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检测棘球蚴病患者血清内循环抗原的免疫层析试条的制备和评价
1
作者 张璟 王颖 +3 位作者 高春花 危芙蓉 贾孝凯 石锋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期166-170,共5页
目的以棘球蚴囊液纯化抗原特异性单克隆抗体为基础建立一种快速、简便诊断棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法,并对其进行评价。方法纯化棘球蚴囊液抗原,并以此免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其... 目的以棘球蚴囊液纯化抗原特异性单克隆抗体为基础建立一种快速、简便诊断棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法,并对其进行评价。方法纯化棘球蚴囊液抗原,并以此免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价。筛选基于棘球蚴囊液纯化抗原制备的单克隆抗体对,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记筛选到的单克隆抗体,并将其吸附于交联垫;将另一筛选到的单克隆抗体划线包被于同一硝酸纤维素膜适当位置,制成免疫层析试条。用该试条检测手术确诊的细粒棘球蚴病(87例)、多房棘球蚴病(40例)、囊尾蚴病(25例)、日本血吸虫病(10例)、弓形虫病(5例)、并殖吸虫病(5例)、华支睾吸虫病(5例)患者血清,以及60例健康者血清,以评价其检测的敏感性和特异性。结果以棘球蚴囊液纯化抗原为免疫源制备单克隆抗体,共筛选了11株能高效分泌效价在1∶25600~1∶102400特异抗体的细胞株,抗体亚类为IgG_(1)或IgG_(2)a。筛选到的单克隆抗体F 3B 6作为标记抗体,单克隆抗体C 4H 6作为包被抗体制成免疫层析试条,用该试条检测127份棘球蚴病患者血清的敏感性为88.12%(112/127),其中试条检测囊型包虫病患者血清的敏感性为88.51%(77/87),检测泡型包虫病患者血清的敏感性为87.50%(35/40),试条法检测两型包虫病患者血清敏感性之间差异无统计学意义(χ^(2)=0.03,P=0.86)。与25份囊尾蚴病患者血清、10份日本血吸虫病患者血清、5份弓形虫病患者血清、5份并殖吸虫病患者血清和5份华支睾吸虫病患者血清均无交叉反应,60份健康者血清也均为阴性,总特异性为100.00%。结论成功制备了棘球蚴囊液纯化抗原的单克隆抗体,以此单抗为基础研制出的快速诊断棘球蚴病胶体金免疫层析试条敏感性、特异性均较高。 展开更多
关键词 棘球蚴病 单克隆抗体 循环抗原 免疫层析试条 检测 评价
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纳米金棒应用于肝吸虫血清循环抗原检测的研究
2
作者 陈丽萍 廉晓丽 +3 位作者 蔡子涵 李倩 欧阳天昭 杨毅梅 《大理大学学报》 2023年第10期27-33,共7页
目的:研究纳米金棒对肝吸虫病早期及低虫荷的检测效应。方法:纳米金棒标记不同浓度巯基化的肝吸虫特异性IgG抗体,用紫外分光光度计扫描纳米金棒吸收峰,观察吸收峰位移大小,优选出最佳标记浓度;用纳米金棒标记最佳浓度抗体,检测不同感染... 目的:研究纳米金棒对肝吸虫病早期及低虫荷的检测效应。方法:纳米金棒标记不同浓度巯基化的肝吸虫特异性IgG抗体,用紫外分光光度计扫描纳米金棒吸收峰,观察吸收峰位移大小,优选出最佳标记浓度;用纳米金棒标记最佳浓度抗体,检测不同感染度、不同感染时间及不同稀释度的大鼠血清循环抗原。结果:纳米金棒标记20μg/mL抗体时,吸收峰位移最大为20.0 nm;肝吸虫特异性IgG抗体纳米金棒可检出50、100、200条囊蚴感染后3、10、17、31 d的血清循环抗原及稀释度为1︰400的血清循环抗原。结论:肝吸虫特异性IgG抗体纳米金棒对肝吸虫病早期及低虫荷的检测具有明显优势。 展开更多
关键词 纳米金棒 肝吸虫 循环抗原 特异性IGG抗体 检测
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ELISA双单克隆抗体夹心法检测弓形虫循环抗原的实验研究 被引量：17
3
作者 傅翠娥 陈彩华 +5 位作者 蒋柏鸣 郑志国 杨旭明 杨纪顺 朱冠 范学理 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期19-19,共1页
用酶联免疫吸附试验(ELISA)双单克隆抗体夹心法,检测人工感染弓形虫家兔血清循环抗原(CAg)的累积阳性频率。在潜伏期内,重、中度感染兔CAg阳性率分别为30.8及11.1％;急性期、亚急性期和慢性早期的阳性率,中度感染兔分别为86.1及76.7％,... 用酶联免疫吸附试验(ELISA)双单克隆抗体夹心法,检测人工感染弓形虫家兔血清循环抗原(CAg)的累积阳性频率。在潜伏期内,重、中度感染兔CAg阳性率分别为30.8及11.1％;急性期、亚急性期和慢性早期的阳性率,中度感染兔分别为86.1及76.7％,轻度感染兔分别为43.3及32％。中、轻度感染兔的CAg阳性率在急性期逐步上升,而在亚急性、慢性早期逐步下降。健康兔、血吸虫病及球虫病兔的血清试验,均阴性。本法检测CAg的效果高于其他3种双抗体法,提示有较高的特异性、敏感性和重现性,可诊断弓形虫急性或活动性感染。 展开更多
关键词 弓形体 ELISA 单克隆抗体 循环抗原
