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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 DNA与改良痘苗病毒组合疫苗诱导小鼠抗体应答 被引量:3
1
作者 李淑梅 李珣 +4 位作者 薛采芳 缪军 雷俊川 刘忠湘 王宪锋 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期93-96,共4页
目的探索DNA与改良痘苗病毒(MVA)组合免疫对增强恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(MSP1)抗体应答的作用。方法以人工合成MSP1全基因为基础分别构建DNA免疫质粒VR1020/190和重组MVA,单用VR1020/190或与表达质粒GM-CSF共同对小鼠进行初始免疫后... 目的探索DNA与改良痘苗病毒(MVA)组合免疫对增强恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1(MSP1)抗体应答的作用。方法以人工合成MSP1全基因为基础分别构建DNA免疫质粒VR1020/190和重组MVA,单用VR1020/190或与表达质粒GM-CSF共同对小鼠进行初始免疫后,用重组病毒追加强化,采用DNA/MVA组合方案免疫BALB/c小鼠,ELISA测定血清IgG及其亚类水平,经腹腔接种转基因伯氏疟原虫Pb-PfM19进行攻击。结果DNA免疫能有效诱导小鼠产生抗MSP1-190抗体,其终点稀释度为1∶2500,GM-CSF质粒共免疫组抗体的终点稀释度为1∶11150,抗体亚类的测定表明GM-CSF质粒显著促进了IgG1类抗体应答,MVA追加可使单独免疫组和共免疫组抗体分别增加53和10倍;两实验组产生了水平相近的抗19000抗体(1∶32000),其含量占血清中MSP1总IgG的1/4-1/3。经转基因伯氏疟原虫Pb-PfM19攻击后小鼠的存活时间并没有明显延长(P>0.05)。结论采用合成MSP1全基因进行DNA/MVA组合免疫可诱导小鼠产生显著的抗体应答,抗体的详细特性和保护作用正在进一步研究中。 展开更多
关键词 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 抗体应答 痘苗病毒 疫苗诱导 组合 改良 BALB/c小鼠 ELISA测定 DNA免疫 伯氏疟原虫 MSP1 血清IgG MVA CSF 免疫组 人工合成 表达质粒 重组病毒 IgG1 抗体亚类 总IgG 存活时间 MSPI 保护作用
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云南和海南两省不同地区恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因型的研究 被引量:10
2
作者 诸欣平 周蕾 +2 位作者 张新梅 杨静 杨雅平 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-3,共3页
目的 分析云南和海南两省恶性疟原虫的基因型及其分布。方法采用套式PCR法特异扩增MSP2基因中间多态区 ,对恶性疟原虫群体进行基因分型。结果 检测云南省 31例和海南省 2 9例恶性疟原虫患者血清 ,其中分别有 14和 18种不同的MSP2等位... 目的 分析云南和海南两省恶性疟原虫的基因型及其分布。方法采用套式PCR法特异扩增MSP2基因中间多态区 ,对恶性疟原虫群体进行基因分型。结果 检测云南省 31例和海南省 2 9例恶性疟原虫患者血清 ,其中分别有 14和 18种不同的MSP2等位基因型 ,其等位基因株存在高度的多态性 ,基因片段大小及分布频率具有地区差异。海南省不同等位基因型虫株混合感染及多重感染现象比云南省严重。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白2 基因分型 等位基因 云南 海南
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1C末端基因导入烟草叶绿体的研究 被引量:4
3
作者 陈勤 梁婉琪 +5 位作者 钱炳俊 申慧峰 曹建平 徐馀信 张大兵 汤林华 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期263-267,共5页
目的将恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1C末端msp1-42基因(3D7株)导入烟草叶绿体基因组中并进行同质化筛选,为利用叶绿体表达系统生产MSP1-42蛋白提供基础材料。方法利用烟草偏爱密码子设计克隆恶性疟原虫(3D7株)msp1-42基因的引物,从含msp1-4... 目的将恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1C末端msp1-42基因(3D7株)导入烟草叶绿体基因组中并进行同质化筛选,为利用叶绿体表达系统生产MSP1-42蛋白提供基础材料。方法利用烟草偏爱密码子设计克隆恶性疟原虫(3D7株)msp1-42基因的引物,从含msp1-42基因的pBluntmsp质粒中扩增出msp1-42,构建烟草叶绿体表达载体LRrrmsp。