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微小RNA-21抑制剂联合基于石墨烯量子点负载顺铂纳米药物系统对黑色素瘤细胞凋亡、迁移和侵袭的影响
1
作者 游小龙 周正宇 +5 位作者 陈雯 魏小勇 傅爱荣 袁分钱 李敏 凌琦 《癌症进展》 2024年第5期501-506,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-21抑制剂联合基于石墨烯量子点负载顺铂纳米药物系统(GPt)对黑色素瘤细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制。方法培养黑色素瘤B16F10细胞,分为对照组、纳米药24 h组、纳米药48 h组、纳米药72 h组,利用四甲基偶氮... 目的探讨微小RNA(miRNA)-21抑制剂联合基于石墨烯量子点负载顺铂纳米药物系统(GPt)对黑色素瘤细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制。方法培养黑色素瘤B16F10细胞,分为对照组、纳米药24 h组、纳米药48 h组、纳米药72 h组,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)筛选出合适的给药剂量和用药时间;然后再分为miRNA-21抑制剂组、纳米药组、miRNA-21抑制剂+纳米药组。采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况,聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测miRNA-21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、p53和Bcl-2相关X蛋白(BAX)的表达情况。再通过皮下注射B16F10细胞制备裸鼠黑色素瘤模型,检测各组肿瘤重量。结果筛选出用药作用时间与剂量分别为72 h和5.0μl,miRNA-21抑制剂具有明显的干扰效果,可用于后期实验。与对照组相比,纳米药组和miRNA-21抑制剂组细胞的侵袭能力、迁移能力均下降,G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,凋亡增多,两者联用后效果更明显。miRNA-21抑制剂组和纳米药组的Bcl-2蛋白和mRNA相对表达量均下降,两者联用后下降更加明显,p53、BAX蛋白和mRNA相对表达量均升高,两者联用后升高更加明显。与对照组相比,其他各组小鼠肿瘤重量均下降,并且miRNA-21抑制剂+纳米药组下降最明显。对照组的肿瘤组织中血管分布丰富,肿瘤细胞排列紧密,肿瘤细胞生长活跃,大小相对一致,其他各组肿瘤细胞排列疏松,细胞生长不活跃。结论GPt联合miRNA-21抑制剂能够诱导黑色素瘤细胞发生凋亡,并能抑制细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 黑色素瘤 微小rna-21 基于石墨烯量子点负载顺铂纳米药物系统 机制
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血清微小RNA-21-3p及白细胞介素-18水平对急性重症胰腺炎并发急性肾损伤的预测价值 被引量：1
2
作者 赵丽 裴红红 +2 位作者 白郑海 邱晓娟 邬媛 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第6期705-708,713,共5页
目的:探讨血清微小RNA-21-3p(miR-21-3p)及白细胞介素18(IL-18)水平对急性重症胰腺炎并发急性肾损伤的预测价值。方法:纳入急性重症胰腺炎患者120例为研究对象,根据是否出现急性肾损伤分为急性肾损伤组(46例)和非急性肾损伤组(74例)。... 目的:探讨血清微小RNA-21-3p(miR-21-3p)及白细胞介素18(IL-18)水平对急性重症胰腺炎并发急性肾损伤的预测价值。方法:纳入急性重症胰腺炎患者120例为研究对象,根据是否出现急性肾损伤分为急性肾损伤组(46例)和非急性肾损伤组(74例)。另选择同期体检健康者60例为健康组。三组均在入院时采集空腹状态下肘静脉血,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定miR-21-3p表达量,采用酶联免疫吸附试验测定IL-18水平。比较三组miR-21-3p表达量、IL-18水平。比较不同临床资料患者miR-21-3p表达量和IL-18水平。采用多元Logistic回归分析急性重症胰腺炎并发急性肾损伤的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清miR-21-3p及IL-18对急性重症胰腺炎并发急性肾损伤的预测价值。结果:与健康组比较,急性肾损伤组、非急性肾损伤组血清miR-21-3p表达量和IL-18水平更高,且急性肾损伤组血清指标高于非急性肾损伤组(均P<0.05)。不同APACHEⅡ评分、CT分级、有无胸水患者的miR-21-3p表达量和IL-18水平比较差异有统计学意义(均P<0.05)。CT分级、胸水、血清miR-21-3p表达量和IL-18水平是急性重症胰腺炎并发急性肾损伤的影响因素(均P<0.05)。血清miR-21-3p、IL-18单独预测急性重症胰腺炎并发急性肾损伤有一定价值,但联合预测的价值更高(均P<0.05)。结论:急性重症胰腺炎患者血清miR-21-3p表达量及IL-18水平会明显上升,CT分级、胸水、血清miR-21-3p表达量和IL-18水平与急性重症胰腺炎并发急性肾损伤密切相关。血清miR-21-3p及IL-18联合检测对急性重症胰腺炎并发急性肾损伤具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 急性重症胰腺炎 急性肾损伤 微小rna-21-3p 白细胞介素18 预测价值
