成骨细胞特异性转录因子2在乳腺癌中的表达及临床意义 被引量：3

1

作者 周炳娟 黄丽娟 +5 位作者 曹建江 马小乐 孙吉瑞 乔海芝 赵文明 张金库 《临床与病理杂志》 2017年第1期50-55,共6页

目的:探讨成骨细胞特异性转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测Runx2在乳腺浸润性导管癌和癌旁乳腺组织中的表达情况及其与乳腺癌临床病理特征间的关系... 目的:探讨成骨细胞特异性转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测Runx2在乳腺浸润性导管癌和癌旁乳腺组织中的表达情况及其与乳腺癌临床病理特征间的关系。结果:Runx2在乳腺浸润性导管癌及癌旁乳腺组织中的阳性表达率分别为69.52%(73/105)和8.57%(9/105),乳腺浸润性导管癌组Runx2的阳性表达率显著高于癌旁乳腺组织,差异具有统计学意义,而且Runx2在乳腺浸润性导管癌中的表达与雌激素受体(estrogen receptor,ER)呈负相关。Runx2的表达与乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移及临床分期相关,而与患者年龄及肿瘤大小无关。结论:Runx2可能参与了乳腺癌的发生,而且在ER阴性乳腺癌的发生过程中可能发挥了更加重要的作用。Runx2与乳腺癌的恶性程度、浸润、转移有关,提示Runx2可能成为乳腺癌患者预后评估的重要指标之一。 展开更多

关键词 乳腺癌 成骨细胞特异性转录因子2 免疫组织化学

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成骨细胞特异性转录因子Osterix对骨形成作用的研究进展 被引量：7

2

作者 吴添龙 程细高 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期557-561,共5页

骨形成是一个涉及从间充质干细胞向成骨细胞分化的复杂发育过程,研究骨形成过程中的关键因子并阐明其作用的具体分子机制对骨代谢性疾病的治疗具有重要意义。Osterix(Osx)是迄今为止发现的唯一一个成骨细胞特异性转录因子,Osx只在骨组... 骨形成是一个涉及从间充质干细胞向成骨细胞分化的复杂发育过程,研究骨形成过程中的关键因子并阐明其作用的具体分子机制对骨代谢性疾病的治疗具有重要意义。Osterix(Osx)是迄今为止发现的唯一一个成骨细胞特异性转录因子,Osx只在骨组织细胞中表达,在干细胞向成骨细胞分化过程中起决定性作用,没有Oxs就没有骨形成和骨再生。Osx的发现为整个骨形成领域的研究开启了新的窗口。基于Osx在骨形成过程中的重要地位,研究者们迫切希望开发出作用于Osx的合成代谢分子,这对骨代谢性疾病的治疗将起到革命性的进步,因此对Osx的上下游因子及信号通路之间具体作用机制的进一步研究和阐明显得尤其重要。笔者对其研究进展做一综述。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性转录因子 骨形成

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比较浓缩生长因子提取液和富血小板纤维蛋白提取液对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响 被引量：7

3

作者 魏中武 刘双喜 +1 位作者 陈灼庚 黄谢山 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期901-908,共8页

目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,2... 目的:比较浓缩生长因子提取液(concentrated growth factor extract,CGFe)和富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对成骨细胞MC3T3-E1增殖的影响。方法:制备CGFe和PRFe。分别采用含CGFe(10%,20%,30%)与PRFe(10%,20%,30%)的DMEM培养基培养MC3T3-E1。分别于培养的第1,3,5,7天,采用MTT法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色法检测细胞中ALP的活性;采用定量RTPCR(quantitative RT-PCR,RT-qPCR)检测培养第3和7天细胞中核心结合蛋白因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix,Osx)mRNA表达水平。结果:在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe与PRFe均能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe与PRFe比较,CGFe组细胞的增殖活性高于PRFe组,差异有统计学差异(均P<0.05)。在1,3,5,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组的ALP活性均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。除第1天外,相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组的ALP活性高于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在3,7 d时,与对照组相比,CGFe组与PRFe组Osx和Runx2 mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);相同浓度的CGFe组与PRFe组比较,CGFe组Osx mRNA表达水平明显高于PRFe组,Runx2 mRNA表达水平明显低于PRFe组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:CGFe比PRFe更能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,这可能与其增加ALP活性及上调成骨相关基因Osx的表达有关。 展开更多

关键词 浓缩生长因子提取液 富血小板纤维蛋白提取液 MC3T3-E1 增殖 成骨细胞特异性转录因子 核心结合蛋白因子2

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体外诱导C2C12细胞向成骨细胞的分化 被引量：4

4

作者 张勇 杨彤涛 +3 位作者 胡运生 廖博 文艳华 范清宇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2013年第5期473-477,共5页

