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锌指蛋白-36缺陷抑制小鼠的成骨细胞分化:基于激活ERK/ MAPK通路
1
作者 戎圣炜 李宏芳 +4 位作者 魏怡然 冯子航 甘露 邓仲豪 赵亮 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期697-705,共9页
目的探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制。方法通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化。通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的... 目的探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制。方法通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化。通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的细胞,观察成骨分化作用的改变。通过第二代转录组测序技术探究Zfp36缺陷细胞成骨分化过程中的转录组水平改变。通过ERK/MAPK信号抑制分子U0126验证Zfp36缺陷对成骨分化作用的调控机制。结果小鼠原代骨髓间充质细胞以及MC3T3-E2细胞中Zfp36表达在成骨分化0~14d过程中呈逐渐升高趋势,在第7天到达峰值时较第0天升高3.85倍(P<0.0001)。抑制上述细胞Zfp36的表达后,成骨分化过程中碱性磷酸酶染色及茜素红染色弱于对照组,成骨分化标志基因Alpl(P<0.01)、Sp7(P<0.001)、Bglap(P<0.01)、Ibsp(P<0.0001)表达显著减弱。转录本测序结果提示Zfp36缺陷细胞的下调基因富集到骨矿化相关基因集中,且与ERK信号相关。蛋白表达检测显示Zfp36缺陷细胞的磷酸化ERK蛋白比例较对照组升高2.1倍(P=0.0274)。通过分子化合物U0126抑制Zfp36缺陷细胞中被激活的ERK/MAPK信号,可观察到表型挽救现象,并且呈剂量依赖。Zfp36缺陷细胞在10μmol/L度U0126作用下碱性磷酸酶染色增强,成骨细胞分化标志基因Runx2(P<0.05)及Bglap(P<0.05)表达显著增高。结论ZFP36参与了小鼠成骨细胞的分化调控过程,Zfp36缺陷会引起ERK/MAPK信号通路的激活,进而抑制成骨细胞向骨细胞的分化。 展开更多
关键词 锌指蛋白-36 成骨细胞分化 ERK/MAPK信号通路 骨髓间充质干细胞
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重组人转化生长因子-β1对大鼠正畸牙移动模型成骨细胞分化及ERK/MAPK信号通路的影响 被引量：1
2
作者 林维龙 吴晓沛 +1 位作者 何薇薇 安峰 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期118-123,共6页
目的:探讨重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对大鼠正畸牙移动模型细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及成骨细胞分化的影响。方法:将SD大鼠随机分为:对照组、模型组、rhTGF-β1低剂量组、rhTGF-β1中剂量组、r... 目的:探讨重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对大鼠正畸牙移动模型细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路及成骨细胞分化的影响。方法:将SD大鼠随机分为:对照组、模型组、rhTGF-β1低剂量组、rhTGF-β1中剂量组、rhTGF-β1高剂量组。模型组、rhTGF-β1低、中、高剂量组建立大鼠正畸牙移动模型,各组从造模第1天开始给药,rhTGF-β1(低、中、高)剂量组于双侧上颌第一磨牙近中牙龈黏膜下分别注射1.25、2.5、5 ng/mL的rhTGF-β1溶液0.1 mL,对照组注射0.1 mL生理盐水,每2 d给药1次,持续14 d。游标卡尺测量大鼠上颌第一磨牙移动距离;苏木精-伊红染色观察大鼠牙周及牙槽骨组织病理形态;酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平;Western blot检测大鼠牙周及牙槽骨组织成骨相关蛋白[骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)]和ERK/MAPK通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠牙张力侧牙周组织膜纤维拉伸变长,组织间隙变宽,基质增生,成骨细胞数量大量减少近乎消失,呈现病理损伤,上颌第一磨牙移动距离、血清TNF-α、IL-6、RANKL、牙周及牙槽骨组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达水平明显升高,血清OPG、牙周及牙槽骨组织OCN、OPN、Runx2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,rhTGF-β1低、中、高剂量组大鼠牙张力侧牙周及牙槽骨组织病理损伤逐步减轻,血清TNF-α、IL-6、RANKL、牙周及牙槽骨组织p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达水平依次降低,上颌第一磨牙移动距离、血清OPG、牙周及牙槽骨组织OCN、OPN、Runx2蛋白表达水平依次升高(P<0.05),且各组之间呈剂量依赖性。