为探究湿热处理对花生球蛋白Ara h 3抗原性的影响,采用硫酸铵分级沉淀法从花生脱脂粉中分离纯化出Ara h 3,进行不同温度、时间和质量浓度的湿热处理,通过正交试验确定最优湿热处理条件,采用间接ELISA法检测湿热处理后Ara h 3抗原性变化...为探究湿热处理对花生球蛋白Ara h 3抗原性的影响,采用硫酸铵分级沉淀法从花生脱脂粉中分离纯化出Ara h 3,进行不同温度、时间和质量浓度的湿热处理,通过正交试验确定最优湿热处理条件,采用间接ELISA法检测湿热处理后Ara h 3抗原性变化,测定外源荧光、游离巯基含量以及圆二色光谱,从蛋白结构的变化解释湿热处理对Ara h 3抗原性的影响。研究表明:湿热处理能够降低Ara h 3抗原性,且在质量浓度10 mg/mL、90℃处理30 min时,抗原性降至最低;湿热处理后的Ara h 3荧光强度、表面疏水性增强,三级结构发生变化;游离巯基含量增加、空间结构发生改变;α-螺旋和β-折叠含量降低,无规则卷曲含量增加,二级结构发生变化。湿热处理后Ara h 3空间结构发生改变,部分抗原表位遭到破坏或被包埋,抗原性降低。展开更多
从花生种子中分离纯化花生过敏原Ara h 2,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、圆二色谱(CD)、ANS荧光探针及紫外可见(UV-Vis)光谱等方法,系统研究热加工对Ara h 2抗原性和结构的影响。结果表明:Ara h 2蛋白经55或70℃处理后其抗原性略有升高,...从花生种子中分离纯化花生过敏原Ara h 2,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、圆二色谱(CD)、ANS荧光探针及紫外可见(UV-Vis)光谱等方法,系统研究热加工对Ara h 2抗原性和结构的影响。结果表明:Ara h 2蛋白经55或70℃处理后其抗原性略有升高,经85,100或115℃处理后,其抗原性显著降低,且随着温度和时间的增加其抗原性均不断降低。CD色谱分析表明,Ara h 2经热处理后其二级结构发生变化;ANS荧光探针光谱显示,不同的热处理均导致Ara h 2表面疏水性增加。紫外光谱显示,不同温度对Ara h 2处理30 min后(除55℃外),其紫外吸收值均升高。Ara h 2经100℃处理不同时间后,其紫外吸收值均有增加。由此推断,花生过敏原Ara h 2的构象改变导致了其抗原性的降低。展开更多
文摘为探究湿热处理对花生球蛋白Ara h 3抗原性的影响,采用硫酸铵分级沉淀法从花生脱脂粉中分离纯化出Ara h 3,进行不同温度、时间和质量浓度的湿热处理,通过正交试验确定最优湿热处理条件,采用间接ELISA法检测湿热处理后Ara h 3抗原性变化,测定外源荧光、游离巯基含量以及圆二色光谱,从蛋白结构的变化解释湿热处理对Ara h 3抗原性的影响。研究表明:湿热处理能够降低Ara h 3抗原性,且在质量浓度10 mg/mL、90℃处理30 min时,抗原性降至最低;湿热处理后的Ara h 3荧光强度、表面疏水性增强,三级结构发生变化;游离巯基含量增加、空间结构发生改变;α-螺旋和β-折叠含量降低,无规则卷曲含量增加,二级结构发生变化。湿热处理后Ara h 3空间结构发生改变,部分抗原表位遭到破坏或被包埋,抗原性降低。
文摘从花生种子中分离纯化花生过敏原Ara h 2,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、圆二色谱(CD)、ANS荧光探针及紫外可见(UV-Vis)光谱等方法,系统研究热加工对Ara h 2抗原性和结构的影响。结果表明:Ara h 2蛋白经55或70℃处理后其抗原性略有升高,经85,100或115℃处理后,其抗原性显著降低,且随着温度和时间的增加其抗原性均不断降低。CD色谱分析表明,Ara h 2经热处理后其二级结构发生变化;ANS荧光探针光谱显示,不同的热处理均导致Ara h 2表面疏水性增加。紫外光谱显示,不同温度对Ara h 2处理30 min后(除55℃外),其紫外吸收值均升高。Ara h 2经100℃处理不同时间后,其紫外吸收值均有增加。由此推断,花生过敏原Ara h 2的构象改变导致了其抗原性的降低。