目的成骨细胞特异性转录因子a1(core binding factor a1,Cbfa1)通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。文中构建成Cbfa1,以腺病毒载体转染成肌细胞C2C12,为种子细胞构建组织工程化骨。... 目的成骨细胞特异性转录因子a1(core binding factor a1,Cbfa1)通过调节生长因子和骨特异性细胞外基质蛋白的基因表达而参与成骨细胞的分化和骨发育过程。文中构建成Cbfa1,以腺病毒载体转染成肌细胞C2C12,为种子细胞构建组织工程化骨。方法体外培养小鼠成肌细胞C2C12,用重组腺病毒质粒pAd-IL-31介导Cbfa1/Osf2基因瞬时转染小鼠成肌C2C12细胞,Western blot检测Cbfa1蛋白表达。结果 Cbfa1蛋白表达、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定、骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量以及茜素红染色感染组明显高于对照组。结论成肌细胞C2C12可以作为种子细胞构建组织工程化骨。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性转录因子a1 成肌细胞C2C12 Western BLOT

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LED红光上调MAPK信号促进炎性环境中人牙髓干细胞成骨/成牙本质分化

5

作者 刘源 惠以宁 +2 位作者 姜冰 郑艮子 王瑶 《口腔疾病防治》 2023年第10期701-711,共11页

目的探讨发光二极管(light-emitting diode,LED)红光对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨/成牙本质分化的影响及机制。方法本实验研究已通过单位伦理委员会审查批准。组织块酶消化法培养hDPSCs,在0、1、5、10μg/m... 目的探讨发光二极管(light-emitting diode,LED)红光对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨/成牙本质分化的影响及机制。方法本实验研究已通过单位伦理委员会审查批准。组织块酶消化法培养hDPSCs,在0、1、5、10μg/mL脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下,CCK-8法检测hDPSCs增殖,筛选LPS刺激浓度。设置CG组(矿化诱导)、LPS+CG组、LPS+CG+LED光照组(能量分别为2、4、6、8、10 J/cm^(2))。第7天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及活性测定,实时荧光定量PCR检测ALP、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialo-phosphoprotein,DSPP)基因表达情况,第21天进行茜素红染色及钙结节定量分析,筛选最佳光照能量。设置LPS+CG组、LPS+CG+LED组(最佳能量),ELISA法检测第1、3、5、7天肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interlenkin-1β,IL-1β)表达量。Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38、细胞外调节蛋白激酶5(extracellular regulated protein kinases 5,ERK5)及磷酸化蛋白表达。分别阻断ERK1/2、JNK、ERK5、p38通路后,Western blot法检测第7天ALP、OSX、DMP-1、DSPP蛋白表达。结果CCK-8结果显示10μg/mL LPS诱导下,在第5、7天hDPSCs增殖低于0、1、5μg/mL LPS组(P<0.05),后续选择10μg/mL作为LPS刺激浓度。ALP染色及活性,ALP、OSX、DMP-1、DSPP的基因表达水平及钙结节定量结果示LPS+CG+4 J/cm^(2)组均高于其他处理组(P<0.05)。4 J/cmLED红光上调MAPK信号促进炎性环境中人牙髓干细胞成骨/成牙本质分化LED红光促成骨/成牙本质分化能力最强,作为后续实验光照能量。ELISA结果显示第5、7天,LPS+CG+LED组的TNF-α与IL-1β的分泌表达量低于LPS+CG组(P<0.05)。Western blot结果显示4 J/cm^(2) LED红光促进p-ERK1/2、p-p38、p-JNK、p-ERK5蛋白表达;分别阻断通路后,LPS+CG+LED+U0126(抑制ERK1/2)、SP600125(抑制JNK)、BIX02189(抑制ERK5)组ALP、OSX、DMP-1、DSPP蛋白表达量低于LPS+CG+LED组(P<0.001),LPS+CG+LED+SB203580(抑制p38)组ALP、OSX、DMP-1蛋白表达量与LPS+CG+LED组比较无显著差异(P>0.05)。结论LED红光促进炎症环境下hDPSCs成骨/成牙本质分化,其作用机制可能为通过上调ERK1/2、JNK、ERK5信号减少炎症因子TNF-α与IL-1β释放有关。 展开更多

关键词 人牙髓干细胞 脂多糖 炎性环境 发光二极管 红光 成骨/成牙本质分化 MAPK信号通路 成骨细胞特异性转录因子 牙本质基质蛋白-1 牙本质涎磷蛋白

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淫羊藿苷促进骨髓间充质干细胞成骨分化 被引量：39

6

作者 鲍远 黄俊明 +5 位作者 靖兴志 李兴艳 董永辉 张津铭 郭风劲 陈安民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第24期3501-3507,共7页

