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表皮生长因子受体-细胞外信号调节激酶信号通路下调肺癌细胞中微小RNA145的表达 被引量:6
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作者 郭跃辉 高丰厚 +2 位作者 时婧 袁海花 姜斌 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期187-192,共6页
目的探讨肺癌细胞中表皮生长因子受体(EGFR)的活化与微小RNAl45(miR-145)下调之间的关系及其分子机制。方法选择正常肺上皮细胞BEAS-2B、EGFR野生型和突变型肺癌细胞A549、H292、H1650和H1975,采用实时荧光定量PCR和Western blot... 目的探讨肺癌细胞中表皮生长因子受体(EGFR)的活化与微小RNAl45(miR-145)下调之间的关系及其分子机制。方法选择正常肺上皮细胞BEAS-2B、EGFR野生型和突变型肺癌细胞A549、H292、H1650和H1975,采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各细胞中miR-145的表达水平和EGFR的活化水平,并分析二者的相关性。分别以EGF、特异性EGFR酪氨酸激酶抑制剂AG1478或ERK1/2抑制剂U0126处理H1975、A549和BEAS^B细胞,观察各细胞中miR-145的表达。结果肺癌细胞中EGFR的活化与miR-145的表达呈显著负相关(r=-0.926,P=0.024);EGF可下调miR-145的表达,以BEAS-2B和A549细胞内miR-145的表达下调最为明显,分别下调53.0%(t=30.993,P=0.001)和42.6%(t=14.326,P=0.005);AG1478可恢复EGFR活化诱导miR.145的下调,经AG1478处理后,H1975细胞内miR-145的表达上调67.5%(t=8.269,P=0.014)。EGFR活化后可激活下游信号蛋白分子ERK1/2,U0126可逆转EGFR活化所诱导的miR-145的下调。结论在肺癌细胞中,EGFR通过ERK1/2信号分子下调miR-145的表达。 展开更多
关键词 肺肿瘤 微小rna145 表皮生长因子受体 细胞外信号调节激酶1/2 信号传导
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微小RNA145对人脐静脉血管内皮细胞增殖迁移的影响 被引量:5
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作者 范良 殷铁军 +3 位作者 李岽健 张荣阁 周荣 周斯 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期262-264,共3页
目的观察微小RNAl45(miRl45)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和迁移能力的影响。方法转染miRl45模拟物和阴性对照序列进入人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞,采用细胞计数试剂盒一8(CCK一8)检测转染后HUVECs细胞的增殖能力,Tr... 目的观察微小RNAl45(miRl45)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和迁移能力的影响。方法转染miRl45模拟物和阴性对照序列进入人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞,采用细胞计数试剂盒一8(CCK一8)检测转染后HUVECs细胞的增殖能力,Transwell小室检测转染后HUVECs细胞的迁移能力。用实时定量聚合酶链反应(Real—timePCR)检测miRl45候选靶基因去整合素一金属蛋白酶17(ADAMl7)的mRNA表达水平,Westernblot检测ADAMl7蛋白的表达水平。结果转染48h后,转染miRl45模拟物组的吸光度(A)值(0.34±0.01)明显低于阴性对照组4值(0.44±0.0l,P〈0.01);转染72h后,转染miRl45模拟物组的A值(0.60±0.09)也显著低于阴性对照组A值(0.86±0.05,P〈0.01)。转染miRl45组的细胞迁移穿过Transwell小室膜的细胞数[(135±6)个]明显少于阴性对照组穿过小室膜的细胞数[(205±30)个,P〈0.05]。转染miRl45模拟物组的ADAMl7的mRNA和蛋白水平均呈现下调,Real—timePCR的相对值为0.34±0.15(P〈0.01);Westernblot灰度值为0.65±0.21(P〈0.05)。结论miRl45能够显著抑制HUVECs的增殖和迁移能力,且miRl45可能通过ADAMl7实现调控血管内皮细胞增殖和迁移功能。 展开更多
关键词 微小rna145 脐静脉血管内皮细胞 增殖 迁移 肿瘤血管生成
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上调miRNA145对肝癌细胞的作用及其机制研究 被引量:5