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联合检测血清正五聚蛋白、高迁移率族蛋白1及微小RNA-21对急性肾损伤有预测价值
3
作者 史添立 罗贞 焦石 《内科急危重症杂志》 2023年第4期277-279,共3页
目的:探讨血清正五聚蛋白(PTX3)、高迁移率族蛋白1(HMGB-1)及微小RNA(miR)-21在急性肾损伤(AKI)中的表达及意义。方法:随机选取87例AKI患者为研究组,并选择同期体检的健康人50例为对照组,参照改善全球肾脏病预后组织分期标准,其中Ⅰ期23... 目的:探讨血清正五聚蛋白(PTX3)、高迁移率族蛋白1(HMGB-1)及微小RNA(miR)-21在急性肾损伤(AKI)中的表达及意义。方法:随机选取87例AKI患者为研究组,并选择同期体检的健康人50例为对照组,参照改善全球肾脏病预后组织分期标准,其中Ⅰ期23例,Ⅱ期33例,Ⅲ期31例,根据预后(住院后28 d内)情况分为死亡组19例和存活组68例。监测患者血清PTX3、HMGB-1及miR-21水平并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算最佳诊断截断值和曲线下面积(AUC),分析其对AKI的预测价值。结果:研究组患者血清PTX3、HMGB-1水平高于对照组,miR-21水平低于对照组(P均<0.05);Ⅰ期患者血清PTX3、HMGB-1水平低于Ⅱ期、Ⅲ期患者,且Ⅱ期低于Ⅲ期;Ⅰ期患者miR-21水平高于Ⅱ期、Ⅲ期患者,且Ⅱ期高于Ⅲ期(P均<0.05);死亡组患者血清PTX3、HMGB-1水平高于存活组,miR-21水平低于存活组(P均<0.05);PTX3诊断AKI的截断值为13.28 ng/L,AUC为0.833(95%CI:0.771~0.895);HMGB-1诊断AKI的截断值为11.40pg/mL,AUC为0.916(95%CI:0.901~0.935);miR-21诊断AKI的截断值为0.89,AUC为0.895(95%CI:0.842~0.947);3项联合检测诊断AKI的AUC为0.989(95%CI:0.981~0.999),优于各指标单独预测(Z=4.873、8.062、3.479,P均<0.05)。结论:AKI患者血清PTX3、HMGB-1及miR-21水平表达明显异常,联合检测有预测价值。 展开更多
关键词 正五聚蛋白 高迁移率族蛋白1 微小rna-21 急性肾损伤 预测价值
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微小RNA-21对脓毒症小鼠急性肺损伤的改善作用及其机制
4
作者 葛晨 何聪 +4 位作者 刘俊行 付优 贾丽静 龙玲 杜全胜 《山东医药》 CAS 2023年第30期49-53,共5页
目的 观察微小RNA-21 (miR-21)对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的改善作用,并探讨其可能作用机制。方法 40只雄性昆明小鼠随机分为miR-21前体+ALI组(Pre-miR-21+ALI组)、miR-21前体+磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)... 目的 观察微小RNA-21 (miR-21)对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的改善作用,并探讨其可能作用机制。方法 40只雄性昆明小鼠随机分为miR-21前体+ALI组(Pre-miR-21+ALI组)、miR-21前体+磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)抑制剂LY294002+ALI组(Pre-miR-21+LY+ALI组)、PI3K/Akt抑制剂LY294002+ALI组(LY+ALI组)、ALI组、假手术组,每组各8只。ALI组小鼠采用盲肠结扎穿孔术(CLP)造成脓毒症ALI;Pre-miR-21+ALI组小鼠先尾静脉注射miR-21前体腺病毒0.2mL (1×10^(9)pfu/mL),4天后采用CLP造成脓毒症ALI;Pre-miR-21+LY+ALI组小鼠先尾静脉注射miR-21前体腺病毒0.2ml(1×10^(9)pfu/mL),4天后尾静脉注射LY (0.3 mg/g),注射30 min后进行CLP;LY+ALI组小鼠先尾静脉注射LY(0.3 mg/g),注射30 min后进行CLP;假手术组小鼠仅开腹探查盲肠。干预24 h时麻醉各组小鼠后取腹主动脉血,测算各组小鼠氧合指数(OI),采用ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-6和氧化应激指标ROS、SOD;处死各组小鼠后取右肺组织,HE染色观察肺组织病理学变化,测算肺组织肺湿重/干重比值(W/D);取各组小鼠左肺组织,采用qRT-PCR法检测miR-21,采用WESTERN Blotting法检测各组小鼠左肺组织磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化Akt (p-Akt)蛋白。