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微小RNA-384通过下调多效生长因子表达抑制胰腺癌细胞增殖及浸润 被引量:3
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作者 符常波 聂磊 +1 位作者 殷涛 吴东德 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1048-1051,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-384在胰腺癌组织及癌旁组织、胰腺癌细胞株中的表达及其与胰腺癌临床病理特殊的关系及其对癌细胞株增殖、迁移等的影响,探讨其作用机制。方法查询生物信息预测miR-384可能靶向结合多效生长因子(PTN)的mRNA,... 目的观察微小RNA(miRNA,miR)-384在胰腺癌组织及癌旁组织、胰腺癌细胞株中的表达及其与胰腺癌临床病理特殊的关系及其对癌细胞株增殖、迁移等的影响,探讨其作用机制。方法查询生物信息预测miR-384可能靶向结合多效生长因子(PTN)的mRNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测2016年3月至2018年12月湖北省肿瘤医院67例胰腺癌组织标本或穿刺标本中癌及癌旁组织中miR-384及PTN的表达,用携带miR-384的腺病毒转染胰腺癌细胞株PANC-1/MIAPaCa-2,PT-PCR技术检测转染前后miR-384、PTNmRNA表达量,蛋白质印迹法(Westernblot)检测转染前后PTN蛋白变化,通过噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell小室检测转染前后PANC-1/MIAPaCa-2增殖、迁移及侵袭能力变化。应用SPSS19.0统计软件和GraphPadPrism8.0进行数据处理和统计分析,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示。miR-384在癌组织和癌旁组织间表达量的比较采用配对样本的t检验。结果miR-384在胰腺癌组织及癌旁组织中相对表达量分别为0.0037±0.0009、0.0065±0.0022,差异有统计学意义(t=6.177,P<0.01),并与神经浸润及淋巴结转移明显相关(χ^2=4.750、13.400,P<0.05)。将胰腺癌组织分为miR-384低表达组及高表达组,PTNmRNA相对表达量分别为0.073±0.028、0.045±0.001,差异有统计学意义(t=2.082,P<0.05)。转染腺病毒后,与阴性对照组比较,PANC-1细胞中miR-384表达提高11.69倍(t=28.600,P<0.01),PTNmRNA及PTN蛋白则分别降至19.02%(t=31.200,P<0.01)、38.00%(t=16.200,P<0.01),MIAPaCa-2细胞中miR-384表达提高14.95倍(t=21.300,P<0.01),PTNmRNA及PTN蛋白分别降至15.02%(t=13.300,P<0.01)、13.74%(t=13.500,P<0.01),差异有统计学意义。两种细胞株增殖、迁移、侵袭能力均下降,而重组人PTN蛋白处理可逆转此情况。结论miR-384在胰腺癌中具有明显抑制肿瘤作用,其机制可能是通过靶向结合PTNmRNA下调PTN表达实现。 展开更多
关键词 胰腺癌 多效生长因子 侵袭转移 RNA干扰 微小rna-384
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长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因靶向微小RNA-384对肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响 被引量:2
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作者 朱登彦 余旸 +4 位作者 杨洋 刘东雷 吴恺 齐宇 赵松 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1221-1224,共4页
目的观察长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)靶向微小RNA(miRNA,miR)-384对人肺腺癌细胞株SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响.方法在肺癌SPC-A1细胞中转染小干扰RNA(siRNA)CRNDE,实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)测定干... 目的观察长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)靶向微小RNA(miRNA,miR)-384对人肺腺癌细胞株SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响.方法在肺癌SPC-A1细胞中转染小干扰RNA(siRNA)CRNDE,实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)测定干扰效果,噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖变化,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,蛋白质印迹法(Westernblot)检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平,靶向关系预测软件预测CRNDE与miR-384有结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.在SPC-A1细胞中共转染siRNACRNDE和miR-384抑制物(Inhibitors),用上述方法测定miR-384Inhibitors对siRNACRNDE影响肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的逆转作用.两组间比较采用t检验,多组差异比较采用单因素方差分析.