慢性心力衰竭患者血浆循环微小RNA-19b的表达情况分析 被引量：3

1

作者 张婧 张恩翔 +2 位作者 王洪江 王喆 池洪杰 《中国医刊》 CAS 2022年第6期621-625,共5页

目的探讨慢性心力衰竭(简称心衰)患者血浆循环微小RNA(mirco RNA,miR)-19b与N末端B型利钠肽前体(N-terminal pro-B type natriuretic peptide,NT-proBNP)及心功能的相关性,评价循环miR-19b对慢性心衰的诊断及评估价值。方法选择首都医... 目的探讨慢性心力衰竭(简称心衰)患者血浆循环微小RNA(mirco RNA,miR)-19b与N末端B型利钠肽前体(N-terminal pro-B type natriuretic peptide,NT-proBNP)及心功能的相关性,评价循环miR-19b对慢性心衰的诊断及评估价值。方法选择首都医科大学附属北京朝阳医院2016年10月至2018年11月收住院的心衰患者208例作为心衰组,根据左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)及舒张早期快速充盈波和舒张晚期心房收缩波充盈速度比(E/A)将心衰组患者分为收缩性心衰组(LVEF<45%)及舒张性心衰组(LVEF≥45%),根据年龄将心衰组分为≥60岁组与<60岁组。选取同期住院的年龄及性别匹配的非心衰冠心病及高血压患者80例作为对照组。记录所有患者的年龄、性别、病史、实验室检查及用药情况等临床资料。所有患者于入院次日晨起空腹取血,使用反转录聚合酶链反应检测血浆中循环mi R-19b的表达水平并进行组间比较,采用多因素logistic回归分析心衰患者血浆循环mi R-19b水平与NT-pro BNP及心功能的相关性。结果心衰组的循环mi R-19b表达水平为1.039±0.348,明显低于对照组(1.341±0.381),差异有显著性(P<0.05);收缩性心衰组循环mi R-19b表达水平(1.005±0.377)与舒张性心衰组(1.055±0.340)比较差异无显著性(P=0.335)。多因素logistic回归分析显示,纠正心衰发生其他相关因素后,mi R-19b仍与心衰呈负相关。受试者工作特征曲线分析显示,循环mi R-19b诊断心衰的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.739±0.035(P<0.05),NT-pro BNP诊断心衰的AUC为0.896±0.024(P<0.05),NT-pro BNP与mi RNA-19b比值诊断心衰的AUC为0.902±0.023(P<0.05)。结论心衰患者血浆循环mi R-19b的表达水平降低,且不受心脏收缩功能、舒张功能及年龄的影响,对心衰具有辅助诊断价值。 展开更多

关键词 微小rna-19b 心力衰竭 N末端b型利钠肽前体 心功能

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微小RNA-19b协同5-氮胞苷对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响 被引量：1

2

作者 周琦 明强 +1 位作者 刘敏 骆春艳 《岭南心血管病杂志》 CAS 2021年第5期587-592,共6页

目的探讨微小RNA(micro RNA,miR)-19b对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem sells,BMSCs)分化的影响,并研究其协同5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对BMSCs分化成心肌样细胞的作用。方法分离培养SD大鼠BMSCs,细胞鉴定后使用mi... 目的探讨微小RNA(micro RNA,miR)-19b对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem sells,BMSCs)分化的影响,并研究其协同5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)对BMSCs分化成心肌样细胞的作用。方法分离培养SD大鼠BMSCs,细胞鉴定后使用miR-19b mimics/inhibitor转染BMSCs,实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测转染效率。采用10μmol/L 5-aza干预转染后的BMSCs,观察细胞形态学变化。采用Western blot检测诱导后BMSCs中心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)、和心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)表达。结果与5-aza诱导的BMSCs相比,miR-19b mimics转染后的BMSCs无明显形态学变化,5-aza诱导的miR-19b mimics组细胞形态变化最大,细胞体积变大,细胞聚集呈涡旋样,而5-aza诱导的miR-19b inhibitor组细胞形态变化不明显。与对照组比较,miR-19b mimics组ANP、cTnI及cTnT蛋白表达水平明显升高,而miR-19b inhibitor组ANP、cTnI及cTnT蛋白表达水平明显降低。结论miR-19b无诱导BMSCs分化的能力,但协同5-aza诱导BMSCs可提高其向心肌样细胞分化的能力。 展开更多