结果 与假手术组比较,ALI组小鼠OI下降,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D、miR-21表达升高(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血,PTEN蛋白相对表达量下降,p-Akt蛋白相对表达量增加(P均<0.05);与ALI组比较,Pre-miR-21+ALI组小鼠OI高,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D降低,miR-21相对表达量高(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血减轻,PTEN蛋白相对表达量下降,p-Akt蛋白相对表达量增加(P均<0.05);与ALI组比较,Pre-miR-21+LY+ALI组OI降低,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D、miR-21相对表达量升高(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血加重,PTEN蛋白相对表达量下降,p-Akt蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与ALI组比较,LY+ALI组OI降低,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D升高(P均<0.05),肺泡结构破坏、肺泡出血加重;与Pre-miR-21+LY+ALI组比较,LY+ALI组OI降低,血清TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平、肺组织W/D升高,miR-21相对表达量下降(P均<0.05),光镜下可见肺泡结构破坏、肺泡出血加重,PTEN蛋白相对表达量升高,p-Akt蛋白相对表达量下降(P均<0.05)。结论 尾静脉预注射miR-21前体腺病毒的脓毒症小鼠急性肺损伤程度较轻,肺组织PTEN蛋白相对表达量低、p-Akt蛋白相对表达量高。miR-21可能通过抑制肺组织PTEN表达、促进p-Akt表达,减轻脓毒症小鼠肺组织炎症反应和氧化应激水平,从而减轻脓毒症小鼠ALI。 展开更多
关键词 微小RNA 微小rna-21 脓毒症 急性肺损伤 磷脂酶和张力蛋白同源物 丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶
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三七总皂苷对大鼠心肌梗死后血管新生及微小RNA-21表达的影响 被引量：26
5
作者 樊清波 李小威 +1 位作者 简立国 秦秉玉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第1期48-52,共5页
目的:观察三七总皂苷对大鼠心肌梗死后血管新生和VEGF、微小RNA-21(miRNA-21)表达的影响。方法:108只健康Wistar大鼠结扎左冠状动脉建立急性心肌梗死模型后分为心肌梗死对照组、三七总皂苷低剂量治疗组和三七总皂苷高剂量治疗组,心肌梗... 目的:观察三七总皂苷对大鼠心肌梗死后血管新生和VEGF、微小RNA-21(miRNA-21)表达的影响。方法:108只健康Wistar大鼠结扎左冠状动脉建立急性心肌梗死模型后分为心肌梗死对照组、三七总皂苷低剂量治疗组和三七总皂苷高剂量治疗组,心肌梗死对照组和三七总皂苷治疗组分别于术后即刻及术后每天腹腔注射生理盐水和三七总皂苷(100和400 mg/kg),术后3、7、14、21 d分别处死9只大鼠,进行心肌梗死面积百分比测定,免疫组化法测定梗死周边区微血管密度和VEGF蛋白相对表达量,RT-PCR法检测miRNA-21、VEGF mRNA相对表达量。结果:3组3、7、14及21 d梗死周边区微血管密度、心肌梗死面积百分比、VEGF蛋白相对表达量、VEGF和miRNA-21 mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F微血管密度=35.163、42.906、49.510、54.245,P均<0.001;F梗死面积百分比=59.358、68.241、66.350、58.667,P均<0.001;F VEGF蛋白=145.576、164.024、179.349、186.362,P均<0.001;F VEGF mRNA=253.542、268.958、315.313、347.914,P均<0.001;F miRNA-21 mRNA=53.421、67.954、72.358、75.694,P均<0.001)。与心肌梗死对照组相比,三七总皂苷治疗组微血管密度、VEGF蛋白、VEGF和miRNA-21mRNA相对表达量均升高(P均<0.05),心肌梗死面积百分比减少(P均<0.05);不同剂量三七总皂苷治疗组上述各指标比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。各组梗死周边区miRNA-21、VEGF mRNA的相对表达量间均呈正相关(r心肌梗死对照组=0.609,P=0.036;r三七总皂苷低剂量治疗组=0.522,P=0.047;r三七总皂苷高剂量治疗组=0.581,P=0.042)。结论:三七总皂苷有促进心肌梗死后VEGF和miRNA-21表达、促进血管新生和缩小梗死面积的作用。 展开更多
关键词 三七总皂苷 心肌梗死 大鼠 血管内皮生长因子 微小rna-21 MIrna-21
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反义微小RNA-21对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：10
6
作者 张明 魏巍 +2 位作者 刘禄成 李志 温都苏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期450-452,607,共4页
