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先天性心脏病与弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒及单纯疱疹病毒感染的关系 被引量：21
1
作者 吴春涛 陈立华 +1 位作者 刘苏 方明星 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期852-854,共3页
目的探讨先天性心脏病(先心病)与弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)及单纯疱疹病毒(HSV)感染的关系。方法选取80例先心病患者(先心病组)和32例非先心病者(对照组)。采用聚合酶链反应(PCR)荧光定量方法检测两组受检者心肌组织... 目的探讨先天性心脏病(先心病)与弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)及单纯疱疹病毒(HSV)感染的关系。方法选取80例先心病患者(先心病组)和32例非先心病者(对照组)。采用聚合酶链反应(PCR)荧光定量方法检测两组受检者心肌组织、血清和白细胞中的TOX、RV、CMV及HSV4种基因并进行比较。结果先心病组心肌组织中TOX、RV、CMV、HSV的基因检出率分别为16.2%、18.8%、28.8%和7.5%,对照组分别为0、0、18.8%和6.2%,两组TOX、RV基因检出率间差异有统计学意义(P<0.05),CMV、HSV基因检出率间差异无统计学意义(P>0.05)。先心病组与对照组心肌组织中CMV、HSV阳性者的CMV〔(5.50±1.30)copies/ml和(5.30±0.33)copies/ml〕、HSV〔(4.51±0.87)copies/ml和(4.32±0.17)copies/ml〕基因定量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);先心病组与对照组白细胞中CMV阳性者的CMV〔(5.23±1.20)cop-ies/ml和(5.02±0.79)copies/ml〕基因定量比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论先心病的发生与TOX、RV、CMV、HSV感染有关,但与病原体感染的数量无关。 展开更多
关键词 心脏缺损 先天性 弓形虫属 风疹病毒 巨细胞病毒 单纯疱疹病毒属 基因 聚合酶链反应
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非小细胞型肺癌与弓形虫感染的关系 被引量：6
2
作者 郑顺利 杨庆生 马小红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1031-1032,共2页
目的:探讨非小细胞型肺癌(NSCLC)患者弓形虫(TOX)感染的状况。方法:用酶联免疫法(ELISA)检测168例NSCLC患者、同期住院的90例非肿瘤且无自身免疫性疾病患者以及90例健康体检者血中弓形虫循环抗原(TOX-CAg)、TOX-IgG及TOX-IgM抗体阳性率... 目的:探讨非小细胞型肺癌(NSCLC)患者弓形虫(TOX)感染的状况。方法:用酶联免疫法(ELISA)检测168例NSCLC患者、同期住院的90例非肿瘤且无自身免疫性疾病患者以及90例健康体检者血中弓形虫循环抗原(TOX-CAg)、TOX-IgG及TOX-IgM抗体阳性率,比较各组间以及NSCLC组内性别、肿瘤分期和病理类型的弓形虫阳性率差异。结果:168例NSCLC患者血清中TOX-CAg阳性者34例(20.2%),TOX-IgM阳性者36例(21.4%),TOX-IgG阳性者27例(16.1%);而90例其它疾病患者血清中3者分别为9例(10.0%)、10例(11.1%)和6例(6.7%),90例健康组血清中3者分别为3例(3.3%)、4例(4.4%)和4例(4.4%);NSCLC组与其它疾病组的TOX-CAgI、gG及IgM阳性率差异均有显著性(P<0.05),NSCLC组与健康组的TOX-CAgI、gG及IgM差异更明显(P<0.01),其它疾病组与健康组的TOX-CAgI、gG及IgM差异不明显(P>0.05);另外,在肺癌分期方面,对于TOX-CAg和TOX-IgM,Ⅰ、Ⅱ期间无明显差异(P>0.05),Ⅲ、Ⅳ期间也无明显差异(P>0.05),但Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ期间差异显著(P<0.05),Ⅰ、Ⅱ期与Ⅳ期间差异显著(P<0.05或P<0.01),对于TOX-IgG抗体,各肿瘤分期间无明显差异(P>0.05);肺腺、鳞癌与其它病理类型间无明显差异(P>0.05);男女间无明显差异(P>0.05)。结论:非小细胞型肺癌患者的弓形虫感染率明显高于其他人,而且晚期肺癌的弓形虫感染率高于早期肺癌。 展开更多