关键词 微小rna-19b 骨髓间充质干细胞 5-氮胞苷 心肌样细胞

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老年冠心病患者PCI术后血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平变化及意义

3

作者 郑彬彬 范晓涌 +2 位作者 柴辉 佟勤红 吴瑷斌 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期1541-1544,共4页

目的 探讨老年冠心病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后血清细胞间黏附分子(ICAM)-1、微小RNA(miR)-19b、视黄醇结合蛋白(RBP)4水平变化及意义。方法 选取因行PCI术住院治疗的老年冠心病患者115例,根据PCI术后6个月的随访结果分为预后不良... 目的 探讨老年冠心病患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后血清细胞间黏附分子(ICAM)-1、微小RNA(miR)-19b、视黄醇结合蛋白(RBP)4水平变化及意义。方法 选取因行PCI术住院治疗的老年冠心病患者115例,根据PCI术后6个月的随访结果分为预后不良组24例,预后良好组91例。收集老年冠心病患者的性别、年龄、体质量指数(BMI)、饮酒史、吸烟史、发病至球囊扩张时间、多支病变、病程、支架长度、支架直径,病变部位(右冠状动脉、左前降支、左回旋支),冠状动脉Gensini评分。分别于PCI术前、术后3 d采集外周静脉血5 ml,分离血清,检测血清ICAM-1、RBP4水平及miR-196表达。PCI术后进行6个月随访,记录主要不良心血管事件发生情况。结果 预后不良组发病至球囊扩张时间、多支病变比例、冠状动脉Gensini评分明显高于预后良好组(P<0.05)。老年冠心病患者PCI术后3 d血清ICAM-1、RBP4浓度明显低于术前,血清miR-19b表达水平明显高于术前(P<0.01)。预后不良组血清ICAM-1、RBP4水平明显高于预后良好组,血清miR-19b表达水平明显低于预后良好组(P<0.05)。多支病变比例、冠状动脉Gensini评分及血清ICAM-1、miR-19b、RBP4水平是PCI预后的独立影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清ICAM-1、miR-19b、RBP4对老年冠心病患者PCI预后均具有较高的预测价值(P<0.01)。将血清ICAM-1、miR-19b、RBP4纳入Logistic回归模型结果显示,各指标联合检测的预测价值最高[曲线下面积(AUC)=0.942]。结论 老年冠心病患者PCI术后3 d血清ICAM-1、RBP4浓度明显下降,血清miR-19b表达水平明显升高;血清ICAM-1、miR-19b、RBP4联合检测可用于患者PCI预后评估。 展开更多

关键词 冠心病 经皮冠状动脉介入 细胞间黏附分子1 微小rna-19b 视黄醇结合蛋白4

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微小RNA-19b对急性坏死性胰腺炎腺泡细胞坏死的作用 被引量：6

4

作者 罗乾坤 张宏伟 +3 位作者 秦涛 胡明星 张亚平 刘传江 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期333-335,共3页

目的 观察微小RNA-19b（miRNA,miR-19b）在大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）中的表达变化及其对腺泡细胞坏死的作用.方法 建立ANP模型：接种AR42J细胞1＆#215;105个/孔于24孔板,24 h后加入200 μm/L牛磺石胆酸-3-硫酸酯二钠盐（TLC-S）,1h... 目的 观察微小RNA-19b（miRNA,miR-19b）在大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）中的表达变化及其对腺泡细胞坏死的作用.方法 建立ANP模型：接种AR42J细胞1＆#215;105个/孔于24孔板,24 h后加入200 μm/L牛磺石胆酸-3-硫酸酯二钠盐（TLC-S）,1h后检测淀粉酶和miR-19b表达量.病毒转染及分组：转染腺病毒介导miR-19b模拟物（mimic）为mimic组,转染miRNA反义寡核苷酸链（AMO）为AMO组,转染空病毒组及未转染病毒的空白组,转染48 h后荧光检测转染效率,诱导ANP,实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测miR-19b的表达量,吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）双染色法检测AR42J细胞坏死率.结果 TLC-S处理后AR42J细胞较未处理细胞淀粉酶水平[（1 084.5±64.9）U/L比（290.3 ±6.8）U/L]明显升高（P＜0.05）,miR-19b表达量升高（2.51±0.14）倍,建立模型成功;mimic组miR-19b表达量较空病毒组升高（5.94±0.95）倍,AR42J细胞坏死率明显升高[（50.3±1.5）％比（39.6±2.3）％,P ＜0.05];AMO组miR-19b表达量降低（0.38±0.15）倍,AR42J细胞坏死率明显降低[（23.1±3.3）％比（39.6±2.3）％,P＜0.05];空病毒组比空白组miR-19b表达量、细胞坏死率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 miR-19b表达量在ANP中升高,上调其表达,腺泡细胞坏死率增加,下调其表达,腺泡细胞坏死率降低. 展开更多