结论:rhTGF-β1可减轻大鼠正畸牙移动模型炎症反应,促使成骨分化,加速正畸牙移动,可能与抑制ERK/MAPK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 重组人转化生长因子-β1 大鼠正畸牙移动模型 ERK/MAPK信号通路 成骨细胞分化
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异甘草素抑制RANKL/RANK/TRAF6信号通路对骨质疏松大鼠成骨细胞分化的影响 被引量：4
3
作者 张超 李强强 +3 位作者 王雄 赵辉 叶仲夺 王勇平 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期488-492,508,共6页
目的探究异甘草素对骨质疏松(OP)大鼠成骨细胞分化的影响是否与调控核因子-κB受体活化体配体(RANKL)/核因子-κB受体活化体(RANK)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)信号通路有关。方法采用去势法建立绝经后OP大鼠模型,造模2周后将大... 目的探究异甘草素对骨质疏松(OP)大鼠成骨细胞分化的影响是否与调控核因子-κB受体活化体配体(RANKL)/核因子-κB受体活化体(RANK)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)信号通路有关。方法采用去势法建立绝经后OP大鼠模型,造模2周后将大鼠随机分为模型组、阳性组(戊酸雌二醇0.09 mg/kg)、异甘草素低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组,每组10只,另取10只大鼠作为假手术组。给药结束后采用ELISA法检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)、雌二醇(E_(2))水平;Micro-CT扫描观察骨微结构指标;HE染色观察股骨组织病理学;免疫组化法检测大鼠股骨Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达;Western Blot法检测大鼠股骨RANKL、RANK、TRAF6蛋白表达。结果与模型组比,阳性组与异甘草素各剂量组大鼠骨组织病变明显减轻,可见新生骨小梁;ALP[(107.94±9.83)U/L、(75.27±7.51)U/L、(89.35±9.14)U/L、(106.33±10.02)U/L比(53.79±5.62)U/L]、E_(2)[(27.71±2.67)pg/mL、(18.36±1.82)pg/mL、(23.65±2.28)pg/mL、(27.46±2.71)pg/mL比(14.64±1.59)pg/mL]水平,Tb.Th[(0.36±0.04)mm、(0.23±0.02)mm、(0.28±0.03)mm、(0.36±0.03)mm比(0.12±0.01)mm]、Tb.N[(4.45±0.44)1/mm、(2.67±0.27)1/mm、(3.36±0.34)1/mm、(4.41±0.44)1/mm比(1.51±0.12)1/mm]、BMD[(0.37±0.04)g/cm^(2)、(0.22±0.02)g/cm^(2)、(0.29±0.03)g/cm^(2)、(0.38±0.03)g/cm^(2)比(0.14±0.01)g/cm^(2)]、BV/TV[(11.94±1.23)%、(7.12±0.70)%、(8.49±0.85)%、(11.77±1.16)%比(5.75±0.61)%]以及Runx2表达[(0.84±0.08)、(0.41±0.04)、(0.59±0.06)、(0.82±0.08)比(0.27±0.03)]升高(P<0.05),Tb.Sp[(0.25±0.02)mm、(0.43±0.04)mm、(0.34±0.03)mm、(0.23±0.02)mm比(0.56±0.06)mm]以及RANKL[(0.42±0.04)、(0.86±0.08)、(0.64±0.06)、(0.45±0.04)比(1.09±0.11)]、RANK[(0.39±0.04)、(0.81±0.08)、(0.67±0.06)、(0.41±0.04)比(1.03±0.10)]、TRAF6[(0.47±0.05)、(0.77±0.08)、(0.61±0.06)、(0.49±0.05)比(0.96±0.09)]蛋白表达降低(P<0.05),且异甘草素呈剂量依赖性。结论异甘草素可能通过抑制RANKL/RANK/TRAF6信号通路,促进成骨细胞分化,改善股骨病变,有效发挥对OP的治疗作用。 展开更多