背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷... 背景:传统中药淫羊藿应用于各类骨科疾病有着悠久的历史,其主要成分之一淫羊藿苷有多种生物学效应。目的:探讨淫羊藿苷在体内及体外对骨髓间充质干细胞成骨分化的作用及机制。方法:在体外存在或不存在成骨诱导培养的条件下,用淫羊藿苷作用于骨髓间充质干细胞,通过RT-PCR检测runx2、ocn和osx基因的表达情况,以及通过茜素红染色检测成骨细胞分泌的钙结节数量。用淫羊藿苷喂养大鼠(2 mg/d)5周后,进行Micro CT扫描并分析胫骨上段骨结构。结果与结论:(1)无论是否存在成骨诱导培养条件,淫羊藿苷均能促进成骨分化相关基因的表达;(2)在成骨诱导培养时,淫羊藿苷能明显增加钙结节沉积;(3)动物实验表明淫羊藿苷能显著促进骨小梁的生成。 展开更多

关键词 淫羊藿属 骨髓 间质干细胞 骨钙素 核心结合因子α1亚基 组织工程 组织构建 骨细胞 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 成骨分化 runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 国家自然科学基金

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不同牵张力值对其成骨相关因子RUNX2、Osterix表达的影响分析

7

作者 李跃 李海清 《继续医学教育》 2017年第8期133-134,共2页

目的探索不同牵张力值对成骨相关因子人牙周膜成纤维细胞核心结合因子(RUNX2)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix)表达的影响分析。方法随机选取口腔门诊10~14岁需要拔除的牙,检查所取牙齿标本根尖没有发生病变,牙根正常没有发生骨质吸收... 目的探索不同牵张力值对成骨相关因子人牙周膜成纤维细胞核心结合因子(RUNX2)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix)表达的影响分析。方法随机选取口腔门诊10~14岁需要拔除的牙,检查所取牙齿标本根尖没有发生病变,牙根正常没有发生骨质吸收,牙周组织无发生炎症性病变。共设定为1个对照组与3个实验组,同时依据加载的时间长短还设定了0 h、6 h、12 h以及24 h 4个时间段。利用SPSS 20.0统计学软件进行分析。结果随着培养和加压时间的延长两种成骨相关因子的积分光密度(IOD)值也呈现逐渐升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05);各个时间点动态牵张力A组和B组的两种成骨相关因子IOD值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);静牵张力组与对照组不同时间点两种成骨相关因子的IOD值差异无统计学意义(P>0.05)。结论牵张力值和作用时间与成骨相关因子RUNX2和Osterix的IOD值存在有明显的正相关性。 展开更多

关键词 牵张力 牙周膜细胞 细胞核心结合因子 成骨细胞特异性转录因子

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构建沉默Runx 2基因的牙龈癌细胞慢病毒载体

8

作者 胡金龙 秦晗 +1 位作者 张勇 邓晴 《西部医学》 2023年第9期1287-1291,共5页

目的筛选沉默成骨细胞特异性转录因子2(Runx2)基因的慢病毒载体,转染人上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌细胞系GNM细胞,获得沉默Runx 2基因的GNM细胞,为探究Runx2在GNM细胞中的转录调控奠定实验基础。方法根据预实验结果在含HiTransG P的培养液... 目的筛选沉默成骨细胞特异性转录因子2(Runx2)基因的慢病毒载体,转染人上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌细胞系GNM细胞,获得沉默Runx 2基因的GNM细胞,为探究Runx2在GNM细胞中的转录调控奠定实验基础。方法根据预实验结果在含HiTransG P的培养液中,病毒按照感染复数(MOI)10转染GNM细胞,将病毒按序号分为NC组:CON313;KD1组:LV-Runx2-RNAi(80978-1);KD2组:LV-Runx2-RNAi(80979-1);KD3组:LV-Runx2-RNAi(80980-1),使用荧光显微镜观察转染120 h后各组荧光标记基因的表达;实时PCR分析Runx2的转录产物水平,比较Runx 2基因的组间沉默效率;Western Blot进一步检测Runx2蛋白沉默效果。结果各组细胞经慢病毒转染,120 h后观察见细胞状态良好,其中NC组荧光表达未见;KD1组荧光表达较高;KD2组荧光表达最高;KD3组荧光表达较低。实时PCR分析显示Runx 2基因沉默效果最佳的为KD2组,沉默效率可达64.4%(P<0.05)。Western Blot结果显示各实验组中KD2组GNM细胞的Runx2蛋白表达最低(P<0.05)。结论成功筛选出特异性转染GNM细胞的慢病毒载体,同时初步确定转染实验相关适宜参数。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性转录因子2 牙龈癌 慢病毒 转染

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加减知柏地黄丸对特发性中枢性性早熟小鼠ERK1/2、OSX表达的影响

9

作者 曾博煌 黄桢 +3 位作者 王修银 何仰芬 叶玉莲 吴嘉怡 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第6期754-758,764,共6页