关键词 微小rna-19b 急性胰腺炎 腺泡细胞 坏死

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微小RNA-19b调节锌指蛋白13对骨肉瘤细胞增殖凋亡的影响 被引量：1

5

作者 王庆生 孙晓海 +3 位作者 叶湛 李祥 王发圣 刘勇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2254-2256,共3页

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-19b是否通过转录后上调癌基因低密度脂蛋白受Kruppel样因子13(KLF13)的表达而促进人骨肉瘤细胞增殖与凋亡.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测人骨肉瘤细胞株和正常人成骨细胞中miR-19b与KLF1... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-19b是否通过转录后上调癌基因低密度脂蛋白受Kruppel样因子13(KLF13)的表达而促进人骨肉瘤细胞增殖与凋亡.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测人骨肉瘤细胞株和正常人成骨细胞中miR-19b与KLF13基因的表达;使用miR-19b抑制物(hsa-miR-19b inhibitor)抑制骨肉瘤细胞株中miR-19b的表达活性,应用荧光素酶活性实验和蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-19b与靶基因KLF13表达调控的影响.并进一步采用四唑氮化合物(MTS)法和流式细胞仪检测MG-63细胞的增殖和凋亡变化.结果miR-19b及KLF13基因在骨肉瘤细胞株(MG-63、US-OS和Saos-2)及人成骨细胞(hFOB 1.19)相对表达分别为665.66±39.74、517.75±26.82、564.88±41.20和16.09±4.80,差异有统计学意义(均P<0.05).荧光素报告载体实验表明KLF13是miR-19b直接调控的靶基因.Western blot检测结果提示,导入反义寡核苷酸抑制miR-19b的表达后,KLF13的表达水平明显下降,对照组为0.783±0.053,实验组分别为0.424±0.021、0.265±0.016.进一步观察到此时骨肉瘤细胞MG-63的增殖能力显著抑制、凋亡显著增加,与阴性对照组比较差异有统计学意义(均P<0.01);而抑制KLF13的表达可以明显促进miR-19b介导的骨肉瘤细胞增殖和凋亡抑制.结论miR-19b可通过上调靶向癌基因KLF13的表达来促进骨肉瘤细胞的增殖和抑制骨肉瘤细胞的凋亡. 展开更多

关键词 骨肉瘤 微小rna-19b Kruppel样因子13 细胞增殖 凋亡

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微小RNA-19b在胰腺导管腺癌增殖及转移中的作用 被引量：1

6

作者 胡明星 付强 +2 位作者 张旭 禹鹏飞 秦涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1425-1428,共4页

