目的研究间充质干细胞来源外泌体微小核糖核酸-3614-5p(miR-3614-5p)对模型大鼠先兆子痫(preeclampsia,PE)进展的调节作用及相关机制。方法将36只SD大鼠(24只雌性和12只雄性)以雌雄比例2∶1合笼饲养自然受孕。24只妊娠大鼠随机分为假手...目的研究间充质干细胞来源外泌体微小核糖核酸-3614-5p(miR-3614-5p)对模型大鼠先兆子痫(preeclampsia,PE)进展的调节作用及相关机制。方法将36只SD大鼠(24只雌性和12只雄性)以雌雄比例2∶1合笼饲养自然受孕。24只妊娠大鼠随机分为假手术组(sham组)、PE模型组(PE组)和外泌体miR-3614-5p组(PE+exo组),每组8只。PE组通过皮下注射100 mg/kg的NG-硝基-L-精氨酸甲酯建立大鼠PE模型;PE+exo组构建PE模型,同时在第14天腹腔注射160μg/ml的外泌体悬液(0.5 ml/只/天),连续6天,实验持续21天;sham组则给予等量生理盐水。在妊娠第0,7,14和21天测量血压和尿蛋白浓度。RT-qPCR检测miR-3614-5p水平及B细胞淋巴瘤病-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)的mRNA水平;ELISA检测Caspase-3活性、活性氧(ROS)水平及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe2+)含量;Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白水平。结果与sham组大鼠相比,PE组大鼠的胎盘组织(0.43±0.05 vs 1.01±0.07)和外周血(0.51±0.07vs 1.01±0.12)中miR-3614-5p表达显著下调,差异具有统计学意义(t=19.070,10.180,均P<0.01)。与上清液相比,源自MSCs的外泌体中miR-3614-5p显著富集。与sham组相比,PE组大鼠第21天的舒张压(175.43±6.02 mmHg vs113.26±5.11 mmHg)、收缩压(123.57±5.63 mmHg vs 82.63±5.26 mmHg)及尿蛋白含量(175.48±13.21 mg/ml vs67.65±5.76 mg/ml)显著升高(t=22.606,16.440,23.168,均P<0.01);与PE组相比,PE+exo组舒张压(124.57±5.33mmHg vs 175.43±6.02 mmHg)、收缩压(89.76±3.88 mmHg vs 123.57±5.63 mmHg)及尿蛋白含量(97.69±7.23 mg/ml vs 175.48±13.21 mg/ml)显著降低,差异具有统计学意义(t=18.493,13.577,16.713,均P<0.01)。与sham组相比,PE组大鼠胎盘组织中Caspase-3活性(238.56%±13.22%vs 100.12%±5.93%)、Bax水平(3.18±0.71 vs 1.01±0.11)、ROS水平(387.65%±25.98%vs 100.51%±5.89%)、MDA含量(33.21±3.17 nmol/mg vs 14.83±2.69 nmol/mg)和Fe2+浓度(38.77±6.53 nmol/ml vs 17.51±3.15 nmol/ml)显著升高,而Bcl-2水平(0.47±0.08 vs 1.01±0.12)、GSH含量(4.12±1.22 nmol/mg vs 9.76±0.93 nmol/mg)、GPX4蛋白(0.48±0.06 vs 1.01±0.24)和SLC7A11蛋白(0.51±0.11vs 1.01±0.11)水平则显著降低(t=6.459~32.863,均P<0.01);与PE组相比,PE+exo组胎盘组织中Caspase-3活性(117.35%±8.67%vs 238.56%±13.22%)、Bax水平(1.13±0.45 vs 3.18±0.71)、ROS水平(128.73%±14.37%vs387.65%±25.98%)、MDA含量(18.13±3.89 nmol/mg vs 33.21±3.17 nmol/mg)和Fe2+浓度(19.05±3.45 nmol/ml vs38.77±6.53 nmol/ml)显著降低,而Bcl-2水平(1.04±0.11 vs 0.47±0.08),GSH含量(7.86±1.07 nmol/mg vs 4.12±1.22nmol/mg),GPX4蛋白(0.98±0.14 vs 0.48±0.06)和SLC7A11蛋白(1.11±0.09 vs 0.51±0.11)水平则显著升高,差异具有统计学意义(t=6.093~29.633,均P<0.01)。结论miR-3614-5p在PE模型大鼠的胎盘组织和外周血中显著下调。MSCs来源的外泌体miR-3614-5p通过抑制铁死亡改善大鼠的PE进展。MSCs来源的外泌体miR-3614-5p可能是PE治疗的一个新的潜在的生物标志物。展开更多
