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利用12S rRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性鉴定动物种类 被引量:9
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作者 汪琦 张昕 +3 位作者 赵大贺 马海萍 陈广全 张惠媛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期214-219,共6页
目的:建立一种精确可靠的鉴定常见的10种动物(猪、狗、牛、山羊、绵羊、马、鸡、鼠、三文鱼和鹿)的方法。方法:利用12SrRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)鉴别动物种... 目的:建立一种精确可靠的鉴定常见的10种动物(猪、狗、牛、山羊、绵羊、马、鸡、鼠、三文鱼和鹿)的方法。方法:利用12SrRNA基因的限制性酶切末端片段长度多态性(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)鉴别动物种类。将线粒体12S rRNA基因通过引物的5'端用FAM荧光标记,从基因组DNA中扩增450bp的目的片段。引物对1(下游引物FAM标记,上游引物不标记)扩增的PCR产物用限制性内切酶AluⅠ酶切。引物对2(上游引物FAM标记,下游引物不标记)扩增的PCR产物用限制性内切酶Tru9Ⅰ酶切。得到的酶切产物分别在遗传分析仪ABI3100上进行毛细管电泳,片段大小用Peak Scanner 1.0软件分析。结果:根据AluⅠ酶切图谱能够区分鸡、马、猪和三文鱼,而鹿和牛、山羊和绵羊、鼠和狗因酶切图谱相同无法分开。根据Tru9Ⅰ酶切图谱,能够进一步将鹿和牛、山羊和绵羊、鼠和狗分开。同一种动物不同个体的酶切图谱完全相同,结果具有可重复性。没有出现物种内多态的现象。大多数情况下,实际得到的末端片段长度与理论值非常接近,只存在2~5bp的差异。结论:该方法操作简单、结果精确,适用于鉴定动物种类。 展开更多
关键词 限制性末端片段长度多态性T—RFLP 种类鉴定 12S RRNA
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天麻扩增酶切片段长度多态性反应体系的建立 被引量:2
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作者 常楚瑞 邹佳宁 +1 位作者 宋聚先 王晓丽 《贵阳医学院学报》 CAS 2006年第5期391-392,共2页
目的:以天麻为试验材料,建立扩增酶切片段长度多态性(AFLP)分析体系。方法:对天麻DNA提取、酶切-连接、预扩增和选择性扩增等试验过程进行研究。结果:得到了清晰的天麻AFLP指纹图谱。结论:该体系具有良好的稳定性和重复性。
关键词 天麻 多态性 限制性片段长度 片段长度多态性
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ABO位点限制性扩增片段长度多态性的研究
3
作者 李晓平 杜庆新 +3 位作者 顾明波 王剑 车德仁 朱爱民 《中国法医学杂志》 CSCD 1998年第4期197-201,共5页
建立了PCR扩增、限制性酶切、8%(T)、5%(C)聚丙烯酸胺凝胶垂直电泳和银染检测ABO位点的限制性片段长度多态性的方法体系。应用Amp-RFLP技术对185名中国人(哈尔滨)ABO位点的基因频率和基因型分布进行了调查和统计分析。ABO位点... 建立了PCR扩增、限制性酶切、8%(T)、5%(C)聚丙烯酸胺凝胶垂直电泳和银染检测ABO位点的限制性片段长度多态性的方法体系。应用Amp-RFLP技术对185名中国人(哈尔滨)ABO位点的基因频率和基因型分布进行了调查和统计分析。ABO位点特异片段长度为140~200bp,基因频率为0.2000~0.5568。6种基因型频率为0.973~0.3135,杂合度0.5838,Dp值0.7146。经H-W平衡吻合度检测,完全符合群体遗传多态分布。通过对11个家庭33名相关个体的分析,证明完全符合孟德尔遗传定律。ABO基因型检验适用于法庭科学的个体识别和亲权鉴定。 展开更多
关键词 ABO基因型 聚合链反应(PCR) 限制性片段长度多态性(Amp-RFLP)
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限制性片段长度多态性聚合酶链反应法检测人细胞色素氧化酶2D6药物代谢相关基因位点多态性 被引量:4
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作者 夏清荣 单锋 +4 位作者 徐亚运 梁俊 曹银 柳杨 闫春宇 《安徽医药》 CAS 2019年第12期2347-2350,共4页