关键词 异甘草素 骨质疏松 成骨细胞分化 RANKL/RANK/TRAF6信号通路
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黄芪对兔骨髓基质细胞增殖和向成骨细胞分化的影响 被引量：36
4
作者 许春姣 翦新春 +1 位作者 成洪泉 郭峰 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期489-491,共3页
关键词 骨髓基质细胞 增殖 黄芪 成骨细胞分化 贫血 小鼠 补中益气 BMSC 分泌 SCF
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p44/42和p38 MAPKs在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中发挥不同的功能 被引量：22
5
作者 廖清船 肖洲生 +4 位作者 秦艳芳 赵彦 潘玮 刘霆 周宏灏 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第3期267-271,共5页
目的　观察p4 4 /42MAPK、p38MAPK通路在维生素C(VitC)、β 磷酸甘油 (β GP)诱导骨髓间充质干细胞 (BMSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法　用 [3 H] 甲基胸腺嘧啶掺入率法反映细胞增殖情况 ;测定碱性磷酸酶活性与钙沉积量反映细胞... 目的　观察p4 4 /42MAPK、p38MAPK通路在维生素C(VitC)、β 磷酸甘油 (β GP)诱导骨髓间充质干细胞 (BMSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法　用 [3 H] 甲基胸腺嘧啶掺入率法反映细胞增殖情况 ;测定碱性磷酸酶活性与钙沉积量反映细胞向成骨细胞分化状态 ;用Western blotting法反映MAPK的表达情况。结果　与溶剂对照组相比 ,在促成骨细胞分化剂VitC、β GP作用下 ,骨髓间充质干细胞 (BMSCs)p4 4 /42MAPK、p38MAPK通路均提前 5d激活。p4 4 /42MAPK通路阻断剂(PD980 5 9)明显减少 [3 H] 甲基胸腺嘧啶掺入率 ,抑制BMSCs的增殖 ;而p38MAPK通路的阻断剂(SB2 0 35 80 )则显著降低ALP活性及钙沉积量 ,抑制BMSCs向成骨细胞的分化。结论　p4 4 /42MAPK通路在BMSCs的增殖过程中起重要作用 ,而p38MAPK通路可能与BMSCs向成骨细胞分化调节有关。 展开更多
关键词 p38MAPK 成骨细胞分化 骨髓间充质干细胞 BMSC P44/42 通路 钙沉积 GP 增殖
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植物雌激素金雀异黄酮通过p38MAPK通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化 被引量：19
6
作者 廖清船 肖洲生 +3 位作者 秦艳芳 刘亭 赵彦 周宏灏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期683-687,共5页
目的研究丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）的亚型p38 MAPK在植物雌激素金雀异黄酮（Genistein）促进小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells ,BMSCs）向成骨细胞分化过程... 目的研究丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）的亚型p38 MAPK在植物雌激素金雀异黄酮（Genistein）促进小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells ,BMSCs）向成骨细胞分化过程中的作用.方法 BMSCs用无酚红α-MEM（含经活性碳吸附的10% FBS、β-磷酸甘油、维生素C）培养,先用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,然后用SB203580（p38 MAPK通路阻断剂）以及PD98059（p44/42 MAPK通路阻断剂）阻断相应的通路后,再用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,并同时观察上述处理后MAPK通路的变化.测定碱性磷酸酶（ALP）活性和钙（Ca）沉积量反映BMSCs向成骨细胞分化状况,用Western blot来检测MAPK通路是否激活.结果 Genistein（0.01,0.1,1 μmol·L-1）剂量依赖性增加小鼠BMSCs细胞内ALP活性和细胞外Ca沉积量,并同时引起p38MAPK通路的激活和p44/42MAPK通路的抑制.SB203580预处理能减弱Genistein刺激引起的p38MAPK通路的激活并同时阻止Genistein诱导的BMSCs向成骨细胞分化.结论 Genistein在0.01～1 μmol·L^-1剂量范围内可通过p38MAPK通路促进小鼠BMSCs向成骨细胞分化. 展开更多