目的:探讨微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响,为膀胱癌的治疗提供理论依据。方法:将脂质体介导的反义寡核苷酸(AS-miRNA-21)转染T24细胞,设转染无义序列组、对照组和AS-miRNA-21转染组,采用... 目的:探讨微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响,为膀胱癌的治疗提供理论依据。方法:将脂质体介导的反义寡核苷酸(AS-miRNA-21)转染T24细胞,设转染无义序列组、对照组和AS-miRNA-21转染组,采用蛋白印迹(Western blotting)检测转染细胞miRNA-21表达水平,噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪(FCM)分别检测转染细胞的增殖和凋亡情况,转染无义序列组、对照组分别与AS-miRNA-21转染组比较。结果:经过转染AS-miRNA-21的T24细胞miRNA-21表达水平下降,细胞增殖能力受抑。AS-miRNA-21组T24细胞增殖率为53.6%,转染无义序列组T24细胞增殖率为92.5%,对照组为100%;相对应的凋亡率分别为13.8%、1.9%和2.7%。上述3组间T24细胞的增殖率、凋亡率比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:反义miRNA-21对人膀胱癌细胞T24具有抑制增殖和促进凋亡的作用,抑制miRNA-21表达有望成为膀胱癌基因治疗的有效方法。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 微小rna-21 反义寡核苷酸类
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乙肝肝硬化患者中微小RNA-21、Th9的表达及其对肠道屏障功能调控机制的影响 被引量：11
7
作者 赵彩红 田志颖 +3 位作者 张丽贤 何显 苏新爱 王丽华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1204-1207,共4页
目的探讨乙肝肝硬化患者中微小RNA-21(miR-21)、辅助性T淋巴细胞9(Th9)的表达及其对肠道屏障功能调控机制的影响。方法选择乙肝肝硬化患者144例作为肝硬化组,同期选择体格检查健康者144例作为对照组,记录两组入选者的常规检测指标,测定... 目的探讨乙肝肝硬化患者中微小RNA-21(miR-21)、辅助性T淋巴细胞9(Th9)的表达及其对肠道屏障功能调控机制的影响。方法选择乙肝肝硬化患者144例作为肝硬化组,同期选择体格检查健康者144例作为对照组,记录两组入选者的常规检测指标,测定血液中miR-21、Th9、二胺氧化酶(DAO)、内毒素(ET)、D-乳酸(D-lac)表达水平并进行相关性分析。结果肝硬化组的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)含量都高于对照组,肝硬化组的miR-21相对表达量与Th9含量都高于对照组,肝硬化组的血清ET、DAO与D-lac值高于对照组(P<0.05)。在肝硬化组中,直线相关分析显示血清ET、DAO、D-lac与ALT、TBIL、AST、miR-21、Th9都呈现显著正相关性(P <0.05)。结论乙肝肝硬化患者中miR-21、Th9都呈现高表达状况,也表现为肠道屏障功能紊乱状态,两者可互相形成,形成恶性循环,从而参与乙肝肝硬化的发生与发展。 展开更多
关键词 乙肝 肝硬化 微小rna-21 辅助性T淋巴细胞9 肠道屏障功能
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重组腺病毒载体携带反义微小RNA-21对膀胱癌细胞生长的作用 被引量：9
8
作者 朱德淳 李然伟 +2 位作者 刘禄成 温都苏 魏巍 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第9期1351-1353,共3页
目的探讨重组腺病毒载体介导的微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24生长的影响。方法构建反向插入miRNA-21基因的重组腺病毒载体(rAV-miRNA-21),并用反义rAV-miRNA-21转染T24,即病毒载体用药组。采用噻唑蓝(MTT... 目的探讨重组腺病毒载体介导的微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24生长的影响。方法构建反向插入miRNA-21基因的重组腺病毒载体(rAV-miRNA-21),并用反义rAV-miRNA-21转染T24,即病毒载体用药组。采用噻唑蓝(MTT)法和原位末端标记(TUNEL)法检测T24细胞的增殖和凋亡情况。同时设对照组和空病毒组作为对比。结果 rAV-miRNA-21用药组、对照组和空病毒组T24细胞的增殖率分别为(37.1±6.8)%(、95.7±5.8)%(、86.3±7.5)%;凋亡率分别是(31.6±4.7)%(、8.4±2.9)%(、7.3±4.6)%。用药组的增殖率和凋亡率分别与对照组和空病毒组相比较,差异均有统计学意义(P<0.01),而对照组与空病毒组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论反义miRNA-21重组腺病毒载体转染T24细胞可以抑制肿瘤细胞增殖,增加细胞凋亡,进而抑制膀胱癌细胞生长。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 微小rna-21 重组腺病毒 基因治疗
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微小RNA-21在膀胱癌中的表达及其临床意义 被引量：5
9
作者 战鹏 张明 +3 位作者 范海涛 温都苏 李然伟 刘禄成 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期4872-4873,共2页