目的检测微小RNA（miRNA，miR）-19b在胰腺导管腺癌（PDAC）细胞株中的表达量，探讨miR-19b在PDAC细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测人胰腺导管正常上皮细胞HPDE、人PDAC细胞株PANC1、M... 目的检测微小RNA（miRNA，miR）-19b在胰腺导管腺癌（PDAC）细胞株中的表达量，探讨miR-19b在PDAC细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测人胰腺导管正常上皮细胞HPDE、人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及人PDAC转移细胞株COLO357、FG中miR-19b的表达水平；构建miR-19b稳定高表达及低表达细胞株。通过Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验验证miR-19b沉默和高表达的PDAC细胞迁移和侵袭能力改变；通过噻唑蓝（MTT）实验和克隆形成实验检测miR-19b沉默及高表达后PDAC细胞增殖能力的变化，并通过Western blot进一步检测PDAC细胞增殖标志物p21及p27在miR-19b沉默及高表达后表达量改变。结果RT-qPCR检测结果显示与人胰腺导管正常上皮细胞HPDE中miR-19b表达量（98.21±14.54）比较，人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及转移细胞株COLO357、FG中miR-19b的表达量（198.45±21.22、221.37±18.59、182.51±13.48、317.64±15.20、331.34±17.18）明显升高（P=0.003、0.005、0.021、0.001、0.001），差异有统计学意义；Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验显示miR-19b沉默后FG细胞的迁移和侵袭能力[（22.54±2.87）%、（28.87±5.62）%]与对照组[（99.65±3.07）%、（98.73±4.38）%]比较明显下降（P=0.005、0.002），差异有统计学意义；相反BxPC3细胞过表达miR-19b的细胞的迁移和侵袭能力[（317.53±10.21）%、（286.77±12.83）%]与对照组[（97.89±5.31）%、（98.25±7.57）%]比较明显升高（P=0.003、0.007），差异有统计学意义；克隆形成实验和MTT实验检测发现miR-19b沉默后PDAC细胞增殖能力与对照组比较明显降低（P=0.003、0.005），差异有统计学意义，miR-19b过表达后PDAC细胞增殖能力与对照组比较明显增强（P=0.002、0.007），差异有统计学意义；Western blot结果显示miR-19b沉默后PDAC细胞增殖标志物p21及p27表达量与对照组比较升高（3.25±0.27、5.38±0.33）倍（P=0.003、0.001），差异有统计学意义；miR-19b高表达后p21及p27表达量与对照组比较下降（2.68±0.15、3.27±0.27）倍（P=0.006、0.005），差异有统计学意义。结论miR-19b可促进PDAC细胞迁移和侵袭，可增强PDAC细胞增殖能力。 展开更多

关键词 微小rna-19b 胰腺导管腺癌 转移 增殖

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微小RNA-19b在胰腺导管腺癌增殖、迁移及侵袭中的作用

7

作者 胡明星 付强 +2 位作者 张旭 禹鹏飞 秦涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期615-618,共4页

目的检测微小RNA(miRNA,miR)-19b在胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株中的表达,探讨miR-19b在PDAC细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人胰腺导管正常上皮细胞HPDE、人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、B... 目的检测微小RNA(miRNA,miR)-19b在胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株中的表达,探讨miR-19b在PDAC细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人胰腺导管正常上皮细胞HPDE、人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及人PDAC转移细胞株COLO357和FG中miR-19b的表达水平;构建miR-19b稳定高表达及低表达细胞株。通过Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验验证miR-19b沉默和高表达的PDAC细胞迁移和侵袭能力改变;通过噻唑蓝(MTT)实验和克隆形成实验检测miR-19b沉默及高表达后PDAC细胞增殖能力的变化,并通过Western blot进一步检测PDAC细胞增殖标志物p21及p27在miR-19b沉默及高表达后的表达量改变。结果RT-qPCR检测结果显示与人胰腺导管正常上皮细胞HPDE中miR-19b表达量(98.21±14.54)比较,人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及转移细胞株COLO357、FG中miR-19b的表达量(198.45±21.22、221.37±18.59、182.51±13.48、317.64±15.20、331.34±17.18)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验显示miR-19b沉默后FG细胞的迁移和侵袭能力[(22.54±2.87)%、(28.87±5.62)%]与对照组[(99.65±3.07)%、(98.73±4.38)%]比较明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);相反BxPC3细胞过表达miR-19b的细胞的迁移和侵袭能力[(317.53±10.21)%、(286.77±12.83)%]与对照组[(97.89±5.31)%、(98.25±7.57)%]比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);克隆形成实验和MTT实验检测显示miR-19b沉默后PDAC细胞增殖能力[(41.23±0.45)%]与对照组[(62.45±0.21)%]比较明显降低(P<0.01),差异有统计学意义;miR-19b过表达后PDAC细胞增殖能力[(78.27±0.35)%]与对照组[(61.21±0.33)%]比较明显增强,差异有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示miR-19b沉默后PDAC细胞增殖标志物p21及p27表达量与对照组比较升高(3.25±0.27)、(5.38±0.33)倍,差异有统计学意义(P<0.01);miR-19b高表达后p21及p27表达量与对照组比较下降(2.68±0.15)、(3.27±0.27)倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论miR-19b可促进PDAC细胞迁移和侵袭,可增强PDAC细胞增殖能力。 展开更多

关键词 胰腺癌 微小rna-19b 转移 增殖

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血清miR-92a、miR-17、miR-19b对冠心病患者冠状动脉病变程度的评估价值 被引量：2