结果转染siRNACRNDE后的肺癌SPC-A1细胞中CRNDE表达水平降低(1.01±0.12比0.43±0.06),细胞增殖能力降低(0.37±0.05比0.24±0.02,F=10.467,P<0.05),细胞侵袭(141.25±15.23比101.02±9.84,F=9.420,P<0.05)和迁移(188.20±16.84比142.58±11.22,F=8.345,P<0.05)数目减少,细胞中MMP-9、MMP-2、Vimentin蛋白水平下降,E-cadherin蛋白水平升高.CRNDE与miR-384有互补结合位点,CRNDE靶向负调控miR-384表达.miR-384 Inhibitors可以逆转siRNACRNDE对肺癌细胞增殖(0.26±0.03比0.35±0.04,t=3.118,P<0.05)、迁移(139.84±10.57比176.51±12.45,t=5.276,P<0.05)、侵袭(99.84±10.02比134.25±11.25,t=3.890,P<0.05)能力抑制作用和MMP-9、MMP-2、E-cadherin、Vimentin蛋白表达影响.结论下调lncRNACRNDE靶向miR-384抑制肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移. 展开更多
关键词 中文肺癌 微小rna-384 结直肠肿瘤差异表达基因 迁移 侵袭
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微小RNA-384靶向调控Smad核内相关蛋白1影响肺癌SPC-A1细胞侵袭迁移 被引量:2
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作者 朱登彦 余旸 +4 位作者 杨洋 刘东雷 吴恺 齐宇 赵松 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1069-1072,共4页
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-384对肺癌SPC-A1细胞侵袭迁移的作用及靶向调控机制。方法将miR-384模拟物(mimics)转染到SPC-A1细胞中,使用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)方法测定上调效果,噻唑蓝(MTT)法测定增殖变化,Transwell小室... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-384对肺癌SPC-A1细胞侵袭迁移的作用及靶向调控机制。方法将miR-384模拟物(mimics)转染到SPC-A1细胞中,使用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)方法测定上调效果,噻唑蓝(MTT)法测定增殖变化,Transwell小室检测侵袭和迁移变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、波形蛋白(Vimentin)、MMP-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达。靶基因预测软件预测Smad核内相关蛋白1(SNIP1)可能为miR-384的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将miR-384 mimics及pcDNA3.1-SNIP1共转染到SPC-A1细胞中,MTT、Transwell小室和Western blot检测pcDNA3.1-SNIP1对上调miR-384抗肺癌细胞增殖和侵袭、迁移的影响。两组间比较采用t检验,多组差异比较采用单因素方差分析。结果miR-384 mimics能够明显提高SPC-A1细胞中miR-384表达水平(0.97±0.13比2.28±0.27),降低细胞增殖(0.41±0.04比0.29±0.03)、侵袭(148.23±13.98比115.30±10.23)和迁移(196.48±17.36比137.58±12.07)能力,抑制细胞中MMP-2、Vimentin、MMP-9蛋白表达,促进细胞中E-cadherin蛋白表达。荧光素酶报告载体鉴定结果显示miR-384靶向调控SNIP1表达。荧光素酶报告载体鉴定结果显示转染miR-384 Mimics后的SPC-A1细胞中SNIP1蛋白水平下降(t=9.954,P<0.01),差异有统计学意义,pcDNA3.1-SNIP1可明显逆转miR-384 mimics对SPC-A1细胞增殖[(0.26±0.04)个比(0.38±0.04)个]、迁移[(130.20±10.56)个比(158.25±11.47)个]和侵袭[(110.27±9.68)个比(149.20±10.38)个]的抑制作用,提高细胞中SNIP1和MMP-2、Vimentin、MMP-9蛋白表达水平,降低E-cadherin蛋白表达水平。结论miR-384靶向调控SNIP1抑制肺癌SPC-A1细胞侵袭迁移。 展开更多
关键词 肺癌 侵袭 微小rna-384 Smad核内相关蛋白1
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LncRNA SNHG17通过miR-384靶向AEG1对非小细胞肺癌细胞生物学行为的调控作用 被引量:1
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作者 刘韵鹏 刘子豪 +1 位作者 康伯铭 杨志广 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期298-307,共10页