通过基因枪转化法转化烟草叶片,在500mg/L壮观霉素的选择压力下筛选抗性植株,采用PCR鉴定抗性植株的msp1-42基因及aadA基因,对鉴定阳性植株进行同质化筛选(叶片切碎、在含500mg/L壮观霉素分化培养基上分化出新的植株)3轮以上,并采用多重PCR分析其同质化情况。结果构建了恶性疟原虫msp1-42基因的叶绿体表达载体LRrrmsp。基因枪转化后获得6个转化子,转化频率为0.6个/枪。转化3~5d后,小块叶片开始增大增厚,并逐渐由绿色变为黄绿色,7~10d后黄化或白化,再经约30d的筛选培养,叶片上出现绿色小芽。PCR检测抗性植株的msp1-42及aadA基因,分别扩增出约900bp与500bp的条带,与预期相符。多重PCR分析从经过3轮同质化筛选植株的叶绿体基因中扩增出与未转基因烟草对照大小一致的弱条带,表明经过3轮同质化筛选的转基因植株仍含有未插入外源基因的叶绿体基因组。结论获得含恶性疟原虫msp1-42的烟草叶绿体表达载体,并将恶性疟原虫msp1-42基因导入烟草叶绿体基因组中,获得尚未完全同质化的转基因烟草。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 叶绿体 基因表达 裂殖表面蛋白1 植物疫苗
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套式PCR用于海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1和2的分型研究 被引量:7
4
作者 宋杰 江钢锋 陈沛泉 《热带医学杂志》 CAS 2002年第3期230-232,共3页
目的 了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1(pfMSP1)和表面蛋白 2 (pfMSP2 )等位基因型的分型特征。方法 采用套式PCR法分别扩增pfMSP1基因第 2区与第 3区部分片段和pfMSP2基因的中间可变区 (第 3区 ) ,对海南省恶性疟原虫分离株进... 目的 了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1(pfMSP1)和表面蛋白 2 (pfMSP2 )等位基因型的分型特征。方法 采用套式PCR法分别扩增pfMSP1基因第 2区与第 3区部分片段和pfMSP2基因的中间可变区 (第 3区 ) ,对海南省恶性疟原虫分离株进行基因分型。结果  5 5份血样中有 5 2份恶性疟疾患者扩增出pfMSP1基因片段 ,以MAD2 0型为主导型 (84 6 % ) ,K1型为次要型 ,未检出RO33型 ,两种不同等位基因混合感染率为 15 4 %。同时 ,5 5份血样中有 5 3份恶性疟疾患者扩增出pfMSP2基因片段 ,以 3D7型为主导型 (83% ) ,FC2 7型为次要型 ,混合感染率为 17%。结论 海南省恶性疟原虫的MSP1存在MAD2 0型和K1型两种等位基因型 ,以MAD2 0型为优势虫株 ;其MSP2存在 3D7型和FC2 7型两种等位基因型 ,以 3D7等位基因家族为主。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白1 裂殖表面蛋白2 基因分型 套式PCR 海南
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1-17区基因的原核表达、纯化及表达产物鉴定 被引量:6
5
作者 缪军 薛采芳 +1 位作者 李珣 甄荣芬 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第6期30-32,共3页
目的 为进一步研究和应用恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 的17区基因(MSP1- 17),本文原核表达了FUP株MSP1 的17 区基因,并纯化及鉴定了表达蛋白。方法 将MSP1- 17 基因片段克隆入原核表达载体pGEX- ... 目的 为进一步研究和应用恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1 的17区基因(MSP1- 17),本文原核表达了FUP株MSP1 的17 区基因,并纯化及鉴定了表达蛋白。方法 将MSP1- 17 基因片段克隆入原核表达载体pGEX- 4T- 1,形成pGEX- 4T- 1/MSP1- 17。IPTG诱导pGEX- 4T- 1/MSP1- 17 转化的BL21菌,纯化并用MSP1- 17 特异性单克隆抗体鉴定表达产物。结果 成功地构建了pGEX- 4T- 1/MSP1- 17,转化菌经诱导表达出与GST融合的蛋白(约40KD),纯化后纯度达72% ,MSP1- 17 特异性单克隆抗体可识别表达蛋白。结论 成功表达并纯化了MSP1- 17 蛋白,为深入研究和应用MSP1- 17 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖 表面蛋白1 原核表达 纯化