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作者 王寰昱 王亚峰 +7 位作者 张昆松 张朝晖 张梓健 黄陕州 吴健 彭宝岗 陈东 周奇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1019-1025,共7页
目的:探讨微小RNA145(miRNA145)对肝癌细胞生长、凋亡及侵袭转移的影响。方法:实验将Hep G2细胞随机设置为3组:空白对照组、空质粒组及转染组,转染后real-time PCR法检测验证各组细胞miRNA145及N-钙黏蛋白(N-cadherin)mRNA的表达,并用We... 目的:探讨微小RNA145(miRNA145)对肝癌细胞生长、凋亡及侵袭转移的影响。方法:实验将Hep G2细胞随机设置为3组:空白对照组、空质粒组及转染组,转染后real-time PCR法检测验证各组细胞miRNA145及N-钙黏蛋白(N-cadherin)mRNA的表达,并用Western blot检测miRNA145目标蛋白N-钙黏蛋白的表达,MTS增殖实验检测各组细胞的生长情况,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率,Transwell法检测各组细胞的侵袭转移能力。结果:Real-time PCR结果证实转染组细胞miRNA145表达比空质粒组和空白对照组细胞明显增多(P<0.05),同时N-钙黏蛋白的表达在转染组细胞中显著减少(P<0.05);经Western blot结果证实,转染组细胞中N-钙黏蛋白表达比空质粒组和空白对照组细胞明显减少(P<0.05);转染组细胞活性在转染后第2天、第3天均明显下降,70.04%的细胞周期停止在G1期,转染后Hep G2细胞凋亡率明显增高,细胞的侵袭转移能力下降,差异均有统计学意义。结论:上调miRNA145表达能有效抑制肝癌细胞的细胞周期进展和侵袭转移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小rna145 肝细胞癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭
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MicroRNA-145在NSCLC患者血清中的表达特点及与预后的相关性 被引量:2
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作者 郭静 《临床肺科杂志》 2019年第5期899-902,共4页
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清微小RNA145(MicroRNA-145)的表达变化特点及与患者预后的相关性。方法选取我院2014年1月至2015年1月确诊的90例NSCLC患者(NSCLC组)、90例年龄及性别相匹配的健康对象作为对照组,采用RT-PCR技术检测... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清微小RNA145(MicroRNA-145)的表达变化特点及与患者预后的相关性。方法选取我院2014年1月至2015年1月确诊的90例NSCLC患者(NSCLC组)、90例年龄及性别相匹配的健康对象作为对照组,采用RT-PCR技术检测两组患者血清MicroRNA-145水平,并分析不同分化程度、病理学类型、TNM分期、病灶大小、淋巴结转移、患者中的MicroRNA-145水平差异,采用Cox比例风险回归模型分析影响NSCLC患者预后的影响因素。结果 NSCLC组患者的血清MicroRNA-145水平显著的高于对照组(P<0.05);不同TNM分期、不同分化程度、是否发生淋巴结转移的NSCLC组患者的血清MicroRNA-145水平差异具有统计学意义(P<0.05);经过2年随访,失访9例患者,存活35例患者,2年生存率为38.89%;采用Cox比例风险模型进行分析,发现NSCLC患者TNM分期增高、发生淋巴结转移、血清MicroRNA-145水平升高对患者延长生存时间不利(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清MicroRNA-145水平高表达,并且与患者病理学特征、预后情况关系密切。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 微小rna145 预后
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miRNA在多囊卵巢综合征发病中的作用机制研究进展 被引量:10
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作者 张攀 孙艳美 +3 位作者 张萍萍 张宁 苗绘 李亚丽 《山东医药》 CAS 2018年第3期99-102,共4页