关键词 金雀异黄酮 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 丝裂原激活的蛋白激酶
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黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中ALP和BGP表达的影响 被引量：15
7
作者 曾高峰 宗少晖 +1 位作者 邹斌 李柯柯 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期779-783,共5页
目的探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(bone gla protein,BGP)表达的影响。方法取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成... 目的探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨钙素(bone gla protein,BGP)表达的影响。方法取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成细胞悬液,传代3次后分为7组用于实验。诱导组细胞采用体积分数为0.1双抗、含不同浓度PSP的血清+IMDM培养,非诱导组细胞采用体积分数为0.1双抗血清+IMDM培养。每天在倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况及形态变化。在培养第3,5,7,9,11,13天用四唑盐法(MTT)检测细胞的生长情况并绘制细胞生长曲线。在培养第7天、第14天采用ELISΑ酶联免疫吸附法分别测量细胞碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)的表达量。结果①小鼠骨髓间充质干细胞经PSP诱导后呈三角形、多角形、不规则状,可重叠生长。②各组细胞生长曲线总体趋势基本相同,在第7,9,11,13天,非诱导组细胞不再生长,而各PSP诱导组细胞均继续生长。③各不同浓度PSP诱导组均比非诱导组高表达ALP和BGP(P<0.01)。结论PSP可显著促小鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化过程中ALP和BGP的表达,且随着浓度的增高该促进作用逐渐增强。 展开更多
关键词 黄精多糖 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 碱性磷酸酶 骨钙素
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黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中PINP和BMP-2表达的影响 被引量：8
8
作者 曾高峰 宗少晖 +1 位作者 邹斌 李柯柯 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1188-1192,共5页
探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中I型前胶原N端前肽(Procollagen typeⅠN-terminal Propeptide,PINP)和骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响。取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌... 探讨黄精多糖(PSP)对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用中I型前胶原N端前肽(Procollagen typeⅠN-terminal Propeptide,PINP)和骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响。取8周龄雄性BALB/C小鼠1只,无菌操作分离小鼠股骨和胫骨,注射器冲出骨髓制成细胞悬液,传代3次后分为6组用于实验。空白诱导组仅加入等量成骨诱导培养基;阳性对照诱导组加入等量成骨诱导培养基及雌二醇(10-8mol/L);各PSP诱导组:加成骨诱导培养基和各自浓度的PSP(200、300、400、500 mg/mL)。每天在倒置显微镜下观察各组细胞的生长情况及形态变化。倒置相差显微镜镜下观察细胞形态变化。在培养第7 d、第14 d采用ELISA酶联免疫吸附法分别测量细胞PINP和BMP-2的表达量。实验结果显示小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。各不同浓度PSP诱导组均比非诱导组高表达PINP和BMP-2(P<0.01)。表明PSP呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,高浓度PSP可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中BMP-2和PINP的表达。 展开更多