目的建立测定人细胞色素氧化酶2D6(CYP2D6)基因多态性的限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR RFLP)检测方法。方法通过增加PCR扩增体系中DNA模板上样体积、降低... 目的建立测定人细胞色素氧化酶2D6(CYP2D6)基因多态性的限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR RFLP)检测方法。方法通过增加PCR扩增体系中DNA模板上样体积、降低引物浓度以及减少限制性内切酶的用量等方法改进、优化实验条件,建立以PCR RFLP法为基础的肝药酶CYP2D6基因型检测方法。结果采用PCR RFLP法能够检测CYP2D6?2、CYP2D6?10和CYP2D6?14基因型,且过程简便,经济实用。结论该方法检测CYP2D6药物代谢相关基因位点基因型具有简便、高效、准确和经济的特点,可在临床及实验室推广使用。 展开更多
关键词 细胞色素P450 CYP2D6 多态性 限制性片段长度 片段长度多态性分析 基因检测
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限制性片段长度多态性分析酶切条件的优化
5
作者 王丽 裴秀英 戴寿芝 《中华临床医药杂志(北京)》 CAS 2003年第4期26-27,共2页
目的:对结核分枝杆菌RFLP—DNA分型技术的各个环节进行优化,以提高DNA指纹的清晰度和稳定性。方法:提取结核分枝杆菌DNA,经PvuII酶切后进行琼脂糖凝胶电泳、southern转印,并用经地高辛随机引物标记试剂盒标记IS6110的245bp探针进... 目的:对结核分枝杆菌RFLP—DNA分型技术的各个环节进行优化,以提高DNA指纹的清晰度和稳定性。方法:提取结核分枝杆菌DNA,经PvuII酶切后进行琼脂糖凝胶电泳、southern转印,并用经地高辛随机引物标记试剂盒标记IS6110的245bp探针进行杂交。结果:用于结核分枝杆菌DNARFLP分析的最佳DNA浓度是2μg,内切酶浓度为2u/μgDNA,酶切反应时间为4h。结论:RFLP的酶切条件经过合理优化,可以在消耗最低的情况下取得最佳的实验效果。 展开更多
关键词 限制性片段长度多态性分析 条件 优化 分枝杆菌 结核
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1997-1998泰国的全国样本结核分枝杆菌限制性内切酶片段长度多态性研究
6
作者 D. Rienthong P. Ajawatanawong +5 位作者 S. Rienthong S. Smithtikarn P. Akarasewi A. Chaiprasert P. Palittapongarnpim 张宗德 《结核与肺部疾病杂志》 2005年第4期166-170,共5页
地点:1997-1998 年间,作为全球项目的一部分,在泰国进行了全国性的抗结核药物耐药监测。目的:评价 IS6110 杂交带谱和成簇的水平,由于样本收集时间较短,预计不会太高。设计:共计 828 株分离株可做标准的 IS6110 杂交指纹分析。结果:随... 地点:1997-1998 年间,作为全球项目的一部分,在泰国进行了全国性的抗结核药物耐药监测。目的:评价 IS6110 杂交带谱和成簇的水平,由于样本收集时间较短,预计不会太高。设计:共计 828 株分离株可做标准的 IS6110 杂交指纹分析。结果:随着地理位置、病人年龄、对利福平和链霉素耐药的变化,限制性片段长度多态性也随之变化。北京株在青年病人中常见,离曼谷越远,其流行率也越低,但只有一个杂交带的分离株则正好相反。排除含有 5 个以下拷贝 IS6110 的菌株,26.4%的菌株成簇。成簇在女性患者中更普遍。成簇菌株常常来自不同省份,如果有耐药,它们的耐药谱也不同。结论:在泰国某些地区用 IS6110 杂交带谱的成簇性来推断近期传播的可靠性值得怀疑。在结核病高流行国家进行全国性的近期传播研究的评价应该谨慎。 展开更多
关键词 结核 分子流行病学 RFLP 泰国 耐药 限制性片段长度多态性 限制性内切 结核分枝杆菌 多态性研究 样本
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广东汉族人群ABO扩增片段限制性长度多态性调查
7
作者 梁敏捷 杨巍 +3 位作者 刘超 王孝力 程新志 张继富 《中国法医学杂志》 CSCD 2000年第B06期41-42,共2页
1990年,Yamamoto等首次报道了ABO各等位基因核苷酸序列的差异。随后,Lee和Chang等采用PCR-RFLP方法进行ABO基因型检测。国内也先后报道了运用PCR-RFLP方法检测ABO基因型。本文报道对广东汉族人群ABO基因座的扩增片段限制性长度多态性进... 1990年,Yamamoto等首次报道了ABO各等位基因核苷酸序列的差异。随后,Lee和Chang等采用PCR-RFLP方法进行ABO基因型检测。国内也先后报道了运用PCR-RFLP方法检测ABO基因型。本文报道对广东汉族人群ABO基因座的扩增片段限制性长度多态性进行的调查。 展开更多
关键词 ABO基因座 片段限制性长度 多态性 广东
全文增补中
鼠疫耶尔森氏菌荧光标记扩增片段长度多态性分型方法 被引量:5
8
作者 裴德翠 庞昕 +6 位作者 宋亚军 翟俊辉 陈泽良 刘海洪 郭兆彪 王津 杨瑞馥 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期258-261,共4页