8

作者 王双双 张斌强 +5 位作者 钱航 徐先琳 陈孝强 唐俊 翟宇新 陈继舜 《山东医药》 CAS 2023年第7期76-79,共4页

目的 探讨血清微小RNA-92a(miR-92a)、miR-17、miR-19b对冠心病(CAD)患者冠状动脉(冠脉)病变程度的评估价值。方法 选取因胸闷胸痛不适行冠脉造影检查的92例患者,依据造影检查结果分为对照组30例、CAD组62例。用Gensini评分评估CAD组冠... 目的 探讨血清微小RNA-92a(miR-92a)、miR-17、miR-19b对冠心病(CAD)患者冠状动脉(冠脉)病变程度的评估价值。方法 选取因胸闷胸痛不适行冠脉造影检查的92例患者,依据造影检查结果分为对照组30例、CAD组62例。用Gensini评分评估CAD组冠脉病变情况,并将CAD患者分为低评分组(≤40分)32例、高评分组(>40分)30例。收集各组临床资料;用实时荧光定量PCR法检测各组血清miR-92a、miR-17、miR-19b表达;用多因素Logistic回归模型分析CAD发生的影响因素;用Spearman相关分析法分析血清miRNA表达与Gensini积分的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miRNA对CAD病情的评估价值。结果 CAD组HDL-C低于对照组(P<0.05),两组其他临床资料比较差异无统计学意义(P均>0.05)。CAD组miR-92a、miR-17相对表达量高于对照组,miR-19b相对表达量低于对照组(P均<0.05)。miR-92a、miR-17表达升高为CAD发生的危险因素(P均<0.05),miR-19b表达升高为CAD发生的保护因素(P均<0.05)。高评分组血清miR-92a、miR-17相对表达量高于低评分组(P均<0.05),血清miR-19b相对表达量低于低评分组(P<0.05)。CAD患者血清miR-92a、miR-17相对表达量与Gensini积分呈正相关(rs分别为0.529、0.519,P均<0.05),血清miR-19b相对表达量与Gensini积分呈负相关(rs=-0.579,P<0.05)。血清miR-92a、miR-17、miR-19b及三者联合评估CAD患者冠脉病变程度的曲线下面积分别为0.806(95%CI:0.695~0.917)、0.800(95%CI:0.689~0.911)、0.834(95%CI:0.737~0.932)、0.967(95%CI:0.930~1.000)。三者联合评估CAD冠脉病变程度的曲线下面积高于单独评估(P均<0.05)。结论 血清miR-92a、miR-17、miR-19b可作为CAD患者冠状动脉病变程度的评估指标,三者联合检测评估价值更高。 展开更多

关键词 冠心病 微小rna-92a 微小rna-17 微小rna-19b 冠脉病变程度

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血清miRNA-19b在早期非小细胞肺癌辅助诊断中的临床价值 被引量：1

9

作者 王达 马异峰 +3 位作者 马尚 白万秋 居文福 时广利 《临床肺科杂志》 2022年第8期1172-1175,共4页

目的通过检测血清miRNA-19b在早期(I和Ⅱ期)非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的相对表达量,分析miRNA-19b在早期NSCLC诊断中的临床应用价值。方法应用qRT-PCR法检测100例早期NSCLC患者和50名体检正常人miRNA-19b的相对表达水平,通过ROC曲线判... 目的通过检测血清miRNA-19b在早期(I和Ⅱ期)非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的相对表达量,分析miRNA-19b在早期NSCLC诊断中的临床应用价值。方法应用qRT-PCR法检测100例早期NSCLC患者和50名体检正常人miRNA-19b的相对表达水平,通过ROC曲线判断其诊断价值,并与目前临床常用的肿瘤标志物癌胚抗原和细胞角蛋白比较。结果miRNA-19b在健康人对照中的表达量明显低于早期NSCLC,差异有显著统计学意义(P<0.001)。血清miRNA-19b在早期NSCLC中的敏感性(63.0%)显著高于癌胚抗原和细胞角蛋白的敏感性(4.0%和9.0%),差异均有显著统计学意义(P<0.001)。ROC曲线分析显示血清miRNA-19b在早期NSCLC中的辅助诊断价值明显好于癌胚抗原和细胞角蛋白。结论血清miRNA-19b在早期NSCLC辅助诊断中的价值显著优于癌胚抗原和细胞角蛋白,具有非常大的潜在临床应用价值。 展开更多