关键词 弓形虫属 肺肿瘤 非小细胞型肺癌 弓形虫感染
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弓形虫GRA1基因变异及真核表达载体的构建 被引量：2
3
作者 李淑红 吴春风 +3 位作者 刘力华 谭岩 于军 潘广新 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期369-371,共3页
目的 :构建弓形虫致密颗粒抗原 1 (GRA1 )基因真核表达质粒。方法 :根据 GRA1基因已知序列 ,设计一对引物。用 PCR技术从弓形虫 RH株基因组 DNA中扩增 GRA1基因片段 ,插入 pc DNA3质粒 ,转化大肠杆菌 DH5 α感受态细胞 ,经酶切及 PCR鉴... 目的 :构建弓形虫致密颗粒抗原 1 (GRA1 )基因真核表达质粒。方法 :根据 GRA1基因已知序列 ,设计一对引物。用 PCR技术从弓形虫 RH株基因组 DNA中扩增 GRA1基因片段 ,插入 pc DNA3质粒 ,转化大肠杆菌 DH5 α感受态细胞 ,经酶切及 PCR鉴定、测序。结果 :从弓形虫 RH株基因组中扩增出 775 bp的 GRA1基因 ,测序显示该基因存在一 1 35 bp的插入序列 ,使得所得 PCR产物分子量大于预期值 (6 2 8bp)。该插入序列造成GRA1基因移码突变。结论 :首次报道了变异的弓形虫 RH株 展开更多
关键词 弓形虫属/遗传学 致密颗粒抗原1 聚合酶链反应 克隆 分子 变异(遗传学)
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弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的脾淋巴细胞持续性免疫应答 被引量：3
4
作者 孟晓丽 殷国荣 +3 位作者 吴静 唐旭 马广源 张杰 《山西医科大学学报》 CAS 2006年第9期927-930,共4页
目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的脾淋巴细胞的免疫应答及持续时间。方法96只BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μg可溶性速殖子抗原+1μg霍乱毒素)滴鼻免疫2次(间隔2周),... 目的观察弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的脾淋巴细胞的免疫应答及持续时间。方法96只BALB/c小鼠随机分为免疫组和对照组,免疫组以弓形虫复合黏膜疫苗20μl/只(20μg可溶性速殖子抗原+1μg霍乱毒素)滴鼻免疫2次(间隔2周),对照组以PBS滴鼻。分别于末次滴鼻后第1,2,3,4,6,8,10,12周处死小鼠,脾淋巴细胞计数,免疫细胞化学法检测CD4+、CD8+T细胞亚群水平。结果免疫组小鼠于第1,2周脾淋巴细胞明显高于对照组(P<0.01),其中以CD4+T细胞增生为主,第1,2,3,4,6周增生显著(P<0.01),CD8+T细胞水平在第2,3周也有增生(P<0.05),CD4+/CD8+比值第6周高于对照组(P<0.01)。结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导脾淋巴细胞增殖性免疫应答,且可持续较长时间。 展开更多
关键词 弓形虫属 黏膜疫苗 滴鼻免疫 霍乱毒素 小鼠
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经口感染弓形虫对小鼠免疫器官的影响 被引量：2
5
作者 张杰 刘红丽 +1 位作者 韩剑峰 殷国荣 《山西医科大学学报》 CAS 2004年第4期347-349,共3页
目的　研究经口感染弓形虫对小鼠免疫器官的影响。方法　两组小鼠分别灌胃接种含 5× 10 4个速殖子的液体 0 .5ml或相同剂量的PBS ,观察小鼠的体况、胸腺、脾、Peyer’spatches(PP结 )的变化。 结果　经口接种弓形虫速殖子可致小鼠... 目的　研究经口感染弓形虫对小鼠免疫器官的影响。方法　两组小鼠分别灌胃接种含 5× 10 4个速殖子的液体 0 .5ml或相同剂量的PBS ,观察小鼠的体况、胸腺、脾、Peyer’spatches(PP结 )的变化。 结果　经口接种弓形虫速殖子可致小鼠感染 ,在第 8,10天表现最为严重。胸腺重量略有减轻 ;PP结肿大 ,但数目变化不显著 ;脾脏增重 ,尤其在第 8,10天与对照组相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论　 5× 10 4个弓形虫速殖子灌胃接种可使小鼠出现一过性临床症状 ,并可以诱导机体黏膜和系统免疫应答 ,使免疫器官发生病理改变。 展开更多