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以恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1的17区片段基因为基础构建的复合核酸疫苗候选质粒 被引量:4
6
作者 缪军 薛采芳 +1 位作者 喻启桂 秦恩强 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期321-325,共5页
目的 :构建以恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1的 17区基因为基础的复合核酸疫苗。方法 :将恶性疟原虫 FUP株 MSP1的 17区基因片段与包含若干个内源性和外源性 T细胞位点相应的基因片段相连 ,构成复合基因 ( hybrid gene,HG) ,将其分别克隆... 目的 :构建以恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1的 17区基因为基础的复合核酸疫苗。方法 :将恶性疟原虫 FUP株 MSP1的 17区基因片段与包含若干个内源性和外源性 T细胞位点相应的基因片段相连 ,构成复合基因 ( hybrid gene,HG) ,将其分别克隆入非分泌性真核表达载体 [VR10 12和 p CDNA3.1( - ) ]和经改建后的分泌型载体 VR10 12 /TPA中 ,通过 PCR和酶切鉴定重组克隆。结果和结论 :经鉴定复合基因正确地克隆入真核表达载体 ,成功地构建了 VR10 12 /HG,p CD-NA3.1/HG和 VR10 12 /TPA/HG。结论 :为探讨疟疾核酸疫苗的效果及 T细胞位点的作用打下了基础。 展开更多
关键词 核酸疫苗 裂殖 表面蛋白 质粒 聚合酶链反应
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海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 2基因的分型研究及序列分析(英文) 被引量:5
7
作者 江钢锋 陈沛泉 王善青 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2002年第3期131-134,共4页
目的 对恶性疟原虫海南株的 MSP2基因进行分型和多态性分析。 方法 采用套式 PCR法特异扩增 MSP2基因的中间可变区 (第 3区 ) ,对 4 1株恶性疟原虫分离株进行基因分型 ,并对部分目的基因片段进行直接测序。 结果  4 1份血样中有 3... 目的 对恶性疟原虫海南株的 MSP2基因进行分型和多态性分析。 方法 采用套式 PCR法特异扩增 MSP2基因的中间可变区 (第 3区 ) ,对 4 1株恶性疟原虫分离株进行基因分型 ,并对部分目的基因片段进行直接测序。 结果  4 1份血样中有 39份共扩增得到 5 5个目的基因片段 ,以 3D7型为主 (2 8份血样 ,36个基因片段 ) ,两种等位基因家族混合感染的情况极少见。序列分析结果表明 ,海南省恶性疟原虫虫株的 MSP2中间重复序列区变异程度大。 结论 海南省恶性疟原虫的 MSP2以 3D7等位基因家族为主 。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白2 基因分型 等位基因多态性 序列分析
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海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白3的分型研究 被引量:3
8
作者 吴强 江钢锋 陈沛泉 《广东药学院学报》 CAS 2004年第5期527-529,共3页
目的了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 3(pfMSP3)等位基因型的分型特征。方法采用套式PCR法扩增pfMSP3基因的可变区序列 ,对海南省恶性疟原虫分离株进行基因分型 ,并对其代表株的基因片段进行序列分析。结果 4 1份血样扩增出 5 1个pf... 目的了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 3(pfMSP3)等位基因型的分型特征。方法采用套式PCR法扩增pfMSP3基因的可变区序列 ,对海南省恶性疟原虫分离株进行基因分型 ,并对其代表株的基因片段进行序列分析。结果 4 1份血样扩增出 5 1个pfMSP3基因片段 ,以 3D7型为主导型 (78.4 % ) ,K1型为次要型 (2 1.6 % ) ,其中 ,混合感染率为 2 4 .4 %。序列分析表明 ,海南省恶性疟原虫虫株的 3D7型和K1型的可变区序列与 3D7和K1原型序列具有高度同源性。结论海南省恶性疟原虫的MSP3存在 3D7型和K1型两种等位基因型 ,以 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白3 基因分型 序列分析
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2融合HBS基因重组质粒的免疫原性研究 被引量:1
9
作者 赖秀球 朱家勇 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期63-67,共5页