关键词 血清微小rna-19b 早期非小细胞肺癌 辅助诊断

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miR-19b沉默对P19细胞分化及线粒体功能的影响 被引量：2

10

作者 刘雪华 朱莎莎 +6 位作者 余章斌 朱春 李萌萌 韩树萍 胡晓山 朱金改 彭宇竹 《东南大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第5期704-709,共6页

目的:通过沉默微小RNA-19b(miR-19b)研究miR-19b对P19细胞分化及线粒体功能的影响。方法:转染miR-19b沉默质粒与空载质粒进入P19细胞建立起稳定的细胞系;线粒体功能分析用以检测细胞凋亡;诱导分化P19细胞,实时定量荧光PCR检测miR-19b沉... 目的:通过沉默微小RNA-19b(miR-19b)研究miR-19b对P19细胞分化及线粒体功能的影响。方法:转染miR-19b沉默质粒与空载质粒进入P19细胞建立起稳定的细胞系;线粒体功能分析用以检测细胞凋亡;诱导分化P19细胞,实时定量荧光PCR检测miR-19b沉默后细胞分化关键基因表达水平。结果:Target Scan 5.1软件及双荧光素酶报告基因系统共同证实,Wnt1为miR-19b在P19细胞中发挥作用的靶点(P<0.05);测定第0、4、6、8、10、12天c Tn T、NKX2.5、GATA4等基因的核酸表达量显示,心肌分化相关标志基因逐渐增高,miR-19b沉默组明显低于对照组(P<0.05);于分化第10天检测线粒体功能,发现miR-19b沉默组线粒体DNA拷贝数的相对含量高于对照组,其活性氧水平显著低于对照组,ATP水平也高于对照组(均P<0.05)。结论:miR-19b沉默可抑制细胞凋亡,抑制心肌细胞分化。 展开更多

关键词 微小rna-19b沉默 P19细胞 线粒体 分化

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胎儿静脉导管产前超声参数联合母体血清miR-19b对胎儿先天性心脏病的诊断价值 被引量：7

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作者 周钰昆 张金辉 +4 位作者 张伟 张雪松 梁宏伟 王瑞玲 郑婷华 《临床误诊误治》 CAS 2022年第4期74-78,共5页

目的探讨胎儿静脉导管产前超声参数联合母体血清miR-19b对胎儿先天性心脏病的诊断价值及意义。方法选取2019年1月—2020年12月规律接受产检的2504例孕妇作为研究对象进行前瞻性队列研究,均行产前胎儿超声检查与母体血清miR-19b检测,根... 目的探讨胎儿静脉导管产前超声参数联合母体血清miR-19b对胎儿先天性心脏病的诊断价值及意义。方法选取2019年1月—2020年12月规律接受产检的2504例孕妇作为研究对象进行前瞻性队列研究,均行产前胎儿超声检查与母体血清miR-19b检测,根据产后随访结果分为病例组(均为先天性心脏病)、对照组(均无先天性心脏病),比较两组胎儿静脉导管心室收缩期峰值流速(S)、心室舒张期峰值流速(D)、峰值流速指数(PVIV)、前负荷指数(PLI)、S/心房收缩期速度(A)及miR-19b,采用多因素Logistic回归分析胎儿先天性心脏病的相关影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析PVIV、PLI、S/A、miR-19b及联合诊断胎儿先天性心脏病的价值。结果病例组PVIV、PLI、S/A及miR-19b高于对照组(P<0.05)。PVIV、PLI、S/A及miR-19b均为胎儿先天性心脏病发生的独立危险因素(P<0.01)。PVIV、PLI、S/A联合miR-19b诊断胎儿先天性心脏病的ROC曲线下面积最大。PVIV、PLI、S/A、miR-19b高水平组胎儿先天性心脏病发生率高于低水平组(P<0.01)。结论应用超声检测胎儿静脉导管PVIV、PLI、S/A联合母体血清miR-19b可用于胎儿先天性心脏病的产前诊断,从而为临床治疗、妊娠决策提供参考。 展开更多

关键词 先天性心脏病 胎儿 胎儿静脉导管 超声检查 产前 微小rna-19b 产前诊断

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miR-92a与miR-19b对小鼠胰岛β细胞胰岛素基因表达的影响 被引量：1