关键词 弓形虫属 胸腺 脾 肠道集合淋巴结 小鼠 近交BALB C
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弓形虫在宿主体内的分布及所致病理变化的研究进展 被引量：4
6
作者 杨莎莎 殷国荣 郑明学 《山西医科大学学报》 CAS 2006年第8期863-867,共5页
关键词 弓形虫属 病理状态 体征和症状 损伤机制
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实验小鼠弓形虫检测方法的建立和应用 被引量：2
7
作者 巩薇 卫礼 +2 位作者 王吉 贺争鸣 邢瑞昌 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第4期231-234,共4页
目的建立小鼠弓形虫抗体检测方法。方法制备抗原片和可溶性抗原,免疫小鼠制备阳性对照血清,确定了IFA和ELISA检测方法的最适工作条件。根据弓形虫B1基因序列,合成一对寡聚脱氧核糖核苷酸片断,建立PCR检测体系。结果与IHA法相比较,ELISA... 目的建立小鼠弓形虫抗体检测方法。方法制备抗原片和可溶性抗原,免疫小鼠制备阳性对照血清,确定了IFA和ELISA检测方法的最适工作条件。根据弓形虫B1基因序列,合成一对寡聚脱氧核糖核苷酸片断,建立PCR检测体系。结果与IHA法相比较,ELISA、IFA的抗体检出率均显著高于IHA,抗体滴度分析,ELISA抗体滴度高于IFA法。对弓形虫感染鼠不同组织进行PCR检测,可检出特异性扩增条带。结论建立的IFA和ELISA检测方法具有灵敏度高、重复性好,结果判定明确等优点,是比较有效的监测方法。建立了弓形虫PCR检测体系,经对弓形虫DNA及病鼠各组织的初步检测,证明本PCR体系具有较高的敏感性和特异性。 展开更多
关键词 小鼠 弓形虫属 荧光抗体技术 间接酶联免疫吸附测定 聚合酶链反应
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6个弓形虫新基因的克隆与分析 被引量：1
8
作者 蒋立平 舒衡平 +2 位作者 蔡力汀 吴翔 王丹静 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第5期445-450,共6页
目的 :克隆并分析弓形虫新的抗原基因 ,为弓形虫病疫苗的研制提供有效的候选抗原分子。方法 :以弓形虫RH株速殖子感染大鼠血清作为探针筛选弓形虫cDNA文库 ,对阳性克隆的插入片段进行PCR扩增及DNA序列测定。通过互联网对测序获得的核苷... 目的 :克隆并分析弓形虫新的抗原基因 ,为弓形虫病疫苗的研制提供有效的候选抗原分子。方法 :以弓形虫RH株速殖子感染大鼠血清作为探针筛选弓形虫cDNA文库 ,对阳性克隆的插入片段进行PCR扩增及DNA序列测定。通过互联网对测序获得的核苷酸序列进行同源性分析 ,并预测新基因编码蛋白质的结构与功能。结果 :共筛选出 13个阳性克隆 ,其插入片段大小分别为 0 .4 5～ 2 .4kb。通过测序分析 ,其中新基因L3,L6 ,L7和L13分别编码 4 9,5 9,16 0和 76个氨基酸组成的非跨膜蛋白 ;新基因L11和L12基因分别编码 5 5 0和 114个氨基酸组成的跨膜蛋白。结论 展开更多
关键词 弓形虫属 抗原 克隆 序列分析 大鼠
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弓形虫14-3-3信号转导蛋白基因亚克隆及鉴定 被引量：1
9
作者 王维 汪学龙 +1 位作者 沈继龙 蒋作君 《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第1期12-14,共3页
目的　将弓形虫 14 3 3(Toxo14 3 3)信号转导蛋白基因亚克隆入表达载体pBK CMV ,用于寻找弓形虫新的诊断和候选疫苗分子以及寄生虫 宿主相互作用等研究。方法　根据Toxo14 3 3核苷酸序列设计并合成一对引物 ,以弓形虫速殖子mRNA为模板 ... 目的　将弓形虫 14 3 3(Toxo14 3 3)信号转导蛋白基因亚克隆入表达载体pBK CMV ,用于寻找弓形虫新的诊断和候选疫苗分子以及寄生虫 宿主相互作用等研究。方法　根据Toxo14 3 3核苷酸序列设计并合成一对引物 ,以弓形虫速殖子mRNA为模板 ,RT PCR法扩增Toxo14 3 3DNA片段 ,通过TA连接将其克隆入 pGEM T载体、经测序证实序列完全正确。再将该目的基因亚克隆入表达载体 pBK CMV中 ,转化大肠杆菌XL1 blue,提取质粒 ,经双酶切法和以该质粒为模板PCR法证实。结果　Toxo14 3 3信号蛋白基因ORF含 798bp ,编码 2 6 5个氨基酸。 结论　获得表达质粒pBK CMV/Toxo14 3 3阳性重组体 ,为原核和真核基因表达奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫属 基因表达 克隆 分子 信号转导 14-3-3蛋白质