关键词 黄精多糖 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 Ⅰ型前胶原N端前肽 骨形态发生蛋白2
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间充质干细胞向成骨细胞分化中的Wnt信号通路 被引量：11
9
作者 潘京华 黄浩 查振刚 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第40期7144-7149,共6页
背景:研究表明Wnt信号通路在间充质干细胞向成骨分化中具有重要作用。目的:归纳总结Wnt信号通路的机制、调控以及其参与间充质干细胞成骨分化的作用。方法:应用计算机检索Pubmed和CNKI数据库中1998年9月至2013年3月相关文献,在标题和摘... 背景:研究表明Wnt信号通路在间充质干细胞向成骨分化中具有重要作用。目的:归纳总结Wnt信号通路的机制、调控以及其参与间充质干细胞成骨分化的作用。方法:应用计算机检索Pubmed和CNKI数据库中1998年9月至2013年3月相关文献,在标题和摘要中以"Wnt,间充质干细胞,Wnt信号通路,成骨细胞分化,经典Wnt信号传导通路,非经典Wnt信号传导通路"或"Wnt,Mesenchymal stem cells,Wnt signaling pathways,osteoblastic differentiation,canonical Wnt signaling,non-canonical Wnt signaling"为检索关键词进行检索。最后选择31篇符合标准的文献进行综述。结果与结论:Wnt信号传导通路在间充质干细胞向成骨细胞中充当着关键的角色,包括经典Wnt信号、非经典Wnt信号以及其内部多种因子都参与间充质干细胞增殖和分化的调控。经典Wnt信号传导通路与非经典Wnt信号传导通路能联合调控人间充质干细胞的多向性分化,其中Wnt信号传导通路在参与在间充质干细胞向成骨分化的过程中,Wnt11,FZD6,sFRP2,sFRP3和Ror2等因子的表达升高,而Wnt9a和FZD7的表达下降。但Wnt信号的各因子如何相互影响,如何利用Wnt信号的机制促使间充质干细胞更快、更准确地分化值得更进一步探讨与研究。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞综述 Wnt蛋白质 间充质干细胞 WNT信号通路 成骨细胞分化 经典Wnt信号传导通路 非经典Wnt信号传导通路 省级基金
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成骨细胞分化与骨骼发育的转录因子Cbfα1/Runx2 被引量：15
10
作者 徐道志 詹红生 赵咏芳 《中医正骨》 2006年第11期61-63,共3页
关键词 成骨细胞分化 特异性转录因子 Runx2 骨骼发育 CBF 间充质干细胞 多向分化潜能 成软骨细胞
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TGF-β/BMPs、Wnt和MAPK信号通路在间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用 被引量：14
11
作者 万晓晨 刘翠平 +1 位作者 陈海啸 李继承 《细胞生物学杂志》 CSCD 2008年第6期697-700,共4页
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多潜能成体干细胞,具有向成骨细胞分化的能力。在MSCs向成骨细胞分化中,受到多种信号通路调控,其中TGF-β/BMPs、Wnt、MAPK信号通路发挥了重要作用。而且,通过对Smad1蛋白酶体的调节,Wn... 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多潜能成体干细胞,具有向成骨细胞分化的能力。在MSCs向成骨细胞分化中,受到多种信号通路调控,其中TGF-β/BMPs、Wnt、MAPK信号通路发挥了重要作用。而且,通过对Smad1蛋白酶体的调节,Wnt和MAPK信号可以对TGF-β/BMPs通路进行调控。在相关信号通路的共同作用下,MSCs向成骨细胞分化。现对MSCs分化过程中TGF-β/BMPs、Wnt、MAPK这三条通路进行了简要综述。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨细胞分化 TGF-β/BMPs信号通路 WNT信号通路 MAPK信号 通路