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血吸虫循环抗原检测的现场试验Ⅰ 被引量：17
4
作者 严自助 王文 +4 位作者 吕再婴 唐为忠 吴缨 胡万富 王之怀 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1992年第5期275-277,共3页
将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫... 将血吸虫肠相关趋阴极抗原的单克隆抗体用于Dot—ELISA,共检测2175份血清,其中急性血吸虫病血清210份,阳性率为91.9％;慢性血吸虫病血清798份,阳性率为86.7％;正常人血清752份,假阳性率为1.1％;除肺吸虫病外,对其他寄生虫病或非寄生虫感染疾病血清无明显交叉反应。用单盲法Dot—ELISA检测3批血清,结果敏感性为86.5％～95.1％;特异性为96.9％～100.0％。检测流行区居民547份血清,Dot—ELISA阳性反应130份;粪检阳性72例。两者均为阳性者55例,相符率为76.4％。上述结果表明,Dot—ELISA检测循环抗原确实具有较好的敏感性与特异性,适于大规模应用及流行病学调查。 展开更多
关键词 血吸虫病 循环抗原 单克隆抗体 Dot—ELISA
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单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原的研究Ⅱ 被引量：23
5
作者 严自助 吕再婴 +1 位作者 王文 吴缨 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1990年第2期39-42,共4页
将血吸虫肠相关阳极抗原单克隆抗体1B10A标记过氧化物酶后用于Dot-ELISA检测了急、慢性血吸虫病人血清中循环抗原,阳性率分别为90％、80.8％,除肺吸虫外,对其他主要的寄生虫病感染、非寄生虫感染性疾病及正常人无阳性反应。检测EPG>8... 将血吸虫肠相关阳极抗原单克隆抗体1B10A标记过氧化物酶后用于Dot-ELISA检测了急、慢性血吸虫病人血清中循环抗原,阳性率分别为90％、80.8％,除肺吸虫外,对其他主要的寄生虫病感染、非寄生虫感染性疾病及正常人无阳性反应。检测EPG>80病人血清中的抗原水平高于EPG<80者;病人经有效药物治疗后,粪检阳性者,大部分抗原检测转为阴性,其余抗原滴度呈不同程度下降。将该单克隆抗体与肠相关阴极抗原的单克隆抗体,分别检测同批血清,结果基本一致。将肠相关阳极抗原与阴极抗原的单克隆抗体联合应用,能增强某些弱反应。 展开更多
关键词 循环抗原 DOT-ELISA 抗原检测 单克隆抗体 病人血清 阳性反应 肠相 关阳 感染性疾病 关阴
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血吸虫循环抗原检测及疗效考核价值 被引量：14
6
作者 石佑恩 韩家俊 +1 位作者 邓伟文 刘世国 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1996年第5期277-280,共4页
采用单克隆抗体(McAb)S31/32双夹心ELISA法检测感染不同寄生虫病人血清中循环抗原(CAg)427份,其中慢性血吸虫病188例,阳性检出率为95.2%,晚期血吸虫病阳性率4.5%(2/44),正常53人假阳性率5.7%.测定其他寄生虫感染患者及肝炎病人,除发现... 采用单克隆抗体(McAb)S31/32双夹心ELISA法检测感染不同寄生虫病人血清中循环抗原(CAg)427份,其中慢性血吸虫病188例,阳性检出率为95.2%,晚期血吸虫病阳性率4.5%(2/44),正常53人假阳性率5.7%.测定其他寄生虫感染患者及肝炎病人,除发现肺吸虫病、旋毛虫病和华枝睾吸虫病有交叉反应外,其它均呈阴性反应.同时,检测血吸虫病治疗前、后CAg,计495 份血清,慢性血吸虫病治疗前188例,阳性率95.2%,吡喹酮治疗后3、6、12和36个月,其阴转率分别为20.4%、31.9%、96.2%和87.7%.比较双夹心ELISA法和一步法ELISA检查CAg,无显著差异.测试结果提示,采用单抗S31/32建立的双夹心ELISA检测血吸虫循环抗原有很高的敏感性和良好的特异性,病人在治疗后一年其阴转率高,有很好的疗效考核价值. 展开更多
关键词 日本血吸虫 循环抗原 疗效考核 单克隆抗体
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日本血吸虫循环抗原动态消长的实验研究 被引量：12
7
作者 刘世国 石佑恩 +1 位作者 韩家俊 邓伟文 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期283-286,共4页
目的：了解日本血吸虫三类循环抗原（ＣＡｇ）在感染家兔的动态变化及治疗后的消长情况。方法：制备日本血吸虫的三株单抗，以辣根过氧化物酶标记，分别建立检测日本血吸虫肠相关抗原（ＧＡＡ）、膜相关抗原（ＭＡＡ）和可溶性虫卵抗原... 目的：了解日本血吸虫三类循环抗原（ＣＡｇ）在感染家兔的动态变化及治疗后的消长情况。方法：制备日本血吸虫的三株单抗，以辣根过氧化物酶标记，分别建立检测日本血吸虫肠相关抗原（ＧＡＡ）、膜相关抗原（ＭＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的斑点酶联免疫吸附试验（ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），观察感染日本血吸虫家兔血中三类抗原的动态变化情况。结果：家兔感染后第４ｗｋ，有３９％家兔血中ＧＡＡ呈阳性反应，而仅８．６％家兔ＭＡＡ、ＳＥＡ呈阳性反应，第８ｗｋ三类ＣＡｇ均呈阳性反应，并于第１０ｗｋ左右达高峰。未治疗组家兔直至感染后第２７ｗｋ，血中三类ＣＡｇ一直维持较高水平。感染后第９ｗｋ家兔接受吡喹酮治疗，治疗后第４ｗｋ，ＣＡｇ水平开始下降，治疗后第６ｗｋ有１０％家兔ＳＥＡ阴转，治疗后第８ｗｋ，ＧＡＡ阴转率为２０％，ＳＥＡ为７０％，ＭＡＡ为８０％，治疗后第１４ｗｋ除１例外，三类ＣＡｇ全部阴转。结论：ＧＡＡ早期诊断效果较好，而ＭＡＡ和ＳＥＡ在治疗后较ＧＡＡ消失快。 展开更多