目的探讨微小RNA-21(miRNA-21)在膀胱癌中的蛋白表达及其与膀胱癌发生、发展、转移的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测膀胱组织中miRNA-21的蛋白表达,阐明其与患者临床病理特征之间的相关性。结果 miRNA-21在膀胱正常组织中表达的... 目的探讨微小RNA-21(miRNA-21)在膀胱癌中的蛋白表达及其与膀胱癌发生、发展、转移的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测膀胱组织中miRNA-21的蛋白表达,阐明其与患者临床病理特征之间的相关性。结果 miRNA-21在膀胱正常组织中表达的阳性率为5%(1/20),在膀胱癌组织中表达的阳性率为76%(38/50),二者差异有统计学意义(P<0.05)。miRNA-21的阳性表达率与膀胱癌患者的年龄、性别无关联(P>0.05),但与淋巴结转移、浸润深度及病理分级、临床分期有密切关系(P<0.05)。结论 miRNA-21在膀胱癌组织中的异常高表达与其生长转移有密切关系,该蛋白可作为判断膀胱癌生物学行为的重要标志物。 展开更多
关键词 膀胱癌 微小rna-21 免疫组织化学染色
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唾液及血浆中微小RNA-21水平应用于早期食管癌的诊断价值 被引量：4
10
作者 李伟 闫丛临 谭晓刚 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第14期1894-1896,共3页
目的研究唾液及血浆中的微小RNA-21(miRNA-21)水平应用于早期食管癌的诊断价值。方法选取2011年2月至2014年2月河南省南阳市中心医院收治的112例早期食管癌患者作为观察组,同期来该院进行健康查体的100例患者作为对照组,比较两组查体者m... 目的研究唾液及血浆中的微小RNA-21(miRNA-21)水平应用于早期食管癌的诊断价值。方法选取2011年2月至2014年2月河南省南阳市中心医院收治的112例早期食管癌患者作为观察组,同期来该院进行健康查体的100例患者作为对照组,比较两组查体者miRNA-21的表达水平,比较唾液和血浆miRNA-21的诊断价值;研究miRNA-21水平与肿瘤分期、病理类型和分化的相关性。结果观察组唾液miRNA-21水平为(6.08±2.22),对照组为(0.64±0.09),差异有统计学意义(P<0.05);观察组的血浆miRNA-21表达水平为(20.91±10.59),对照组为(1.69±0.17),差异有统计学意义(P<0.05)。唾液中的miRNA-21水平ROC曲线下面积(AUC)为0.866 5,灵敏度为88.24%,特异度为69.97%;血浆中的miRNA-21AUC为0.882 0,灵敏度为90.20%,特异度为70.69%,二者诊断价值差异无统计学意义(P>0.05)。唾液与血浆中的miRNA-21水平与早期食管癌的分期和病理类型无明显的相关性(P>0.05),与分化程度相关性较强(P<0.05)。结论唾液及血浆中的miRNA-21水平应用于早期食管癌具有较高的诊断价值,唾液可能代替血浆应用于早期食管癌的诊断。 展开更多
关键词 唾液 血浆 微小rna-21 食管肿瘤 诊断价值
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微小RNA-21-5p靶向Smad7调控转化生长因子-β1诱导心肌纤维化促进房颤的发生 被引量：7
11
作者 朱参战 王新宏 +5 位作者 刘昕 薛嘉虹 赵玲 宋雅璠 周甜 张明娟 《临床内科杂志》 CAS 2019年第7期485-489,共5页
目的探讨微小RNA(miR)-21-5p对转化生长因子(TGF)-β1,诱导心肌纤维化从而促进房颤的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测房颤患者(AF组)和窦性心律患者(SR组)右心耳肌组织miR-21-5p、Smad7、... 目的探讨微小RNA(miR)-21-5p对转化生长因子(TGF)-β1,诱导心肌纤维化从而促进房颤的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测房颤患者(AF组)和窦性心律患者(SR组)右心耳肌组织miR-21-5p、Smad7、TGF-Bi和纤粘蛋白(Fibronecin)的表达。采用RT-qPCR和Westernblot检测过表达miR-21-5p和敲减Smad7对SD乳鼠心肌成纤维细胞TGF-β1,和Fibronecin表达的影响。釆用双荧光素酶报告基因实验验证miR-21-5p和Smad7的靶向关系。结果AF组miR-21-5p、TGF-β1 mRNA及蛋白、Fibronecin蛋白表达水平均高于SR组,Smad7 mRNA和蛋白表达水平均低于SR组(P<0.05).miR-21-5p mimics组miR-21-5p和TGF-β1、Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均高于miR-NC组(P<0.05)。si-Smad7组TGF-Rix Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均高于si-NC组(P<0.05)omiR-21-5pmimics与Smad73'-UTR野生型质粒共转染后SD乳鼠心肌成纤维细胞荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。miR-21-5p mimics组Smad7 mRNA和蛋白表达水平均低于miR-NC组,TGF-β1、Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均高于miR-NC组(P<0.05);miR-21-5pmimics+pcDNA3.1-Smad7组TGF-β1、Fibronecin mRNA及蛋白表达水平均低于miR-21-5pmimics+pcDNA3.1组(PvO.05)。结论miR-21-5p表达上调能够通过靶向抑制Smad7促进TGF-β1和Fibronecin分泌,诱导心肌纤维化。 展开更多