目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型。方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择最佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,... 目的建立荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)技术平台,探讨鼠疫菌基因分型。方法用5种核酸限制性内切酶消化鼠疫菌基因组DNA,选择最佳内切酶组合,酶切片段经接头连接后,用荧光素标记的5条EcoRⅠ引物和9条MseⅠ引物组成的引物配对扩增,选择最佳引物组合,进行系列PCR条件的优化。扩增产物经ABI PRISM 3100 Genetic Analyzer(遗传分析仪)检测,GeneScan等软件进行分析。结果成功建立FAFLP技术平台。结论FAFLP具有快速、简便、廉价、分辨率高、重复性好和污染少的优点,可用于鼠疫菌的基因分型分析。 展开更多
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 荧光标记片段长度多态性 基因分型 聚合链反应
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扩增片段长度多态性技术在动物遗传多样性研究中的应用 被引量:2
9
作者 郝琦蕾 姜晋国 《杭州师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2004年第1期73-76,共4页
扩增片段长度多态性(AFLP)是一种有效的分子遗传标记方法,具有快速、经济、简便、模板需要量少、重复性高、结果可靠等优点。目前AFLP在动物方面的应用还不是很多,处于初级阶段,主要用于鉴定分类关系、种群遗传多样性分析、遗传连锁图... 扩增片段长度多态性(AFLP)是一种有效的分子遗传标记方法,具有快速、经济、简便、模板需要量少、重复性高、结果可靠等优点。目前AFLP在动物方面的应用还不是很多,处于初级阶段,主要用于鉴定分类关系、种群遗传多样性分析、遗传连锁图谱构建等方面。 展开更多
关键词 片段长度多态性技术 动物遗传多样性 分子遗传标记 内切
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用限制性内切酶多态性分析23SrRNA快速鉴定李斯特菌种
10
作者 赵丹燕 《医学研究通讯》 2005年第7期60-61,共2页
目的为快速鉴定六种李斯特菌。方法用 PCR 扩增六种参考李斯特菌23SrRNA 基因片段 S_1、S_2,再用限制性内切酶 S_1、S_2,用 API 反应条同时做生化反应。结果 S_2用 XmnI 或 CfoI 酶切,S_2用 AluI 或 ClaI 酶切,可以分别鉴定出这六种参... 目的为快速鉴定六种李斯特菌。方法用 PCR 扩增六种参考李斯特菌23SrRNA 基因片段 S_1、S_2,再用限制性内切酶 S_1、S_2,用 API 反应条同时做生化反应。结果 S_2用 XmnI 或 CfoI 酶切,S_2用 AluI 或 ClaI 酶切,可以分别鉴定出这六种参考李斯特菌,结果与 API 反应条一致。结论 PCR-RFLP 能快速、方便地用于李斯特菌的鉴定,且方法可靠、实用,可应用于食品和环境微生物的鉴定。 展开更多
关键词 23SrRNA 限制性内切 快速鉴定 多态性分析 PCR-RFLP 李斯特菌 菌种 PCR 环境微生物 基因片段 生化反应 API Cla ALU
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pMCT118位点扩增片段长度多态性及其应用 被引量:23
11
作者 李伯龄 丁焰 +3 位作者 倪锦堂 陈松 胡兰 叶健 《中国法医学杂志》 CSCD 1991年第3期132-135,195,共5页
本文报道了对98例中国人 pMCT118位点扩增片段长度多态性的等位基因频率调查及有关法医生物物证检验问题的研究。用多聚酶链反应、小型聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法,在12h 内检测低至1ngDNA 的 pMCT118位点扩增片段长度多态性。已发现2... 本文报道了对98例中国人 pMCT118位点扩增片段长度多态性的等位基因频率调查及有关法医生物物证检验问题的研究。用多聚酶链反应、小型聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法,在12h 内检测低至1ngDNA 的 pMCT118位点扩增片段长度多态性。已发现22个等位基因,大小分布在340~780bp 之间,基因频率为0.005~0.3,杂合度为79%。对6个家系22名相关个体的分析符合孟德尔定律。探讨了微量检材样品制备和对混合斑、单根毛囊、唾液等生物检材的法医应用。对20个实际案例进行了检验。 展开更多
关键词 pMCT118位点 多聚链反应 片段长度多态性 个体识别
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中国人p33.6位点的扩增片段长度多态性 被引量:13
12
作者 陈松 李伯龄 +3 位作者 倪锦堂 胡兰 季安全 叶健 《中国法医学杂志》 CSCD 1993年第3期129-132,共4页