关键词 日本血吸虫 循环抗原 动态观察 疗效
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检测血清和脑脊液中囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病的研究 被引量：7
8
作者 蔺心敬 李桂苹 +3 位作者 霍海英 徐风全 李庆山 赵中平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期146-147,共2页
目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中囊尾蚴循环抗原（ Ｃ Ａｇ）诊断脑囊虫病。方法：用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ提纯的蛋白质分子量为 ６４ ｋ Ｄａ、５３ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 的囊尾蚴抗原... 目的：用抗血清检测脑囊虫病患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中囊尾蚴循环抗原（ Ｃ Ａｇ）诊断脑囊虫病。方法：用 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ提纯的蛋白质分子量为 ６４ ｋ Ｄａ、５３ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 的囊尾蚴抗原分别免疫家兔，制备相应的抗血清，以双夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ。结果：抗５３ ｋ Ｄａ 抗原抗血清对 ３２ 例脑囊虫病活动型患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ａｇ 的检出率分别为９３．８％ 和９１．７％ ，１６ 例脑囊虫病非活动型患者仅１ 例 Ｃ Ｓ Ｆ Ｃ Ａｇ 阳性。 Ｃ Ａｇ 检出率明显高于用抗６４ ｋ Ｄａ、３２ ｋ Ｄａ～３０ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测的结果（ Ｐ＜ ０．０５）。结论：抗５３ ｋ Ｄａ 囊尾蚴抗原抗血清检测活动型脑囊虫病患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中的 Ｃ Ａｇ 敏感性较高，特异性较强，可用于活动型脑囊虫病的诊断和疗效考核。 展开更多
关键词 脑囊虫病 循环抗原 SDS-PAGE ELISA 诊断
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弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原的检测 被引量：9
9
作者 金武官 李云珠 +2 位作者 俞善昌 杨惠珍 钱宗立 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期117-118,共2页
目的：探索弓形虫感染早期诊断方法。方法：用快速ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原。结果：在轻、中、重３个感染组，分别于感染后ｄ４、ｄ４及ｄ３检测到弓形虫循环抗原。结论：感染虫体数量越多则弓形虫循环抗原测出... 目的：探索弓形虫感染早期诊断方法。方法：用快速ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原。结果：在轻、中、重３个感染组，分别于感染后ｄ４、ｄ４及ｄ３检测到弓形虫循环抗原。结论：感染虫体数量越多则弓形虫循环抗原测出时间越早，ＯＤ值亦越高。检测弓形虫循环抗原具有早期诊断价值。 展开更多
关键词 弓形虫 循环抗原 鼠血清 弓形体病
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SPA-ELISA检测弓形虫感染鼠尿中的循环抗原 被引量：10
10
作者 金武官 李云珠 +1 位作者 俞善昌 杨惠珍 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期43-45,共3页
[目的 ]探索弓形虫感染早期诊断的简便方法。 [方法 ]用SPA ELISA检测轻度、中度和重度感染弓形虫鼠尿中弓形虫循环抗原 (TCA)。 [结果 ]轻度、中度和重度感染弓形虫 3组鼠尿中均检出TCA ,上述 3组分别于弓形虫感染后d6 、d3和d4显示阳... [目的 ]探索弓形虫感染早期诊断的简便方法。 [方法 ]用SPA ELISA检测轻度、中度和重度感染弓形虫鼠尿中弓形虫循环抗原 (TCA)。 [结果 ]轻度、中度和重度感染弓形虫 3组鼠尿中均检出TCA ,上述 3组分别于弓形虫感染后d6 、d3和d4显示阳性斑点。 [结论 ]SPA ELISA能检出弓形虫感染鼠尿中的弓形虫循环抗原 ,可用于弓形虫感染的早期诊断。 展开更多