文摘目的研究间充质干细胞来源外泌体微小核糖核酸-3614-5p(miR-3614-5p)对模型大鼠先兆子痫(preeclampsia,PE)进展的调节作用及相关机制。方法将36只SD大鼠(24只雌性和12只雄性)以雌雄比例2∶1合笼饲养自然受孕。24只妊娠大鼠随机分为假手术组(sham组)、PE模型组(PE组)和外泌体miR-3614-5p组(PE+exo组),每组8只。PE组通过皮下注射100 mg/kg的NG-硝基-L-精氨酸甲酯建立大鼠PE模型;PE+exo组构建PE模型,同时在第14天腹腔注射160μg/ml的外泌体悬液(0.5 ml/只/天),连续6天,实验持续21天;sham组则给予等量生理盐水。在妊娠第0,7,14和21天测量血压和尿蛋白浓度。RT-qPCR检测miR-3614-5p水平及B细胞淋巴瘤病-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)的mRNA水平;ELISA检测Caspase-3活性、活性氧(ROS)水平及丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和亚铁离子(Fe2+)含量;Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)蛋白水平。结果与sham组大鼠相比,PE组大鼠的胎盘组织(0.43±0.05 vs 1.01±0.07)和外周血(0.51±0.07vs 1.01±0.12)中miR-3614-5p表达显著下调,差异具有统计学意义(t=19.070,10.180,均P<0.01)。与上清液相比,源自MSCs的外泌体中miR-3614-5p显著富集。与sham组相比,PE组大鼠第21天的舒张压(175.43±6.02 mmHg vs113.26±5.11 mmHg)、收缩压(123.57±5.63 mmHg vs 82.63±5.26 mmHg)及尿蛋白含量(175.48±13.21 mg/ml vs67.65±5.76 mg/ml)显著升高(t=22.606,16.440,23.168,均P<0.01);与PE组相比,PE+exo组舒张压(124.57±5.33mmHg vs 175.43±6.02 mmHg)、收缩压(89.76±3.88 mmHg vs 123.57±5.63 mmHg)及尿蛋白含量(97.69±7.23 mg/ml vs 175.48±13.21 mg/ml)显著降低,差异具有统计学意义(t=18.493,13.577,16.713,均P<0.01)。与sham组相比,PE组大鼠胎盘组织中Caspase-3活性(238.56%±13.22%vs 100.12%±5.93%)、Bax水平(3.18±0.71 vs 1.01±0.11)、ROS水平(387.65%±25.98%vs 100.51%±5.89%)、MDA含量(33.21±3.17 nmol/mg vs 14.83±2.69 nmol/mg)和Fe2+浓度(38.77±6.53 nmol/ml vs 17.51±3.15 nmol/ml)显著升高,而Bcl-2水平(0.47±0.08 vs 1.01±0.12)、GSH含量(4.12±1.22 nmol/mg vs 9.76±0.93 nmol/mg)、GPX4蛋白(0.48±0.06 vs 1.01±0.24)和SLC7A11蛋白(0.51±0.11vs 1.01±0.11)水平则显著降低(t=6.459~32.863,均P<0.01);与PE组相比,PE+exo组胎盘组织中Caspase-3活性(117.35%±8.67%vs 238.56%±13.22%)、Bax水平(1.13±0.45 vs 3.18±0.71)、ROS水平(128.73%±14.37%vs387.65%±25.98%)、MDA含量(18.13±3.89 nmol/mg vs 33.21±3.17 nmol/mg)和Fe2+浓度(19.05±3.45 nmol/ml vs38.77±6.53 nmol/ml)显著降低,而Bcl-2水平(1.04±0.11 vs 0.47±0.08),GSH含量(7.86±1.07 nmol/mg vs 4.12±1.22nmol/mg),GPX4蛋白(0.98±0.14 vs 0.48±0.06)和SLC7A11蛋白(1.11±0.09 vs 0.51±0.11)水平则显著升高,差异具有统计学意义(t=6.093~29.633,均P<0.01)。结论miR-3614-5p在PE模型大鼠的胎盘组织和外周血中显著下调。MSCs来源的外泌体miR-3614-5p通过抑制铁死亡改善大鼠的PE进展。MSCs来源的外泌体miR-3614-5p可能是PE治疗的一个新的潜在的生物标志物。
