诊，应多种方法并用。此３例患者均无明确免疫抑制因素存在。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 脑炎 病毒分离 病理
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多聚酶链反应和病毒分离检测巨细胞病毒的比较研究
5
作者 郭永建 戴赓孙 +3 位作者 苏东辉 黄妙辉 吴丽瑟 何爱华 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第6期20-22,共3页
92名住院患儿病毒分离、常规PCR、热启动PCR、碘化钠抽提结合热启动PCR的CMV检出率分别为61％、28％、39％和48％。与病毒分离止较,常规PCR、热启动PCR、碘化钠抽提结合热启动PCR检测极低拷贝数CMVDNA的敏感性分别为8％、36％和64％。... 92名住院患儿病毒分离、常规PCR、热启动PCR、碘化钠抽提结合热启动PCR的CMV检出率分别为61％、28％、39％和48％。与病毒分离止较,常规PCR、热启动PCR、碘化钠抽提结合热启动PCR检测极低拷贝数CMVDNA的敏感性分别为8％、36％和64％。从而显示碘化钠抽提结合热启动PCR,敏感性高,简便快速,4h内可判定结果,颇具临床实用价值。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 病毒分离 聚合酶链反应
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小鼠巨细胞病毒(MCMV)实验性感染的研究 Ⅰ.昆明系和CBA系小鼠的临床病理和病毒分离的比较
6
作者 汤家铭 刘昌茂 +2 位作者 袁云华 赵为之 程鸿 《实验动物与比较医学》 CAS 1990年第3期129-132,共4页
用MCMV-Smith株实验感染昆明系和CBA系小鼠,两个品系有完全不同的临床表现、死亡率和病理改变。昆明系十分易感,而CBA系有抵抗力。对感染小鼠的领下腺、脾脏和肾脏进行病毒分离发现,颌下腺是MCMV分离的最可靠器官,感染7天后即可分离出MC... 用MCMV-Smith株实验感染昆明系和CBA系小鼠,两个品系有完全不同的临床表现、死亡率和病理改变。昆明系十分易感,而CBA系有抵抗力。对感染小鼠的领下腺、脾脏和肾脏进行病毒分离发现,颌下腺是MCMV分离的最可靠器官,感染7天后即可分离出MCMV,病毒分离时间达感染后70～105天,分离率约70％,而脾脏和肾脏的病毒分离率则较低。 展开更多
关键词 小鼠巨细胞病毒 实验感染 病理改变 病毒分离
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人巨细胞病毒感染与系统性红斑狼疮病情活动性的关联性研究 被引量：8
7
作者 崔寰 陈伟 +4 位作者 夏俊保 刘倩 黄维 李迎伟 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第5期508-511,共4页
目的探索人巨细胞病毒(HCMV)感染与系统性红斑狼疮(SLE)病情活动之间的关系。方法采用病毒分离、聚合酶链式反应(PCR)检测HCMVUL54基因和间接免疫荧光试验(IFA)检测HCMVpp65抗原的方法,对49份SLE患者血白细胞标本进行HCMV分离鉴定,并结... 目的探索人巨细胞病毒(HCMV)感染与系统性红斑狼疮(SLE)病情活动之间的关系。方法采用病毒分离、聚合酶链式反应(PCR)检测HCMVUL54基因和间接免疫荧光试验(IFA)检测HCMVpp65抗原的方法,对49份SLE患者血白细胞标本进行HCMV分离鉴定,并结合临床资料分析HCMV感染与SLE病情活动的相关性。结果49份SLE患者血白细胞标本中,HCMV病毒分离后出现典型细胞病变的有3份,经PCR和IFA联合检测鉴定阳性的有12份,阳性率为24.5%;Logistic回归分析显示,SLE活动期患者的HCMV感染率为38.5%,显著高于SLE非活动期患者8.7%的HCMV感染率(OR=8.7,95%CI:1.4～53.3,P=0.019)。结论HCMV感染与SLE病情活动呈现显著正相关。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性/病毒学 巨细胞病毒/分离和提纯
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人巨细胞病毒蚀斑实验条件的优化及在抗病毒物质活性测定中的应用 被引量：6
8
作者 张俊玲 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第5期485-489,共5页
