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岩藻黄质活化核因子E2相关因子2改善糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡
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作者 谢婷 刘婷婷 +3 位作者 曾雪慧 李亚敏 周庞虎 易念华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第23期3609-3614,共6页
背景:骨质疏松症发病率高,易导致骨折等并发症的发生,而现有药物干预不良反应大,难以满足临床需求。目的:探索岩藻黄质对糖皮质激素诱导成骨细胞骨质疏松症模型的作用与潜在机制。方法:将原代大鼠成骨细胞接种于6孔板内,待细胞融合度达... 背景:骨质疏松症发病率高,易导致骨折等并发症的发生,而现有药物干预不良反应大,难以满足临床需求。目的:探索岩藻黄质对糖皮质激素诱导成骨细胞骨质疏松症模型的作用与潜在机制。方法:将原代大鼠成骨细胞接种于6孔板内,待细胞融合度达到80%后分4组干预:对照组单纯培养24 h,糖皮质激素组使用地塞米松干预24 h,岩藻黄质组使用岩藻黄质干预24 h,糖皮质激素+岩藻黄质组使用地塞米松与岩藻黄质同时干预24 h。干预结束后,检测细胞增殖、凋亡、细胞内活性氧含量以及凋亡相关蛋白、骨形成相关蛋白、细胞核核因子E2相关因子2的蛋白表达。结果与结论:①CCK-8检测显示,与对照组比较,糖皮质激素组细胞活性降低(P<0.05);与糖皮质激素组比较,糖皮质激素+岩藻黄质组细胞活性升高(P<0.05);②JC-1线粒体膜电位染色与流式细胞学检测显示,与对照组比较,糖皮质激素组细胞凋亡比例增加(P<0.05);与糖皮质激素组比较,糖皮质激素+岩藻黄质组细胞凋亡比例减少(P<0.05);③Western Blot检测显示,与对照组比较,糖皮质激素组BAX、裂解聚ADP核糖聚合酶的蛋白表达升高(P<0.05),BCL2、Ⅰ型胶原蛋白α1肽链、碱性磷酸酶、骨钙蛋白、RUNX2的蛋白表达降低(P<0.05);与糖皮质激素组比较,糖皮质激素+岩藻黄质组BAX、裂解聚ADP核糖聚合酶的蛋白表达降低(P<0.05),BCL2、Ⅰ型胶原蛋白α1肽链、碱性磷酸酶、骨钙蛋白、RUNX2的蛋白表达升高(P<0.05);④荧光探针检测显示,与对照组比较,糖皮质激素组活性氧含量增加(P<0.05);与糖皮质激素组比较,糖皮质激素+岩藻黄质组活性氧含量减少(P<0.05);⑤免疫荧光染色与Western Blot检测显示,与对照组比较,糖皮质激素组细胞核核因子E2相关因子2的蛋白表达降低(P<0.05);与糖皮质激素组比较,糖皮质激素+岩藻黄质组细胞核核因子E2相关因子2的蛋白表达升高(P<0.05);⑥结果表明,岩藻黄质通过活化核因子E2相关因子2改善糖皮质激素诱导的成骨细胞凋亡与骨形成相关分子表达。 展开更多
关键词 骨质疏松症 糖皮质激素 成骨细胞 细胞凋亡 岩藻黄质 活性氧 核因子E2相关因子2 核转位
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血管内皮生长因子165/骨形态发生蛋白改善缺氧复氧状态下成骨细胞损伤
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作者 赵伊婷 张裕祥 +1 位作者 马洁 何雪娇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第35期5669-5674,共6页
背景:研究发现,血管内皮生长因子165和骨形态发生蛋白两种因子在缺氧复氧过程中相互作用,通过调节细胞内信号通路的活化,参与骨细胞损伤的修复过程。目的:进一步探究血管内皮生长因子165/骨形态发生蛋白与缺氧复氧成骨细胞损伤的关系分... 背景:研究发现,血管内皮生长因子165和骨形态发生蛋白两种因子在缺氧复氧过程中相互作用,通过调节细胞内信号通路的活化,参与骨细胞损伤的修复过程。目的:进一步探究血管内皮生长因子165/骨形态发生蛋白与缺氧复氧成骨细胞损伤的关系分析。方法:取成骨细胞,建立缺氧复氧损伤模型,建模前后Real-Time PCR法和免疫印迹法检测血管内皮生长因子165、骨形态发生蛋白2的mRNA及蛋白表达。分别给予建模后成骨细胞不同质量浓度(10,20,40ng/mL)血管内皮生长因子165或骨形态发生蛋白2处理12,24,36,48,72 h,CCK-8法检测细胞增殖,DAPI检测细胞凋亡。结果与结论:(1)与建模前相比,建模后成骨细胞中血管内皮生长因子165、骨形态发生蛋白2的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05);(2)成骨细胞增殖率随着血管内皮生长因子165质量浓度的升高而明显升高(P<0.05);成骨细胞凋亡率随着血管内皮生长因子165质量浓度的升高而明显降低(P<0.05);(3)成骨细胞增殖率随着骨形态发生蛋白2质量浓度的升高而明显升高(P<0.05);成骨细胞凋亡率随着骨形态发生蛋白质量浓度的升高而明显降低(P<0.05);(4)结果表明,血管内皮生长因子165、骨形态发生蛋白在缺氧复氧成骨细胞损伤中低表达,给予血管内皮生长因子165、骨形态发生蛋白处理后缺氧复氧成骨细胞损伤明显降低,且呈浓度依赖性,提示血管内皮生长因子、骨形态发生蛋白对缺氧复氧成骨细胞损伤有明显保护作用。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子165 骨形态发生蛋白2 缺氧复氧 成骨细胞 细胞凋亡
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氧化应激促进成骨细胞铁死亡介导激素性股骨头坏死的病理过程 被引量:2
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作者 章家皓 刘予豪 +3 位作者 周驰 莫亮 方汉军 陈镇秋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第20期3202-3208,共7页