目的探讨加减知柏地黄丸对特发性中枢性性早熟(ICPP)小鼠细胞外信号调控激酶(ERK1/2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)表达的影响。方法将30只18日龄雌性SPF级C57小鼠随机分为正常组、模型组、加减知柏地黄丸高剂量组、加减知柏地... 目的探讨加减知柏地黄丸对特发性中枢性性早熟(ICPP)小鼠细胞外信号调控激酶(ERK1/2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)表达的影响。方法将30只18日龄雌性SPF级C57小鼠随机分为正常组、模型组、加减知柏地黄丸高剂量组、加减知柏地黄丸低剂量组、甲地孕酮组和抑那通组,每组5只。在小鼠20日龄时,正常组给予生理盐水腹腔注射,其余组小鼠腹腔注射瘦素2 mg/kg建立ICPP模型。同时加减知柏地黄丸高、低剂量组分别给予加减知柏地黄丸水溶液3.9 g/mL、1.95 g/mL灌胃,甲地孕酮组给予甲地孕酮水溶液0.13 mg/mL灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均1次/d,连续7 d;抑那通组分别于20日龄、22日龄和24日龄时依次给予抑那通1.574 mg/kg、1.180 mg/kg、1.180 mg/kg右后肢处肌注。实验结束后,qRT-PCR法检测股骨组织中ERK1、ERK2和OSX mRNA表达情况,Western blot法检测股骨组织中ERK1、ERK2表达情况,ELISA法检测血清骨生化指标[胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、碱性磷酸酶(ALP)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、N端中段骨钙素(N-MID)]水平。结果模型组股骨组织中ERK1、ERK2、OSX mRNA表达量和ERK1、ERK2蛋白表达量及血清IGF-1、ALP、OCT、N-MID水平均明显高于正常组(P均<0.05),加减知柏地黄丸高剂量组、加减知柏地黄丸低剂量组、甲地孕酮组股骨组织中ERK1、ERK2、OSX mRNA表达量和ERK1、ERK2蛋白表达量及血清IGF-1、ALP、OCT、N-MID水平均明显低于模型组(P均<0.05)。结论加减知柏地黄丸能通过抑制ERK1/2表达,抑制成骨细胞生长和分化成熟,从而延缓ICPP小鼠骨骺提前闭合。 展开更多

关键词 特发性中枢性性早熟 加减知柏地黄丸 小鼠 细胞外信号调控激酶 成骨细胞特异性转录因子Osterix

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绝经后女性患者血清Smad4和Osterix水平与骨密度及骨折发生率的相关性分析

10

作者 王秀萍 郑天博 +3 位作者 段锦花 吕娟 陈雨 王小英 《中国性科学》 2024年第1期37-41,共5页

目的分析绝经后女性患者血清Smad同源物4(Smad4)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix)水平与骨密度(BMD)及骨折发生率的相关性。方法选取2020年5月至2022年5月西安交通大学第二附属医院收治的157例45~70岁绝经女性作为研究对象,按BMD将患... 目的分析绝经后女性患者血清Smad同源物4(Smad4)和成骨细胞特异性转录因子(Osterix)水平与骨密度(BMD)及骨折发生率的相关性。方法选取2020年5月至2022年5月西安交通大学第二附属医院收治的157例45~70岁绝经女性作为研究对象,按BMD将患者分为BMD正常组(n=51)、BMD减少组(n=59)、骨质疏松症(OP)组(n=47);根据是否骨折分为骨折组(n=48)和非骨折组(n=109)。检测研究对象血清Smad4、Osterix、β胶原降解产物(β-CTX)、Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)、骨桥蛋白(OPN)及N端骨钙素(N-MID)水平;分析血清Smad4与Osterix的相关性,及血清Smad4、Osterix与骨代谢指标间的相关性,以及影响患者发生OP的因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Smad4、Osterix水平对发生骨折风险的预测价值。结果与BMD正常组比较,BMD减少组和OP组的β-CTX、P1NP、OPN、N-MID依次升高,股骨BMD、腰椎L1-4BMD依次降低(P<0.05);BMD减少组和OP组的血清Smad4和Osterix水平依次降低(P<0.05);OP组骨折发生率显著高于BMD正常组和BMD减少组(P<0.001),BMD减少组骨折发生率显著高于BMD正常组(P=0.027)。骨折组的血清Smad4、Osterix水平显著低于非骨折组(P<0.05)。Pearson分析结果表明,Smad4和Osterix的表达水平呈正相关(P<0.05);Spearman分析结果表明,Smad4表达水平与β-CTX、P1NP、OPN和N-MID呈负相关(P<0.05),与股骨BMD和腰椎L1-4BMD呈正相关(P<0.05);Osterix的表达水平与β-CTX、P1NP、OPN和N-MID呈负相关(P<0.05),与股骨BMD和腰椎L1-4BMD呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,低水平Smad4、Osterix、股骨BMD、腰椎L1-4BMD是影响OP发生的危险因素(P<0.05)。绘制ROC曲线结果显示,血清Smad4预测骨折风险的曲线下面积(AUC)为0.937,血清Osterix预测骨折风险的AUC为0.911,二者联合预测骨折风险的AUC为0.974,二者联合优于血清Smad4和Osterix各自单独诊断(Z联合vs.Smad4=3.843、Z联合vs.Osterix=2.386,P<0.05)。结论绝经后OP患者血清Smad4和Osterix呈低表达,与患者的骨代谢生化指标和BMD密切相关,且是影响OP发生的独立危险因素,二者联合可以更好地预测患者发生骨折的风险。 展开更多