目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)的蚀斑形成实验最适工作条件,建立稳定易行的HCMV蚀斑技术,用于HC-MV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究。方法HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞(HF)单层,37℃吸附1h,分别用含0.463‰、0.925‰NaHCO3... 目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)的蚀斑形成实验最适工作条件,建立稳定易行的HCMV蚀斑技术,用于HC-MV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究。方法HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞(HF)单层,37℃吸附1h,分别用含0.463‰、0.925‰NaHCO3及0.5%、1%DMSO琼脂糖覆盖,1周后加盖第2层;2周后用0.5%结晶紫染色5min,计数、计算pfu/ml,采用PCR法对蚀斑培养物进行鉴定;分别用患者血清及HCMVAD169株兔免疫血清进行蚀斑抑制实验,计算中和抗体滴度;蚀斑减少实验测定不同浓度更昔洛韦(GCV)的抗HCMV活性。结果HCMV对照孔在5d出斑,蚀斑为圆形、实心、不透明状;两种浓度NaHCO3对蚀斑形成数量、大小有明显影响且病毒滴度差异有显著性(P<0.05)。在含0.463‰NaHCO3培养孔内,出斑时间提前至3d;但不同浓度的DMSO对蚀斑数量、大小以及病毒滴度的影响差异无显著性(P>0.05)。HCMV患者血清及HCMVAD169株兔免疫血清均可以抑制蚀斑形成。利用蚀斑减少实验测定GCV抗HCMV活性,可在7d内获得结果。结论HCMV蚀斑形成实验条件经优化后,可以方便稳定地对HCMV进行定量测定以及抗病毒活性物质的筛选和评价。 展开更多
关键词 巨细胞病毒/分离和提纯
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人巨细胞病毒UL140基因在临床低传代分离株中的多态性研究
9
作者 齐莹 阮强 +5 位作者 何蓉 卢颖 吉耀华 马艳萍 刘庆 陈淑荣 《小儿急救医学》 2004年第1期19-21,共3页
目的　研究人巨细胞病毒HCMV UL14 0基因在临床低传代分离株中的多态性及其与致病性的关系。方法　对 4 0株HCMV临床低传代分离株进行UL14 0基因全序列的PCR扩增 ,对 12株进行了测序及结果分析。结果　 4 0株HCMV UL14 0基因PCR扩增均... 目的　研究人巨细胞病毒HCMV UL14 0基因在临床低传代分离株中的多态性及其与致病性的关系。方法　对 4 0株HCMV临床低传代分离株进行UL14 0基因全序列的PCR扩增 ,对 12株进行了测序及结果分析。结果　 4 0株HCMV UL14 0基因PCR扩增均阳性。测序的 12株HCMV UL14 0开放阅读框架 (ORF)均在Toledo株UL14 0 ORF的第 174位核苷酸处 ,插入一个胞嘧啶核苷酸C ,造成移码突变。与Toledo株相比 ,临床分离株新增了ScAMP磷酸化SPS和酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化CKP两种重要功能位点 ,且其所位于的氨基酸位点可能是UL14 0蛋白的蛋白质作用位点。结论　临床分离株UL14 0基因的ORF较Toledo株多出 2 31个核苷酸 ,故两者的核苷酸及其编码产物氨基酸序列明显不同。临床分离株存在SPS及CKP两种新的重要功能位点 ,可能在HCMV UL14 0编码蛋白的生物学功能方面起重要作用。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 UL140基因 临床低传代分离株 基因多态性 基因测序 致病性
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用巨细胞病毒阴性供血者的血清识别巨细胞病毒临床分离抗原
10
作者 李喆 《国外医学（输血及血液学分册）》 2004年第6期566-567,共2页
背景防止CMV经输血传播最有效的方法是使用血清反应阴性供血者的血制品。供血者的CMV筛查通常是建立在检测取自CMV实验室提取的AD169抗原的检出。近来有迹象表明大约高达20％的CMV阴性供血者实际上经PCR分析为CMV-DNA阳性。研究设计及... 背景防止CMV经输血传播最有效的方法是使用血清反应阴性供血者的血制品。供血者的CMV筛查通常是建立在检测取自CMV实验室提取的AD169抗原的检出。近来有迹象表明大约高达20％的CMV阴性供血者实际上经PCR分析为CMV-DNA阳性。研究设计及方法在本研究中，作者检测了CMV血清反应阴性血清。 展开更多
关键词 巨细胞病毒阴性供血者 血清 识别 巨细胞病毒 临床分离抗原
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胸腔积液检测人类巨细胞病毒和人乳头瘤病毒的结果分析