背景:研究表明,糖皮质激素诱发股骨头坏死过程中骨代谢失衡与氧化应激密切相关。目的:探究氧化应激诱导成骨细胞铁死亡、促进成骨细胞凋亡、参与激素性股骨头坏死的病理机制。方法:收集47例激素性股骨头坏死患者的一般资料、血清标本和... 背景:研究表明,糖皮质激素诱发股骨头坏死过程中骨代谢失衡与氧化应激密切相关。目的:探究氧化应激诱导成骨细胞铁死亡、促进成骨细胞凋亡、参与激素性股骨头坏死的病理机制。方法:收集47例激素性股骨头坏死患者的一般资料、血清标本和6例股骨头标本,根据ARCO分期标准将血清标本分为ARCOⅡ期、Ⅲ期及Ⅳ期,股骨头标本分为ARCOⅢ期及Ⅳ期。检测血清中丙二醛、超氧化物歧化酶1水平;通过DIA蛋白定量测序、免疫蛋白印迹试验及碱性磷酸检测并验证患者股骨头中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白的表达。结果与结论:①激素性股骨头坏死患者的ARCO分期与年龄、性别、侧别无关;②ARCOⅢ期患者血清中丙二醛、超氧化物歧化酶1水平较Ⅱ期、Ⅳ期高;③在坏死区域与正常区域对比中,DIA蛋白定量测序结果显示,差异蛋白的功能主要与氧化还原相关,其中坏死区域中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白表达较正常区域低,且ARCOⅣ期低于Ⅲ期;Western blot验证了DIA蛋白定量结果,且坏死区域中碱性磷酸酶活性低于正常区域,Ⅳ期低于Ⅲ期;④在坏死区域与硬化带区域中,差异蛋白的功能同样与氧化还原相关,且坏死区域中超氧化物歧化酶1、谷胱甘肽过氧化物酶4、Bcl-2蛋白表达及碱性磷酸酶活性较硬化带区域低,且Ⅳ期低于Ⅲ期;⑤结果说明,糖皮质激素可通过上调氧化应激水平,诱导成骨细胞铁死亡的发生,抑制成骨功能,影响激素性股骨头坏死的进展。 展开更多
关键词 氧化应激 铁死亡 成骨细胞 激素性股骨头坏死 SOD1 GPX4
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结核分枝杆菌对成骨细胞中抑瘤素M表达的影响
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作者 方德健 《西藏医药》 2024年第2期155-157,共3页
目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis MTB)对成骨细胞中促炎细胞因子抑瘤素M(oncostatin M,OSM)表达的影响。方法利用MTB标准株侵染成骨细胞模拟体外骨结核微环境。通过预实验筛选MTB侵染成骨细胞的最佳质量浓度和最佳作... 目的探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis MTB)对成骨细胞中促炎细胞因子抑瘤素M(oncostatin M,OSM)表达的影响。方法利用MTB标准株侵染成骨细胞模拟体外骨结核微环境。通过预实验筛选MTB侵染成骨细胞的最佳质量浓度和最佳作用时间。成骨细胞随机分为三组,A组为对照组,是未被MTB侵染的人成骨细胞组;B组和C组为实验组,分别是被感染复数为1:1和1:5浓度的MTB侵染的人成骨细胞,侵染时间为6小时。随后用荧光显微镜观察成骨细胞的凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测上清液中抑瘤素M的表达水平。结果1.成骨细胞经MTB侵染后,凋亡明显增加,且随着感染复数增大,凋亡情况越明显。2.MTB侵染成骨细胞后,随着成骨细胞凋亡的增加,其分泌的OSM水平亦相应增加。结论OSM与MTB诱导的成骨细胞凋亡有关,OSM可能通过参与骨结核的炎性反应过程,影响成骨细胞的增殖与分化,进而参与骨破坏进程。 展开更多
关键词 抑瘤素M 成骨细胞 结核分枝杆菌 凋亡
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成骨细胞程序性死亡的研究进展
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作者 梁松林 成文翔 +2 位作者 张鹏 李志超 李念虎 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期385-390,共6页
成骨细胞是促进骨骼生成并维持骨强度的主要细胞类型,其功能异常可以直接导致骨强度下降。程序性死亡是细胞代谢的终末事件之一,目前共有五种常见的细胞程序性死亡:凋亡、自噬、铁死亡、焦亡和坏死性凋亡,它们彼此间既协作又拮抗,在细... 成骨细胞是促进骨骼生成并维持骨强度的主要细胞类型,其功能异常可以直接导致骨强度下降。程序性死亡是细胞代谢的终末事件之一,目前共有五种常见的细胞程序性死亡:凋亡、自噬、铁死亡、焦亡和坏死性凋亡,它们彼此间既协作又拮抗,在细胞代谢的不同阶段响应不同刺激发挥影响,是细胞正常行使职能的前提。成骨细胞的程序性死亡对骨生成及骨稳态的维持至关重要,因此调节成骨细胞的程序性死亡有望对骨质疏松起到直接治疗作用。本文拟对骨质疏松中成骨细胞程序性死亡的作用及串扰关联进行综述,以期为调控成骨细胞死亡从而缓解骨质疏松的研究提供新的思路与参考。 展开更多
关键词 成骨细胞 凋亡 自噬 铁死亡 焦亡 坏死性凋亡
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蒙药壮西-4调控miR-204对骨质疏松大鼠成骨细胞增殖的影响及机制
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作者 图布新 通啦嘎 +4 位作者 包海金 李桂花 色·色日道尔吉 瑟·道尔吉巴图 浩仁他本 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1124-1128,共5页