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体外培养的人脐动脉平滑肌细胞可自发成骨细胞分化并钙化 被引量：3
12
作者 郭永平 孙明姝 +1 位作者 钱家麒 倪兆慧 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期87-95,共9页
研究脐动脉来源的平滑肌细胞在体外培养时是否会自发成骨细胞分化,以深入了解该细胞的生物学特点。采用MTT法研究了脐动脉平滑肌细胞的生长曲线;用形态学方法观察了脐动脉平滑肌细胞自发细胞结节的形成过程;用Hoechst 33258染色法及TUNE... 研究脐动脉来源的平滑肌细胞在体外培养时是否会自发成骨细胞分化,以深入了解该细胞的生物学特点。采用MTT法研究了脐动脉平滑肌细胞的生长曲线;用形态学方法观察了脐动脉平滑肌细胞自发细胞结节的形成过程;用Hoechst 33258染色法及TUNEL染色法研究了细胞结节中的凋亡现象;采用免疫组化染色法研究了细胞结节中碱性磷酸酶的表达。采用茜素红S染色及透射电镜研究了脐动脉平滑肌细胞的自发钙化。研究发现,体外培养的脐动脉平滑肌细胞传代后约7天细胞即可汇合,汇合后的细胞表现为典型的"峰、谷"样生长状态,随着培养时间的延长,在"峰"形生长区域,细胞聚集生长,自发形成细胞结节,经4-5周培养,细胞结节不断增大并钙化,免疫组化发现结节中有大量碱性磷酸酶表达。同时,在结节形成过程中伴随有大量平滑肌细胞凋亡。我们的研究表明,体外培养的脐动脉来源的平滑肌细胞同主动脉来源的平滑肌细胞一样可以自发成骨细胞分化,而平滑肌细胞凋亡可能参与了该过程。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 成骨细胞分化 血管钙化 细胞培养 脐动脉
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小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇对PⅠNP和BMP-2表达的影响 被引量：2
13
作者 宗少晖 曾高峰 +2 位作者 邹斌 李柯柯 赵劲民 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第3期359-362,共4页
目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白诱导... 目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL)对Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白诱导组、阳性诱导组及高、中、低浓度α-ZAL诱导组。空白诱导组仅加入成骨条件培养基,阳性诱导组加入等量成骨条件培养基及雌二醇,高、中、低浓度α-ZAL诱导组分别加入成骨条件培养基及梯度浓度(10-5、10-6、10-7mol/L)的α-ZAL。采用ELISΑ法测定PⅠNP和BMP-2的表达量。结果小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。与空白诱导组比较,各组PⅠNP表达量均明显升高(P<0.01),阳性诱导组及低、中浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量均明显升高(P<0.01),高浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量明显下降(P<0.01)。与阳性诱导组比较,低浓度α-ZAL诱导组PⅠNP表达量明显升高(P<0.01),而中、高浓度α-ZAL诱导组PⅠNP表达量明显下降(P<0.01),低、中浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量均明显升高(P<0.01),高浓度α-ZAL诱导组BMP-2表达量明显下降(P<0.01)。结论α-ZAL呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,低浓度(10-7mol/L)α-ZAL可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中PⅠNP和BMP-2的表达,随着剂量的升高,促进作用下降。 展开更多
关键词 Α-玉米赤霉醇 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 Ⅰ 型前胶原 N 端前肽 骨形态发生蛋白 -2
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Cbfa1/Runx2与成骨细胞分化调控 被引量：14
14
作者 王国红 李祺福 《生命科学》 CSCD 2005年第1期40-44,共5页
