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甲状腺球蛋白抗原决定簇基因的克隆及其真核表达载体的构建 被引量：1
1
作者 冯洁 李宁 +5 位作者 吕枚 方佩华 杨立平 崔景秋 王少艳 张红艳 《武警医学院学报》 CAS 2006年第1期10-13,共4页
[目的]构建可将甲状腺球蛋白抗原决定簇基因转染入真核细胞的重组载体。[方法]用TRIzol一步法从甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR逆转录出cDNA,PCR扩增出目的基因,与pcDNATM3．1D／V5-His- TOPO(?)载体进行拓扑克隆,对重组质粒进行PCR、酶... [目的]构建可将甲状腺球蛋白抗原决定簇基因转染入真核细胞的重组载体。[方法]用TRIzol一步法从甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR逆转录出cDNA,PCR扩增出目的基因,与pcDNATM3．1D／V5-His- TOPO(?)载体进行拓扑克隆,对重组质粒进行PCR、酶切及测序鉴定。[结果]甲状腺球蛋白抗原决定簇基因及其重组载体经鉴定准确无误。[结论]成功的构建了带有目的基因的真核表达质粒Tg-pcDNATM3．1D／V5-His- TOPO(?)。 展开更多
关键词 甲状腺球蛋白 抗原决定簇基因 真核表达载体
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甲状腺球蛋白抗原决定簇基因的克隆及原核表达载体的构建
2
作者 冯洁 吕枚 +5 位作者 李宁 方佩华 杨立平 崔景秋 王少艳 张红艳 《天津医科大学学报》 2005年第4期550-553,共4页
目的:扩增甲状腺球蛋白抗原决定簇基因,构建可转化入大肠杆菌的重组表达载体。方法:用TRIzol一步法从甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR逆转录出cDNA,PCR扩增出目的基因,与pET102/D-TOPO载体进行拓扑克隆,对重组质粒进行PCR、酶切及测序鉴... 目的:扩增甲状腺球蛋白抗原决定簇基因,构建可转化入大肠杆菌的重组表达载体。方法:用TRIzol一步法从甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR逆转录出cDNA,PCR扩增出目的基因,与pET102/D-TOPO载体进行拓扑克隆,对重组质粒进行PCR、酶切及测序鉴定。结果:甲状腺球蛋白抗原决定簇基因及其重组表达载体经鉴定准确无误。结论:成功构建了带有目的基因的原核表达载体。 展开更多
关键词 甲状腺球蛋白 抗原决定簇基因 原核表达载体
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水泡性口炎病毒抗原决定簇单克隆抗体研究 被引量：2
3
作者 周学章 高丰 +1 位作者 宋德光 李元刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期532-536,共5页
用RT-PCR的方法扩增水泡性口炎病毒G蛋白抗原决定簇部分基因片段,构建克隆质粒pMD18-T-G_(660)和表达质粒pET-28a-G_(660),转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后得到高效表达,表达蛋白质的分子量为30 Ku,占总蛋白的20.745%。切胶回收蛋白... 用RT-PCR的方法扩增水泡性口炎病毒G蛋白抗原决定簇部分基因片段,构建克隆质粒pMD18-T-G_(660)和表达质粒pET-28a-G_(660),转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后得到高效表达,表达蛋白质的分子量为30 Ku,占总蛋白的20.745%。切胶回收蛋白测定蛋白含量,作为免疫BALB/c小鼠的免疫原,免疫BALB/c小鼠4次,按单克隆抗体制备技术,获得3株稳定分泌抗表达的G蛋白的单克隆抗体L细胞株,抗体类型鉴定属于IgG亚类。 展开更多
关键词 抗原决定簇基因 克隆 表达 单克隆抗体
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水泡性口炎病毒G蛋白抗原决定区片段基因在大肠杆菌中的表达 被引量：1
4
作者 周学章 高丰 贺文琦 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期475-477,共3页
用RT-PCR的方法扩增水泡性口炎病毒G蛋白抗原决定基部分基因片段,构建克隆质粒pMD18-T-G660和表达质粒pET-28a-G660,转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,得到高效表达,表达蛋白质的相对分子质量为30 000,占总蛋白的20.745%。
关键词 抗原决定簇基因 克隆 表达
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