目的 探讨蒙药壮西-4调控miR-204对骨质疏松大鼠成骨细胞增殖的影响及机制。方法 将60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、低、中和高剂量组各10只。建模各组给予维A酸溶液灌胃建立骨质疏松模型,连续14 d。阳性对照... 目的 探讨蒙药壮西-4调控miR-204对骨质疏松大鼠成骨细胞增殖的影响及机制。方法 将60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、低、中和高剂量组各10只。建模各组给予维A酸溶液灌胃建立骨质疏松模型,连续14 d。阳性对照组给予戊酸雌二醇灌胃,低、中、高剂量组分别给予不同剂量(50、100、200 mg/kg)蒙药壮西-4灌胃,空白对照组和模型对照组给予同体积的生理盐水灌胃,连续42 d。采用骨密度(BMD)仪测定大鼠第4腰椎及右股骨的BMD值,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)血清miR-204表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清骨桥蛋白(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)含量。取MC3T3-E1细胞,分为对照组、促进组、抑制组和药物组,分别加入生理盐水、miR-204模拟物、miR-204抑制剂和蒙药壮西-4。采用RT-PCR法检测miR-204表达量,Western印迹检测RANKL、OPG蛋白表达量,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖情况,计算细胞存活率。结果 各组第4腰椎和右股骨BMD值、血清miR-204表达量、血清OPG含量差异有统计学意义(均P<0.05);空白对照组明显高于建模各组,模型对照组明显低于低、中、高剂量组、阳性对照组,阳性对照组和中剂量组明显高于低、高剂量组(均P<0.05)。各组血清RANKL含量差异有统计学意义(均P<0.05),空白对照组明显低于建模各组(均P<0.05),模型对照组明显高于低、中、高剂量组和阳性对照组(均P<0.05),阳性对照组和中剂量组明显低于低、高剂量组(均P<0.05)。各组miR-204表达量、OPG蛋白表达量、细胞存活率差异有统计学意义(均P<0.05),促进组和药物组明显高于对照组和抑制组,抑制组明显低于对照组(均P<0.05)。各组RANKL蛋白表达量差异具有统计学意义(均P<0.05),促进组和药物组明显低于对照组和抑制组,抑制组明显高于对照组(均P<0.05)。结论 蒙药壮西-4能增加骨质疏松大鼠BMD,其可能机制为通过上调miR-204表达促进大鼠成骨细胞增殖。 展开更多
关键词 蒙药壮西-4 miR-204 骨质疏松 成骨细胞 增殖
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生物力学作用对成骨细胞生物特性的影响
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作者 熊婉琦 李振豪 +6 位作者 崔焱 刘家河 李陈致 吴铭健 李炎城 杨帆 刘保一 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第21期3407-3412,共6页
背景:骨形成是成骨细胞合成和分泌类骨质并促进其矿化的过程,在此过程中普遍存在力学信号转导。成骨细胞在体内主要受到重力、压应力、拉伸力、流体剪切力和静水压力等力学因素的调节,不同的力学作用通过激素、细胞骨架蛋白和微小RNA等... 背景:骨形成是成骨细胞合成和分泌类骨质并促进其矿化的过程,在此过程中普遍存在力学信号转导。成骨细胞在体内主要受到重力、压应力、拉伸力、流体剪切力和静水压力等力学因素的调节,不同的力学作用通过激素、细胞骨架蛋白和微小RNA等调节成骨细胞的增殖、分化和凋亡等生物特性。通过明确生物力学作用对成骨细胞的影响,为成骨细胞在骨代谢疾病中的治疗提供思路及参考依据。目的:综述不同生物力学作用对成骨细胞生物特性的影响。方法:采用PubMed、Web of Science、FMRS、中国知网及万方数据库进行文献检索,检索2000-2023年发表的相关文献,纳入与生物力学作用对成骨细胞影响有关的包括基础研究及组织工程研究在内的所有文献,最终对70篇文献进行综述。结果与结论:不同生物力学作用对成骨细胞的增殖、分化和凋亡等生物特性产生影响,这些影响和作用力的强度和时间相关,具体作用如下:①微重力条件下,成骨细胞的增殖和分化受到抑制,导致骨密度下降,从而形成骨质疏松症。②相比于微重力,超重力对成骨细胞的增殖产生促进作用。③压应力对成骨细胞的影响存在加载强度和时间的依赖性。适宜的压应力可促进成骨细胞的增殖和分化,有益于骨组织的形成和修复;而过度的压应力则会导致成骨细胞凋亡和骨组织的破坏。④在成骨细胞上施加不同类型的拉伸力,其生物学效应存在差异。研究表明,伸长率在0-12%的范围内对成骨细胞的增殖有促进作用。⑤流体剪切力具有促进成骨细胞增殖和分化的作用,同时还能够增强生物材料的骨诱导作用。⑥静水压可以对成骨细胞的增殖、分化和凋亡等生物学行为产生影响,这些作用与静水压施加的时间和强度密切相关。研究不同生物力学作用对成骨细胞的影响,对于深入理解骨生长和维护机制具有重要意义。 展开更多
关键词 成骨细胞 生物力学 生物特性 信号通路 机械转导 微小RNA 骨代谢 骨质疏松
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Caveolin-1介导流体剪切应力调控MC3T3-E1成骨细胞增殖和凋亡
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作者 移植 詹红伟 +5 位作者 王耀斌 梁晓远 牛永康 向德剑 耿彬 夏亚一 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第34期5440-5445,共6页