关键词 微小rna-21-5p 转化生长因子-Β1 SMAD7 心肌纤维化 心房颤动
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两种荧光定量聚合酶链反应法检测乳腺癌组织中微小RNA-21的应用分析 被引量：4
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作者 张晟春 王燕 +1 位作者 张兴毅 王才友 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期624-629,共6页
目的比较两种荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测乳腺癌组织中微小RNA(miR)-21的表达,选择更适用于临床的检测方法。方法选取遵义医学院附属医院普外科2010年度住院的手术治疗的乳腺癌患者,手术切除的乳腺组织标本,包括乳腺癌组织和癌... 目的比较两种荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测乳腺癌组织中微小RNA(miR)-21的表达,选择更适用于临床的检测方法。方法选取遵义医学院附属医院普外科2010年度住院的手术治疗的乳腺癌患者,手术切除的乳腺组织标本,包括乳腺癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm)14对。分别用SYBR GreenⅠ染料和Taq-Man探针作为荧光指示剂,FQ-PCR法检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-21的相对表达水平,应用SPSS 15.0统计软件分析两种检测模式的差异。最后用Northern Blot法进行实验验证。结果 SYBR GreenⅠ染料法检测乳腺癌组织与癌旁组织中miR-21的表达,差异有统计学意义(t=6.704,P=0.000);TaqMan探针法检测乳腺癌组织与癌旁组中miR-21的表达,差异有统计学意义(t=7.238,P=0.000)。SYBR GreenⅠ染料法与TaqMan探针法检测乳腺癌组织中miR-21的表达,差异无统计学意义(t=2.33,P=0.053);SYBR GreenⅠ染料法与TaqMan探针法检测癌旁组织中miR-21的表达,差异无统计学意义(t=0.07,P=0.95)。Northern Blot法检测乳腺癌组织和癌旁组织中miR-21的表达,探针分别为miR-21和U6的反义链,由32P标记。用Image Quant软件测定灰度值评定信号表达强弱,结果表明,乳腺癌组织中miR-21高表达,而癌旁组织中miR-21低表达。结论 SYBR GreenⅠ染料法和TaqMan探针法检测乳腺癌组织miR-21表达均较癌旁组织中明显升高,与Northern Blot法检测结果一致,但SYBR GreenⅠ染料法简单、有效、成本较低,更适用于临床miR-21的检测。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 聚合酶链反应 微小rna-21
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靶向抑制微小RNA-21提高白血病细胞对三氧化二砷的敏感性研究 被引量：2
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作者 李育敏 谷景义 +5 位作者 朱雪娇 陈万群 郭敏 姚君琳 林春燕 费嘉 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期170-173,共4页
目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-m... 目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-miR-21、As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率和IC50;PI单染检测细胞周期及凋亡;实时定量PCR检测miRNA-21表达水平的改变;免疫荧光法检测miRNA-21候选靶基因PDCD4蛋白表达的改变。结果AMO-miR-21与As2O3联合使用后,IC50从2.10μmol/L降低到1.23μmol/L,敏感性提高到单用As2O3的1.78倍;AMO-miR-21联合As2O3组细胞凋亡明显增加(P<0.05);单独转染AMO-miR-21可显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.01),同时抑癌基因PDCD4蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论AMO-miR-21与As2O3联合使用可提高K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供了新的方法。AMO-miR-21通过靶向抑制miRNA-21,进而上调抑癌基因PDCD4的表达而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 微小rna-21 反义寡核苷酸 三氧化二砷 白血病 化疗敏感性
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微小RNA-21和肿瘤抑素在膀胱癌中的表达及其相关性的研究 被引量：5