关键词 循环抗原 SPA-ELISA 弓形体病 IGG 制备
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日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究 被引量：11
11
作者 娄文娴 张恩英 +5 位作者 俞安洲 许东红 杨士静 沈大康 朱旭明 薛纯良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期5-10,共6页
目的：探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。方法：感染日本血吸虫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴结Ｂ细胞和小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０株）融合，制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探针，检测日本血吸虫病患者和... 目的：探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。方法：感染日本血吸虫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴结Ｂ细胞和小鼠骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０株）融合，制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探针，检测日本血吸虫病患者和正常人血清；晚期血吸虫病患者脾血和外周血；感染日本血吸虫兔和小鼠的门脉血和外周血。结果：获得９种抗日本血吸虫单克隆抗体，将其中抗不同抗原表位的单抗优化组合后使用，检测抗原的敏感性可提高４－８倍。用组合单抗建立的夹心ＥＬＩＳＡ和ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测慢性血吸虫病的敏感性分别为７４％和８４．２％，特异性分别为９６．１％和９５．７％。通过小鼠和家兔门脉血和外周血以及人的脾血和外周血循环抗原的比较研究表明，门脉血中的抗原水平明显高于外周血。结论：用组合单抗较用一种单抗提高检出率。ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测的不仅是循环抗原，同时还检测到免疫复合物，因此影响疗效考核。 展开更多
关键词 日本血吸虫 单克隆抗体 循环抗原
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抗血吸虫成虫表膜抗原单克隆抗体检测循环抗原及/或免疫复合物的实验研究 被引量：8
12
作者 裘丽姝 薛海筹 +3 位作者 陆键 张永红 朱震霞 李浩 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期177-180,共4页
本文报告用单克隆抗体检测血吸虫感染兔血清中循环抗原及/或免疫复合物的实验结果.以血吸虫成虫盐水浸液抗原ACSE免疫BALB/c小鼠,取其脾脏与SP2/0骨髓瘤细胞融合获得抗成虫表膜的单克隆抗体8SE_4。此抗体经DE_(52)柱层析提纯后制成HRP-8... 本文报告用单克隆抗体检测血吸虫感染兔血清中循环抗原及/或免疫复合物的实验结果.以血吸虫成虫盐水浸液抗原ACSE免疫BALB/c小鼠,取其脾脏与SP2/0骨髓瘤细胞融合获得抗成虫表膜的单克隆抗体8SE_4。此抗体经DE_(52)柱层析提纯后制成HRP-8SE_4结合物.血清样本与HRP-8SE_4作用后加入PEG(mw·6000)沉淀免疫复合物,然后加入底物OPD显色,于492nm读数,OD值即反映血循环中抗原及/或免疫复合物的量。实验结果表明5只重感染兔(接种尾蚴15O0～2000条)于感染后6wk可见OD值明显升高,达到感染前的1.9～4.5倍。5只轻感染兔接种尾蚴10～500条亦于感染6wk后OD值明显上升,至感染后8wk达高峰,此后至11wk剖杀时仍维持在较高水平.5轻感染兔检虫数为4～326条,未见虫荷与检测结果有明显相关。本实验结果提示感染兔血清中有循环表膜抗原及/或其复合物存在。至于检测该抗原能否用于考核治疗效果,有待进一步研究。 展开更多
关键词 日本血吸虫 表膜 循环抗原
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谷胱甘肽-S-转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血吸虫循环抗原的研究 被引量：8
13
作者 汤益 张素娥 +5 位作者 刘述先 施晓华 宋光承 徐裕信 蒋健敏 屠乐鸣 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2000年第2期97-99,共3页