背景:流体剪切应力在成骨细胞增殖和凋亡中起着重要作用。然而,Caveolin-1(Cav-1)是否参与成骨细胞中流体剪切应力诱导的增殖与凋亡过程尚不清楚。目的:探讨Cav-1在流体剪切应力调控成骨细胞增殖和凋亡中的作用。方法:选择生长状态良好... 背景:流体剪切应力在成骨细胞增殖和凋亡中起着重要作用。然而,Caveolin-1(Cav-1)是否参与成骨细胞中流体剪切应力诱导的增殖与凋亡过程尚不清楚。目的:探讨Cav-1在流体剪切应力调控成骨细胞增殖和凋亡中的作用。方法:选择生长状态良好的MC3T3-E1成骨细胞,加载不同时间(0,30,60,90 min)且强度为1.2 Pa的流体剪切应力,观察Cav-1蛋白的表达,筛选出时间为60 min的条件进行实验。将MC3T3-E1细胞分为:对照组、流体剪切应力组、流体剪切应力+pcDNA 3.1组(对照)、流体剪切应力+pcDNA Cav-1组(过表达质粒),分别采用流体剪切应力和过表达Cav-1等方式干预,通过q RT-PCR和Western blot检测MC3T3-E1细胞内增殖以及凋亡相关分子的表达量;通过CCK-8与Ed U实验检测MC3T3-E1细胞增殖活性;采用Hoechst 33258染色以及流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果与结论:加载流体剪切应力后MC3T3-E1细胞中Cav-1的表达显著下调,且加载60 min表达水平最低。过表达Cav-1减弱了流体剪切应力促进MC3T3-E1细胞增殖及抑制细胞凋亡的效应。说明Cav-1在流体剪切应力调节成骨细胞增殖和凋亡过程中具有重要的作用,并可能为骨质疏松症提供潜在治疗策略。 展开更多
关键词 骨质疏松 流体剪切应力 CAVEOLIN-1 成骨细胞 增殖 凋亡
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成骨细胞线粒体移植促骨髓间充质干细胞体外增殖、迁移和成骨分化
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作者 杨雅丽 司琪琦 +2 位作者 王思瑜 周嘉裕 郭泰林 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期150-158,共9页
为探究成骨细胞(OBs)线粒体移植对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化的影响,本研究体外人工提取BMSCs线粒体和OBs线粒体,分别移植入受体BMSCs.实验结果发现,接受成骨细胞线粒体的BMSCs表现出显著增强的增殖、迁移、抗凋亡和成骨能力.此... 为探究成骨细胞(OBs)线粒体移植对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化的影响,本研究体外人工提取BMSCs线粒体和OBs线粒体,分别移植入受体BMSCs.实验结果发现,接受成骨细胞线粒体的BMSCs表现出显著增强的增殖、迁移、抗凋亡和成骨能力.此外,接受成骨细胞线粒体的BMSCs胞内活性氧水平降低、氧气消耗速率上调、ATP产量增加.以上结果表明,(1)成骨细胞线粒体移植能够增强体外BMSCs功能,促进其向成骨分化;(2)相较于接受骨髓间充质干细胞线粒体,接受成骨细胞线粒体移植的受体BMSCs具有更强的有氧代谢能力以及更强的成骨分化能力,有望为骨生长与骨损伤修复提供一种候选方法 . 展开更多
关键词 线粒体移植 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 骨分化 代谢
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基于高通量测序对大鼠骨髓干细胞及诱导后成骨细胞的环状RNA表达差异分析研究
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作者 周琦琪 魏薇 +3 位作者 崔杰 韩祥祯 何惠宇 孙皓 《口腔颌面修复学杂志》 2024年第2期88-96,共9页
目的:对环状RNA调控大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)及成骨分化的差异表达进行研究,构建大鼠BMSCs全转组录基因数据库,获得特异性基因表达谱,进行功能注释和信号通路等生物信息学分析。方法:采用高通... 目的:对环状RNA调控大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)及成骨分化的差异表达进行研究,构建大鼠BMSCs全转组录基因数据库,获得特异性基因表达谱,进行功能注释和信号通路等生物信息学分析。方法:采用高通量测序技术检测大鼠BMSCs的成骨分化过程中环状RNA(circular RNA,circRNA)部分的差异性表达。通过基因本体(gene ontology,GO)注释分析以及京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)进行通路富集分析,对具有差异性表达的环状RNA进行功能注释。结果:在大鼠BMSCs成骨分化过程中,每个样本中预测到的circRNA数量为4230个,每个样本中预测到的特异的circRNA为1820个。高通量测序结果显示,在大鼠BMSCs成骨分化过程中共检测到2822个circRNA;总共检测到29个具有差异性表达的circRNA。结论:发现许多差异表达的circRNA与细胞的成骨分化密切相关。这些差异表达circRNA为潜在调控大鼠BMSCs及成骨分化的分子机制提供线索与依据。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 全转录测序 成骨细胞 基因分析 环状RNA
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乳鼠原代成骨细胞的培养优化
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作者 王左钰 周阳 杨俊伟 《基础医学与临床》 2024年第2期159-166,共8页