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作者 李然伟 任明 +3 位作者 刘禄成 温都苏 李志 郭航 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第10期1597-1599,共3页
目的探讨膀胱癌中微小RNA-21和肿瘤抑素表达与临床病理特征之间的关系。方法采用SABC法对98例膀胱癌患者分别进行微小RNA-21和肿瘤抑素的免疫组化染色,其与肿瘤临床分期和细胞分级间的关系及微小RNA-21和肿瘤抑素在瘤细胞中的共表达情... 目的探讨膀胱癌中微小RNA-21和肿瘤抑素表达与临床病理特征之间的关系。方法采用SABC法对98例膀胱癌患者分别进行微小RNA-21和肿瘤抑素的免疫组化染色,其与肿瘤临床分期和细胞分级间的关系及微小RNA-21和肿瘤抑素在瘤细胞中的共表达情况。结果膀胱癌患者中微小RNA-21和肿瘤抑素的阳性表达率分别是69.4%和43.9%。与浅表性和分化较好的膀胱癌相比,侵袭性和分化差的癌细胞中微小RNA-21表达上调明显,而肿瘤抑素表达则显著下调,组间比较(P<0.01),差异有统计学意义。有68例患者存在微小RNA-21和肿瘤抑素共表达,两者之间呈负相关(P<0.05),差异也具有统计学意义。结论微小RNA-21和肿瘤抑素共表达失调可能促进膀胱癌的发生发展,抑制微小RNA-21表达,上调肿瘤抑素水平有希望成为有效治疗膀胱癌的一种新方法 。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 微小rna-21 肿瘤抑素
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腺病毒介导反义微小RNA-21对裸鼠膀胱癌生长的抑制作用 被引量：2
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作者 李志 刘禄成 +4 位作者 温都苏 梁新 郭航 张明 陈秀玲 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1158-1159,共2页
目的观察腺病毒介导反义微小RNA-21对裸鼠膀胱癌移植瘤的杀伤效应及毒性反应。方法裸鼠膀胱接种人膀胱癌细胞株T24建立裸鼠膀胱癌移植瘤模型,经尿道膀胱内灌注重组腺病毒,自灌注始,每7 d测肿瘤体积,实验结束后处死裸鼠分离瘤体测量体积... 目的观察腺病毒介导反义微小RNA-21对裸鼠膀胱癌移植瘤的杀伤效应及毒性反应。方法裸鼠膀胱接种人膀胱癌细胞株T24建立裸鼠膀胱癌移植瘤模型,经尿道膀胱内灌注重组腺病毒,自灌注始,每7 d测肿瘤体积,实验结束后处死裸鼠分离瘤体测量体积大小,噻唑蓝(MTT)比色法和原位末端标记(TUNEL)法分别检测肿瘤细胞增殖率和凋亡指数,常规病理学和生化检查评价肝肾毒性反应。结果治疗组裸鼠肿瘤比未用药对照组生长明显缓慢,自实验对照的第1天算起至28 d实验结束处死裸鼠剥离出肿瘤,治疗组肿瘤体积显著小于未治疗组(P<0.05),两组间肿瘤细胞增殖率和凋亡率指数也存在显著差异(P<0.01);常规HE组织细胞染色病理检查以及血化验结果两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论腺病毒介导的反义微小RNA-21在对裸鼠膀胱癌移植瘤生长发挥良好抑制作用的同时,对裸鼠肝肾无明显毒性反应,提示将微小RNA-21作为临床膀胱癌的靶向基因治疗可能具有一定价值。 展开更多
关键词 膀胱癌 微小rna-21 基因治疗 裸鼠
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过表达微小RNA-21对c-Kit^+心脏干细胞增殖、迁移及分化的影响 被引量：2
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作者 王艳 石蓓 +3 位作者 邓文文 王冬梅 盛瑾 陈文明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期961-968,共8页
目的:探讨转染微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对c-Kit^+心脏干细胞增殖、分化和迁移的影响。方法:采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养c-Kit^+心脏干细胞,以Lipofectamine~2000为载体将miR-21模拟物(mimics)和其阴性对照(mimics nega... 目的:探讨转染微小RNA-21(microRNA-21,miR-21)对c-Kit^+心脏干细胞增殖、分化和迁移的影响。方法:采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养c-Kit^+心脏干细胞,以Lipofectamine~2000为载体将miR-21模拟物(mimics)和其阴性对照(mimics negative control,MNC)分别转染至c-Kit^+心脏干细胞。实验分为正常对照(control)组(正常培养的心脏干细胞)、MNC组(转染MNC 48 h的细胞)和mimics组(转染miR-21 mimics 48 h的细胞)。qPCR检测各组细胞miR-21的表达情况,以CCK-8法和EdU法检测细胞增殖状态,qPCR及免疫荧光检测细胞分化情况,划痕实验观察细胞迁移能力。结果:成功获取c-Kit^+心脏干细胞,经流式细胞术鉴定其高表达c-Kit(90.8%),低表达CD45(0.6%)及CD34(0.5%);与control组相比,mimics组中miR-21表达量显著增高(P<0.05),MNC组中miR-21表达量与control组无明显差异。CCK-8和EdU实验结果发现与control组比较,mimics组中细胞增殖能力明显增加(P<0.05),MNC组中细胞增殖能力无明显变化;免疫荧光及qPCR结果表明3组心肌细胞谱系标志物Nkx2.5、CD31和α-平滑肌肌动蛋白水平无明显差异;细胞划痕实验结果发现,3组间细胞迁移能力无明显不同。结论:过表达miR-21可显著促进c-Kit^+心脏干细胞的增殖能力,但对细胞迁移及分化能力无明显影响。 展开更多