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弓形虫病的感染特点及其防治措施 被引量：15
10
作者 刘英 梁涛 +2 位作者 李永辉 杨凯 张瑞君 《畜牧兽医杂志》 2015年第1期83-84,86,共3页
弓形虫病是由弓形虫科弓形虫属的弓形虫寄生于人和动物引起的疾病。目前，已知中间宿主有45种哺乳动物，70余种鸟类和5种爬行动物，终末宿主为猫和猫科动物。现已查明刚地弓形虫可以感染200余种脊椎动物，各种家畜包括猪、绵羊、山羊、... 弓形虫病是由弓形虫科弓形虫属的弓形虫寄生于人和动物引起的疾病。目前，已知中间宿主有45种哺乳动物，70余种鸟类和5种爬行动物，终末宿主为猫和猫科动物。现已查明刚地弓形虫可以感染200余种脊椎动物，各种家畜包括猪、绵羊、山羊、牛、马、犬、猫等和实验动动物和小鼠、天竺鼠、家兔等，以及人类都能感染弓形虫病，弓形虫病已被列为重要的人兽互传寄生虫病。 展开更多
关键词 弓形虫病 感染特点 防治 哺乳动物 猫科动物 寄生虫病 刚地弓形虫 弓形虫属
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弓形虫速殖子在宿主细胞内增殖与丝裂原激活蛋白激酶表达 被引量：6
11
作者 孙新 《蚌埠医学院学报》 CAS 2002年第4期283-284,294,共3页
目的 :观察RH株弓形虫速殖子在不同培养基中及在NIH3T3和MRC5细胞内的增殖 ,比较其丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)表达的差异。方法 :速殖子细胞培养观察宿主细胞的感染率 ,不同培养时间观察培养基中游离速殖子数量 ,Westernblot分析在不同... 目的 :观察RH株弓形虫速殖子在不同培养基中及在NIH3T3和MRC5细胞内的增殖 ,比较其丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)表达的差异。方法 :速殖子细胞培养观察宿主细胞的感染率 ,不同培养时间观察培养基中游离速殖子数量 ,Westernblot分析在不同条件下MAPK的表达。结果 :在MEM培养基中RH株速殖子的增殖速度明显高于在DMEM培养基中的增殖速度 ;其感染细胞百分率和培养基中游离速殖子计数均有显著差别 ;Westernblot分析表明在二者具有MAPK识别的差异。结论 :MEM和DMEM两种培养基对RH株速殖子的增殖有显著影响 ,初步结果表明其差异与MAPK有关。 展开更多
关键词 弓形虫速殖子 宿主细胞 丝裂原激活蛋白激酶 弓形虫属 弓形体病 速殖子增殖
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弓形虫P30基因非融合蛋白表达的研究 被引量：3
12
作者 丛华 古钦民 +3 位作者 周怀瑜 赵群利 何深一 李瑛 《山东医科大学学报》 2001年第6期497-499,共3页
目的 :构建弓形虫主要表面抗原P30基因的原核表达载体并在E .coli中进行表达。方法 :采用定向克隆的方法 ,将PCR扩增得到的P30片段 ,插入原核表达质粒 pBV2 2 0上 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,于氨苄LB培养平板上筛选阳性克隆 ,经过... 目的 :构建弓形虫主要表面抗原P30基因的原核表达载体并在E .coli中进行表达。方法 :采用定向克隆的方法 ,将PCR扩增得到的P30片段 ,插入原核表达质粒 pBV2 2 0上 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,于氨苄LB培养平板上筛选阳性克隆 ,经过酶切及PCR扩增鉴定重组子。将含阳性重组子 pBV2 2 0 P30的工程菌经温度诱导表达 ,SDS PAGE电泳及免疫印迹分析。结果 :成功构建了 pBV2 2 0 P30重组质粒 ;SDS PAGE电泳及Western blot显示表达P30非融合蛋白的分子量为 2 9kD ,且能被弓形虫高免鼠血清识别。结论 :从弓形虫基因组DNA中获取P30基因 ,并成功构建了 pBV2 2 0 P30重组质粒 ,诱导表达了P30非融合蛋白。对弓形虫病基因疫苗研制奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫属 P30基因 基因表达