目的 探讨适宜培养乳鼠原代成骨细胞的培养基配比及培养时间,为体外成骨细胞原代培养提供改良实验方案。方法 用间断酶消化法消化CD1乳鼠颅骨提取原代成骨细胞,差速离心获得纯化成骨细胞。制定诱导时间、胎牛血清、β-甘油磷酸钠盐、地... 目的 探讨适宜培养乳鼠原代成骨细胞的培养基配比及培养时间,为体外成骨细胞原代培养提供改良实验方案。方法 用间断酶消化法消化CD1乳鼠颅骨提取原代成骨细胞,差速离心获得纯化成骨细胞。制定诱导时间、胎牛血清、β-甘油磷酸钠盐、地塞米松浓度梯度实验,用Western blot与免疫荧光测定成骨细胞成熟标志物,通过碱性磷酸酶、茜素红染色、超微结构鉴定其成骨活性。结果 (1)间断酶消化法可从乳鼠颅骨中获得原代细胞进行增殖及传代扩增,细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。(2)成骨细胞成熟标志物表达与诱导培养时间、胎牛血清浓度成平行关系,使用10%血清培养14 d即可获得成熟成骨细胞。(3)分别在不同浓度含β-甘油磷酸钠盐及地塞米松培养液中诱导原代成骨细胞分化,于10 mmol/L β-甘油磷酸钠盐及5 nmol/L地塞米松培养条件下成骨细胞成熟标志物表达较高(P<0.01),碱性磷酸酶及茜素红染色明显,成骨活性良好。结论 CD1乳鼠颅骨提取的原代成骨细胞在含10%胎牛血清、10 mmol/L β-甘油磷酸钠盐溶液及5 nmol/L地塞米松的诱导培养基中培养,于14 d即有良好的成骨活性,适用于做体外实验研究。 展开更多
关键词 乳鼠 成骨细胞 原代培养
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组蛋白修饰对破骨细胞和成骨细胞分化及功能的调节
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作者 侯宜锦 章浩 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期507-514,共8页
组蛋白修饰作为表观遗传学机制之一,在染色质结构、核小体定位、基因表达调控等方面发挥着至关重要的作用。近年研究发现,乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等组蛋白修饰方式对破骨细胞及成骨细胞分化过程进行调控并影响骨稳态。本文对组... 组蛋白修饰作为表观遗传学机制之一,在染色质结构、核小体定位、基因表达调控等方面发挥着至关重要的作用。近年研究发现,乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化等组蛋白修饰方式对破骨细胞及成骨细胞分化过程进行调控并影响骨稳态。本文对组蛋白修饰在破骨细胞和成骨细胞分化及功能调节方面的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 组蛋白修饰 骨稳态 骨细胞 成骨细胞
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PD98059抑制大鼠听泡成骨细胞增殖及分化
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作者 黄玉 刘豆 +1 位作者 黄文霞 梁耕田 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期155-161,共7页
目的 探究ERK抑制剂PD98059对大鼠听泡成骨细胞增殖及分化的影响。方法 用0.25%胰酶和I型胶原酶两步消化法提取SD乳鼠听泡成骨细胞,分别与浓度为0、10、25和50μmol/L的ERK抑制剂PD98059进行共培养,然后采用EDU法连续4天对4组成骨细胞... 目的 探究ERK抑制剂PD98059对大鼠听泡成骨细胞增殖及分化的影响。方法 用0.25%胰酶和I型胶原酶两步消化法提取SD乳鼠听泡成骨细胞,分别与浓度为0、10、25和50μmol/L的ERK抑制剂PD98059进行共培养,然后采用EDU法连续4天对4组成骨细胞的增殖进行检测,对各组增殖趋势进行对比分析。用10 mmol/L、50μg/ml和10^(-7) mol/L的浓度的β-甘油磷酸钠、L-维生素C和地塞米松对4组成骨细胞进行成骨诱导分化,24 h后采用RT-qPCR技术检测各组成骨相关因子Ocn、Bsp、Runx2、Bmp2、OPG和RANKL mRNA的表达水平,分析结果。结果 浓度为10、25和50μmol/L的ERK抑制剂PD98059对SD乳鼠听泡成骨细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,其中浓度为10μmol/L的PD98059对其增殖的抑制作用明显大于其余3组(P<0.05)。此外,上述不同浓度的PD98059对Ocn、Bsp、Runx2、Bmp2和OPG mRNA的表达均有不同程度的抑制作用,其中Ocn、Bsp、Runx2和Bmp2 mRNA的表达在10μmol/L的PD98059组明显低于0、25和50μmol/L的PD98059组(P<0.05);OPG mRNA的表达在10和25μmol/L的PD98059组明显低于0和50μmol/L的PD98059组(P<0.05),而前二者间的差异并无明显统计学意义(P>0.05)。RANKL mRNA的表达在各组中均未检测出CT值。结论 ERK通路抑制剂PD98059对SD乳鼠听泡成骨细胞的增殖和分化均有抑制作用,推测ERK1/2-MAPK通路可能通过影响大鼠听泡成骨细胞的增殖与分化而介导了鼓室硬化的形成。 展开更多
关键词 听泡 成骨细胞 PD98059 增殖 分化
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CKIP-1对模拟失重诱导的成骨细胞微丝变化的影响
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作者 王脉桃 宋卫红 +2 位作者 周华 万倩 惠辉 《医学临床研究》 CAS 2024年第4期500-503,共4页