目的探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体力捕获并检测抗体，建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测... 目的探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体力捕获并检测抗体，建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测定法和ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果３种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为１００％；对慢性血吸虫病的敏感性分别为７６．４％、９８．１％和９６．２％；特异性分别为９５．０％、９８．０％和９６．０％。结论ｒＳｊ２６ＧＳＴ抗原对日本血吸虫病具有诊断价值，可望有较好的应用前景。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 诊断 多克隆抗体 循环抗原
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弓形虫感染的循环抗原检测的研究 被引量：10
14
作者 郭小华 陈观今 +2 位作者 徐秉锟 郑焕钦 刘达宏 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期178-181,共4页
本文首次报道应用竞争抑制酶联免疫吸附试验(I-ELISA)观察到人工感染弓形虫兔血清循环抗原的消长规律。在感染后1d即可测出循环抗原(CA),4d后CA水平升高,10—13d达高峰,然后迅速下降,感染60d后测不到。提示CA的检测对弓形虫的活动性感... 本文首次报道应用竞争抑制酶联免疫吸附试验(I-ELISA)观察到人工感染弓形虫兔血清循环抗原的消长规律。在感染后1d即可测出循环抗原(CA),4d后CA水平升高,10—13d达高峰,然后迅速下降,感染60d后测不到。提示CA的检测对弓形虫的活动性感染具有较好的诊断价值。结果还表明I-ELISA是一种敏感、特异性高、简便而快速的检测CA的方法。 展开更多
关键词 弓形体 循环抗原 感染 ELISA
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Dot-ELISA检测血吸虫循环抗原的方法学研究 被引量：11
15
作者 严自助 吕再婴 +1 位作者 王文 吴缨 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 1991年第4期211-213,共3页
本文观察了影响单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫循环抗原的有关因素。经改进后的方法,以国产纤维薄膜为载体,0.05％Tw20作为封闭剂,整个反应时间缩短至1.5h,与原方法检测同批病人血清及正常人血清,无论敏感性、特异性与反应强度均一致... 本文观察了影响单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫循环抗原的有关因素。经改进后的方法,以国产纤维薄膜为载体,0.05％Tw20作为封闭剂,整个反应时间缩短至1.5h,与原方法检测同批病人血清及正常人血清,无论敏感性、特异性与反应强度均一致。改进后的方法,节省试剂,降低成本,缩短时间,更利于推广应用。 展开更多
关键词 循环抗原 DOT-ELISA 病人血清 正常人血清 单克隆抗体 试剂盒 反应强度 封闭剂 特异性 结合物
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金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究 被引量：22
16
作者 沈丽英 干小仙 +2 位作者 丁建祖 沈慧英 樊晋江 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期12-14,共3页
目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上，以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体，金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧ... 目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上，以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体，金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧＦＡ。结果　用该法检测了急性血吸病人血清３０ 人份和慢性血吸病人血清３８ 人份，其阳性检出率分别为１００ ％ 和５２－６ ％ ；１２０ 人份流行区健康人血清全为阴性；１００ 人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为１００％ ，与１０ 例华支睾病人血清无交叉反应；１５ 例肺吸虫病人血清有１ 例阳性，交叉反应率为６－７ ％ ；与双夹心ＥＬＩＳＡ的符合率为９７－４％ ，经χ２ 检验表明两法检测效果无显著性差异。结论　用ＤＩＧＦＡ检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备，有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 血吸虫病 循环抗原 金标免疫渗滤法
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卵黄抗体IgY检测血吸虫病人循环抗原的初步研究 被引量：8
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作者 张炜明 吴玉龙 +4 位作者 刘文琪 仇镇宁 冯振卿 李雍龙 管晓虹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2008年第1期16-19,共4页