成骨细胞是由间充质干细胞经骨原细胞和前成骨细胞分化而来的。近年来已鉴定转录因子Cbfa1(core binding factor a1)是成骨细胞分化和骨形成的关键调控因子。在成骨细胞分化的过程中,Cbfa1通过调控成骨细胞特异性细胞外基质蛋白基因的... 成骨细胞是由间充质干细胞经骨原细胞和前成骨细胞分化而来的。近年来已鉴定转录因子Cbfa1(core binding factor a1)是成骨细胞分化和骨形成的关键调控因子。在成骨细胞分化的过程中,Cbfa1通过调控成骨细胞特异性细胞外基质蛋白基因的表达和成骨细胞周期参与成骨细胞的分化过程。新近发现Cbfa1能通过自身的PST序列区域与Smads结合形成复合物共同参与成骨细胞的分化调控。 展开更多
关键词 CBFAL SMADS 成骨细胞分化
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辛伐他汀在骨髓基质干细胞向成骨细胞分化过程中的作用 被引量：3
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作者 曲强 郭伟 陈翠珠 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第3期319-321,329,共4页
目的　通过对小鼠骨髓干细胞体外培养的观察 ,研究辛伐他汀在骨髓基质干细胞向成骨细胞定向分化过程中的作用。方法　取雄性 6周ICR小鼠股骨骨髓基质细胞进行原代和传代培养 ,应用组织化学及vonKossa方法检测细胞碱性磷酸酶染色和细胞... 目的　通过对小鼠骨髓干细胞体外培养的观察 ,研究辛伐他汀在骨髓基质干细胞向成骨细胞定向分化过程中的作用。方法　取雄性 6周ICR小鼠股骨骨髓基质细胞进行原代和传代培养 ,应用组织化学及vonKossa方法检测细胞碱性磷酸酶染色和细胞外基质矿化 ;在细胞培养早期加入辛伐他汀 (实验组 )或保持基础培养条件 (对照组 ) ,应用半定量RT PCR方法分别检测两组Ⅰ型胶原蛋白 (COL1)、碱性磷酸酶 (ALP)、转录因子CBFA1和Osterix(OSX)在成骨细胞分化过程中的表达。结果　小鼠骨髓基质细胞经体外诱导后分化为具备碱性磷酸酶活性和矿化细胞外基质的成熟成骨细胞。实验组COL1、ALP和CBFA1表达在细胞培养第 3,5天均高于对照组 ,OSX表达差异不明显。结论　辛伐他汀在成骨细胞分化过程中促进其相关基因的表达。 展开更多
关键词 辛伐他汀 成骨细胞分化 骨髓基质干细胞 表达 CBFA1 对照组 骨髓基质细胞 细胞外基质 小鼠 细胞培养
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成骨细胞分化、骨形成与修复中转录因子Osx和Satb2的调控作用 被引量：3
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作者 侯秋科 黄永铨 +1 位作者 李昀骏 陈东风 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第7期925-932,共8页
背景:成骨细胞主要来自于骨髓细胞向骨基质中的间充质细胞,一些转录因子或局部因素可促进骨髓基质细胞调节分化为成骨细胞。目的:明确C_2C_12细胞以及Osx与Satb2在骨质疏松修复过程中的作用。方法:取野生型SD大鼠20只,分为正常组10只,... 背景:成骨细胞主要来自于骨髓细胞向骨基质中的间充质细胞,一些转录因子或局部因素可促进骨髓基质细胞调节分化为成骨细胞。目的:明确C_2C_12细胞以及Osx与Satb2在骨质疏松修复过程中的作用。方法:取野生型SD大鼠20只,分为正常组10只,假手术组和骨质疏松模型组(模型组)各5只,同时取Osx-KO大鼠10只。模型组和Osx-KO大鼠切除双侧卵巢构建野生型大鼠与Osx-KO大鼠进行骨质疏松模型;假手术组找出双侧卵巢但不切除。检测各组大鼠术后体质量的变化及股骨骨密度含量。体外培养C_2C_12细胞,并设计了si RNA-Satb2、si RNA-Osx,通过细胞实验、基因沉默、western blot法,观察成骨细胞分化的相关Osx与Satb2的表达及对骨质疏松的影响。结果与结论:(1)体质量:造模12周后,模型组、Osx-KO组大鼠较正常组和假手术组大鼠显著增加(P<0.01)。(2)骨密度:模型组、Osx-KO组较正常组和假手术组显著降低(P<0.01)。(3)转录因子:野生型大鼠各因子均有表达,在Osx-KO大鼠中,Satb2、Osx基因的表达显著降低(P<0.001),而Runx2基因在两种类型的大鼠中的表达差异无显著性意义。(4)当对基因进行沉默后:再检测相关的成骨基因发现Satb2、Osx、Runx2、ALP基因的表达水平均有显著的抑制。(5)结果说明:在骨质疏松发病中转录因子Osx、Satb2可能是保护性分子,对成骨细胞分化、骨形成与修复有着关键的调控作用。 展开更多
关键词 骨质疏松 转录因子 成骨细胞 组织工程 组织构建 OSX Satb2 成骨细胞分化
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机械应力对激素性股骨头坏死股骨头内调控成骨细胞分化和成熟基因的相关实验研究 被引量：1
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作者 刘泽朋 马信龙 +2 位作者 马剑雄 张华锋 张园 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2009年第S1期89-90,共2页