【目的】探讨酪蛋白激酶结合蛋白1(CKIP-1)对模拟失重诱导的成骨细胞微丝变化的影响。【方法】选择小鼠成骨样细胞株(MC3T3-E1)进行研究,借助回转器模拟微重力环境,通过慢病毒感染构建CKIP-1过表达模型,将细胞分为a组(微重力组)、b组(... 【目的】探讨酪蛋白激酶结合蛋白1(CKIP-1)对模拟失重诱导的成骨细胞微丝变化的影响。【方法】选择小鼠成骨样细胞株(MC3T3-E1)进行研究,借助回转器模拟微重力环境,通过慢病毒感染构建CKIP-1过表达模型,将细胞分为a组(微重力组)、b组(空载慢病毒及微重力组)、c组(CKIP-1过表达慢病毒及微重力组)、d组(CKIP-1过表达慢病毒组)。使用FITC标记的鬼笔环肽对细胞进行荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察细胞微丝的变化,同时通过qRT-PCR技术测定CKIP-1 mRNA、ALP mRNA及RUNX2 mRNA的表达情况。【结果】每组细胞的微丝结构均呈现不同程度的解聚,而且张力纤维可见紊乱排列,并数量下降,以CKIP-1过表达慢病毒感染的成骨细胞模拟微重力组改变最为明显。c组、d组CKIP-1 mRNA表达水平高于a组、b组,差异有统计学意义(P<0.05)。c组成骨细胞RUNX2 mRNA、ALPL mRNA表达水平均低于a组、b组、d组,差异有统计学意义(P<0.05)。a组、b组、d组成骨细胞RUNX2 mRNA、ALPL mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】CKIP-1过表达可能会进一步加重微重力条件下成骨细胞骨架微丝的解聚,进而抑制成骨细胞增殖及分化。 展开更多
关键词 成骨细胞/超微结构 失重模拟
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锌指蛋白-36缺陷抑制小鼠的成骨细胞分化:基于激活ERK/ MAPK通路
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作者 戎圣炜 李宏芳 +4 位作者 魏怡然 冯子航 甘露 邓仲豪 赵亮 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期697-705,共9页
目的探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制。方法通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化。通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的... 目的探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制。方法通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化。通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的细胞,观察成骨分化作用的改变。通过第二代转录组测序技术探究Zfp36缺陷细胞成骨分化过程中的转录组水平改变。通过ERK/MAPK信号抑制分子U0126验证Zfp36缺陷对成骨分化作用的调控机制。结果小鼠原代骨髓间充质细胞以及MC3T3-E2细胞中Zfp36表达在成骨分化0~14d过程中呈逐渐升高趋势,在第7天到达峰值时较第0天升高3.85倍(P<0.0001)。抑制上述细胞Zfp36的表达后,成骨分化过程中碱性磷酸酶染色及茜素红染色弱于对照组,成骨分化标志基因Alpl(P<0.01)、Sp7(P<0.001)、Bglap(P<0.01)、Ibsp(P<0.0001)表达显著减弱。转录本测序结果提示Zfp36缺陷细胞的下调基因富集到骨矿化相关基因集中,且与ERK信号相关。蛋白表达检测显示Zfp36缺陷细胞的磷酸化ERK蛋白比例较对照组升高2.1倍(P=0.0274)。通过分子化合物U0126抑制Zfp36缺陷细胞中被激活的ERK/MAPK信号,可观察到表型挽救现象,并且呈剂量依赖。Zfp36缺陷细胞在10μmol/L度U0126作用下碱性磷酸酶染色增强,成骨细胞分化标志基因Runx2(P<0.05)及Bglap(P<0.05)表达显著增高。结论ZFP36参与了小鼠成骨细胞的分化调控过程,Zfp36缺陷会引起ERK/MAPK信号通路的激活,进而抑制成骨细胞向骨细胞的分化。 展开更多
关键词 锌指蛋白-36 成骨细胞分化 ERK/MAPK信号通路 骨髓间充质干细胞
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人骨关节炎软骨细胞上调成骨细胞中骨保护素的作用途径
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作者 李家乐 罗达胜 +2 位作者 郑刘杰 刘伟 姚运峰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第26期4194-4201,共8页
背景:研究发现上调的刺猬蛋白信号将导致骨关节炎标志物蛇毒蛋白Runx2、聚蛋白多糖酶5、COL10A1以及基质金属蛋白酶13的升高,而抑制刺猬蛋白能减轻骨关节炎的严重程度。猜测骨关节炎软骨细胞能够通过印度刺猬蛋白(Indian hedgehog prote... 背景:研究发现上调的刺猬蛋白信号将导致骨关节炎标志物蛇毒蛋白Runx2、聚蛋白多糖酶5、COL10A1以及基质金属蛋白酶13的升高,而抑制刺猬蛋白能减轻骨关节炎的严重程度。猜测骨关节炎软骨细胞能够通过印度刺猬蛋白(Indian hedgehog protein,IHH)信号通路影响成骨细胞来影响骨的形成。目的:探索人骨关节炎软骨细胞对软骨下成骨细胞的影响。方法:收集骨关节炎患者的胫骨平台标本,使用酶解法提取软骨细胞,利用酶预消化+骨块法提取成骨细胞。采用甲苯胺蓝染色和免疫荧光鉴定软骨细胞;采用碱性磷酸酶染色和免疫荧光鉴定成骨细胞,在海藻酸钠珠中以维持软骨细胞表型,将其与成骨细胞共培养,共培养系统中分别加入IHH信号通路的抑制剂(Cyclopamine,10 nmol/L)和激活剂(Purmorphamine,10 nmol/L),48 h后收集各组成骨细胞,利用qRT-PCR检测成骨细胞中Gli1、骨保护素、Runx2、甲状旁腺激素相关肽、碱性磷酸酶、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-kBligand,RANKL)以及骨钙素等基因mRNA的表达;利用Westernblot检测各处理组的成骨细胞中GLi1、骨保护素、RANKL蛋白的表达。结果与结论:①与骨关节炎软骨细胞共同培养时,成骨细胞中GLi1、骨保护素、RUNX2的mRNA表达水平明显增加,而甲状旁腺激素相关肽的mRNA表达水平相对降低(P<0.05);加入IHH抑制剂(Cyclopamine)后,IHH信号通路目的基因Gli1在mRNA和蛋白水平上表达均明显降低(P<0.05),加入IHH信号通路激活剂(Purmorphamine)后,Gli1在mRNA及蛋白水平上表达均明显升高(P<0.05);骨保护素在实验中表现出与Gli1相同的变化趋势。②成骨细胞骨保护素/RANKL比值测定结果显示,与骨保护素的趋势相同。③结果表明,人骨关节炎软骨细胞能够促进成骨细胞中Gli1、骨保护素、Runx2等蛋白的表达;其中骨保护素的上调与IHH信号通路相关;骨关节炎软骨细胞能够通过IHH信号通路上调成骨细胞骨保护素的表达进而上调骨保护素/RANKL的比值,这将有助于软骨下骨中的骨形成。 展开更多