目的探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)卵黄抗体(IgY)检测血吸虫循环抗原的应用价值。方法以纯化的鸡IgY作为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病人和健康人血清,并... 目的探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)卵黄抗体(IgY)检测血吸虫循环抗原的应用价值。方法以纯化的鸡IgY作为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验法(SEA-ELISA)作比较。结果S-ELISA测得SEA浓度(y)与吸光度(A450)值(x)呈明显的正相关(y=459.22x-108.14,r=0.9481)。急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100.00%(9/9),慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84.44%(38/45),健康人的特异性为96.00%(48/50)。两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论S-ELISA具有较好的敏感性和特异性,可用于血吸虫病免疫诊断。 展开更多
关键词 血吸虫病 免疫诊断 循环抗原 IGY 可溶性虫卵抗原 酶联免疫吸附试验
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滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究 被引量：14
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作者 刘玉冰 张洪花 +4 位作者 徐洪秀 贾凤菊 江洪涛 韩广东 葛凌云 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期84-86,共3页
目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗... 目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。 展开更多
关键词 囊虫病 滴金免疫测定法 单克隆抗体 循环抗原 诊断
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弓形虫感染鼠尿中循环抗原的检测 被引量：6
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作者 金武官 杨惠珍 +2 位作者 姜昌斌 徐克继 钱宗立 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期60-62,共3页
用快速ELISA检测弓形虫感染鼠的尿液,在轻、中、重三个感染组分别在感染后第5、4、3d检测到弓形虫循环抗原。实验结果显示弓形虫循环抗原的浓度与感染天数相平行,这在国内为首次报道。用免疫印迹法分析感染小鼠尿中弓形虫循环抗原,其特... 用快速ELISA检测弓形虫感染鼠的尿液,在轻、中、重三个感染组分别在感染后第5、4、3d检测到弓形虫循环抗原。实验结果显示弓形虫循环抗原的浓度与感染天数相平行,这在国内为首次报道。用免疫印迹法分析感染小鼠尿中弓形虫循环抗原,其特异区带为75、67、55、43、30、28、22 kDa。 展开更多
关键词 弓形虫 循环抗原 鼠尿
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应用单克隆抗体检测脑囊虫病患者的循环抗原(英文) 被引量：7
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作者 郭增柱 黄敏君 +2 位作者 安亦军 黄松 姜洪杰 《热带医学杂志》 CAS 2005年第2期113-115,共3页
目的评价单克隆抗体检测循环抗原(CAg)诊断脑囊虫病的价值。方法用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体4B6,以ELISA方法检测患者和对照者血清和/或脑脊液中的猪囊虫抗原。结果82例脑囊虫病患者血清CAg阳性率为79.2%(65/82),脑脊液CAg阳性率... 目的评价单克隆抗体检测循环抗原(CAg)诊断脑囊虫病的价值。方法用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体4B6,以ELISA方法检测患者和对照者血清和/或脑脊液中的猪囊虫抗原。结果82例脑囊虫病患者血清CAg阳性率为79.2%(65/82),脑脊液CAg阳性率为100%(26/26),治疗一个疗程后血清CAg转阴率为85%(17/20)。从对照者标本中未检出猪囊虫CAg。4B6和包虫抗原有轻微交叉反应。结论CAg检测,尤其是脑脊液CAg检测有助于脑囊虫病的诊断,而血清CAg检测则有助于疗效考核。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 脑囊虫病 循环抗原 单克隆抗体 ELISA
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