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作者 李旭艳 翟文君 +1 位作者 付娜 田娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2139-2147,共9页

目的:探讨微小RNA-92a(miR-92a)和微小RNA-19b(miR-19b)对小鼠胰岛β细胞胰岛素基因表达的影响。方法:qPCR检测小鼠胰岛素瘤MIN6细胞内源性miR-92a和miR-19b的相对表达水平。将MIN6细胞分为对照组及实验Ⅰ、Ⅱ组(每组n=3),分别转染阴性... 目的:探讨微小RNA-92a(miR-92a)和微小RNA-19b(miR-19b)对小鼠胰岛β细胞胰岛素基因表达的影响。方法:qPCR检测小鼠胰岛素瘤MIN6细胞内源性miR-92a和miR-19b的相对表达水平。将MIN6细胞分为对照组及实验Ⅰ、Ⅱ组(每组n=3),分别转染阴性对照miRNA(NC)、miR-92a和miR-19b,qPCR验证miRNAs的过表达,光学显微镜观察细胞形态,CCK8法检测细胞活力,qPCR、Western blot及免疫荧光检测胰岛素表达情况,生物信息学预测、双萤光素酶报告基因实验和Western blot分析miR-92a和miR-19b调控胰岛素表达的可能机制。结果:与成体胰腺祖细胞相比,MIN6细胞内源性miR-92a和miR-19b相对表达量显著降低(P<0.05);过表达miR-92a和miR-19b对MIN6细胞活力没有影响,但抑制胰岛素mRNA和蛋白表达;miR-19b显著抑制NeuroD13'UTR萤光素酶活性和NeuroD1蛋白表达(P<0.05),而miR-92a对NeuroD13'UTR萤光素酶活性和NeuroD1蛋白表达起到微调作用。结论:miR-92a和miR-19b抑制小鼠胰岛细胞胰岛素基因表达。 展开更多

关键词 微小rna-92a 微小rna-19b 胰岛素 MIN6细胞

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肝纤维化进程中miRNA-19b表达变化的研究 被引量：3

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作者 郭晓东 熊璐 +5 位作者 张红萍 周艳贤 杨美 章方莉 刘树红 李进 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第4期611-612,606,共3页

目的:观察微小RNA(miRNA)-19b在肝纤维化大鼠肝脏组织的表达,探讨miRNA-19b在肝纤维化进程中的作用。方法:将20只SD大鼠随机分成正常对照组和肝纤维化模型组。采用改良式复合因素法复制大鼠肝纤维化模型,分别在6、7周后,取各组大鼠肝脏... 目的:观察微小RNA(miRNA)-19b在肝纤维化大鼠肝脏组织的表达,探讨miRNA-19b在肝纤维化进程中的作用。方法:将20只SD大鼠随机分成正常对照组和肝纤维化模型组。采用改良式复合因素法复制大鼠肝纤维化模型,分别在6、7周后,取各组大鼠肝脏组织,用荧光实时定量PCR方法检测miRNA-19b的表达。结果:6周后肝纤维化模型组大鼠肝脏组织miRNA-19b的表达低于正常对照大鼠组(P<0.05),7周模型组大鼠肝脏组织miRNA-19b的表达低于6周模型组(P<0.05)。结论:miRNA-19b在肝纤维化大鼠肝脏组织中表达降低,可能与纤维化进程相关,且可能成为肝纤维的诊断以及预后的一个指标。 展开更多

关键词 肝纤维化 微小rna-19b 荧光实时定量聚合酶链反应 大鼠

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超声心动检查联合孕妇血清miRNA-19b、AFP测定对胎儿先天性心脏病的诊断价值分析 被引量：5

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作者 杨伟 王峥 《中国优生与遗传杂志》 2020年第5期618-621,共4页

