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利用往返电泳法(R-PAGE)检测马铃薯纺锤块茎类病毒技术要点
1
作者
邱彩玲
《中国马铃薯》
2014年第4期233-234,共2页
目前国内普遍采用的往返电泳法是检测马铃薯类病毒的主要方法之一,但该方法存在灵敏度低,重复性差等问题。因此,针对上述问题总结出一些技术要点:(1)保证植物生长环境及正确取样;(2)提高凝胶中RNA的浓度和质量;(3)控制好反向电泳的温度...
目前国内普遍采用的往返电泳法是检测马铃薯类病毒的主要方法之一,但该方法存在灵敏度低,重复性差等问题。因此,针对上述问题总结出一些技术要点:(1)保证植物生长环境及正确取样;(2)提高凝胶中RNA的浓度和质量;(3)控制好反向电泳的温度和时间;(4)及时更换染色液。
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关键词
往返电泳
马铃薯类病毒
技术要点
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职称材料
梨皱果类病毒的RTP-CR分析及鉴定
被引量:
2
2
作者
施圆圆
夏立秋
+1 位作者
刘萍
杨希才
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2006年第S2期85-91,共7页
类病毒是由247~600个核苷酸组成的单链、共价闭合环状RNA,无蛋白质外壳.采用酚-氯仿抽提法提取梨中类病毒的粗核酸,再用DEAE纤维素过柱纯化;通过往返电泳检测,对比ASSVd,可知梨类病毒基因长度在328bp左右.设计引物,RTP-CR扩增此类病毒...
类病毒是由247~600个核苷酸组成的单链、共价闭合环状RNA,无蛋白质外壳.采用酚-氯仿抽提法提取梨中类病毒的粗核酸,再用DEAE纤维素过柱纯化;通过往返电泳检测,对比ASSVd,可知梨类病毒基因长度在328bp左右.设计引物,RTP-CR扩增此类病毒,除去所得PCR产物中的酶蛋白、单核苷酸等,再转化大肠杆菌DH5α;挑取阳性转化子,用碱性裂解法小量提取转化子质粒DNA;进行EcoRⅠ和HaeШ酶切鉴定,结果与预期的梨皱果类病毒基因大小一致.
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关键词
梨皱果类病毒
往返电泳
RTP-CR
克隆
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职称材料
桑花叶型萎缩病病原研究初报
被引量:
13
3
作者
卢全有
夏志松
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期249-251,共3页
通过往返双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)和垂直双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)检测,发现从桑花叶型萎缩病的病叶组织中提取的总核酸中存在环状小分子RNA,即类病毒RNA。根据桑花叶型萎缩病的症状和发生规律以及植物类病毒病的定...
通过往返双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)和垂直双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)检测,发现从桑花叶型萎缩病的病叶组织中提取的总核酸中存在环状小分子RNA,即类病毒RNA。根据桑花叶型萎缩病的症状和发生规律以及植物类病毒病的定义,认为这种环状小分子RNA可能是引起桑花叶型萎缩病的病原。
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关键词
桑花叶型萎缩病
往返
双向聚丙烯酰胺凝胶
电泳
垂直双向聚丙烯酰胺凝胶
电泳
类病毒
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职称材料
桑树花叶型萎缩病病株叶片组织中类似类病毒小分子RNA的检测与分析
被引量:
2
4
作者
卢全有
夏志松
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期1017-1021,共5页
为了能有效检测桑树中的类似类病毒小分子RNA(mscRNA),给解明mscRNA与桑树花叶型萎缩病发生的关系提供依据,以来自不同蚕区和不同季节发病桑园中的桑树花叶型萎缩病病株叶片为材料,采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法分别提取病叶组织中的m...
为了能有效检测桑树中的类似类病毒小分子RNA(mscRNA),给解明mscRNA与桑树花叶型萎缩病发生的关系提供依据,以来自不同蚕区和不同季节发病桑园中的桑树花叶型萎缩病病株叶片为材料,采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法分别提取病叶组织中的mscRNA,然后利用往返聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)进行检测鉴定,并对mscRNA在2mol/LLiCl溶液中的溶解性及该检测方法的灵敏度进行分析。结果显示:采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法都可以有效地提取阳性材料中含有的mscRNA;在溶解及不溶于2mol/LLiCl的阳性材料RNA样品中均含有丰富的mscRNA,mscRNA在LiCl溶液中的溶解性与已知类病毒的溶解性有很大的差异;当提取的病桑叶片组织总RNA量为480ng时,通过Return-PAGE可以检测到mscRNA,当总RNA量≤96ng时,已检测不到其中含有的mscRNA;在36株发病植株的叶片总RNA样品中,有7个样品检测出含有mscRNA,检出率约19%,在一些病症明显的植株样品中未检测出mscRNA,而在一些病症较轻的植株样品中却检测出mscRNA。检测结果提示:mscRNA与桑树花叶型萎缩病症的表现没有表现出明显的关联。
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关键词
桑树花叶型萎缩病
类似类病毒小分子RNA
溶解性
往返
聚丙烯酰胺凝胶
电泳
原文传递
题名
利用往返电泳法(R-PAGE)检测马铃薯纺锤块茎类病毒技术要点
1
作者
邱彩玲
机构
黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所
东北农业大学
出处