11
作者 刘瑞吉 刘兰吉 韩猛 《中国误诊学杂志》 CAS 2006年第4期651-652,共2页
关键词 胸腔积液/微生物学 巨细胞病毒/分离和提纯 乳头状瘤病毒 人/分离和提纯
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1983～2003年日本儿童中人类巨细胞病毒分离株的基因变异
12
《河南医学研究》 CAS 2005年第4期371-371,共1页
关键词 人类巨细胞病毒 病毒分离株 基因变异 日本 儿童 分子流行病学 基因研究 MED
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实时荧光定量PCR检测巨细胞病毒两种白细胞提取方法对比分析 被引量：3
13
作者 刘广印 周光庭 沈佐君 《淮海医药》 CAS 2007年第2期95-96,共2页
目的比较实时荧光定量PCR技术检测巨细胞病毒两种白细胞提取处理方法。方法对51例新生儿黄疸患者外周血分别进行淋巴细胞分离液法提取白细胞和0.8%氯化胺裂解红细胞法提取白细胞,然后同时进行实时荧光定量PCR检测。结果51例样本中两种... 目的比较实时荧光定量PCR技术检测巨细胞病毒两种白细胞提取处理方法。方法对51例新生儿黄疸患者外周血分别进行淋巴细胞分离液法提取白细胞和0.8%氯化胺裂解红细胞法提取白细胞,然后同时进行实时荧光定量PCR检测。结果51例样本中两种方法均阳性5例,白细胞抽提液法阳性、氯化胺裂解红细胞法阴性2例;白细胞抽提液法阴性、氯化胺裂解红细胞法阳性4例;两者均阴性40例;氯化胺裂解红细胞阳性率法17.64%,淋巴细胞分离液法阳性率13.72%。经统计学分析,两方法阳性率差异无显著性(χ2=0.5,P>0.05)。结论氯化胺裂解红细胞法提取白细胞方法简便、可靠,可用于荧光定量PCR检测巨细胞病毒。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 巨细胞病毒 淋巴细胞分离液法 氯化胺裂解红细胞法
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婴幼儿巨细胞包涵体病的临床及病毒分离
14
作者 董宗祈 孙志勤 《武汉市医学科研》 1995年第1期11-12,共2页
关键词 婴儿 巨细胞包涵体病 病毒分离 实验室诊断
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婴儿巨细胞病毒感染与母乳喂养
15
作者 吴佩英 吕绳敏 +3 位作者 刘兰青 刘春复 陈淑荣 阮强 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第2期145-147,149,共4页
采集儿童保健门诊1个月～1岁健康婴儿尿及其母乳共105对进行病毒分离。分离结果:正常母乳巨细胞病毒阳性率为16.2%,婴儿尿巨细胞病毒阳性率为21.9%,感染母乳喂养的婴儿感染率为41.1%,明显高于非感染母乳喂养的婴儿感染率18.2%,可见感染... 采集儿童保健门诊1个月～1岁健康婴儿尿及其母乳共105对进行病毒分离。分离结果:正常母乳巨细胞病毒阳性率为16.2%,婴儿尿巨细胞病毒阳性率为21.9%,感染母乳喂养的婴儿感染率为41.1%,明显高于非感染母乳喂养的婴儿感染率18.2%,可见感染母乳是婴儿巨细胞病毒感染的主要来源。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 婴儿 母乳 病毒分离 尿
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小鼠巨细胞病毒包涵体观察
16
作者 汤家铭 刘昌茂 +2 位作者 袁云华 赵为之 程鸿 《实验动物与比较医学》 CAS 1993年第1期4-7,共4页
作者观察了CBA系和昆明种小鼠实验感染小鼠巨细胞病毒(MCMV)Smith株后,其颌下腺细胞内病毒包涵体的出现和病毒分离情况。结果表明,核内包涵体的持续存在时间因品系而异,在昆明种的持续时间较CBA系长;核内包涵体与病毒分离的阳性率不完... 作者观察了CBA系和昆明种小鼠实验感染小鼠巨细胞病毒(MCMV)Smith株后,其颌下腺细胞内病毒包涵体的出现和病毒分离情况。结果表明,核内包涵体的持续存在时间因品系而异,在昆明种的持续时间较CBA系长;核内包涵体与病毒分离的阳性率不完全一致,两者符合率为69％(33/48)。并以颌下腺出现病毒包涵体为指标,观察10个品系不同鼠龄共231只小鼠的MCMV自然感染情况。发现包涵体的阳性率与品系有关,远交系的高于近交系;且与鼠龄有关;老龄淘汰鼠,21.7％(15/69);5～7周龄鼠,12.0％(9/75);3周龄前乳鼠,5.0％(3/60);尤以孕鼠为最高 (29.6％,8/27)。 展开更多
关键词 小鼠巨细胞病毒 包涵体 病毒分离