关键词 骨关节炎 成骨细胞 骨细胞 印度刺猬信号通路 骨保护素 核因子ΚB受体活化因子配体
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中药调控成骨细胞铁死亡治疗激素性股骨头坏死
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作者 张绵钰 韩杰 +2 位作者 曾浩 陈相汕 高振罡 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第1期185-192,共8页
背景:有研究发现成骨细胞铁死亡可作为重要的发病机制诱导激素性股骨头坏死的发生与发展。随着祖国医学的发展,有学者发现某些中药单体、中药复方及中成药等可通过多种通路机制调控成骨细胞铁死亡,最终起到治疗激素性股骨头坏死的作用... 背景:有研究发现成骨细胞铁死亡可作为重要的发病机制诱导激素性股骨头坏死的发生与发展。随着祖国医学的发展,有学者发现某些中药单体、中药复方及中成药等可通过多种通路机制调控成骨细胞铁死亡,最终起到治疗激素性股骨头坏死的作用。目的:探讨成骨细胞铁死亡与激素性股骨头坏死的关系及中草药调控成骨细胞铁死亡治疗激素性股骨头坏死的作用机制,为激素性股骨头坏死的诊治提供新的思路。方法:以“铁死亡,激素性股骨头坏死,成骨细胞,中草药,糖皮质激素,铁代谢,活性氧,谷胱甘肽过氧化物酶”为中文检索词,以“ferroptosis,Hormonal necrosis of the femoral head,osteoblast,Chinese herbal medicine,glucocorticoid,iron metabolism,ROS,GPX4”为英文检索词,检索中国知网、Pub Med、万方及维普数据库,筛选各数据库建库至2023年成骨细胞铁死亡与激素性股骨头坏死及中草药干预调控研究相关的文章,最终纳入74篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)成骨细胞铁死亡在激素性股骨头坏死发病中起重要作用。(2)成骨细胞铁死亡的发生受到多种机制通路调控,如细胞内铁超载引起铁死亡;细胞发生脂质过氧化损伤细胞膜引起铁死亡;细胞膜上胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白通过影响谷胱甘肽水平和谷胱甘肽过氧化物酶4活性,从而诱导铁死亡;细胞内发生芬顿反应产生大量活性氧引起铁死亡等。(3)中药单体淫羊藿苷等、中药复方青娥丸等及中成药补肾活血颗粒等均可通过调控成骨细胞铁死亡的发生,有助于防治激素性股骨头坏死。(4)目前关于成骨细胞铁死亡相关机制尚不明确,继续深入探明两者的作用机制,有望为临床治疗激素性股骨头坏死提供新选择。 展开更多
关键词 股骨头坏死 铁死亡 中医药 成骨细胞 糖皮质激素 铁代谢 活性氧 谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化物酶 脂质过氧化
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艾司氯胺酮通过NMDA受体促进小鼠成骨细胞增殖分化
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作者 郑马强 马智聪 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第1期85-90,共6页
目的探讨艾司氯胺酮对成骨细胞增殖分化的作用及其机制。方法将从C57BL/6雄性小鼠中提取并诱导转化而成的成骨细胞置于不同浓度(0,6.25,12.5,25,50,100,200μmol/L)的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)中,采用CCK-8细胞毒性实验检测不同时间点(24... 目的探讨艾司氯胺酮对成骨细胞增殖分化的作用及其机制。方法将从C57BL/6雄性小鼠中提取并诱导转化而成的成骨细胞置于不同浓度(0,6.25,12.5,25,50,100,200μmol/L)的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)中,采用CCK-8细胞毒性实验检测不同时间点(24,48,72,96 h)成骨细胞的活性,确定对增殖分化无毒性的NMDA浓度区间。将诱导分化的成骨细胞分为3组:对照组、艾司氯胺酮(Ket)组以及Ket+NMDA组,干预24,48,72 h采用荧光定量PCR(qPCR)法分别检测各组成骨细胞Runt相关转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix mRNA的表达情况;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组成骨细胞B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关联的X基因(Bax)和脑源性神经营养因子(BDNF)相关蛋白的表达情况。结果CCK-8细胞毒性实验结果显示,在同一时间点,0~200μmol/L的NMDA对成骨细胞活性的影响差异无统计学意义(P>0.05);在一定浓度下,NMDA干预不同时间对成骨细胞活性的影响差异无统计学意义(P>0.05)。qPCR实验结果显示,与对照组相比,Ket组和Ket+NMDA组Runx2和Osterix表达均升高(P<0.01);与Ket组相比,Ket+NMDA组Runx2和Osterix表达下降(P<0.01)。ELISA结果显示,与对照组相比,Ket组Bcl-2蛋白及BDNF蛋白的表达量升高(P<0.05),Bax蛋白的表达量下降(P<0.05);与Ket组相比,Ket+NMDA组Bcl-2蛋白及BDNF蛋白的表达量下降(P<0.05),Bax蛋白的表达量升高(P<0.05)。结论艾司氯胺酮可能通过阻断N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)引起BDNF表达增加,进而促进抗凋亡蛋白的表达同时抑制凋亡蛋白的表达,最终对成骨细胞的增殖分化起到促进作用。 展开更多