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弓形虫的感染途径和预防 被引量：6
13
作者 徐军 孙新 《疾病控制杂志》 2007年第5期512-515,共4页
弓形虫是一种世界范围内广泛分布的机会致病原虫,人类普遍易感且感染途径广泛,先天性和免疫缺陷者获得性弓形虫病危害较为严重。对于人类感染弓形虫途径的深入了解,有助于更好的预防弓形虫感染。
关键词 弓形虫属 感染 一级预防
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融合蛋白弓形虫主要表面抗原P30-CTXA2/B在大肠杆菌中的表达
14
作者 古钦民 于瑾 +6 位作者 王伟 卞继峰 何深一 周怀瑜 李瑛 赵群力 丛华 《山东大学学报（医学版）》 CAS 2002年第3期210-212,共3页
目的 :克隆并表达含有刚地弓形虫主要表面抗原P30及霍乱毒素A2 /B亚基基因的原核表达载体 ,为弓形虫疫苗的研究奠定基础。方法 :通过PCR方法扩增出P30基因片段 ,将其克隆入含有霍乱毒素A2 /B亚基基因的表达质粒pUAB0 2 4 ,在大肠杆菌JM1... 目的 :克隆并表达含有刚地弓形虫主要表面抗原P30及霍乱毒素A2 /B亚基基因的原核表达载体 ,为弓形虫疫苗的研究奠定基础。方法 :通过PCR方法扩增出P30基因片段 ,将其克隆入含有霍乱毒素A2 /B亚基基因的表达质粒pUAB0 2 4 ,在大肠杆菌JM10 9(DE3)中表达融合蛋白。行SDS PAGE电泳及West ernblotting检测鉴定。结果 :酶切电泳证明质粒构建正确。SDS PAGE显示IPTG诱导可以产生特异性条带。Westernblotting进一步证实该条带为p30 CTA2 /B融合蛋白。结论 :成功构建的表达载体pUAB0 2 4 p30可有效表达特异性的融合抗原蛋白P30 CTA2 /B。 展开更多
关键词 弓形虫属 霍乱毒素 基因表达 大肠杆菌
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编码弓形虫表面抗原P30、P22复合基因真核表达载体的构建
15
作者 郭岚 古钦民 +4 位作者 李瑛 周怀瑜 赵群力 丛华 何深一 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第1期8-11,共4页
目的　构建编码弓形虫RH株表面抗原P30、P22复合基因的真核表达重组质粒, 为进一步表达融合蛋白及研制核酸疫苗做准备。　方法　用弓形虫RH株腹腔接种小鼠,收集腹水,酚/氯仿法抽提弓形虫基因组 DNA;用 PCR技术从基因组DNA中扩增编码表... 目的　构建编码弓形虫RH株表面抗原P30、P22复合基因的真核表达重组质粒, 为进一步表达融合蛋白及研制核酸疫苗做准备。　方法　用弓形虫RH株腹腔接种小鼠,收集腹水,酚/氯仿法抽提弓形虫基因组 DNA;用 PCR技术从基因组DNA中扩增编码表面抗原 P30、P22 的基因片段,分别重组入 pMD18 T载体中。将 pMD18 T载体中的P30、P22基因片段分别酶切,定向克隆入 pUC18克隆载体中, pUC18 P30 P22 中的 P30 P22 片段经酶切、纯化后,亚克隆入 pcDNA3.1( )真核表达载体,用酶切、PCR及测序的方法对重组子进行鉴定。　结果　从弓形虫 RH株基因组DNA中扩增出特异的P30及P22片段;大小均与预测值相符;克隆 pUC18 P30 P22 重组质粒的酶切片段分别与 P30、P22基因大小一致;经亚克隆、筛选鉴定获得了 pcDNA3.1 P30 P22重组质粒,所测P30、P22基因序列与文献报道一致。结论　成功构建弓形虫 pUC18 P30 P22重组质粒和 pcDNA3.1 P30 P22 重组质粒,为研制弓形虫 DNA疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 弓形虫属 P30基因 P22基因 克隆
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一例犬弓形虫病的诊治与体会
16
作者 文英会 金喜新 裴亚玲 《中国畜禽种业》 2016年第9期120-121,共2页