目的探讨超声心动检查联合孕妇血清微小RNA-19b(miRNA-19b)、甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)测定对胎儿先天性心脏病诊断的临床价值,以提高疾病的阳性检出率。方法选取2016年1月~2019年4月我院行产检的2352例孕妇为研究对象,136例失访... 目的探讨超声心动检查联合孕妇血清微小RNA-19b(miRNA-19b)、甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)测定对胎儿先天性心脏病诊断的临床价值,以提高疾病的阳性检出率。方法选取2016年1月~2019年4月我院行产检的2352例孕妇为研究对象,136例失访,根据生产结局,将孕妇分成异常组(n=26)和正常组(n=2190)。于妊娠15~21w对其胎儿行超声心动检查,t检验比较血清miRNA-19b和AFP水平,应用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线评估单一指标及联合诊断胎儿先天性心脏病的诊断效能。结果在受检孕妇中,超声心动图检查诊断先天性心脏病胎儿716例,法洛四联症125例,室间隔缺损268例,完全性房间隔缺损131例,心房异构86例,永存动脉干106例;异常组患者血清AFP和miRNA-19b水平明显高于正常组(P<0.05);超声心动图诊断胎儿先天性心脏病对应的灵敏度为76.92%、特异度为68.22%、约登指数为0.451、ROC曲线下面积为0.807(95%CI 0.751~0.863);血清miRNA-19b诊断胎儿先天性心脏病临界值为4.55,对应灵敏度为65.38%、特异度为69.82%、约登指数为0.352、ROC曲线下面积为0.737(95%CI 0.673~0.801);血清AFP诊断胎儿先天性心脏病临界值为32.6ug/L,对应的灵敏度为61.53%、特异度为61.55%、约登指数为0.230、ROC曲线下面积为0.651(95%CI 0.578~0.725);三者联合诊断胎儿先天性心脏病灵敏度为88.46%、特异度为60.96%、约登指数为0.494、ROC曲线下面积为0.879(95%CI 0.835~0.923),联合诊断的灵敏度和约登指数高于超声心动检查联合孕妇血清miRNA-19b、AFP单独检测。结论超声心动检查联合孕妇血清miRNA-19b、AFP测定可有效提高冠心病诊断的各项性能指标,其中孕妇血清miRNA-19b、AFP是对超声心动检查很好的补充,对胎儿先天性心脏病早期诊断具有重要价值。 展开更多

关键词 超声心动图 微小rna-19b 甲胎蛋白 先天性心脏病

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MicroRNA-19b对强毒力结核分枝杆菌诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响及其机制 被引量：5

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作者 刘红艳 《现代医学》 2016年第7期952-957,共6页

目的:探讨微小RNA-19b(miR-19b)对强毒力结核分枝杆菌(H37Rv)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法:以强毒力H37Rv感染miR-19b模拟物或其抑制剂转染的大鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率;RT-PCR检测Toll样受体蛋... 目的:探讨微小RNA-19b(miR-19b)对强毒力结核分枝杆菌(H37Rv)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法:以强毒力H37Rv感染miR-19b模拟物或其抑制剂转染的大鼠肺泡巨噬细胞,流式细胞术检测大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率;RT-PCR检测Toll样受体蛋白(TLRs)的mRNA或miR-19b水平;Western blot检测Cleaved caspase 3、Bcl-2及TLRs蛋白的表达,应用Gel-pro4.0软件分析Western blots条带;所有数据采用独立样本t检验。结果:大鼠肺泡巨噬细胞经H37Rv感染后,miR-19b抑制剂组细胞总凋亡率[12 h为(13.55±0.45)%,24 h为(17.16±0.42)%]显著高于对照组[12 h为(9.42±0.47)%,24 h为(12.29±0.37)%];转染24 h后,细胞Cleaved caspase 3相对表达(0.59±0.07)显著高于对照组(0.45±0.05),Bcl-2相对表达(0.34±0.03)显著低于对照组(0.54±0.05),且细胞Toll样受体2(TLR2)相对水平(mRNA为0.283±0.03,蛋白为0.25±0.02)显著高于对照组(mRNA为0.20±0.02,蛋白为0.18±0.01),各组间TLR4、TLR7、TLR9表达无差异;以上变化在miR-19b模拟物组中则相反。此外,高表达的TLR2经其抗体中和后,miR-19b沉默使H37Rv感染大鼠肺泡巨噬细胞的促凋亡作用受到抑制。结论:大鼠肺泡巨噬细胞中,miR-19b沉默能够通过上调TLR2水平促进强毒力结核分枝杆菌诱导的大鼠肺泡巨噬细胞凋亡。 展开更多

关键词 微小rna-19b 结核分枝杆菌 大鼠肺泡巨噬细胞 TOLL样受体2 细胞凋亡

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