关键词 激素性股骨头坏死 蛋白合成 机械应力 基因表达 大鼠 成骨细胞分化 动态变化 实验研究 实验组 应力作用
原文传递
兔BMSCs体外培养及其向成骨细胞分化的实验研究 被引量：7
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作者 潘锋 柏树令 《解剖科学进展》 CAS 2005年第1期12-15,共4页
目的　探讨培养兔骨髓基质干细胞向成骨细胞的分化,为骨组织工程研究提供种子细胞。方法　取 2月龄新西兰大耳白兔,麻醉后取骨髓,直接进行原代培养,传代后观察其生长特性,绘制生长曲线并加诱导液使其 向成骨细胞方向分化,并分别用... 目的　探讨培养兔骨髓基质干细胞向成骨细胞的分化,为骨组织工程研究提供种子细胞。方法　取 2月龄新西兰大耳白兔,麻醉后取骨髓,直接进行原代培养,传代后观察其生长特性,绘制生长曲线并加诱导液使其 向成骨细胞方向分化,并分别用钙钴法检测碱性磷酸酶,茜素红染色检测钙结节,免疫组化染色检测Ⅰ型胶原,透 射电镜观察胞质中钙质成分。结果　原代培养中出现大量细胞克隆,传代后细胞呈旋涡状密集生长,加入诱导液 后细胞形态发生改变并向成骨细胞分化,胞质内见有呈黑色的碱性磷酸酶颗粒和Ⅰ型胶原反应产物,并见有多个 细胞形成的钙化结节,电镜下观察到胞质中含有许多基质小泡,几天内成骨细胞数可达1×106/L。结论　培养兔 骨髓基质干可向成骨细胞方向分化,作为骨组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 成骨细胞分化 骨组织工程 结节 种子细胞 原代培养 碱性磷酸酶 诱导 BMSC 传代 胞质
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Wnt信号通道组成及其在成骨细胞分化增殖中的效应 被引量：5
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作者 岳二丽 杨晓喻 赵红宇 《中国口腔种植学杂志》 2008年第4期195-199,共5页
种植体周骨形成及骨结合情况直接影响种植修复的长期疗效。近年来的研究发现Wnt信号通道在骨形成和改建中有重要作用,通过对该通道的研究有可能发现骨形成信号网络中的一些关键环节,进而通过临床干预措施加速骨形成。
关键词 Wnt/β-catenin信号通道 成骨细胞分化 骨形成
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信号传导及转录激活因子1基因沉默促进人牙周膜细胞成骨细胞分化 被引量：2
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作者 呼海燕 刘彩宏 《口腔医学》 CAS 2016年第10期884-889,共6页
目的探讨信号传导及转录激活因子1(signal transducers and activators of transcription 1,STAT1)对人牙周膜细胞骨向分化的作用及其机制。方法采用酶消化法分离培养原代人牙周膜细胞,细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人牙周膜... 目的探讨信号传导及转录激活因子1(signal transducers and activators of transcription 1,STAT1)对人牙周膜细胞骨向分化的作用及其机制。方法采用酶消化法分离培养原代人牙周膜细胞,细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激人牙周膜细胞,采用成骨分化培养基诱导人牙周膜细胞骨向分化。通过转染STAT1过表达载体或小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)实现STAT1基因过表达或基因表达沉默。采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒和茜素红染色检测成骨分化。实时定量PCR方法检测STAT1,Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠα1,Col A1)和骨调素(osteopontin,OPN)的m RNA表达水平。Western blot方法检测STAT1和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的蛋白表达水平。结果 LPS炎性刺激诱导人牙周膜细胞STAT1高表达。STAT1过表达显著抑制ALP活性、骨质矿化、Runx2的核转移以及Col A1和OPN的表达水平。相反,STAT1基因沉默则显著促进ALP活性、骨质矿化、Runx2的核转移以及Col A1和OPN的表达水平。结论 STAT1基因沉默促进人牙周膜细胞成骨分化,其机制与促进Runx2核转移有关。 展开更多
关键词 信号传导及转录激活因子1 人牙周膜细胞 成骨细胞分化
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