目的:研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因17(lncRNA SNHG17)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:培养人NSCLC A549细胞和H1299细胞,细胞按照分组要求分别转染pcDNA3.1-NC、SNHG17过表达质粒(pcDNA3.1-S... 目的:研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因17(lncRNA SNHG17)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。方法:培养人NSCLC A549细胞和H1299细胞,细胞按照分组要求分别转染pcDNA3.1-NC、SNHG17过表达质粒(pcDNA3.1-SNHG17)、si-NC、SNHG17小干扰RNA(si-SNHG17)、mimics NC、微小RNA-384模拟物(miR-384mimics)、inhibitor NC、miR-384抑制剂(miR-384 inhibitor)、pcDNA3.1-星形细胞上调基因1(AEG1)和si-AEG1。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测A549细胞和H1299细胞及各组转染后细胞中lncRNA SNHG17、miR-384和AEG1 mRNA表达水平;ENCORI和TargetScan数据库预测lncRNA SNHG17与miR-384、miR-384与AEG1 mRNA之间的靶向结合作用。A549细胞分为si-NC组、si-SNHG17组、inhibitor NC组、miR-384 inhibitor组、si-NC+inhibitor NC组、si-SNHG17+inhibitor NC组、si-SNHG17+miR-384 inhibitor组、si-AEG1组、inhibitor NC+si-NC组、miR-384inhibitor+si-NC组和miR-384 inhibitor+si-AEG1组。H1299细胞分为pcDNA3.1-NC组、pcDNA3.1-SNHG17组、mimics NC组、miR-384 mimics组、pcDNA3.1-NC+mimics NC组、pcDNA3.1-SNHG17+mimics NC组、pcDNA3.1-SNHG17+miR-384 mimics组、pcDNA3.1-AEG1组、mimics NC+pcDNA3.1-NC组、miR-384 mimics+pcDNA3.1-NC组和miR-384 mimics+pcDNA3.1-AEG1组。采用CCK-8法检测各组细胞活力,Transwell法检测各组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中AEG1蛋白表达水平。结果果:H1299细胞中lncRNA SNHG17表达水平明显低于A549细胞(P<0.01)。在A549细胞中,与si-NC组比较,si-SNHG17组细胞中SNHG17表达水平明显降低(P<0.01),细胞活力、迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01);在H1299细胞中,与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-SNHG17组细胞中SNHG17表达水平明显升高(P<0.01),细胞活力、迁移细胞数和侵袭细胞数明显升高(P<0.01)。在A549细胞中,与si-NC组比较,si-SNHG17组细胞中miR-384表达水平明显升高(P<0.01),AEG1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);在H1299细胞中,与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-SNHG17组细胞中miR-384表达水平明显降低(P<0.01),AEG1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。ENCORI数据库预测SNHG17与miR-384有2个结合位点。在A549细胞中,与si-NC+inhibitor NC组比较,si-SNHG17+inhibitor NC组细胞中AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显降低(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与si-SNHG17+inhibitor NC组比较,si-SNHG17+miR-384inhibitor组细胞中AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.01)。在H1299细胞中,与pcDNA3.1-NC+mimics NC组比较,pcDNA3.1-SNHG17+mimics NC组细胞中AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与pcDNA3.1-SNHG17+mimics NC组比较,pcDNA3.1-SNHG17+miR-384 mimics组细胞中AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显降低(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。在A549细胞中,与si-NC组比较,si-AEG1组细胞中AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显降低(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01);在H1299细胞中,与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-AEG1组细胞中AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.01)。ENCORI数据库预测miR-384与AEG1有1个结合位点。在A549细胞中,与inhibitor NC+si-NC组比较,miR-384inhibitor+si-NC组细胞中细胞活力明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与miR-384 inhibitor+si-NC组比较,miR-384 inhibitor+si-AEG1组细胞中细胞活力明显降低(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。在H1299细胞中,与mimics NC+pcDNA3.1-NC组比较,miR-384 mimics+pcDNA3.1-NC组细胞中细胞活力明显降低(P<0.01)、迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01);与miR-384 mimics+pcDNA3.1-NC组比较,miR-384mimics+pcDNA3.1-AEG1组细胞中细胞活力明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.01)。结论:lncRNA SNHG17通过miR-384靶向AEG1调控NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 小核仁RNA宿主基因17 微小rna-384 星形细胞上调基因1 非小细胞肺 生物学行为