目的 构建恶性疟原虫海南分离株 (FCC1/HN)裂殖子表面蛋白 2 (MSP2 )融合HBsAg基因片断真核重组表达质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS ,观察该DNA疫苗的免疫特性。方法  (1)以恶性疟原虫海南分离株 (FCC1/HN)基因组为模板 ,扩增出pfMSP2 DNA... 目的 构建恶性疟原虫海南分离株 (FCC1/HN)裂殖子表面蛋白 2 (MSP2 )融合HBsAg基因片断真核重组表达质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS ,观察该DNA疫苗的免疫特性。方法  (1)以恶性疟原虫海南分离株 (FCC1/HN)基因组为模板 ,扩增出pfMSP2 DNA片断 ,将该片段克隆入质粒pVXORF1-HBS中HBS的上游并与之紧密相连 ,构建质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS ;构建真核重组表达质粒 pVXORF1-PfMSP2 以作为对照。 (2 )用上述构建的质粒及空质粒 pVXORF1免疫KM小鼠 ,以ELISA检测血清IgG抗体。 结果  (1)筛选出的重组子为编码FCC1/HNMSP2 基因片断的重组质粒 pVXORF1-PfMSP2 -HBS及 pVXORF1-PfMSP2 。 (2 )裸DNA尾根多点注射KM小鼠 ,显示 pVXORF1-PfMSP2 -HBS组小鼠较pVXORF1-PfMSP2 组小鼠产生抗PfMSP2 蛋白的抗体效价明显增高 ,二者比较 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1)。结论 PfMSP2 融合HBsAg基因片段激发机体产生抗PfMSP2 抗体的能力显著增强 ,提示PfMSP2 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白2 融合HBS基因 重组质粒 免疫原性 研究 DNA疫苗
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2基因克隆及其在大肠杆菌中的表达
10
作者 陈志辉 管惟滨 +2 位作者 吴少廷 缪为民 焦炳华 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期322-325,共4页
目的:克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2全基因,并在大肠杆菌中进行表达。方法:采用PCR扩增恶性疟原虫FCC-1/HN株MSP2基因,克隆插入pUC19,并重组人表达质粒载体中,转化大肠杆菌,诱导重组质粒pBK-CMV/... 目的:克隆恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2全基因,并在大肠杆菌中进行表达。方法:采用PCR扩增恶性疟原虫FCC-1/HN株MSP2基因,克隆插入pUC19,并重组人表达质粒载体中,转化大肠杆菌,诱导重组质粒pBK-CMV/msp2表达MSP2蛋白抗原,对表达产物进行SDS-PAGE,dot-ELISA和Wewtern blot鉴定。结果:PCR扩增出824bpDNA片段。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白2 基因克隆 大肠杆菌
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-2DNA疫苗诱导小鼠T淋巴细胞的增殖
11
作者 张仁利 吴少庭 +4 位作者 高世同 林敏 郑春福 陈雅棠 李富荣 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期48-51,共4页
目的 为了探讨恶性疟原虫FCC - 1/HN株裂殖子表面蛋白 - 2 (MSP - 2 )DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组真核表达质粒pBK/MSP - 2经骨骼肌注射BALB/c小鼠 ,小鼠经DNA疫苗免疫 8w后 ,用流... 目的 为了探讨恶性疟原虫FCC - 1/HN株裂殖子表面蛋白 - 2 (MSP - 2 )DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法 将重组真核表达质粒pBK/MSP - 2经骨骼肌注射BALB/c小鼠 ,小鼠经DNA疫苗免疫 8w后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN -γ和IL - 2的产生。结果 与对照组相比 ,疫苗组CD+ 4CD8+ T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN -γ有一个高浓度的分泌。结论 恶性疟原虫FCC - 1/HNMSP - 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白-2 疫苗