目前已发现PCOS患者中多个miRNAs表达异常,如miR-320a、miR-145、miR-483、miR-93。这些miRNAs与PCOS的发生发展有关。其中miR-320a表达异常导致会导致PCOS患者卵丘细胞中雌激素合成障碍。另外miR-320a还可以影响胰岛素敏感性,导致胰岛... 目前已发现PCOS患者中多个miRNAs表达异常,如miR-320a、miR-145、miR-483、miR-93。这些miRNAs与PCOS的发生发展有关。其中miR-320a表达异常导致会导致PCOS患者卵丘细胞中雌激素合成障碍。另外miR-320a还可以影响胰岛素敏感性,导致胰岛素抵抗。miR-145及其靶基因胰岛素受体底物1共同调节PCOS患者卵丘细胞增殖,进而影响PCOS患者激素分泌。miR-483-3p可能通过靶向作用胰岛素样生长因子1抑制人卵巢颗粒细胞增殖从而阻滞细胞周期。miR-93过度表达直接抑制葡萄糖转运蛋白4表达,降低葡萄糖代谢和胰岛素敏感性,从而加重PCOS患者的胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 微小rna 微小rna320a 微小rna145 微小rna483 微小rna93
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miR-145在垂体腺瘤患者中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 范雁东 罗坤 +3 位作者 丁崇学 李彦东 孙宏杰 周凯 《疑难病杂志》 CAS 2021年第2期109-111,117,共4页
目的分析微小RNA 145(miR-145)在垂体腺瘤患者中的表达及其对预后的评估意义。方法选取2016年1月—2019年1月新疆医科大学第一附属医院神经外科诊治垂体腺瘤患者120例瘤组织样本(PA组),并选取正常垂体样本20份作为对照组,采用实时荧光定... 目的分析微小RNA 145(miR-145)在垂体腺瘤患者中的表达及其对预后的评估意义。方法选取2016年1月—2019年1月新疆医科大学第一附属医院神经外科诊治垂体腺瘤患者120例瘤组织样本(PA组),并选取正常垂体样本20份作为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定2组垂体组织miR-145表达量,分析瘤组织miR-145与患者临床/病理特征及预后的关系。结果PA组患者瘤组织miR-145的表达显著低于对照组(t/P=2.165/0.032),而在功能性垂体腺瘤(FPA)亚组患者中表达显著高于无功能垂体腺瘤(NFPA)亚组(t/P=22.725/0.000);垂体腺瘤患者瘤组织miR-145的表达在不同年龄、肿瘤侵袭性及肿瘤分型中比较,差异有统计学意义(t/P=2.369/0.021、6.167/0.000、7.492/0.000);高表达miR-145的NFPA患者总体复发率显著低于低表达患者,差异有统计学意义(17.24%vs.42.31%,χ2/P=4.176/0.041)。结论miR-145的表达减少可能是FPA发生和发展的重要因素,有望成为预后评估的新靶点。 展开更多
关键词 垂体腺瘤 微小rna 145 临床病理特征 预后
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细胞外信号调节酶5与微小RNA-145在前列腺癌组织中表达的关系 被引量:1
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作者 杨冉星 李高峰 +1 位作者 俞建军 张笑 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2326-2328,F0004,共4页
目的 探讨细胞外信号调节酶5(ERK5)与微小RNA-145(miR-145)在前列腺癌组织中表达及两者之间的关系.方法 分别采用免疫组织化学和原位杂交的方法检测组织芯片上40例前列腺癌患者80点前列腺癌组织以及15点周围正常组织中ERK5与miR-14... 目的 探讨细胞外信号调节酶5(ERK5)与微小RNA-145(miR-145)在前列腺癌组织中表达及两者之间的关系.方法 分别采用免疫组织化学和原位杂交的方法检测组织芯片上40例前列腺癌患者80点前列腺癌组织以及15点周围正常组织中ERK5与miR-145的表达,并与临床病理特征进行统计学分析.结果 ERK5在前列腺癌组织中阳性表达率为77.5%,而在癌旁组织阳性表达率为26.7%,两者表达差异有统计学意义(P<0.05).miR-145在前列腺癌组织表达率为27.5%,在癌旁组织阳性表达率为62.5%,两者差异有统计学意义(P<0.05).ERK5表达与患者的Gleason评分、前列腺特异抗原(PSA)水平、临床分期明显相关(P<0.05).miR-145在Ⅱ期的前列腺癌患者的表达率明显高于Ⅲ期,ERK5与miR-145在前列腺癌中呈负相关.结论 ERK5与miR-145在前列腺癌中表达呈负相关,提示miR-145与ERK5在前列腺癌发生及进展中密切相关. 展开更多
关键词 前列腺癌 细胞外信号调节酶5 微小rna145
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人pre-miR-145真核表达载体的构建及其对胃癌细胞游走、侵袭活性的影响 被引量:3
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作者 张桓瑜 梁铸林 +2 位作者 郑丽端 童强松 董继华 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期571-573,共3页