关键词 绝经后骨质疏松症 骨密度 Smad同源物4 成骨细胞特异性转录因子 骨折发生率

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漆黄素对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响

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作者 杨鑫 李源力 +2 位作者 蒋萍 王冶 敬雪明 《临床误诊误治》 CAS 2023年第7期38-43,共6页

目的 探讨漆黄素对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响。方法 将50只雌性SD大鼠采取双侧卵巢切除法构建骨质疏松症模型,分为模型组、漆黄素10、20、40 mg/kg组及阳性对照组,每组10只。漆黄素组给予不同浓度漆黄素干预,阳性对照组给予雌二醇(E_(... 目的 探讨漆黄素对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响。方法 将50只雌性SD大鼠采取双侧卵巢切除法构建骨质疏松症模型,分为模型组、漆黄素10、20、40 mg/kg组及阳性对照组,每组10只。漆黄素组给予不同浓度漆黄素干预,阳性对照组给予雌二醇(E_(2))干预,连续8周。另选10只大鼠作为假手术组。检测各组大鼠血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、E_(2)、Ⅰ型胶原羧基C端交联肽(CTX-Ⅰ)、骨γ-羧基谷氨酸蛋白(BGP)以及骨密度(BMD),HE染色观察骨组织形态学,采用Micro-CT测定骨指标[骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、骨小梁数目(Tb.N)],采用生物力学材料实验机检测骨生物力学参数(股骨颈加载力、胫骨轴强度、腰椎压缩力),Western-blot检测Runt相关转录因子2(Runx2)、低密度脂蛋白受体相关蛋白-5(Lrp-5)、β-联蛋白(β-catenin)和成骨细胞特异性转录因子Osterix(Osx)表达水平。结果 与假手术组比较,模型组ALP、OCN、Tb.Sp、CTX-Ⅰ显著升高,E_(2)、BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N、BGP、股骨颈加载力、胫骨轴强度、腰椎压缩力、Runx2、Lrp-5、β-catenin、Osx水平显著降低(P<0.05);HE染色显示股骨骨小梁排列疏松、网状结构破坏、小梁数减少且断裂点增多。与模型组比较,漆黄素40 mg/kg组及阳性对照组ALP、OCN、Tb.Sp、CTX-Ⅰ显著降低,E_(2)、BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N、BGP、股骨颈加载力、胫骨轴强度、腰椎压缩力、Runx2、Lrp-5、β-catenin、Osx水平显著升高(P<0.05);HE染色显示股骨骨小梁排列及网状结构明显恢复,有较高的骨连接。结论 漆黄素可提高去势骨质疏松大鼠骨应力,其作用机制可能与促进Wnt/β-catenin蛋白通路、降低大鼠体内高骨转换速率有关。 展开更多

关键词 骨质疏松 绝经后 漆黄素 骨钙素 骨密度 骨体积分数 股骨颈加载力 成骨细胞特异性转录因子 大鼠 Sprague-Dawley

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鸡胚成骨细胞分离培养方法的建立

12

作者 闵雯嫣 周佳桦 +5 位作者 张雨蓓 张松彬 卞建春 袁燕 顾建红 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2392-2397,共6页

为了寻找一种可以获得大量高纯度、活力强的鸡胚成骨细胞(osteoblast,OB)的分离培养方法,利用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶2次消化法分离18日龄鸡胚颅盖骨细胞。CCK-8法、台盼蓝染色对其进行增殖和活性鉴定;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,A... 为了寻找一种可以获得大量高纯度、活力强的鸡胚成骨细胞(osteoblast,OB)的分离培养方法,利用胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶2次消化法分离18日龄鸡胚颅盖骨细胞。CCK-8法、台盼蓝染色对其进行增殖和活性鉴定;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和茜素红染色(alizarin red staining)对其进行特异性染色鉴定;实时荧光定量PCR扩增检测鸡胚OB标志性基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP、成骨细胞特异性转录因子(osteoblast specific transcription factor,OSX)mRNA的表达。结果显示,分离的细胞活性较强,具有良好的增殖能力,ALP和茜素红染色均呈强阳性,能高表达ALP、Runx2、OSX基因;表明所分离的颅盖骨细胞具有OB特性,活性强,纯度高,为进一步探讨家禽骨骼疾病的发生及防控机制奠定基础。 展开更多

关键词 鸡胚 成骨细胞 茜素红 Runt相关转录因子2(Runx2) 成骨细胞特异性转录因子(OSX)

原文传递

基于BMP/Runx2/Osx信号通路研究淫羊藿总黄酮改善绝经后骨质疏松模型大鼠的作用机制 被引量：15

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作者 徐众华 莫雨晴 周驰 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第19期2333-2338,共6页