用PCR、小型聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法对小卫星区域p33.6(D1S111)位点的扩增片段长度多态性(Amp—FLP)进行分析和对100例无关中国人p33.6位点的等位基因频率进行调查及数据处理,发现该位点核心序列重复数从9到22之间的全部14个等位基... 用PCR、小型聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法对小卫星区域p33.6(D1S111)位点的扩增片段长度多态性(Amp—FLP)进行分析和对100例无关中国人p33.6位点的等位基因频率进行调查及数据处理,发现该位点核心序列重复数从9到22之间的全部14个等位基因,片段长度分布于435~925bp之间,基因频率为0.5~35.5%,杂合度为76%。对6个家系共22名相关个体进行分析,符合孟德尔遗传定律;对人体各种不同组织DNA进行该位点的分析,显示出高度的一致性。该位点适用于法医学上的个人识别以及亲子鉴定。 展开更多
关键词 p33.6位点 多聚链反应 可变数目的串联重复 片段长度多态性 中国人
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烟草品种识别方法──扩增片段长度多态性(AFLP~) 被引量:2
13
作者 LucaRossi 赵百东 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 1999年第4期5-5,共1页
关键词 烟草品种 长度多态性 识别方法 片段 AFLP 烤后烟叶 多态性标记 聚丙烯酰胺 遗传多型性 限制性内切
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延吉市土壤中分离的棘阿米巴CJY/S3线粒体DNA限制性片段长度多态性
14
作者 许成军 金善姬 +2 位作者 崔春权 玄英花 郑善子 《延边大学医学学报》 CAS 2010年第4期240-242,共3页
[目的]观察棘阿米巴土壤分离株CJY/S3的线粒体DNA限制性片段长度多态性.[方法]从棘阿米巴CJY/S3提取线粒体DNA,用EcoRI进行酶切,与广东地区土壤分离株CG/S1进行比较观察限制性片段长度多态性.[结果]延吉市土壤分离株CJY/S3与广东地区土... [目的]观察棘阿米巴土壤分离株CJY/S3的线粒体DNA限制性片段长度多态性.[方法]从棘阿米巴CJY/S3提取线粒体DNA,用EcoRI进行酶切,与广东地区土壤分离株CG/S1进行比较观察限制性片段长度多态性.[结果]延吉市土壤分离株CJY/S3与广东地区土壤分离株CG/S1具有相同的片段模式.[结论]延吉市棘阿米巴土壤分离株CJY/S3与CG/S1具有密切的亲缘关系,而线粒体DNA限制性片段长度多态性分析是棘阿米巴分类简便且有效的方法. 展开更多
关键词 延吉市 土壤 分离株 棘阿米巴 线粒体 DNA 限制性片段长度多态性分析 广东地区 亲缘关系 方法 比较观察 提取 模式 结果 分类 Eco
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扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)基本原理和特点
15
作者 纳新 《现代渔业信息》 2007年第2期31-31,共1页
扩增片段长度多态性(AFLP)是建立在RFLP基础上的选择性聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction.PCR),它的基本原理是对基因组DNA进行限制性内切酶酶切,将人工合成的特定双链接头连在这些片段的两端,形成一个带接头的特异片段... 扩增片段长度多态性(AFLP)是建立在RFLP基础上的选择性聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction.PCR),它的基本原理是对基因组DNA进行限制性内切酶酶切,将人工合成的特定双链接头连在这些片段的两端,形成一个带接头的特异片段,用这些特异片段为扩增反应模板,通过接头序列和PCR引物3’一端选择性碱基的识别, 展开更多
关键词 片段长度多态性 原理 限制性内切 聚合链反应 基因组DNA 特异片段 PCR引物 RFLP
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扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)技术基本涵义
16
作者 新博 《现代渔业信息》 2007年第6期30-30,共1页
本刊讯:扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)技术,该技术是由Vos等1995年建立的一项分子标记技术,其基本原理是选择性扩增带有人工接头的DNA酶切片段。因不同个体的DNA的酶切片段存在差异,从而产... 本刊讯:扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)技术,该技术是由Vos等1995年建立的一项分子标记技术,其基本原理是选择性扩增带有人工接头的DNA酶切片段。因不同个体的DNA的酶切片段存在差异,从而产生扩增片段的长度多态性。AFLP技术具有不需要预先知道被研究物种的基因组DNA序列信息, 展开更多
关键词 片段长度多态性 分子标记技术 基因组DNA 涵义 AFLP技术 片段 选择性 人工接头