目的构建人微小RNAl45(miR-145)前体的真核表达载体,探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法根据人pre-miR-145序列,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接人pPG-miR-EGFP载体,转化扩增后进行测序鉴定;重组质粒在阳离子脂质体Lip... 目的构建人微小RNAl45(miR-145)前体的真核表达载体,探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法根据人pre-miR-145序列,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接人pPG-miR-EGFP载体,转化扩增后进行测序鉴定;重组质粒在阳离子脂质体Lipofectamine2000的介导下,瞬时转染人胃癌细胞株SGC-7901,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR.145表达水平,黏附实验和Transwell小室实验检测癌细胞游走、侵袭能力。结果所构建的pPG—miRl45-EGFP载体中插入基因片段与设计序列完全匹配;重组质粒转染SGC.7901细胞后,miR-145表达分别上调20.45倍(P〈0.01),细胞黏附能力分别下降51.5%(P〈0.01),细胞侵袭能力分别下降30.4%(P〈0.01)。结论成功构建人pre—miR-145真核表达载体,转染胃癌细胞过表达后,能抑制癌细胞的游走和侵袭能力。 展开更多
关键词 微小rna145 胃癌 表达载体
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胃癌组织中miR-45表达及其对胃癌原代培养细胞5-FU敏感性的影响 被引量:6
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作者 檀碧波 张明月 +3 位作者 赵群 范立侨 刘庆伟 李勇 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2020年第14期1133-1137,共5页
目的胃癌中微小RNA-145(miR-145)存在异常表达,但miR-145与胃癌化疗耐药的关系罕见报道。本研究探讨胃癌组织中miR-145表达与肿瘤细胞对氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗敏感性关系及临床意义,为改善5-FU对胃癌的化疗效果提供依据。... 目的胃癌中微小RNA-145(miR-145)存在异常表达,但miR-145与胃癌化疗耐药的关系罕见报道。本研究探讨胃癌组织中miR-145表达与肿瘤细胞对氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗敏感性关系及临床意义,为改善5-FU对胃癌的化疗效果提供依据。方法收集2017-06-01-2019-10-31河北医科大学第四医院外科确诊并手术的70例胃癌患者肿瘤及癌旁组织(距肿瘤边缘>3cm,镜下未见到癌或不典型增生组织),实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测组织中miR-145及多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)、B淋巴细胞/白血病-2(B lymphatic leukaemia 2,Bcl-2)、Livin和胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)基因的mRNA表达;免疫组化法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、Bcl-2、Livin和TS蛋白表达;噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)法检测胃癌细胞对5-FU的体外敏感性。结果miR-145在胃癌组织水平(0.389 0±0.111 8)低于癌旁正常组织(0.505 7±0.202 0),差异有统计学意义,t=-4.229,P<0.001;胃癌组织MDR1、Bcl-2和TS的mRNA水平均高于癌旁正常组织,均P<0.05。MTT结果显示,肿瘤组织细胞在5-FU作用后活性为(46.081±15.721)%;miR-145高水平的肿瘤细胞对5-FU的活性(42.223±13.478)%低于miR-145低水平者(50.406±17.090)%,t=-2.236,P=0.029;在胃癌组织中P-gp、Bcl-2和TS蛋白阳性的肿瘤组织对5-FU的活性高于阴性表达者(P<0.05),Livin表达与肿瘤组织对5-FU的活性无关(P>0.05)。miR-145与Bcl-2(r=-0.510 6,P<0.001)、TS(r=-0.403 2,P=0.000 5)的mRNA表达关系经Spearman秩相关分析发现均存在中度负相关,与MDR1(r=-0.203 2,P=0.091 6)、Livin(r=-0.174 3,P=0.149 0)的mRNA无统计学意义的相关。结论 miR-145可能通过调节Bcl-2、TS等耐药相关基因参与了胃癌对5-FU的耐药形成。 展开更多
关键词 微小rna145 胃癌 氟尿嘧啶 药物抵抗
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