目的:基于骨形态发生蛋白(BMP)/Runt相关转录因子2(Runx2)/成骨细胞特异性转录因子(Osx)信号通路研究淫羊藿总黄酮对绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠的影响,从而明确其防治骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:将50只大鼠按体质量分层法随机... 目的:基于骨形态发生蛋白(BMP)/Runt相关转录因子2(Runx2)/成骨细胞特异性转录因子(Osx)信号通路研究淫羊藿总黄酮对绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠的影响,从而明确其防治骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:将50只大鼠按体质量分层法随机分为假手术组,模型组,淫羊藿总黄酮低、高剂量组[265、530 mg/(kg·d)]和雌二醇组[0.09 mg/(kg·d)],每组10只。除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠均采用卵巢摘除去势法建立PMOP模型。大鼠造模成功并进行正常饲养2个月后开始灌胃给药,每天给药1次,连续给药84 d;假手术组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水。末次给药结束后,测定各组大鼠右侧下肢股骨和椎骨的骨密度(BMD)以及股骨骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp);采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清中钙离子、骨钙素、Ⅰ型原胶原N端前肽(P1NP)的水平;采用苏木精-伊红染色法观察股骨的病理学变化;分别采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法和Western blotting法检测大鼠骨组织中BMP、Runx2、Osx的mRNA及蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨、椎骨BMD,血清中钙离子、骨钙素、P1NP水平,股骨Tb.N和Tb.Th以及股骨组织中BMP、Runx2、Osx mRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),股骨Tb.Sp显著升高(P<0.01);骨小梁组织结构紊乱,断裂明显。与模型组比较,各给药组大鼠上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01),并且淫羊藿总黄酮的作用具有剂量依赖性(P<0.05);骨小梁数目增多,排列整齐,结构较为完整。结论:淫羊藿总黄酮改善OP的作用机制可能与促进BMP/Runx2/Osx信号通路活性有关。 展开更多

关键词 淫羊藿总黄酮 骨质疏松症 骨形态发生蛋白 Runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 大鼠

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Wnt信号通路对vaspin诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响 被引量：4

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作者 陈坤 高飞 《中国临床研究》 CAS 2015年第11期1415-1417,1421,共4页

目的研究Wnt/胞内β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路对脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)介导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法体外培养4周龄雄性SD大鼠的BMSCs,分为4组:对照组,实验1、2、3组,分别加入成骨诱导... 目的研究Wnt/胞内β-连锁蛋白(β-catenin)信号通路对脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)介导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法体外培养4周龄雄性SD大鼠的BMSCs,分为4组:对照组,实验1、2、3组,分别加入成骨诱导液、含50 ng/ml、100 ng/ml vaspin的成骨诱导液及含100 ng/ml vaspin成骨诱导液+Dickkopf1(DKK1,Wnt/β-catenin信号通路特异性阻断剂),于成骨诱导第7天酶标仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨分化相关基因:ALP、核心蛋白结合因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)mRNA及β-catenin的表达水平。结果体外培养BMSCs,并加入不同浓度vaspin诱导后,实验1、2组ALP活性较对照组增加,并呈vaspin浓度依赖性(P均<0.05);成骨分化基因ALP、RUNX2、OSX mRNA表达水平增加,亦呈vaspin浓度依赖性(P均<0.05);β-catenin表达水平仅在加入100 ng/ml vaspin时升高(P<0.05);加入DKK1后(实验3组),ALP活性及成骨分化各基因表达水平较实验2组(100 ng/ml vaspin)显著下降(P均<0.05),β-catenin表达水平也显著下降(P<0.05)。结论 Vaspin可通过Wnt/β-catenin通路促进大鼠BMSCs成骨分化。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 脂肪组织特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 Wnt/胞内β-连锁蛋白通路 核心蛋白结合因子2 成骨细胞特异性转录因子Osterix

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抑制p38 MAPK对小鼠釉质发育相关基因表达的影响 被引量：1

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作者 罗晓娜 刘向晖 +2 位作者 王博 刘昕 谢晓华 《口腔疾病防治》 2021年第8期529-534,共6页

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)对成釉上皮中釉质发育相关基因表达的影响,为釉质发育分子机制的研究提供基础。方法在体外小鼠下颌磨牙牙胚的培养基中加入以DMSO溶解的p38 MAPK特异性... 目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)对成釉上皮中釉质发育相关基因表达的影响,为釉质发育分子机制的研究提供基础。方法在体外小鼠下颌磨牙牙胚的培养基中加入以DMSO溶解的p38 MAPK特异性抑制剂SB203580为实验组,以培养基中加入等量DMSO处理的牙胚为对照组,利用Western blot检测成釉上皮中磷酸化p38(pp38)的蛋白表达水平,实时定量PCR检测成釉上皮中Runt相关转录因子2(runtrelated transcription factor 2,Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,Osx)以及成釉细胞标志物牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast associated protein,ODAM)、釉成熟蛋白(amelotin,AMTN)、基质金属蛋白酶20(matrix metalloproteinase 20,MMP20)和激肽释放酶4(kallikrein 4,KLK4)的mRNA表达水平。结果Western blot结果显示,在抑制剂SB203580的作用下,小鼠成釉上皮中p38 MAPK的磷酸化水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。实时定量PCR结果表明,SB203580组的转录因子Runx2和Osx以及成釉细胞标志物ODAM、AMTN、MMP20、KLK4的表达均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论p38 MAPK信号通路可能通过调控转录因子Runx2、Osx及成釉细胞标志物ODAM、AMTN、MMP20和KLK4的表达介导釉质发育。 展开更多