关键词 艾司氯胺酮 NMDAR 成骨细胞 Bcl-2 Bax BDNF
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楮实子含药血清对成骨细胞功能的影响
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作者 颜志鹏 杜小康 +4 位作者 杨鸿遒 温志刚 余腾烨 刘云 陈珺 《广东药科大学学报》 CAS 2024年第1期8-13,共6页
目的 研究楮实子对体外培养的成骨细胞增殖、分化及其功能的影响,为楮实子在骨代谢疾病中的应用提供实验依据。方法 采用酶消化法培养大鼠成骨细胞,MTT比色法检测不同浓度(5%、10%和20%)楮实子含药血清对细胞增殖的影响,并据此选择最佳... 目的 研究楮实子对体外培养的成骨细胞增殖、分化及其功能的影响,为楮实子在骨代谢疾病中的应用提供实验依据。方法 采用酶消化法培养大鼠成骨细胞,MTT比色法检测不同浓度(5%、10%和20%)楮实子含药血清对细胞增殖的影响,并据此选择最佳浓度进行后续实验;以AKP试剂盒检测成骨细胞AKP活性、以茜素红染色检测成骨细胞形成矿化结节数量;Western blot法检测成骨细胞功能指标基因如成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、I型胶原(collagen type I, Coll-I)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、骨保护素(osteoprotegerin, OPG)和骨钙素(osteocalcin, OCN)等蛋白的表达水平。结果 楮实子含药血清可显著促进成骨细胞增殖(P<0.01)、提高AKP分泌水平(P<0.01)、促进矿化结节形成(P <0.01),并显著上调OSX、Coll-I、ALP、OPN和OPG等成骨功能指标相关基因的蛋白表达(P<0.05)。结论 楮实子含药血清能提高成骨细胞功能,具有较好的促成骨活性。 展开更多
关键词 楮实子 血清药理学 成骨细胞 骨功能指标基因
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咖啡因对大鼠成骨细胞活性及DNA甲基化水平的影响
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作者 黄徐 陈永福 +2 位作者 杨晶晶 尹从玉 潘雪莉 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第2期185-190,197,共7页
目的 观察不同浓度咖啡因对大鼠成骨细胞活性及DNA甲基化水平的影响。方法 胰酶-胶原酶消化法提取新生SD大鼠颅骨成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色鉴定大鼠成骨细胞;分别以0.00、0.25、0.50、1.00、2.00 mmol/L的咖啡因处理成... 目的 观察不同浓度咖啡因对大鼠成骨细胞活性及DNA甲基化水平的影响。方法 胰酶-胶原酶消化法提取新生SD大鼠颅骨成骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色鉴定大鼠成骨细胞;分别以0.00、0.25、0.50、1.00、2.00 mmol/L的咖啡因处理成骨细胞48 h后,采用CCK-8法检测成骨细胞代谢活力,微量酶标法检测成骨细胞培养液中ALP活性,ELISA检测骨钙素(BGP)、5-甲基胞嘧啶(5-mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)的含量,Western blot检测DNA甲基化转移酶1 (DNMT1)和甲基胞嘧啶双加氧酶2 (TET2)蛋白表达的情况。结果 与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.25 mmol/L咖啡因组大鼠成骨细胞代谢活力增加,2.00 mmol/L咖啡因组成骨细胞代谢活力降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.50 mmol/L咖啡因组大鼠成骨细胞中ALP活性和BGP含量升高,2.00 mmol/L咖啡因组成骨细胞中ALP活性和BGP含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.50 mmol/L的咖啡因组大鼠成骨细胞中DNMT1蛋白表达降低、TET2蛋白表达增加、差异均有统计学意义(P<0.05),2.00 mmol/L的咖啡因组成骨细胞中DNMT1蛋白表达增加、TET2蛋白的表达降低、差异均具有统计学意义(P<0.05);与0.00 mmol/L咖啡因组比较,0.25 mmol/L和0.50 mmol/L组大鼠成骨细胞DNA中5-mC含量降低、5-hmC含量增加、差异均有统计学意义(P<0.05),1.00 mmol/L和2.00 mmol/L组的5-mC含量增加、5-hmC含量降低、差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 低剂量咖啡因促进大鼠成骨细胞代谢活力,促进DNA羟甲基化降低整体DNA甲基化水平;高剂量咖啡因抑制大鼠成骨细胞代谢活力,抑制DNA羟甲基化,增加整体DNA甲基化水平。 展开更多
关键词 咖啡因 成骨细胞 DNA甲基化 5-甲基胞嘧啶 5-羟甲基胞嘧啶
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