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急性白血病患者外周血lncRNACRNDE、miR-384表达及其临床意义 被引量:1
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作者 王腾飞 陈珊 +1 位作者 安和兵 周蕾 《检验医学》 CAS 2023年第7期686-691,共6页
目的分析急性白血病患者外周血中长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)、微小RNA-384(miR-384)的相对表达量,并探讨其临床价值。方法选取2017年3月—2019年4月河北北方学院附属第二医院急性髓系白血病(AML)患者106例(AML... 目的分析急性白血病患者外周血中长链非编码RNA(lncRNA)结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)、微小RNA-384(miR-384)的相对表达量,并探讨其临床价值。方法选取2017年3月—2019年4月河北北方学院附属第二医院急性髓系白血病(AML)患者106例(AML组),以同期健康体检志愿者100名作为正常对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测AML组和正常对照组血清lncRNA CRNDE、miR-384相对表达量。采用Pearson相关分析评价AML患者血清lncRNA CRNDE与miR-384相对表达量的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析lncRNA CRNDE、miR-384与AML患者预后的关系。采用Cox回归分析评价影响AML患者预后的危险因素。结果AML组血清lncRNA CRNDE相对表达量明显高于正常对照组(P<0.001),miR-384相对表达量明显低于正常对照组(P<0.001)。AML患者血清lncRNA CRNDE、miR-384相对表达量均与白细胞(WBC)计数、血小板(PLT)计数、骨髓原始细胞比例、美国国立综合癌症网络(NCCN)危险分层、髓外浸润有关(P<0.05)。AML患者血清lncRNA CRNDE与miR-384相对表达量呈显著负相关(r=-0.635,P<0.001)。lncRNA CRNDE低表达(<1.72)患者总生存率、无事件生存率均显著高于lncRNA CRNDE高表达(≥1.72)患者(χ^(2)值分别为27.316、18.056,P<0.001);miR-384高表达(≥0.65)患者总生存率、无事件生存率均显著高于miR-384低表达(<0.65)患者(χ^(2)=8.454,P=0.004;χ^(2)=5.333,P=0.021)。多因素Cox回归分析结果显示,lncRNA CRNDE高表达、miR-384低表达是AML患者不良预后的危险因素(P=0.003)。结论AML患者血清lncRNA CRNDE相对表达量升高,miR-384相对表达量降低,2项指标与患者病理特征和预后密切相关,或可作为评估AML患者预后的生物标志物。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 结直肠肿瘤差异表达基因 微小rna-384 急性白血病 预后
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miR-101 miR-384在喉癌患者中的表达情况及意义 被引量:2
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作者 杨喜科 姜平 付莉萍 《安徽医学》 2020年第10期1221-1224,共4页
目的探讨喉癌患者癌组织微小RNA-101(miR-101)、miR-384表达水平及临床意义。方法选取2013年10月至2014年12月南阳市中心医院院收治的经手术病理证实的104例喉癌患者,采集患者癌组织及癌旁正常黏膜组织标本,采用荧光定量聚合酶链式反应(... 目的探讨喉癌患者癌组织微小RNA-101(miR-101)、miR-384表达水平及临床意义。方法选取2013年10月至2014年12月南阳市中心医院院收治的经手术病理证实的104例喉癌患者,采集患者癌组织及癌旁正常黏膜组织标本,采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测组织标本中miR-101、miR-384的表达水平。分析喉癌组织miR-101、miR-384相对表达量与患者TNM分期、淋巴结转移等临床病理参数的相关性,随访至2019年6月,统计喉癌患者生存时间。结果喉癌组织miR-101、miR-384相对表达量分别为(0.66±0.21)、(0.54±0.17),均高于癌旁正常黏膜组织的(1.18±0.36)、(1.34±0.41),差异有统计学意义(P<0.05)。喉癌组织miR-101、miR-384相对表达量与TNM分期、淋巴结转移呈负相关(P<0.05),与性别、年龄、分型及分化程度均无明显相关性(P>0.05)。miR-101、miR-384高表达患者术后5年生存率为83.6%、84.1%,分别高于低表达患者的64.8%、65.3%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-101、miR-384在喉癌组织中的低表达与肿瘤发展及转移密切相关,二者表达量的差异可能对患者预后产生影响。 展开更多
关键词 喉癌 微小rna-384 微小rna-101 荧光定量聚合酶链式反应
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