关键词 p38 MAPK SB203580 牙釉质 牙胚 成釉上皮 釉质发育 信号通路 Runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 成釉细胞标志物

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聚乙烯亚胺衍生物PEN介导寡核苷酸MT01递送对实验性大鼠牙移动的抑制作用

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作者 刘宇妍 于文雯 +4 位作者 申玉芹 秦甜甜 周雪纯 黄蕾 孙新华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期790-795,I0002,I0003,共8页

目的:探讨聚乙烯亚胺(PEI)衍生物PEN介导寡核苷酸MT01的体内局部递送能力,初步阐明其对实验性牙移动模型大鼠牙槽骨改建的影响及生物学安全性。方法: 48只Wistar雄性大鼠随机均分为PEN组、MT01组、硫代修饰的MT01(MT01s)组和PEN/MT01组... 目的:探讨聚乙烯亚胺(PEI)衍生物PEN介导寡核苷酸MT01的体内局部递送能力,初步阐明其对实验性牙移动模型大鼠牙槽骨改建的影响及生物学安全性。方法: 48只Wistar雄性大鼠随机均分为PEN组、MT01组、硫代修饰的MT01(MT01s)组和PEN/MT01组,建立实验性牙移动模型,各组大鼠分别于左侧上颌第一磨牙颊侧牙龈黏膜局部注射以上4种药物作为药物干预侧,右侧上颌第一磨牙颊侧牙龈黏膜局部注射PBS作为PBS对照侧,每3 d注射1次,14 d时处死大鼠。HE染色观察大鼠重要脏器组织病理形态表现,大体照片及X线片测量牙移动距离,实时定量荧光PCR(RT-PCR)法检测牙周组织中成骨标志性基因Runt相关转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(SP7)和骨钙素(OCN)mRNA表达水平。结果:局部注射以上药物后,各组大鼠的主要脏器组织中均未见明显的炎细胞浸润及结构差异,各脏器组织未见明显异常。与PBS对照侧比较,MT01、MT01s和PEN/MT01组大鼠药物干预侧第一磨牙移动距离均缩小(P<0.05或 P<0.01),PEN组差异无统计学意义(P>0.05),各组大鼠双侧牙齿近中移动距离的差值PEN/MT01组>MT01s组>MT01组>PEN组,且PEN/MT01组与MT01s组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与PBS对照侧比较,MT01s组和PEN/MT01组大鼠药物干预侧牙周组织中Runx2、SP7和OCN mRNA表达水平均明显升高(P<0.05或 P<0.01),且PEN/MT01组升高最为明显;MT01组大鼠药物干预侧牙周组织中Runx2 mRNA表达水平降低(P<0.05),SP7和OCN mRNA表达水平明显升高(P<0.01);PEN组大鼠药物干预侧牙周组织中Runx2 mRNA表达水平降低(P<0.05),SP7和OCN mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论: PEI衍生物PEN可安全递送MT01进入体内,使牙周组织中Runx2、SP7和OCN mRNA表达水平升高,减少实验性牙移动大鼠的牙齿移动距离。 展开更多

关键词 PEN 聚乙烯亚胺衍生物 寡核苷酸MT01 Runt相关转录因子2 成骨细胞特异性转录因子 骨钙素

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Runx2影响肿瘤骨转移信号通路的研究进展

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作者 胡金龙 秦晗 《医学研究杂志》 2021年第9期12-14,162,共4页

成骨细胞特异性转录因子2(runt-related transcription factor2,Runx2)属于转录因子Runxx家族成员,可通过多种信号转导途径参与骨代谢异常、牙齿发育障碍、肿瘤以及器官纤维化等疾病的发生。近年来,Runx2与肿瘤间关系的研究引起关注,在... 成骨细胞特异性转录因子2(runt-related transcription factor2,Runx2)属于转录因子Runxx家族成员,可通过多种信号转导途径参与骨代谢异常、牙齿发育障碍、肿瘤以及器官纤维化等疾病的发生。近年来,Runx2与肿瘤间关系的研究引起关注,在肿瘤细胞中,Runx2可以通过调节一系列信号通路影响转移和非转移性肿瘤细胞侵袭能力,在肿瘤发生和转移过程中发挥重要作用。因此,深入探讨Runx2在肿瘤骨转移中信号通路的分子机制,对研究肿瘤骨转移的形成和防治起到重要促进作用。 展开更多