《中国马铃薯》
2014年第4期233-234,共2页
基金
哈尔滨市应用技术研究与开发项目(2013AE6AW059)
现代农业产业技术体系专项资金资助项目(CARS-10-P14)
文摘
目前国内普遍采用的往返电泳法是检测马铃薯类病毒的主要方法之一,但该方法存在灵敏度低,重复性差等问题。因此,针对上述问题总结出一些技术要点:(1)保证植物生长环境及正确取样;(2)提高凝胶中RNA的浓度和质量;(3)控制好反向电泳的温度和时间;(4)及时更换染色液。
关键词
往返电泳
马铃薯类病毒
技术要点
Keywords
return-polyacrylamide gel electrophoresis (R-PAGE)
potato spindle tuber viroid (PSTVd)
technical point
分类号
S435.32 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
梨皱果类病毒的RTP-CR分析及鉴定
被引量:
2
2
作者
施圆圆
夏立秋
刘萍
杨希才
机构
湖南师范大学生命科学学院
中国科学院微生物研究所
出处
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2006年第S2期85-91,共7页
文摘
类病毒是由247~600个核苷酸组成的单链、共价闭合环状RNA,无蛋白质外壳.采用酚-氯仿抽提法提取梨中类病毒的粗核酸,再用DEAE纤维素过柱纯化;通过往返电泳检测,对比ASSVd,可知梨类病毒基因长度在328bp左右.设计引物,RTP-CR扩增此类病毒,除去所得PCR产物中的酶蛋白、单核苷酸等,再转化大肠杆菌DH5α;挑取阳性转化子,用碱性裂解法小量提取转化子质粒DNA;进行EcoRⅠ和HaeШ酶切鉴定,结果与预期的梨皱果类病毒基因大小一致.
关键词
梨皱果类病毒
往返电泳
RTP-CR
克隆
Keywords
pear crinkled skin viroid
round electrophoresis
RT-PCR
clone
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
S432.41 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
桑花叶型萎缩病病原研究初报
被引量:
13
3
作者
卢全有
夏志松
机构
中国农业科学院蚕业研究所农业部家蚕生物技术重点开放实验室
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期249-251,共3页
文摘
通过往返双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)和垂直双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)检测,发现从桑花叶型萎缩病的病叶组织中提取的总核酸中存在环状小分子RNA,即类病毒RNA。根据桑花叶型萎缩病的症状和发生规律以及植物类病毒病的定义,认为这种环状小分子RNA可能是引起桑花叶型萎缩病的病原。
关键词
桑花叶型萎缩病
往返
双向聚丙烯酰胺凝胶
电泳
垂直双向聚丙烯酰胺凝胶
电泳
类病毒
Keywords
Mulberry mosaic dwarf disease
Return-PAGE
2D-PAGE
Viroid
分类号
S888.71 [农业科学—特种经济动物饲养]
下载PDF
职称材料
题名
桑树花叶型萎缩病病株叶片组织中类似类病毒小分子RNA的检测与分析
被引量:
2
4
作者
卢全有
夏志松
机构
中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点开放实验室
江苏科技大学
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期1017-1021,共5页
基金
江苏省自然科学基金项目(No.BK2006084)
文摘
为了能有效检测桑树中的类似类病毒小分子RNA(mscRNA),给解明mscRNA与桑树花叶型萎缩病发生的关系提供依据,以来自不同蚕区和不同季节发病桑园中的桑树花叶型萎缩病病株叶片为材料,采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法分别提取病叶组织中的mscRNA,然后利用往返聚丙烯酰胺凝胶电泳(Return-PAGE)进行检测鉴定,并对mscRNA在2mol/LLiCl溶液中的溶解性及该检测方法的灵敏度进行分析。结果显示:采用LiCl法和DEAE纤维素柱层析法都可以有效地提取阳性材料中含有的mscRNA;在溶解及不溶于2mol/LLiCl的阳性材料RNA样品中均含有丰富的mscRNA,mscRNA在LiCl溶液中的溶解性与已知类病毒的溶解性有很大的差异;当提取的病桑叶片组织总RNA量为480ng时,通过Return-PAGE可以检测到mscRNA,当总RNA量≤96ng时,已检测不到其中含有的mscRNA;在36株发病植株的叶片总RNA样品中,有7个样品检测出含有mscRNA,检出率约19%,在一些病症明显的植株样品中未检测出mscRNA,而在一些病症较轻的植株样品中却检测出mscRNA。检测结果提示:mscRNA与桑树花叶型萎缩病症的表现没有表现出明显的关联。
关键词
桑树花叶型萎缩病
类似类病毒小分子RNA
溶解性
往返
聚丙烯酰胺凝胶
电泳
Keywords
Mulberry mosaic dwarf disease
Viroid-like small RNA
Solubility
Return-PAGE
分类号
S888.712 [农业科学—特种经济动物饲养]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用往返电泳法(R-PAGE)检测马铃薯纺锤块茎类病毒技术要点
邱彩玲
《中国马铃薯》
2014
0
下载PDF
职称材料
2
梨皱果类病毒的RTP-CR分析及鉴定
施圆圆
夏立秋
刘萍
杨希才
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2006
2
下载PDF
职称材料
3
桑花叶型萎缩病病原研究初报
卢全有
夏志松
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2006
13
下载PDF
职称材料
4
桑树花叶型萎缩病病株叶片组织中类似类病毒小分子RNA的检测与分析
卢全有
夏志松
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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