关键词 微小rna-21 心脏干细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞分化
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微小RNA-21在胰岛素抵抗和糖尿病伴发非酒精性脂肪肝发病中的作用 被引量：8
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作者 赵晓云 邵凯 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期144-149,共6页
目的应用高脂喂养分别诱导胰岛素抵抗(IR)和糖尿病(DM)伴发非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠模型,探讨肝脏微小RNA-21(miR-21)表达改变在NAFLD发病中的作用。方法实验分3组:对照组、IR组和DM组;记录小鼠体质量,腹腔糖耐量实验确定糖代谢异常,... 目的应用高脂喂养分别诱导胰岛素抵抗(IR)和糖尿病(DM)伴发非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠模型,探讨肝脏微小RNA-21(miR-21)表达改变在NAFLD发病中的作用。方法实验分3组:对照组、IR组和DM组;记录小鼠体质量,腹腔糖耐量实验确定糖代谢异常,行肝脏病理切片检查,检测空腹血糖、血清胰岛素、血脂、肿瘤坏死因子α含量的变化,检测肝脏miR-21表达和肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体亚型(PPAR-γ、PPAR-α)和脂肪型脂肪酸结合蛋白(a P2)基因和蛋白表达改变。结果 IR组体质量、血清胰岛素水平和稳态模型胰岛素抵抗指数较对照组明显上升(P<0.01,P<0.05),DM组空腹血糖浓度上升,而血清胰岛素水平明显下降(P<0.05),其他指标较对照组差异无统计学意义(P>0.05);IR组血清胰岛素水平较对照组增加而DM组明显降低(P<0.01,P<0.05);IR组和DM组葡萄糖曲线下面积较对照组显著增加(P<0.01)。IR组和DM组血清肿瘤坏死因子-α水平呈明显上升趋势(P<0.05,P<0.01)。IR组和DM组伴随着NAFLD加重,肝脏组织miR-21表达水平进一步下调(P<0.05),与IR组PPAR-α、a P2和PPAR-γ基因表达上调呈负相关(r值分别为-0.696、-0.664和-0.766,P<0.05),与DM组PPAR-α和PPAR-γ基因表达上调也呈负相关(r值分别为-0.676和-0.550,P<0.05);蛋白表达改变仅IR组PPAR-γ和a P2较对照组明显上调(P<0.05,P<0.01)。结论 IR和DM伴发NAFLD时肝组织均出现miR-21表达降低,可能通过调节PPAR-α和PPAR-γ的基因表达参与NAFLD发病。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝 微小rna-21 胰岛素抵抗 糖尿病 过氧化物酶体增殖物激活受体亚型
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微小RNA-21对宫颈癌HeLa细胞程序性细胞死亡4蛋白表达及细胞增殖的影响 被引量：2
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作者 戴桂红 李国利 +5 位作者 钱华 袁冬兰 焦霞 梅佳 朱晓蔚 于鸿 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2013年第4期288-291,共4页
目的:探讨微小RNA-21(miR-21)对宫颈癌HeLa细胞中程序性细胞死亡4(programmed cell death,PDCD4)基因表达及细胞增殖的影响,为应用miR-21对宫颈癌进行基因治疗提供一定的依据。方法:用脂质体转染的方法,将pre-miR-21、pre-miR-21阴性对... 目的:探讨微小RNA-21(miR-21)对宫颈癌HeLa细胞中程序性细胞死亡4(programmed cell death,PDCD4)基因表达及细胞增殖的影响,为应用miR-21对宫颈癌进行基因治疗提供一定的依据。方法:用脂质体转染的方法,将pre-miR-21、pre-miR-21阴性对照、anti-miR-21、anti-miR-21阴性对照瞬时转染HeLa细胞。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-21相对表达量;MTT法检测宫颈癌HeLa细胞增殖的变化;蛋白质印迹法检测PDCD4蛋白表达情况;荧光素酶报告基因法验证miR-21的靶位点。结果:pre-miR-21上调miR-21的表达,抑制PDCD4蛋白表达,促进HeLa细胞增殖;而anti-miR-21下调miR-21的表达,增加PDCD4蛋白的表达,抑制HeLa细胞增殖。pMIR-Luc-PDCD4-3'UTR与pre-miR-21共转染后,荧光素酶活性下降,而与anti-miR-21共转染后,荧光素酶活性升高。结论:PDCD4基因是miR-21的靶基因;miR-21通过调节PDCD4基因的表达调控细胞增殖。 展开更多
关键词 宫颈癌 HELA细胞 微小rna-21 程序性细胞死亡4
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