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-2 DNA疫苗诱导小鼠T淋巴细胞的增殖
12
作者 邱亚群 尹卫国 张倩 《中国热带医学》 CAS 2004年第2期160-162,共3页
目的 探讨疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )DNA疫苗在小鼠体内诱导免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。 方法 将重组真核表达质粒PBK/MSP 2经骨骼肌注射BALB/c小鼠 ,小鼠经DNA疫苗免疫 8周后 ,用流式细胞仪分析脾脏... 目的 探讨疟原虫FCC 1/HN株裂殖子表面蛋白 2 (MSP 2 )DNA疫苗在小鼠体内诱导免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。 方法 将重组真核表达质粒PBK/MSP 2经骨骼肌注射BALB/c小鼠 ,小鼠经DNA疫苗免疫 8周后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN γ和IL 2的产生。 结果 与对照组相比 ,疫苗组CD4+CD8+T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN γ有高浓度的分泌。 结论 恶性疟原虫FCC 1/HNMSP 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白-2 DNA疫苗 小鼠 T淋巴细胞 细胞增殖 免疫学
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白疟疾疫苗的研究进展 被引量:2
13
作者 赖秀球 《国外医学(寄生虫病分册)》 2002年第6期250-254,共5页
疟疾是一种危害严重的虫媒传染病,在疟原虫对抗疟药物的耐药性及媒介蚊对杀虫剂耐药性日益增强的今天,寻求一种新型、高效、安全的抗疟途径—抗疟疾疫苗的研制备受科研人员的关注。本文对恶性疟原虫裂殖子表面蛋白抗疟疾疫苗的研究进展... 疟疾是一种危害严重的虫媒传染病,在疟原虫对抗疟药物的耐药性及媒介蚊对杀虫剂耐药性日益增强的今天,寻求一种新型、高效、安全的抗疟途径—抗疟疾疫苗的研制备受科研人员的关注。本文对恶性疟原虫裂殖子表面蛋白抗疟疾疫苗的研究进展作一概述。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 研究进展 裂殖表面蛋白 疟疾疫苗
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用四环素调控启动子调控表达恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1全合成基因
14
作者 钱锋 潘卫庆 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期193-196,共4页
[目的 ]用含四环素调控启动子 (PLtetO 1 启动子 )的pZE11质粒表达恶性疟原虫MSP1全合成基因及其C末端 42kDa片段。 [方法 ]将MSP1全合成基因和MSP1C末端 42kDa片段基因分别克隆入受四环素诱导调控的质粒pZE11上 ,转化大肠杆菌DH5αZ1,... [目的 ]用含四环素调控启动子 (PLtetO 1 启动子 )的pZE11质粒表达恶性疟原虫MSP1全合成基因及其C末端 42kDa片段。 [方法 ]将MSP1全合成基因和MSP1C末端 42kDa片段基因分别克隆入受四环素诱导调控的质粒pZE11上 ,转化大肠杆菌DH5αZ1,质粒经酶切、SDS PAGE电泳和Westernblotting反应鉴定重组质粒的构建和重组质粒在DH5αZ1中的表达。 [结果 ]成功地构建了重组pZE11 MSP1质粒和pZE11 MSP1 42质粒 ,SDS PAGE电泳和免疫印迹 (Westernblotting)反应证明两个重组质粒在DH5αZ1中表达了 190和 42kDa蛋白。 [结论 ]含PLtetO 1 启动子的新型表达载体成功地表达了恶性疟原虫MSP1蛋白 ,降低表达产物对宿主细胞的毒性 ,并可为构建受四环素诱导的疟疾———伤寒口服疫苗株提供依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 恶性疟原虫 裂殖表现蛋白1 基因表达
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血清高水平抗恶性疟原虫裂殖子表面蛋白2(MSP2)抗体与肯尼亚(沿海地区)的临床疟疾风险降低有相关性
15
作者 夏惠 《国外医学(寄生虫病分册)》 2005年第6期280-280,共1页
关键词 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 风险评估 肯尼亚 高水平 临床 沿海地区 疟疾 抗体 MSP2 血清
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白疫苗
16
作者 张昀 《生物制品快讯》 2002年第6期7-7,共1页
关键词 动物实验 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 疫苗