弓形虫病是由孢子虫纲、弓形虫属的龚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种寄生于动物或人细胞内的多宿主原虫病,是一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。弓形虫病对人危害较大,尤其是妇女和儿童,孕妇感染后可导致早产、流产、胎儿... 弓形虫病是由孢子虫纲、弓形虫属的龚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种寄生于动物或人细胞内的多宿主原虫病,是一种呈世界性分布的人畜共患寄生虫病。弓形虫病对人危害较大,尤其是妇女和儿童,孕妇感染后可导致早产、流产、胎儿发育畸形等症状。犬猫等是该病原的携带动物,是重要的传染源。随着家庭饲养犬等宠物的数量不断增加. 展开更多
关键词 弓形虫病 龚地弓形虫 人畜共患寄生虫 孢子虫纲 孕妇感染 多宿主 弓形虫属 原虫病 TOXOPLASMA 犬猫
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青海省弓形虫病的调查 被引量：5
17
作者 冬梅 王晓润 《四川畜牧兽医》 2009年第8期30-31,共2页
弓形虫病是由肉孢子虫科（Sarcocystidae）、弓形虫亚科（Toxoplasmatinae）、弓形虫属（Toxoplasma）的刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）寄生于人、畜引起的一种疾病。其临床特征为发热、腹泻、呼吸困难和中枢神经系统障碍等。
关键词 弓形虫病 青海省 刚地弓形虫 肉孢子虫 弓形虫属 临床特征 系统障碍 中枢神经
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弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒的构建与表达 被引量：1
18
作者 綦廷娜 石畅 +2 位作者 汪政勇 宗永丽 李金福 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第3期286-291,共6页
目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)... 目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3.1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1和pc DNA3.1(+)-GRA1,继而构建重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1;设pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1为实验组、pc DNA3.1(+)为对照组分别转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法鉴定其在NIH3T3细胞中的表达。结果:限制性内切酶双酶切及DNA测序分析结果显示,插入pc DNA3.1(+)的片段分别为1008 bp、570 bp和1578 bp,与预期的SAG1、GRA1和SAG1-GRA1复合基因分子大小相当、序列一致;免疫荧光染色法结果显示,转染重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1的NIH3T3细胞内观察到较强的绿色荧光,而转染pc DNA3.1(+)的NIH3T3细胞内未见绿色荧光。结论:成功构建了弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒pc DNA3.1(+)-SAG1-GRA1,且该重组质粒携带的SAG1-GRA1复合基因在NIH3T3细胞中获得表达。 展开更多
关键词 弓形虫属 SAG1基因 GRA1基因 基因重组 重组质粒 体外表达
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猪弓形虫病的调查与诊疗措施
19
作者 刘墨秀 李敬双 《畜牧兽医科技信息》 2007年第2期60-61,共2页
关键词 猪弓形虫病 人畜共患原虫病 诊疗 弓形虫属 发病情况 死亡率 发病率 养猪业
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武定县猪弓形虫病的血清学调查
20
作者 杨明银 杨培昌 +2 位作者 肖俊 文忠 胡自华 《养殖技术顾问》 2011年第10期87-88,共2页
弓形虫病是由弓形虫属的刚地弓形虫重要人、兽共患寄生虫病。人感染弓形虫病的主要原因是食用了未煮熟的含有包囊的肉，或是因误食了终末宿主猫排出的感染性卵囊，对免疫力低下者以及孕妇的危害表现较为突出，孕妇感染弓形虫后，
关键词 猪弓形虫病 血清学调查 刚地弓形虫 感染性 弓形虫属 寄生虫病 终末宿主 危害表现
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