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检测人巨细胞病毒的免疫PCR技术的建立
17
作者 郝好杰 谷志远 李琦 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期148-149,共2页
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是一种广泛传播的病毒,初次感染后,病毒潜伏存在于体内,但可被激活出现复发感染。诊断HCMV近期活动性感染,主要依靠实验室检测。传统的病毒分离、血清中抗CMV-IgM及CMV抗原等的检测,敏感性差,... 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是一种广泛传播的病毒,初次感染后,病毒潜伏存在于体内,但可被激活出现复发感染。诊断HCMV近期活动性感染,主要依靠实验室检测。传统的病毒分离、血清中抗CMV-IgM及CMV抗原等的检测,敏感性差,易漏诊;核酸杂交、PCR等方法虽然敏感性高,但既可检出复制的病毒DNA,也可检出潜伏。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 免疫PCR 可溶性抗原 HCMV活动性感染 细胞抗原 分子生物学研究 核酸杂交 病毒分离 解放军总医院 病毒DNA
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婴儿与母乳巨细胞病毒感染的调查
18
作者 张玫瑰 叶正中 +1 位作者 冯婉玲 丘翠芳 《广州医学院学报》 1989年第3期22-26,共5页
本文首次在广州地区对健康婴儿尿和母乳进行人巨细胞病毒(CMV)分离。183例婴儿尿 CMV 阳性率为56.2%;其中2月龄,3—6月龄,7—12月龄的阳性率分别为27.7%,60.8%和75.5%。73例母乳阳性率为47.9%;其中产后2月,3—6月,7—12月的母乳阳性率... 本文首次在广州地区对健康婴儿尿和母乳进行人巨细胞病毒(CMV)分离。183例婴儿尿 CMV 阳性率为56.2%;其中2月龄,3—6月龄,7—12月龄的阳性率分别为27.7%,60.8%和75.5%。73例母乳阳性率为47.9%;其中产后2月,3—6月,7—12月的母乳阳性率分别为51.8%,45.7%和45.5%。67例婴儿尿和母乳配对进行分离,其阳性率分别为56.7%和52.2%;其中母乳阳性的婴儿尿阳性率为68.5%(24/35),母乳阴性的婴儿尿阳性率为43.7%,二者有显著性差异(X^2=4.19,P<0.05)。本研究结果表明广州地区母乳 CMV 阳性率较高,并显示出喂养含有 CMV 排出的母乳是生后一岁内婴儿获得性感染的重要途径。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 婴儿尿 母乳 病毒分离
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先天性人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮层内皮素—1mRNA的研究
19
作者 袁中玉 王明丽 +1 位作者 陈贵海 李京培 《热带病与寄生虫学》 1999年第4期219-221,共3页
人巨细胞病(HCMV)是人类先天性中枢神经系统(CNS)感染的最主要病原体之一。但 HCMV 在CNS 中的致病机制尚不清楚。内皮素-1(ET-1)是一种生物活性肽,它具有广泛的生物学功能,本文在建立先天性 HCMV 感染小鼠模型的基础上,首次对受染胎鼠... 人巨细胞病(HCMV)是人类先天性中枢神经系统(CNS)感染的最主要病原体之一。但 HCMV 在CNS 中的致病机制尚不清楚。内皮素-1(ET-1)是一种生物活性肽,它具有广泛的生物学功能,本文在建立先天性 HCMV 感染小鼠模型的基础上,首次对受染胎鼠大脑皮层内 ET-1 mRNA 进行分析,旨在探讨先天性 HCMV 感染致 CNS 展开更多
关键词 大脑皮层 先天性感染 胎鼠 原位杂交 内皮素 人巨细胞病毒感染 神经元 病毒分离 生物学功能 正常对照组
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人类巨细胞病毒的实验室诊断研究现状
20
作者 薛平安 李英光 路桂英 《预防医学论坛》 1995年第2期474-476,共3页
人群中巨细胞病毒的感染极为普遍,Griffiths报道人巨细胞病毒(HCMV)感染率可高达60％～100％。绝大多数表现为隐性或轻症感染,但在免疫缺陷患者(如器官移植和艾滋病患者)中,就可产生广泛的HCMV继发感染,其并发症十分严重,病死率较高。
关键词 人类巨细胞病毒 实验室诊断 单克隆抗体 病毒分离 核酸杂交 细胞培养 特异性 人巨细胞病毒 研究现状 国外医学流行病学传染病学分册
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