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恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1羧基端片段基因核酸疫苗的构建
17
作者 缪军 薛采芳 +1 位作者 喻启桂 秦恩强 《第四军医大学学报》 1997年第1期F003-F003,共1页
核酸疫苗能引起明显的细胞免疫反应,在体内为真核天然表达,不需体外表达、纯化等繁琐工作;已有相当数量的试验表明其可引起明显的免疫保护.目前疟原虫仅有关鼠疟约氏疟红前期核酸疫苗的报道[Sedegah M et al.ProcNatl Acad Sci USA,1994;
关键词 核酸疫苗 裂殖 表面蛋白1 疟原虫
全文增补中
恶性疟原虫裂殖子表面蛋白MSP2期特异性反义转录
18
作者 钱磊 《国外医学(寄生虫病分册)》 2003年第5期227-228,共2页
关键词 恶性疟原虫 裂殖 表面蛋白 MSP2期 特异性反义转录
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恶性疟原虫海南分离株裂殖子表面蛋白1基因的分型研究 被引量:9
19
作者 江钢锋 洪佳冬 +2 位作者 陈沛泉 王善青 蒙锋 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期4-6,共3页
目的 了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1(PfMSP1)等位基因型的分型特征。方法 采用套式PCR方法 ,用几对PfMSP1特异引物扩增疟原虫虫株PfMSP1基因第 2区与第 3区部分片段 ,并对等位基因型代表株的基因片段进行序列分析。结果  39... 目的 了解海南省恶性疟原虫裂殖子表面蛋白 1(PfMSP1)等位基因型的分型特征。方法 采用套式PCR方法 ,用几对PfMSP1特异引物扩增疟原虫虫株PfMSP1基因第 2区与第 3区部分片段 ,并对等位基因型代表株的基因片段进行序列分析。结果  39份血样中有 36份恶性疟患者共扩增出 44个PfMSP1基因片段 ,以MAD2 0型为主导型 (占 75 % ) ,K1型为次要型 ,未检出RO33型。两种不同等位基因型的混合感染率为 19 4%。序列分析表明 ,海南省恶性疟原虫虫株的MAD2 0型和K1型第 2区序列与MAD2 0和K1原型序列具有高度同源性。结论 海南省恶性疟原虫虫株存在MAD2 0型和K1型两种等位基因型 ,以MAD2 0型为优势虫株。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 裂殖表面蛋白1 基因分型 序列分析
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中国脑型疟患者恶性疟原虫分离株裂殖子表面蛋白MSP1第16-17区基因和MSP2基因的分子克隆与鉴定 被引量:4
20
作者 边中启 宋关鸿 +2 位作者 管惟滨 严维耀 郑兆鑫 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期1-6,共6页
目的 :为设计研制安全有效的人脑型疟疫苗提供理论依据。方法 :根据 MAD2 0株裂殖子表面蛋白 1( MSP1)和 FC2 7株裂殖子表面蛋白 2 ( MSP2 )基因编码区高度保守碱基设计并合成两对引物 ,应用多聚酶链反应 ( PCR)技术对 5例脑型疟患者恶... 目的 :为设计研制安全有效的人脑型疟疫苗提供理论依据。方法 :根据 MAD2 0株裂殖子表面蛋白 1( MSP1)和 FC2 7株裂殖子表面蛋白 2 ( MSP2 )基因编码区高度保守碱基设计并合成两对引物 ,应用多聚酶链反应 ( PCR)技术对 5例脑型疟患者恶性疟原虫云南省勐腊县勐罕分离株 CMH/ YN和云南省盈江县农场 CYJ/ YN分离株基因组 DNA MSP1第 13- 17区基因和MSP2基因进行扩增 ,并将扩增产物分别经 Eco RI和 Kpn I,Bam HI和 Hind III双酶切后 ,分子定向克隆 M13mp18和 M13mp19载体 ,转染大肠杆菌 ( E.coli) TG1,从含 X- gal和 IPTG的 LB平板上 ,将随机筛选得到的单个无色噬菌斑经 E.coli JM10 3扩增 ,用碱裂解法抽提重组子复制型DNA ( RFDNA)后 ,再分别经 Eco RI和 Kpn I,Bam HI和 Hind III双酶切鉴定。结果 :证实重组子为编码脑型疟患者恶性疟原虫 CMH/ YN和 CYJ/ YN分离株 MSP1第 16- 17区基因和 MSP2基因分子克隆 M13载体。结论 :首次报道确证脑型疟患者恶性疟原虫 CMH/ YN和 CYJ/ YN分离株MSP1第 16- 17区基因和 MSP2基因分别与 MAD2 0株 MSP1和 FC2 7株 MSP2相应基因完全一致。这些发现对研究预防人脑型疟疫苗和建立一种新型脑型疟恶性疟原虫检测方法具有重要意义。 展开更多
关键词 脑型疟 疟原虫 裂殖 表面蛋白 克隆 疫苗
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