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瓯江彩鲤线粒体DNA的限制性内切酶分析 被引量:8
17
作者 王成辉 李思发 +3 位作者 徐志彬 项松平 王剑 段江萍 《上海水产大学学报》 CSCD 2002年第1期14-18,共5页
用 13种限制性内切酶对瓯江彩鲤的线粒体DNA(mtDNA)进行RFLP分析 ,结果表明 :(1)共产生 18种限制性态型 ,其中 5种酶产生限制性片段长度多态性 (RFLPs) ,归结为 5种基因单倍型。 (2 )瓯江彩鲤mtDNA大小为 16 .6 0± 0 .15kb ,单倍... 用 13种限制性内切酶对瓯江彩鲤的线粒体DNA(mtDNA)进行RFLP分析 ,结果表明 :(1)共产生 18种限制性态型 ,其中 5种酶产生限制性片段长度多态性 (RFLPs) ,归结为 5种基因单倍型。 (2 )瓯江彩鲤mtDNA大小为 16 .6 0± 0 .15kb ,单倍型间的基因多样性指数和群体核苷酸多样性指数分别为 0 .75 17、0 .0 2 86 。 展开更多
关键词 瓯江彩鲤 线粒体DNA 限制性内切 限制性片段长度多态性 遗传多样性
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扩增片段长度多态(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)是一种十分理想的分子标记技术
18
作者 钱治 《现代渔业信息》 2007年第2期31-31,共1页
扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)标记技术是Zabean和Vos等科学家发展起来的一种新的分子标记技术。于1993年获得欧洲专利局专利。它是继限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymo... 扩增片段长度多态性(Amplified Fragment Length Polymorphism,AFLP)标记技术是Zabean和Vos等科学家发展起来的一种新的分子标记技术。于1993年获得欧洲专利局专利。它是继限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)、随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)之后的第三代标记技术。 展开更多
关键词 片段长度多态性 分子标记技术 限制性片段长度多态性 随机多态性 理想 欧洲专利 科学家 DNA
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杭州地区肥胖儿童的ApoE基因HhaI酶切位点多态性研究 被引量:4
19
作者 王伟 杨肃文 应静芝 《浙江预防医学》 2005年第6期54-55,共2页
关键词 肥胖儿童 杭州地区 APOE基因 多态性研究 限制性内切片段长度多态性 基因的多态性 disease 位点 血脂水平 胆固醇水平 heart 肥胖的关系 相关研究 载脂蛋白 多种疾病 分析技术 高血脂 冠心病 PCR
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脑出血患者脂蛋白脂酶基因PvuⅡ酶切多态性的观察 被引量:2
20
作者 林慧琼 刘晓春 +5 位作者 李吕力 罗永坚 钟维章 张德敏 滕晓茗 秦文军 《内科》 2006年第1期17-19,共3页
目的探讨脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性与脑出血的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对55例脑出血患者和正常对照组58例脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性分析。结果(1)正常对照组PvuⅡ等位基因频率分别为P+67.24%... 目的探讨脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性与脑出血的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),对55例脑出血患者和正常对照组58例脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性分析。结果(1)正常对照组PvuⅡ等位基因频率分别为P+67.24%,P-32.76%;脑出血组PvuⅡ等位基因频率为P+63.63%,P-36.37%;脂蛋白脂酶基因PvuⅡ等位基因频率在脑出血组与正常对照组之间差异无显著性。(2)与正常对照组相比,脑出血患者组血清TG、LDL-c水平较对照组升高(P<0.05);脑出血患者组血清HDL-c、ApoAI水平较对照组降低(P<0.05)。结论脂蛋白脂酶PvuⅡ酶切多态性与脑出血无明显关联。 展开更多
关键词 脑出血 患者 脂蛋白脂基因 PvuⅡ多态性 多态性 LIPOPROTEIN LIPASE Relationship 对照组 等位基因频率 限制性片段长度多态性 聚合链反应 血清 方法 PCR-RFLP 显著性 LDL-c HDL-c APOAI 升高 结果
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