关键词 成骨细胞特异性转录因子 2 肿瘤 骨转移 信号通路

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补肾活血方通过调节BMP-2/Runx2/Osterix信号通路抑制慢性肾衰竭大鼠血管钙化的实验研究 被引量：26

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作者 柳诗意 张宁 +4 位作者 孟祥飞 刘世巍 朱宏伟 李兰芳 张春玲 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期327-332,共6页

目的观察补肾活血方对慢性肾衰竭大鼠血管钙化（vascular calcification,VC）的BMP-2/Runx2/Osterix信号通路作用,探讨其可能的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组与中药组,每组10只。模型组与中药组大鼠实验第1~4周给予... 目的观察补肾活血方对慢性肾衰竭大鼠血管钙化（vascular calcification,VC）的BMP-2/Runx2/Osterix信号通路作用,探讨其可能的作用机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组与中药组,每组10只。模型组与中药组大鼠实验第1~4周给予250 mg/kg腺嘌呤混悬液灌胃及含1.8%高磷饲料每日1次喂养,第5~8周腺嘌呤改为隔日灌胃。中药组同时按55 g/（kg·d）剂量给予补肾活血方灌胃治疗,每日1次。正常组灌胃等量生理盐水。共给药8周。HE染色观察肾组织变化,茜素红染色观察主动脉钙化结节情况,腹主动脉取血检测血清钙（Ca）、磷（P）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、全段甲状旁腺激素（i PTH）,Western blot法检测骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein,BMP-2）及其下游调节因子即核心结合因子（Runt related transcription factor,Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（Osterix）蛋白的表达。结果 HE染色观察提示：与正常组比较,模型组肾小球结构紊乱,肾小管扩张积水,腔内有炎性细胞的浸润,肾小管内棕褐色结晶沉积,肾脏间质纤维化,肾脏血管明显减少;与模型组比较,中药组正常肾小球数目增多,肾小管扩张程度降低,炎性细胞数量下降,腺嘌呤结晶减少。茜素红染色观察提示：与正常组比较,模型组主动脉出现钙化结节,广泛红色颗粒物沉着;与模型组比较,中药组钙化结节减少。与正常组比较,模型组大鼠血P、SCr、BUN、i PTH水平均明显升高,血Ca水平明显下降,BMP-2、Runx2、Osterix蛋白表达亦增高（P〈0.05,P〈0.01）;与模型组比较,中药组血清P、SCr、BUN、i PTH水平均明显下降,血Ca水平明显升高,BMP-2、Runx2、Osterix蛋白表达均降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论补肾活血方能够改善慢性肾衰竭大鼠肾功能和钙磷代谢,改善肾脏组织学结果,下调BMP-2/Runx2/Osterix信号通路在慢性肾衰竭VC中的表达,这可能是其抑制慢性肾衰竭VC的作用机制之一。 展开更多

关键词 慢性肾衰竭 补肾活血方 血管钙化 骨形态发生蛋白-2 核心结合因子 成骨细胞特异性转录因子

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ATF3和Runx2在乳腺癌中的表达及意义 被引量：3

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作者 黄丽娟 周炳娟 +4 位作者 曹建江 张楠 陈红 马秋双 张金库 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2017年第6期411-414,共4页

目的探讨激活转录因子3（ATF3）和成骨细胞特异性转录因子2（Runx2）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测ATF3和Runx2在105例乳腺浸润性导管癌和相应癌旁乳腺组织中的表达情况，分析其与乳腺癌患者临床病理特... 目的探讨激活转录因子3（ATF3）和成骨细胞特异性转录因子2（Runx2）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测ATF3和Runx2在105例乳腺浸润性导管癌和相应癌旁乳腺组织中的表达情况，分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果乳腺浸润性导管癌组ATF3和Runx2的阳性表达率分别为80.95%（85/105）和69.52%（73/105），显著高于癌旁乳腺组织的11.43%（12/105）和8.57%（9/105），差异均具有统计学意义（χ2=102.097，P=0.000；χ2=11.595，P=0.001）。ATF3和Runx2的表达与乳腺癌的组织学分级（χ2=14.623，P=0.001；χ2=24.891，P=0.000）、淋巴结转移（χ2=7.059，P=0.008；χ2=6.358，P=0.012）及pTNM分期相关（χ2=5.807，P=0.016；χ2=4.902，P=0.027），而与患者年龄（χ2=0.274，P=0.601；χ2=1.554，P=0.213）及肿瘤大小（χ2=2.476，P=0.290；χ2=5.261，P=0.072）无关。ATF3和Runx2在乳腺癌组织中的表达呈正相关（C=0.498，P=0.000）。结论ATF3和Runx2可能协同参与了乳腺癌的发生，而且ATF3和Runx2与乳腺癌的浸润、转移及临床分期有关，提示二者可能成为预测乳腺癌恶性程度和评估患者预后的重要指标。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 免疫组织化学 激活转录因子3 成骨细胞特异性转录因子2

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